人癌胚抗原重组痘苗病毒转染树突状细胞体外诱导的抗肿瘤免疫

目的：研究人癌胚抗原重组痘苗病毒（rV-CEA)转染外周血树突状细胞（DC）后在外体诱导的抗CEA分泌性肿瘤免疫。方法：分离晚期结肠癌患者的外周血单核细胞，在体外用人重组粒－巨噬细胞集落刺激因子（GM－CSF）及白细胞介素4（IL－4）培养成DC，再用rV-CEA转染DC后激发自体T细胞，观察其体外激发自体T细胞的增殖能力及其诱导的细胞毒性T淋巴细胞（CTL）对自体CEA分泌性肿瘤细胞的杀伤活性，并与野生型痘苗病毒（W－VV）及无病毒转染的DC所激发的T细胞进行比较。结果：经rV-CEA转染的DC能显著刺激自体T细胞的增殖，其激活的T细胞对CEA分泌性自体肿瘤细胞具有特异性杀伤作用。结论：rV-CEA转染的DC可以诱导体CEA分泌性肿瘤免疫。     

胃肠道癌患者血清中抗癌胚抗原(CEA)抗体的检测及意义

目的：探讨循环中抗癌胚抗原（ＣＥＡ）特异性抗体的情况，评价ＣＥＡ及抗体的联合检测在胃肠道癌诊断中的作用。方法：用放免法检测血清中 ＣＥＡ含量，用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测抗 ＣＥＡ ＩｇＧ抗体，用竞争抑制法检测抗体的特异性。结果：胃肠道癌患者血清 ＣＥＡ含量升高者（≥１５ ｎｇ／ｍｌ）为 ３０．９％（２１／６８），抗 ＣＥＡ ＩｇＧ抗体阳性者为３５．３％（２４／６８），ＣＦＡ及抗 ＣＥＡ抗体的联合检测可使阳性率提高到５４．３％（３７／６８）；胃肠道良性疾病患者（多发性息肉、溃疡、胰腺炎等）血清ＣＥＡ升高者为３．３％（１／３０），抗 ＣＥＡ　ＩｇＧ抗体阳性者为 ３．３％（１／３０）；健康对照组血清 ＣＥＡ升高者为 ０，抗 ＣＥＡ ＩｇＧ抗体阳性者为 ２．５％（１／４０）。结论：胃肠道癌患者血清中抗癌胚抗原（ＣＥＡ）抗体的检出率较高，这些抗体可作为胃肠道癌的一种肿瘤标志物。     

人血管生成素的基因克隆及真核表达

血管生成素 (angiogenin ,ANG)是存在于正常血浆及实体肿瘤组织中的一种属于核糖核酸酶超家族[1] ,分子量为 14 1kD、pI9 5的蛋白质 ,基因定位于染色体 14q11。ANG是一种能有效促进新生血管形成的刺激因子 ,具有很强的促血管生成作用。因此开展ANG的相关研究在损伤修复及组织工程学中极有意义。本文旨在构建ANG真核表达载体 ,转染人脐静脉内皮细胞 (HUVEC) ,研究其在HUVEC中的表达情况 ,为进一步研究ANG对HUVEC生长状况的影响以及ANG在组织工程学中的应用奠定基础。1　材料与方法1 1　材料　EcoRⅠ、BamHⅠ为Promega产品 ,…     

两个抗普通型急性淋巴母细胞性白血细胞抗原(CLLA)的单克隆抗体产生及鉴定

用杂交瘤技术制备了两个J_5样单克隆抗体分泌杂交瘤株55,79。用间接免疫荧光法检查发现,55、79单克隆抗体与15个不同白血病或淋巴瘤细胞系、人外周血单个核细胞、PHA转化人外周血淋巴母细胞、中性粒细胞、红细胞、血小板及人骨髓细胞的反应性与J_5单克隆抗体的反应性十分相似(见表1)。此二抗体与11例急性白血病患者白血细胞反应性与J_5抗体完     

