分泌抗人喉癌单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及临床意义

用喉癌抗原免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠的脾细胞与ＮＳ－１小鼠骨髓瘤细胞融合，经筛选获得４株分泌抗人喉癌单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞株，均收集到腹水型ＭｃＡｂ，并验证其滴度高，纯化效果好，特异性强。用其中３株ＭｃＡｂ混合，对１２４例喉癌及４０例正常人血清予以检测，结果喉癌患者血清中喉癌相关抗原水平明显高于对照组，Ｐ＜０．０１，且随病情的加重，喉癌相关抗原水平呈上升趋势。故本室建立的抗人喉癌混合ＭｃＡｂ可作为一种较为理想的肿瘤标记物，为喉癌的诊断、病情监测、预后判定提供了一种敏感、特异的测试手段。     

支撑喉镜内侧微瓣技术治疗声带息肉的疗效观察

目的探讨支撑喉镜显微镜下应用内侧微瓣技术治疗声带息肉的方法和疗效。方法经气管插管全麻支撑喉镜显微镜下应用内侧微瓣技术治疗50例声带息肉患者,观察其疗效。结果全组50例患者,术后随访1～6个月,治愈45例,好转5例,无无效病例。未发生声带息肉复发,无声带粘连。结论支撑喉镜显微镜下内侧微瓣技术治疗声带息肉疗效满意,符合微创和功能外科的发展趋势。     

喉癌组织及癌旁粘膜中六种酶活性的测定

本文采用Aboott ABA-100型生化自动分析仪对12例正常喉粘膜(正常对照组)17例手术切除的喉癌组织及其癌旁粘膜(安全缘)进行了六种酶活性的测定,结果喉癌组织中LDH、GPT、GOT、α-HBDH,CK五种酶活性明显高于正常对照组(P<0.01),而癌旁粘膜中LDH、GPT、GOT、α-HBDH活性明显升高(P<0.01),Ck活性高于正常对照组(P<0.05)。癌旁粘膜中五种酶活性高于正常喉粘膜,但却低于喉癌组织,提示组织中酶活性的改变早于形态学改变,所以测定术中安全缘组织中的各种酶活性,将成为判断预后和手术效果观察的客观指标。     

喉癌与人类乳头状瘤病毒相关性的研究

本研究采用分子生物学核酸斑等杂交技术，以［ａ－＾３２Ｐ］－ｄＣＴＰ标记的人类乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）１６型ＮＤＡ的探针，分别对３９例喉癌组织、１０例正常喉粘膜及１例喉脂肪肉瘤进行了检测，并对ＨＰＶ１６的感染率与喉癌的临床分型、病理分化程度及性别的相关性进行研究。结果表明，ＨＰＶ１６的感染程度与喉癌的临床分型及分期有关（Ｐ＜０．０５），而与病理分化程度及性别无关（Ｐ＞０．０５）。故我们认为ＨＰＶ与喉癌     

抗人喉癌双功能抗体制备及对Hep-2细胞株杀伤作用的研究

目的：为了制备高效的,特异的抗人喉癌／抗蓖麻毒素A双功能单克隆抗体,观察其对Hep－2细胞株杀伤作用。方法：选用BALB／C鼠,分别行蓖麻毒素A和人喉鳞状细胞癌腹腔免疫后,提取抗体,经与骨髓瘤细胞融合,制备成抗人喉癌／抗蓖麻毒素A双特异性单克隆抗体。结果：该双功能抗体与喉癌组织的特异性结合率为87％,对Hep－2细胞半数抑制浓度比游离环磷酰胺强40倍。结论：采用二次杂交瘤技术制备的双功能抗体优于化学偶联法,抗体效价具有均匀性和理想的信噪比,抗体易于标准化。     

新城疫病毒对肿瘤细胞的杀伤及其作用机制研究

目的探讨新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)对肿瘤细胞的抑制机制及其体内抑瘤作用。方法采用基因组电泳法观察NDV感染对Hep-2肿瘤细胞基因组的影响。运用SDS-PAGE、Western blot等方法检测NDV感染对Hep-2肿瘤细胞内p53及Bcl-2蛋白表达量的影响。通过间接免疫荧光法检测NDV感染后其新城疫病毒HN基因在Hep-2肿瘤细胞表面的表达情况。另外,构建C57/BL小鼠荷H22模型,瘤内注射NDV,观察其对实体肿瘤的抑制作用,探讨NDV在动物模型体内所介导的抑瘤作用。结果NDV可致Hep-2肿瘤细胞的基因组断裂,电泳呈梯状条带。NDV感染能够上调p53的表达,且不影响Bcl-2蛋白的含量。间接免疫荧光实验显示,NDV感染Hep-2肿瘤细胞后可在其表面表达大量新城疫病毒HN蛋白。动物实验结果说明,NDV可抑制实体肿瘤生长。结论NDV可诱导Hep-2肿瘤细胞凋亡,且不受Bcl-2的影响;能够有效抑制体内实体肿瘤的生长。     

喉癌单克隆抗体三株混合应用检测喉癌组织及血清中喉癌相关抗原

为探讨喉癌相关抗原在喉癌组织及血清中的表达，采用自己研制的抗人喉癌单克隆抗体（ＭｃＡｂ）三株混合应用，分别以ＡＢＣ免疫组化法及ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法对喉癌组织及血清中喉癌相关抗原进行检测。结果表明混合ＭｃＡｂ应用可使喉癌组织中喉癌相关抗原检出率由单一ＭｃＡｂ的８０．０％～８６．６％提高至９７．７％。喉癌患者血清中喉癌相关抗原水平明显高于正常对照组（Ｐ＜０．０１），且血清中喉癌相关抗原水平与临床分型、分期密切相关，随着肿瘤范围扩大，血清中喉癌相关抗原水平呈上升趋势。抗人喉癌混合ＭｃＡｂ特异性较高，敏感性较好，可以作为喉癌早期诊断、监测病情变化、判断预后的肿瘤标记物。     

联合应用VP3和IL-18及HN基因对喉癌细胞抑制效应的研究

目的:探讨核酸疫苗pVVP3IL-18HN对Hep-2肿瘤细胞的杀伤机制和对荷瘤动物模型肿瘤的抑制效应。方法:采用脂质体介导法将核酸疫苗pVVP3IL-18HN体外转染Hep-2细胞,运用吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色从细胞形态学角度观察肿瘤细胞的死亡方式,并进一步运用流式细胞仪(FCM)检测肿瘤细胞线粒体跨膜电位、活性氧水平和主要组织相容性复合体I类分子(MHC-I)表达情况。在C57BL/6小鼠右后肢皮下接种H22肿瘤细胞2×105个,荷瘤第7、14和21天,瘤内注射pVVP3IL-18HN,同时设pVVP3、pVIL-18、PVHN和空白对照组,计算抑瘤率,并检测细胞毒T淋巴细胞活性。结果:pVVP3IL-18HN转染可使Hep-2肿瘤细胞皱缩被AO/EB浓染,并上调肿瘤细胞活性氧水平和MHC-I分子表达,下调线粒体跨膜电位;对荷瘤小鼠模型肿瘤的抑瘤率为60.5%,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:pVVP3IL-18HN主要通过诱导细胞凋亡杀伤喉癌细胞,并对实体肿瘤有显著的抑制作用。