自噬基因Beclin1抑制宫颈癌HeLa细胞裸鼠移植瘤生长的研究

目的:研究自噬基因Beclin1对裸鼠宫颈癌细胞株HeLa移植瘤的抑制作用。方法:将自噬基因Beclin1真核表达质粒pcDNA3.1(+)-Beclin1经脂质体包裹后转染人宫颈癌HeLa细胞,通过荧光定量PCR(RT-PCR)和Westernblot检测其mRNA及蛋白水平的表达,MTT法检测细胞生长抑制率;将HeLa细胞接种于裸鼠右前肢腋下建立裸鼠人宫颈癌移植瘤模型,待瘤结节直径≥5mm后,分别以重组质粒pcDNA3.1(+)-Bec-lin1、pcDNA3.1(+)和生理盐水200μl每两天1次直接瘤内注射,连用3周后,测量3组肿瘤大小并观察肿瘤组织形态学改变。结果:pcDNA3.1(+)-Beclin1能使HeLa中Bec-lin1mRNA及蛋白表达增加(P<0.05),并显著抑制HeLa细胞的生长,呈现时间依赖性,与其余两组相比,有显著统计学差异(P<0.05);经重组质粒治疗21天后,裸鼠皮下移植瘤生长缓慢,相对于对照组瘤体明显缩小、瘤重明显减轻(P<0.05),病理检查可见,pcD-NA3.1(+)-Beclin1处理组瘤块内细胞坏死减少,结缔组织增生,而对照组中癌细胞分布呈弥漫性。结论:自噬基因Beclin1可以抑制HeLa移植瘤的生长。     

卵巢肿瘤剥除术在早期卵巢未成熟畸胎瘤中的应用探讨

目的 分析卵巢肿瘤剥除术在早期未成熟畸胎瘤患者中应用的临床结局,评价其在保留生育功能手术中的应用价值。方法 分析19例初次手术行卵巢肿瘤剥除术的未成熟畸胎瘤患者的临床特征、术后治疗方式、生存和生育结局。结果 行卵巢肿瘤剥除术的19例未成熟畸胎瘤患者,临床分期均为Ⅰ期:Ⅰa期15例(78.9%),Ⅰc期4例(21.1%)。经过45.8个月的中位随访期。随访期间3例(Ⅰa期G₁未成熟性畸胎瘤2例,Ⅰa期G₃未成熟性畸胎瘤)行BEP方案辅助化疗; 1例行二次手术的患者,在补充患侧附件切除手术后4个月再次出现肿瘤证据,经肿瘤细胞减灭术及BEP方案化疗8个疗程后,达到完全缓解(CR);1例Ⅰc2期G₂未成熟性畸胎瘤未遵医嘱返院化疗,初次术后3个月病情进展,予BEP方案化疗1个疗程后行二次肿瘤细胞减灭术,后因放弃治疗,于二次手术后5个月死亡;其余14例选择严密随访,无复发和死亡病例。结论 临床分期为Ⅰ期的未成熟性畸胎瘤,尤其是G₁未成熟性畸胎瘤,在严密随访的情况下,行卵巢肿瘤剥除术和必要的辅助化疗是安全可行的;对于Ⅰ期G₂/G₃未成熟性畸胎瘤,卵巢肿瘤剥除术后建议行辅助化疗。     

乙状结肠代阴道成形术36例临床分析

目的探讨乙状结肠代阴道成形术的优缺点及手术操作要点。方法回顾1992年1月至2009年3月36例先天性无子宫无阴道患者行乙状结肠代阴道的临床资料,对其临床处理进行探讨。结果36例手术均成功,无1例发生肠管坏死、肠瘘及阴道狭窄,性生活均满意。结论乙状结肠代阴道成功率高,远期效果好,是一种治疗先天性无阴道较好的手术方式。     

剖宫产后子宫疤痕处妊娠11例诊治与分析

目的探讨剖宫产疤痕妊娠的诊断及治疗.方法回顾分析2005年1月至2009年3月共收治11例剖宫产术后子宫疤痕处妊娠的患者,对其临床资料进行分析.结果11例患者的年龄24～41岁,6例患者给予米非司酮、氨甲喋呤治疗,其中1例同时行介入治疗,5例行子宫峡部妊娠病灶切除术,11例患者均治愈出院.结论经阴道超声检查是诊断剖宫产疤痕妊娠的主要手段,可根据患者具体情况,采取个体化治疗,可获得良好疗效.     

阴道直肠隔子宫内膜异位症的诊断及治疗

目的探讨直肠阴道隔子宫内膜异位症的临床诊断及治疗.方法回顾分析2例直肠阴道隔子宫内膜异位症患者的临床资料.结果2例患者术前分别用米菲司酮、达非林预处理,治疗方式均采用手术治疗,切除病灶经病理证实为直肠阴道隔子宫内膜异位.结论手术是治疗直肠阴道隔子宫内膜异位症的主要手段.     