鳞状细胞癌的研究进展

鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma,SCC)简称鳞癌,是发生在皮肤、附属器或黏膜的恶性肿瘤,主要从有鳞状上皮覆盖的皮肤开始。有报道认为鳞状细胞癌是几大恶性肿瘤之一,它的危险性比基底细胞癌要高得多。由于近年来SCC的发病率越来越高,特别是在西方发达国家,比如美国,平均每年大约有25万多人患上鳞状细胞癌,     

自体恶性黑色素瘤抗原激活的树突状细胞体外诱导免疫试验

树突状细胞(dendritic cells,DC)是迄今为止所知的抗原呈递能力最强的抗原呈递细胞(antigen presenting cells,APC).肿瘤患者因DC免疫功能低下致宿主抗肿瘤免疫无能.研究表明,人外周血单核细胞在体外用粒/巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte/macrophage colony-stimulating factor,GM-CSF)及白介素4(IL-4)诱导后,可培养出表达高水平MHCI、MHCII类抗原和CD80、CD86等因子的DC.本实验拟应用黑色素瘤患者外周血单核细胞,经GM-CSF及IL-4诱导后获得DC,再经自体肿瘤细胞冻融物冲击,在体外激活自体T淋巴细胞产生细胞毒性T淋巴细胞(CTL),观察其体外抗肿瘤作用.     

人血管生长素的真核表达及亚细胞定位

目的:建立人血管生成素(angiogenin,ANG)的真核表达系统并在细胞内亚定位。方法:采用亚克隆技术构建重组荧光真核细胞表达质粒pEGFP/ANG,然后经脂质体介导转染人脐静脉内皮细胞(HUVEC)并对转染细胞内pEGFP/ANG的表达用荧光显微镜和免疫组化染色进行鉴定。用共聚焦显微镜和免疫电镜观察ANG的亚细胞定位。结果:荧光显微镜观察可见转染的HUVEC内发出强绿色荧光。免疫组化染色检测显示,转染的HUVEC中有棕色颗粒。共聚焦显微镜及免疫电镜检查显示,ANG集聚于细胞核区。结论:以构建的重组体pEGFP/ANG转染HUVEC后,可表达人ANG蛋白;表达的ANG定位于细胞核区。     

基因枪介导单纯疱疹病毒DNA疫苗的免疫效果研究

目的：研究单纯疱疹病毒DNA疫苗经基因枪免疫小鼠的效果。方法：基因枪免疫小鼠腹部，免疫组化法检测gD抗原在接种部位的表达；ELISA检测血清中抗gD抗体；病毒攻击检测经基因枪免疫的DNA疫苗对动物的保护效果。结果：基因枪可有效将DNA质粒运送至小鼠真皮内，单纯疱疹病毒Ⅱ型gD2糖蛋白基因在真皮和肌肉组织中高效表达，免疫小鼠体内产生高滴度的中和抗体，能有效抵抗HSV-2病毒的攻击。结论：疱疹病毒gD DNA疫苗通过基因枪接种方式，可在小鼠体内产生特异性保护作用。     

经癌胚抗原重组痘苗病毒转染的树突状细胞体外诱导特异性T细胞免疫

目的研究人癌胚抗原重组痘苗病毒(rV-CEA)转染外周血树突状细胞(DC)后能否在体外诱导CEA特异性细胞毒性T淋巴细胞免疫。方法将rV-CEA转染外周血单核细胞来源的DC后用于激发同源的T细胞,检测其对T细胞的增殖作用以及对CEA分泌性肿瘤细胞的杀伤活性,并与未经rV-CEA转染的DC激发的T细胞进行比较。结果经rV-CEA转染的DC激活的T细胞对CEA分泌性肿瘤细胞具特异性杀伤作用。结论rV-CEA转染的DC可以诱导CEA特异性T细胞活性。