人脐带源间充质干细胞条件培养液对人肝癌HepG2细胞生长的影响

目的 探讨人脐带源间充质干细胞(HUC-MSC)条件培养液(CM)对人肝癌HepG2细胞生长的影响.方法 选择2011年2月至2014年1月于中国人民解放军第105医院妇产科分娩的35例足月妊娠剖宫产健康胎儿脐带为研究对象,取其用于分离、培养并扩增HUC-MSC.传代扩增至第3代HUC-MSC融合达80％时,更换培养液,继续培养24 h后收集上清液,即为HUC-MSC-CM备用.将对数生长期的人肝癌HepG2细胞按照随机数字表法随机分成相等的3份,分别于含50％,20％及不含HUC-MSC-CM的培养中培养,并分别纳入高含量组、低含量组和空白对照组.采用倒置显微镜观察人肝癌HepG2细胞生长状态,采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法和细胞划痕愈合实验分别检测3组人肝癌HepG2细胞增殖和迁移情况,并采用流式细胞术(FCM)法检测各组细胞的细胞周期变化情况.本研究遵循的程序符合中国人民解放军第105医院人体试验委员会所制定的伦理学标准,得到该委员会批准,脐带获取前,均征得孕妇知情同意,并与之签署临床研究知情同意书.结果 ①所分离的原代HUC-MSC培养至第3代后,细胞形态开始比较均一.②MTT法检测结果显示,人肝癌HepG2细胞培养24,48和72 h时,3组相对吸光度(A)值比较,差异均有统计学意义(F=21.330,6.223,9.345;P=0.004,0.032,0.027),且在这3个时间点,高含量组和低含量组相对A值均显著高于空白对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05),高含量组相对A值亦显著高于低含量组,差异亦均有统计学意义(P＜0.05).③划痕愈合实验结果显示,3组人肝癌HepG2细胞过河时间比较,差异有统计学意义(F=12.860,P=0.025),且高含量组人肝癌HepG2细胞过河时间短于低含量组和空白对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05),低浓度组人肝癌HePG2细胞过河时间亦短于对照组,差异亦有统计学意义(P＜0.05).④FCM法检测人肝癌HepG2细胞周期结果显示,3组G0/G1期和S期人肝癌HepG2细胞比例比较,差异均有统计学意义(F=30.600,30.590;P＜0.05).且与空白对照组相比,高含量组和低含量组人肝癌HepG2细胞G0/G1期细胞比例显著降低,S期细胞比例显著增加,差异均有统计学意义(P＜0.01);且高含量组G0/G1期细胞比例比低含量组下降更显著,而S期细胞比例显著增加,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 HUC-MSC-CM可促进入肝癌HepG2细胞增殖和迁移,并可促进人肝癌HepG2细胞周期G1/S转换.     

前列地尔注射液对室间隔缺损介入治疗后血浆氨基末端脑利钠肽前体水平及心功能的影响

目的 观察先天性心脏病室间隔缺损（VSD）患儿介入封堵术后联合应用前列地尔注射液对术后血浆氨基末端脑利钠肽前体（NT-proBNP）水平及心功能的影响。方法 选择本院2011年1月至2013年1月住院行介入封堵治疗的VSD患儿120例,男51例,女69例,年龄5～8,平均6.1±2.3岁。随机分为前列地尔组60例,对照组60例,前列地尔组在封堵术后即刻注射前列地尔注射液连续7天,分别在术前、术后第3天、术后6个月采用双向侧流免疫法测定其血浆NT-proBNP水平,所有患儿在术前、术后第7天和术后6个月分别进行超声心动图检查,测定左心室舒张期末内径（LVEDD）、左心室收缩期末内径（LVESD）、左心室收缩期末容量（LVESV）、左心室舒张期末容量（LVEDV）、左心室射血分数（LVEF）,并比较两组临床特征、血浆NT-proBNP水平及心功能参数的变化。结果 两组患儿LVEDD、LVESD、LVEDV、LVESV在介入术后第7天及术后6个月均明显小于术前（P<0.05）,且封堵术后6个月前列地尔组LVEDD、LVESD、LVEDV、LVESV较对照组减小更明显（P<0.05）。两组患儿术前血浆NT-proBNP水平无统计学差异（P>0.05）;两组患儿血浆NT-proBNP水平术前与术后第3天、术后第3天与术后6个月比较差异均有统计学意义（P<0.01）,且前列地尔组封堵术后3天、术后6个月较对照组下降更明显（P<0.01）。结论 VSD患儿介入封堵术联合前列地尔治疗可进一步降低血浆NT-proBNP水平并改善患儿心功能。     

