浅谈高效液相色谱分析中常见问题及对策

介绍高效液相色谱仪的基本工作原理和仪器组成,列举了输液泵、色谱柱和几种检测器在液相色谱分析工作中常出现的技术问题和仪器故障,并对其进行分析,提出了一些解决的办法和对策,供大家交流。     

B超诊断胎儿脐带绕颈探讨

脐带绕颈是胎儿宫内窘迫及新生儿窒息主要原因之一,产前及产时确诊有无脐带绕颈,对选择最佳分娩方式及时间,提高新生儿Apgar评分意义很大。我科1989年10月至1990年3月,随机观察住院孕妇40例,以探讨脐带绕颈的B超诊断。方法为常规探查一般项目后,自胎盘的脐带附着处胎儿面起探查,顺其走向,重点探查颈周及下颌有无脐带影象。其特点为略强于皮肤的回声,当与脐带纵切时呈现较粗的窘面     

凝胶内长片段基因克隆的实验方法研究

目的量少、片段长的目的基因受纯化回收效率低的影响而难于克隆,本实验的目的是探索快速高效克隆量少,片段长DNA的实验方法。方法以lnc RNA AL110200 5’RACE大片段PCR产物为目的基因,应用高纯度、高分辨率的低熔点琼脂糖,分离得到含5.0 kb和2.0 kb的凝胶,直接用于连接和转化反应,通过克隆PCR和Sanger测序法鉴定克隆的正确性。结果经测序验证了5.0 kb和2.0 kb重组克隆的正确性,说明应用高纯度的低熔点琼脂糖凝胶可以快速克隆长达5.0kb基因片段。结论该方法是一种省时、高效、易行的长片段基因克隆方法。     

扩张型心肌病蛋白质组学研究

目的:通过蛋白质组学方法比较扩张型心肌病(DCM)患者和正常人心肌组织差异蛋白质谱,找出与DCM相关的差异蛋白,进一步探讨DCM发生的分子生物学机制。方法:选择9例原发病为DCM、左心室射血分数<35%且接受心脏移植手术的患者作为DCM组:心肌组织取自患者自有心脏的左心室游离壁。对照组:心肌组织取自6例不能用作移植的供体心脏。采用双向凝胶电泳(2-DE)分析蛋白质谱差异,热考马斯亮蓝染色,串联质谱(MS-MS)鉴定差异蛋白。采用生物医学研发软件及资料库Ingenuity PathwaysAnalysis分析差异蛋白的定位、功能和相互作用。结果:DCM组和对照组心肌组织2-DE图像中蛋白点的整体分布比较相似,可以检测到超过1 000个蛋白点。通过比较分析,共鉴定出25种差异蛋白,其中在DCM组15种上调,10种下调。使用LOCATE数据库分析差异蛋白的亚细胞定位,提示其中大分子蛋白占40%,细胞骨架蛋白为28%,线粒体蛋白为28%。蛋白的PANTHER分类显示大多数差异蛋白参与了细胞的结构、肌肉收缩、钙离子转运和水解酶的活性等功能。生物学途径分类揭示差异蛋白参与了组织的形成过程、生物调节、发育过程、代谢过程和对刺激的应答过程等。结论:对DCM患者心肌组织蛋白质组学研究发现25种差异蛋白,其中上调表达的蛋白有15种,下调表达的有10种;这些蛋白参与了线粒体能量代谢、心肌收缩、凋亡等过程;提示这些过程可能在DCM发生发展中发挥重要作用。     

用生物安全的理念指导实验室的建设

阜外心血管病医院在科研体制改革过程中,集中资源组建了中心实验室.在这次筹建过程中,始终以生物安全为基点,严格参照行业标准进行改建.通过多方面的学习、实践,建立全新的理念,制定严格的制度,融入先进的管理,确定运行的模式.由此一个全新的生物安全实验室应运而生.     

