基于DNA染料EMA的RT-PCR技术定量检测海产品中病原性副溶血弧菌活细胞

将一种DNA染料叠氮溴化乙锭(ethidium bromide monoazide,EMA)与实时定量聚合酶链式反应(RT-PCR)技术相结合,建立一种能选择性定量检测牡蛎中trh阳性副溶血弧菌活细胞的新方法。结果表明：使EMA成功插入死细胞DNA并且光解溶液中游离EMA的最佳曝光时间为20min;不抑制副溶血弧菌活细胞DNA扩增的最大EMA质量浓度为2.0μg/mL;完全抑制热致死细胞DNA扩增的最小EMA质量浓度为1.0μg/mL;人工污染牡蛎样品,不经过富集,在2.0×103～2.0×107CFU范围内细胞数的常用对数值与Ct值之间呈严格的负相关性,并且纯培养与人工污染牡蛎样品的RT-PCR检测限均为2×103CFU,即人工污染牡蛎样品的RT-PCR检测灵敏度为每克牡蛎样品400个活细胞;冻融实验表明,在温度低于55℃的水浴中对冷冻海产品进行解冻时,冻融过程对副溶血弧菌活细胞几乎没有影响。该方法是一种快速、灵敏且能有效鉴别并定量检测病原活细胞的新方法。     

乳酸链球菌素(Nisin)抑菌作用及其抑菌机理的研究

通过抑菌试验确定了乳酸链球菌素（Nisin）的高产菌株．乳酸乳球菌乳酸亚种T0625菌株的抑菌谱。结果显示,含有乳酸链球菌素的发酵液对革兰氏阳性细菌有抑制作用,但对革兰氏阴性细菌、酵母菌和霉菌无抑制作用。从T0625菌株发酵液中提取乳酸链球菌素加入金黄色葡萄球菌培养液中进行抑菌试验,结果培养液蛋白质含量提高、电导率增加,未出现对数生长期。透射电镜观察发现,加入乳酸链球菌素后,菌体变形,出现质壁分离现象,进而菌体细胞破裂,细胞内容物大量外泄,菌体成为不规则残片。SDS-PAGE凝胶电泳显示,乳酸链球菌素作用使金黄色葡萄球菌菌体内蛋白质减少,培养液中蛋白质增加。推测乳酸链球菌素的作用位点为细胞膜,具有破坏菌体细胞膜完整性的作用。试验结果支持了“孔道形成”理论的观点。     

苦水提液抗突变等功能性质探讨

研究了苦藠水提液抗突变、抗氧化等功能性质,目的是为其深度开发提供理论依据。结果表明:2.0～80mg/mL的鲜苦藠提取液使蚕豆根尖的微核率由12.98‰±5.36‰降到6.97‰±1.35‰;0.01～1.0mg/mL的鲜苦藠提取液对0.1mol/L1.0mLH2O2的清除率为3.1%～19.8%,0.1～1.0mg/mL的鲜苦藠提取液对·OH的清除率为9.6%～76.9%;4～120mg/mL鲜苦藠提取液对亚硝酸盐的清除率为13.19%～100.00%,煮沸45min后清除率为14.13%～99.23%。结论:苦藠水提液有一定的抗突变、抗氧化和清除亚硝酸盐的作用,但随着煮沸时间的延长,可使这种清除能力降低。      