妊娠期急性脂肪肝临床处理分析(附一例报道)

病例:患者21岁,农民,孕2产0。因停经8月,下腹痛, 腹泻5d来诊。患者停经40 天确诊早孕,早孕反应严重,孕 4月诊断为双胎,孕期未系统产检,入院前5天无明显诱因出现下腹痛、腹泻,到外院检查发现肝肾功能异常,于2002年 12月25日21:00急诊转入我院。平时体健,无肝病及肝炎接触史,月经正常,0-0-1-0。     

自噬基因Beclin 1 shRNA表达质粒的构建及其对宫颈癌细胞HeLa生长的作用

目的 构建自噬基因Beclin 1小发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达质粒,探讨Beclin 1抑制后对宫颈癌HeLa细胞生长的作用.方法 根据人Beclin 1 mRNA编码序列,设计RNA干扰靶点,构建Beclin 1 shRNA表达质粒,脂质体法转染人宫颈癌HeLa细胞,通过荧光定量PCR(RT-PCR)和Western blot检测其对HeLa细胞自噬基因Beclin 1 mRNA及蛋白表达的影响.MTT法分析其对细胞增殖、流式细胞仪检测其对细胞周期和细胞凋亡的影响.结果 构建的shRNA表达载体可以使HeLa细胞中自噬基因Beclin 1的mRNA及其蛋白含量降低,转染质粒的细胞生长增殖速度加快,凋亡率降低.结论 成功构建了针对自噬基因Beclin 1的shRNA表达载体,通过转染HeLa细胞,可有效抑制细胞中Beclin 1的表达,并促进细胞生长,抑制凋亡.     

上皮性卵巢癌中自噬基因Beclin 1的表达及其调控相关信号传导途径的研究

目的 研究自噬基因Beclin 1及其调控相关信号传导途径磷酸肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/PKB)与上皮性卵巢癌发生发展之间的关系.方法 用免疫组化的方法对25例正常卵巢组织、25例良性上皮性卵巢肿瘤、19例交界性上皮性卵巢肿瘤及69例上皮性卵巢癌组织进行Beclin 1、Class Ⅰ PI3K (p110α)、Class Ⅲ PI3K(hvps34)及其下游的磷酸化PKB(p-PKB)的表达水平进行检测.结果 Beclin 1、hvps34在正常卵巢组织与良性卵巢肿瘤组织中表达较高,在交界性卵巢肿瘤组织中开始下降,在上皮性卵巢癌中的表达最低(P＜0.05);p110α、p-PKB在交界性卵巢肿瘤组织中开始升高,在上皮性卵巢癌中的表达高于其它3组(P＜0.05).卵巢癌Ⅰ～Ⅱ期、高中分化、淋巴结无转移的卵巢肿瘤组织中Beclin 1的表达分别高于Ⅲ～Ⅳ期、低分化、淋巴结有转移者(P＜0.05),而p110α及p-PKB的表达则分别降低(P＜0.05).结论 自噬基因Beclin 1在上皮性卵巢癌中的表达下调,对自噬起调控作用的PI3K/PKB信号通路中的成分p110α、hvps34、p-PKB存在表达异常,可能与上皮性卵巢癌的发生、发展及临床预后有关.     

上皮性卵巢癌中p110α、hvps34及p-PKB的表达及临床意义

目的 研究信号传导途径PI3K/PKB中的成分p110α、hvps34、p-PKB在上皮性卵巢肿瘤中的表达及其与卵巢癌临床病理参数之间的关系.方法 应用免疫组化检测25例正常卵巢组织、25例良性上皮性卵巢肿瘤、19例交界性上皮性卵巢肿瘤及69例上皮性卵巢癌组织中Class I PI3K (p110α)、 Class Ⅲ PI3K (hvps34)及其下游的磷酸化PKB的表达水平,并分析它们与临床病理参数之间的关系.结果 (1)hvps34在正常卵巢组织与良性卵巢肿瘤组织中表达较高,在交界性卵巢癌组织中开始下降,在上皮性卵巢癌中的表达最低;p110α、p-PKB在交界性卵巢癌组织中开始升高,在上皮性卵巢癌中的表达明显高于其它3组,差异有统计学意义(P＜0.05);(2)卵巢癌Ⅰ～Ⅱ期、高中分化、淋巴结无转移的卵巢癌组织中p110α及p-PKB的表达均低于Ⅲ～Ⅳ期、低分化、淋巴结有转移者,差异有有统计学意义(P＜0.05).结论 在上皮性卵巢癌中PI3K/PKB信号通路中的成分p110α、hvps34、p-PKB存在表达异常,可能与上皮性卵巢癌的发生、发展有关.     

正常妊娠妇女、妊娠期高血压及妊娠期糖尿病患者血脂变化的探讨

目的研究正常妊娠妇女、妊娠高血压疾病及妊娠期糖尿病患者的血脂变化.方法选择正常未孕妇女48例,正常孕妇101例,妊娠高血压疾病68例,妊娠期糖尿病48例,分别测定其血脂水平.结果正常妊娠及妊娠期糖尿病的各项血脂总胆固醇(totalcholesterol,TC)、甘油三脂(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(highdensitylipoproteincholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low-densitylipoproteincholesterol,LDL-C)、载脂蛋白A(apolipoproteinA,ApoA)和载脂蛋白B(apolipoproteinB,ApoB)均比正常未孕妇女升高(P<0.05),差异有显著性.妊娠高血压疾病组除HDL-C外,其余各项均比正常未孕妇女升高(P<0.05),妊娠高血压组与正常妊娠组比较,前者HDL-C和ApoA降低(P<0.05).妊娠期糖尿病和正常妊娠组比较,ApoA降低(P<0.05),子痫前期HDL-C较妊娠高血压降低,而ApoB较妊娠高血压升高(P<0.05).结论血脂代谢异常可能在妊娠高血压疾病和妊娠期糖尿病的发病中起一定作用.