基质金属蛋白酶与黄斑变性

基质金属蛋白酶 (MMP)是维持体内ECM稳定的重要酶系 ,黄斑变性的主要病理改变是玻璃膜和血管基底膜ECM正常的降解重建平衡发生改变 ,致使视网膜下产生新生血管导致视力丧失。本文主要综述与黄斑变性相关的MMP和TIMP在黄斑变性中的变化及作用。     

ELISA方法在基础医学研究中的应用及注意事项

1971年瑞典斯德哥尔摩大学的Engvall和Perlmann首次建立了酶联免疫吸附测定（Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay,ELISA）方法,用于定量检测家兔血液中的IgG。     

通心络预给药2小时对猪急性心肌梗死再灌注后心肌微血管内皮结构完整和无再流的保护作用

目的 评价冠脉再通前2 h给予不同剂量通心络对猪急性心肌梗死(AMI)缺血再灌注后心肌微血管结构完整和无再流变化的疗效.方法 中华小型猪40只,分成假手术组、AMI对照组、通心络治疗组:小剂量(0.1 g/kg)、中剂量(0.2 g/kg)和大剂量(0.4 g/kg),每组8只.冠状动脉前降支阻断1.5 h,再灌注3 h建立AMI缺血再灌注动物模型.各通心络治疗组于AMI缺血再灌注前2 h行灌胃给药.测定并比较各组再灌注后3 h正常区、再灌注区、无再流区心肌组织中血管内皮钙黏连蛋白、β连环蛋白、基质金属蛋白酶(MMP)-2和9水平变化.于AMI 1.5 h和再灌注3 h行心肌声学造影(MCE),测定并比较心肌无再流面积变化.结果 (1)与正常区相比,对照组再灌注区和无再流区心肌组织中血管内皮钙黏连蛋白和β连环蛋白水平均显著降低,而MMP -2、9水平均显著升高(P均<0.05),且无再流区变化更显著(P均<0.05);(2)大剂量通心络能够显著升高再灌注区和无再流区血管内皮钙黏连蛋白,分别为(22.2±3.2)%比(32.0±3.9)%和(14.5±2.8)%比(28.3±2.2)%,β连环蛋白,分别为(20.5±3.5)%比(27.3±2.9)%和(13.3±2.1)%比(20.6±2.4)%,同时显著降低以上区域MMP -2,分别为(48.3±4.1)%比(29.4±3.5)%和(57.3±4.3)%比(38.2±4.0)%,MMP -9,分别为(55.6±4.0)%比(34.3±3.5)%和(62.4±4.8)%比(44.4±4.1)%,以上P均<0.05;(3)大剂量通心络能够显著缩小再灌注后3 h心肌无再流区面积,(6.6±1.7)cm2比(4.8±1.5)cm2,P<0.05;和心肌无再流范围,(90.8±3.8)%比(71.4±4.1)%,P<0.05.结论 AMI缺血再灌注前2 h预给予大剂量通心络对心肌微血管内皮结构完整和心肌无再流有明确保护作用,为通心络的临床应用提供了实验依据.     

晶体过敏性眼内炎

晶体过敏性眼内炎是偶然发生于晶体损伤后的一种罕见眼病。近年来由于白内障囊外摘出手术合并人工晶体植入术的广泛应用，使晶体过敏性限内炎重新引起人们的重视。以前认为此病是由于对隔离的晶体蛋白的免疫排斥反应所致。近来的观察指出，这一概念是不正确的，而且是由于对晶体蛋白耐受性的改变所致。本篇对此病的临床和组织病理学特征以及临床处理上的争论进行讨论。     

压膜保持器与改良HawleyⅡ型保持器联合应用对正畸保持效果的临床研究

目的 通过比较正畸矫治完成后两种保持方式在保持效果、牙周健康两方面的异同,评价联合应用压膜保持器与改良HawleyⅡ型保持器的临床效果. 方法 选择航天中心医院口腔科正畸固定矫治结束后病例80例,随机分为两组,每组40例.联合组日间戴用压膜保持器,夜间戴用改良HawleyⅡ型保持器;压膜组全天均戴用压膜保持器.两组患者在拆除固定矫治器当天及戴用保持器12个月取记存模型对比研究,评价保持效果;在戴用保持器1个月、3个月、6个月和12个月分别检查记录牙周指数,评价牙周健康状况,比较两种保持方式效果的异同. 结果 反映保持效果的各指标在保持器戴用12个月后,两组间未见到统计学差异(P＞0.05);反映牙周健康状况的指标中牙龈指数和菌斑指数在保持器戴用3个月、6个月及12个月,牙石指数在保持器戴用12个月时联合组低于压膜组,差异具有统计学意义(P＜0.05). 结论 压膜保持器与改良HawleyⅡ型保持器联合应用与单独应用压膜保持器均可达到良好的保持效果;在牙周健康方面,联合组对牙周健康的影响较压膜组小,但两组均出现了一定程度的牙龈炎症.