经右桡动脉-右股静脉途径介入封堵动脉导管未闭的安全性及有效性分析

目的 探讨经右桡动脉-右股静脉途径介入封堵动脉导管未闭的安全性及有效性。方法 选取介入封堵动脉导管未闭患者45例,分为经右桡动脉-右股静脉途径封堵动脉导管未闭(PDA)(桡动脉组)14例,经右股动脉-右股静脉途径封堵PDA(股动脉组) 31例,比较两组的手术成功率、平均手术时间、造影清晰度、手术并发症发生率。结果 两组平均手术时间、手术成功率比较,差异无统计学意义。两组手术并发症比较,有差异,P＜0.05。结论 两种手术途径均安全有效,但经右桡动脉途径介入封堵中,平均卧床时间及手术并发症均明显低于传统手术路径,值得推广。     

共情护理对癌痛患者心理状态、疼痛程度和舒适度的影响

[目的]探讨共情护理对癌痛患者心理状态、疼痛程度和舒适度的影响。[方法]选择2018年3月至2019年4月收治的88例癌痛患者进行研究,随机分为对照组与观察组,每组44例。对照组接受常规护理,观察组在对照组基础上加共情护理。比较两组患者护理干预前后心理状态(HAMA及HAMD评分)、NRS评分和舒适度。[结果]护理干预前,两组患者的HAMA及HAMD评分比较无明显差异(P>0.05);干预后,观察组的HAMA、HAMD评分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。护理干预前,两组患者的NRS评分无明显差异(P>0.05);干预后,观察组NRS评分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组患者舒适率为95.45%,明显高于对照组75.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]共情护理可改善癌痛患者心理状态,有效降低癌痛患者的疼痛程度,提高其舒适度,值得在临床推广应用。     

基于“肠脑轴”理论探讨针刺对帕金森病模型大鼠脑内炎症反应的影响

目的 观察针刺对帕金森病模型大鼠黑质区肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、c-Jun氨基端激酶（c-Jun N-terminal kinase,JNK）、γ干扰素（interferon-γ,IFN-γ）、白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）水平的影响,探讨针刺治疗帕金森病（Parkinson’s disease,PD）的作用机制。方法 将40只雄性SD大鼠随机分为针刺组、模型组、假手术组、正常组,每组10只。针刺组和模型组大鼠经颈背部注射鱼藤酮,造模14d。假手术组大鼠予以相同剂量的二甲基亚砜（dimethyl sulfoxide,DMSO）和0.9%NaCl注射液的混合液。针刺组大鼠选取双侧“天枢”、双侧“上巨虚”及“大肠俞”进行针刺治疗,1次/d,20min/次,连续治疗14d。其余各组不进行治疗。比较各组大鼠黑质区酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase,TH）、TNF-α、IFN-γ、IL-1β和磷酸化的JNK蛋白（p-c-jun）表达情况。结果 与正常组、假手术组比较,模型组TH蛋白表达明显减少,p-c-jun、TNF-α、IFN-γ、IL-1β蛋白表达明显增加（P<0.05）。与模型组比较,针刺组TH蛋白表达明显增加,p-c-jun、TNF-α、IFN-γ、IL-1β蛋白表达明显减少（P<0.05）。结论 针刺可以下调PD模型大鼠黑质区JNK表达,降低炎症因子TNF-α、IFN-γ、IL-1β水平,对PD有一定的调节作用。     

项丛刺加旁廉泉针刺法治疗脑卒中后吞咽困难

目的:观察项丛刺加旁廉泉针刺法治疗脑卒中后吞咽困难及对白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)、γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)影响。方法:将60例脑卒中后吞咽困难患者随机分为观察组、对照组,每组30例。两组均给予神经科常规治疗以及中风病临床路径常规选穴(百会、曲池、内关、合谷、足三里、丰隆、三阴交、太冲)。观察组在此基础上加用项丛刺加旁廉泉针刺法。两组治疗前后采用荧光透视吞咽检查(videofluoroscopic swallowing study,VFSS)测定咽部收缩持续时间、洼田饮水试验评分、生活质量评估(Barthel)指数变化。采用RT-PCR及免疫印迹检测外周血IL-6、IFN-γ基因和蛋白表达。结果:观察组有效率显著高于对照组(P0.05);观察组疗程结束后VFSS评分、Barthel指数较对照组升高,洼田饮水试验评分降低(P0.01)。与对照组治疗后比较,研究组IL-6、IFN-γmRNA和蛋白降低(P0.01)。结论:项丛刺加旁廉泉针刺法通过降低炎性细胞因子IL-6、IFN-γ表达,改善脑卒中后吞咽困难患者吞咽功能,疗效优于常规治疗手段。     