125MW机组低谷调峰措施

介绍浙江半山和台州电厂的１２５ＭＷ机组为满足电网调峰需要，从技术、运行、管理、奖励等几方面所采取的措施；特别对奖励措施的落实和改革陈叙了作者的观点。     

响应面法优化胶红酵母伴生的维生素C混菌发酵培养基

从沈阳东陵龙尾湖淤泥中,筛选分离到一株具有促进维生素C(VC)混菌发酵中产酸菌K.vulgare产酸的新伴生菌A8,对菌株A8核糖体ITS rDNA进行PCR扩增并测序,获得长度为610 bp的ITS rDNA序列。在NCBI数据库上进行同源性比对,构建ITS rDNA系统发育树,并进行系统发育分析,再结合形态学鉴定,确认菌株A8为胶红酵母菌(Rhodotorula mucilaginosa)。该菌与K.vulgare组成VC混菌发酵新菌系,产2-酮基-L-古龙酸(2-KGA)量高达52.56 g/L。在单因素试验基础上,采用响应面法对发酵培养基成分进行优化,得到最佳培养基条件为:L-山梨糖80 g/L、尿素14 g/L、玉米浆15 g/L、CaCO31.58 g/L、MgSO40.3 g/L、KH2PO41.0 g/L。在优化条件下发酵,可使2-KGA产量达70.08 g/L,与理论值70.38 g/L基本一致,转化率达81.3%。优化后的培养基比原培养基平均提高2-KGA产量17.52 g/L,表明新筛选的胶红酵母菌具有较强促产酸的伴生能力,并且该菌在通常情况下对动物和人体不致病,为工业生产提供重要的伴生菌资源。     

超声萃取-ICP-OES法快速测定食品中硼砂

建立超声萃取-电感耦合等离子体发射光谱(ICP-OES)法快速测定食品中硼砂含量的方法。食品样品经水超声萃取后,直接采用ICP-OES法测定其中硼元素含量,再换算成硼砂的含量。该法在0.05~50mg/L范围内线性良好,相关系数为0.9999,检出限为0.95mg/kg(以硼砂计),低中高三个不同浓度加标回收率为99.1%~102.4%,相对标准偏差为0.55%~0.80%。该方法操作简单,分析快速、灵敏、准确,适用于食品中硼砂含量的测定。     

分阶段控制通风量提高2-酮基-L-古龙酸生产

考察发酵液中溶解氧对普通生酮基古龙酸菌(Ketogulonicigenium vulgare)和巨大芽胞杆菌(Bacillus magaterium)生长和产酸的影响,优化培养条件以提高维生素C前体-2-酮基-L-古龙酸(2-KLG)的发酵收率。通过比较摇瓶条件下两菌生长和产酸曲线,提出了分三阶段控制通风量策略:即伴生菌巨大芽孢杆菌生长期(0～10h)、产酸菌氧化葡萄糖酸杆菌生长期(10h～25h)和古龙酸大量合成期(25h至发酵结束)。以菌体生长和产酸为衡量指标,对各阶段通风量进行优化,获得三阶段的最适装液量分别为95mL/750mL,95mL/750mL和70mL/750mL。通风量优化后的发酵结果较未优化前,其大菌生长速率、小菌生长速率和古龙酸的产量分别提高了14.7%、10.5%和10.9%。     

木霉T21和T22原生质体制备和再生研究初报

采用不同菌龄、酶液配比、缓冲液-稳定剂系统、酶解时间等条件对木霉T21、T22原生质体制备和再生影响的试验表明,木霉T21和T22原生质体制备和再生的最适条件为:以纤维素酶:蜗牛酶:溶菌酶=5.0:2.5:2.5(g·L-1)的酶液配比,0.2mol·L-1磷酸缓冲液(phosphatebuffersolution,PBS),pH值5.8和0.6mol·L-1蔗糖组成的缓冲液稳定剂系统,将培养了20h的菌丝体在30℃下,酶解3h,最后获得原生质体数量平均约为2.7×1010个·L-1。     

发酵条件对木霉菌株T23的菌丝生长及几丁质酶活性的影响

为使木霉生防制剂实现工业化生产,本试验对木霉菌株T23的最适菌丝生长和最佳产几丁质酶的发酵条件进行了研究。试验结果得出T23的最佳发酵条件以PDB为培养基,在250mL三角瓶中50mL装瓶量,接种量为6%,起始pH值为5,温度25℃离心机转速180r.min-1,培养4d,发酵液中菌丝产量和几丁质酶活分别达到10.64g.L-1和421.3U.mL-1。     

红树莓果醋生产工艺的研究

探讨了以红树莓为原料的果醋生产工艺。通过单因素试验和正交试验确定了红树莓果醋的最佳工艺参数。酒精发酵的最佳工艺条件为发酵温度20℃,果汁的初始糖度16％,酵母菌接种量10％,发酵7d左右。醋酸发酵最佳工艺条件为发酵温度30℃,醋酸菌接种量12％,初始酒精度8％,发酵8d。酿制出的红树莓果醋香味独特,品位纯正。