HEV核酸、抗原、抗体对HEV感染的诊断价值

目的探讨HEV核酸(HEV RNA)、HEV抗原(HEV Ag)、HEV抗体(HEV IgM抗体和HEV IgG抗体)在临床诊断HEV感染中的作用。方法收集在北京大学人民医院进行HEV IgM抗体和HEV IgG抗体检测的13992例标本,其中1924例HEV IgM抗体或HEV IgG抗体阳性。分别采用荧光PCR法进行HEV RNA和基因型检测,酶联免疫吸附试验方法进行HEV Ag、HEV IgM抗体和HEV IgG抗体检测,并检测ALT、AST、TBil和DBil水平。计量资料两组间比较采用Mann-Whitney U检验。结果1924例标本中HEV IgM抗体阳性152例(7.9%),HEV IgG抗体阳性1897例(98.6%),HEV RNA阳性62例(3.2%),HEV Ag阳性55例(2.9%)。HEV IgM抗体阳性组中HEV RNA阳性率为40.8%(62/152),HEV Ag阳性率为36.2%(55/152)。HEV RNA阳性组中HEV Ag阳性率为88.7%(55/62)。HEV RNA阳性组(n=62)ALT、AST、TBil、DBil水平高于HEV RNA阴性组(n=90)(Z值分别为-7.609、-6.942、-5.815、-6.130,P值均<0.001),HEV Ag阳性组(n=55)ALT、AST、TBil、DBil水平明显高于HEV Ag阴性组(n=97)(Z值分别为-6.413、-5.786、-5.199、-5.545,P值均<0.001)。巢式PCR扩增测序结果显示58例HEV RNA阳性,4例阴性。HEV IgG抗体阳性高水平明显降低HEV Ag检测的S/CO值,甚至出现阴性结果。结论与HEV抗体相比,HEV Ag可以提高戊型肝炎的诊断水平,具有一定的临床意义;高水平的转氨酶或胆红素可以辅助诊断HEV感染;高水平的HEV IgG抗体会降低HEV Ag检测值,检测时应注意HEV Ag阴性时HEV IgG抗体值。     

三种消化道重建方式治疗胃癌合并2型糖尿病的研究进展

目前胃癌合并2型糖尿病患者的手术治疗在国内外尚缺乏有效、规范的治疗方案.近几年国内外研究在不同的消化道重建方式治疗胃癌合并2型糖尿病患者的可能机制,疗效,术后并发症情况等方面有了新的发现.据此,我们对胃癌根治术后3种常见的消化道重建方式(毕Ⅰ、毕Ⅱ及Roux-en-Y吻合术)治疗胃癌合并2型糖尿病患者的可能机制,术后血糖控制效果,术后并发症情况等进行了探讨.结合当前研究结果,我们认为胃癌合并2型糖尿病的患者行胃癌根治性胃切除术,Roux-en-Y式吻合应为首选的消化道重建方式,其中以Roux-en-Y食管空肠端侧吻合为最佳术式.然现有的研究多为回顾性病例分析,缺乏临床随机对照研究的支持.因此,开展前瞻性临床随机对照研究以进一步验证上述3种重建方式治疗2型糖尿病的疗效,是我们今后努力的方向.     

改良透明质酸水凝胶控释脑源性神经营养因子对大鼠胚胎神经干细胞生长、分化和凋亡的影响

目的 研究改良透明质酸(HA)水凝胶控释脑源性神经营养因子(BDNF)对大鼠胚胎神经干细胞(rFNSCs)生长、分化及凋亡的影响。方法 实验以大鼠胚胎干细胞为研究对象,将实验分为3组,分别为空白对照组[rFNSCs与聚乳酸乙醇酸(PLGA)和HA共培养]、条件对照组(rFNSCs与BDNF-PLGA和HA共培养)、实验组(rFNSCs与BDNF-PLGA和改良HA水凝胶即Dex-HA共培养)。采用ELISA法检测控释支架中BDNF的释放曲线;Live/Dead实验检测各组中的rFNSCs凋亡情况;CCK-8法检测rFNSCs与水凝胶共培养后的细胞增殖活性;免疫细胞化学染色法检测不同组中rFNSCs的分化情况。结果 ELISA法结果显示水凝胶对BDNF的控释可以持续14 d。Live/Dead实验显示实验组中rFNSCs凋亡数低于空白对照组和条件对照组。CCK-8实验表明,三组中实验组rFNSCs细胞增殖活性最强,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫细胞化学染色结果表明,与空白对照组和条件对照组相比,实验组水凝胶在体外能促进rFNSCs向神经元分化,减少向星形胶质细胞的分化,差异...     

微波用于检测甲胎蛋白

微波用于检测甲胎蛋白吴德祥，王震，张健琴指导：梅永焕（镇江市第二人民医院检验科，２１２００２）国内有人将微波应用于免疫组织化学、骨髓涂片铁染色以及快速检测ＶＣＡ－ＩｇＡ等。为了解微波对聚乙烯板为载体的ＥＬＩＳＡ法是否适宜，我们用常规及微波法同时对４８...