血清胸苷激酶1在食管鳞癌诊治中的应用价值

目的 探讨血清细胞质胸苷激酶1（TK1）在食管鳞癌诊治中的应用价值。方法 选取40例食管鳞癌根治术患者（食管癌组）,采用增强化学发光法检测血清TK1的表达水平,同期检测60例健康体检者（对照组）血清TK1的表达水平。并检测食管鳞癌患者术前、术后1周及术后1个月血清TK1水平。结果 食管癌组患者TK1水平为（2.81±1.80）pmol/L,高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;食管癌组TK1阳性率为57.50%,高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。食管癌组患者术前的血清TK1水平、TK1阳性率均高于术后,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 食管鳞癌患者血清TK1水平及阳性率显著升高,术后血清TK1水平及阳性率逐渐下降,血清TK1在食管鳞癌的诊断及手术疗效预测方面具有一定的临床应用价值。     

HSP70和P27在食管鳞癌中的表达及意义

目的探讨热休克蛋白70(HSP70)和P27在食管鳞状细胞癌中表达之间的相关性。方法采用SP免疫组化染色法检测65例食管鳞癌组织、30例正常食管组织及30例瘤旁组织中的HSP70和P27。结果正常食管上皮、癌旁组织、食管鳞癌中HSP70的阳性表达率分别是16.67%(5/30)、46.67%(14/30)、86.15%(56/65),正常食管上皮、癌旁组织及食管鳞癌中P27的表达率分别是96.67%(29/30)、53.33%(16/30)、41.53%(27/65)。在食管鳞癌中,HSP70和P27的表达呈负相关(rs=-0.541,P=0.000)。结论在食管癌中,P27可能随着HSP70表达的上调而下降,其表达率与多个临床病理指标相关。     

直肠癌患者癌组织中维生素D受体和NF-κB p65的表达及其意义

目的 研究维生素D受体(VDR)和核转录因子(NF)-κB p65在直肠癌患者癌组织中的表达水平。方法 选取直肠癌患者和正常直肠黏膜各32例为研究对象,采用免疫组织化学技术检测直肠癌和对照标本VDR和NF-κB p65 表达水平。结果 直肠癌组织有2例VDR表达阳性(6.25%,2/32),有6例NF-κB p65表达阳性(18.75%,6/32);而对照组有28例VDR表达阳性(87.50%, 28/32),29例NF-κB p65(90.62%, 29/32)表达阳性。直肠癌组织VDR和NF-κB p65阳性表达均低于对照组(P < 0.05)。结论 在人直肠癌组织中VDR和NF-κB p65呈低表达。     

Artemin在食管癌中表达作用的研究

目的:探讨Artemin(ATRN)在食管癌中的表达及作用.方法:采用免疫组化和real-time PCR方法检测ATRN在食管癌组织126例、癌旁组织126例和正常组织21例中的表达水平;应用siRNA技术在食管癌TE11细胞系中研究ATRN表达及对肿瘤细胞的凋亡影响.结果:126例食管癌中ATRN的阳性表达率为73.81%(93/126),癌旁组织的阳性表达率为44.44%(56/126);21例正常食管组织中的ATRN阳性表达率为14.29%(3/21),正常食管组织与食管癌组织及癌旁组织比较差异均有统计学意义(x2分别为32.89、23.15.均P＜0.01);TE11-siRNA细胞系ATRN的mRNA和蛋白表达水平均低于TE11-CK细胞系中相应的表达水平.siRNA抑制食管癌细胞中ATRN的表达后,促进了TE11细胞的凋亡.结论:ATRN与食管癌的生物学行为有关.     

肺鳞癌组织中IGF1和CCL20的表达与患者临床病理特征及预后的关系

目的 探讨肺鳞癌组织中胰岛素样生长因子1（IGF-1）和趋化因子20（CCL20）的表达与患者临床病理特征及预后的相关性。方法 选取2014年2月至2015年2月皖北煤电集团总医院收治的肺鳞癌患者30例,采用免疫组织化学染色法检测患者肺鳞癌组织中IGF-1和CCL20蛋白的表达,通过单因素分析IGF-1和CCL20蛋白与患者临床病理特征的相关性;采用单因素和多因素Cox比例风险模型分析其对患者预后的关系。结果 30例肺鳞癌患者中,18例（60.00%）患者IGF-1蛋白呈阳性表达,且与患者TNM分期及淋巴结转移有关（P<0.05）;23例（76.67%）患者CCL20呈阳性表达,且与患者淋巴结转移、浸润深度、TNM分期有关（P<0.05）。经单因素和多因素Cox比例风险模型分析,浸润深度、淋巴结转移、TNM分期、IGF-1、CCL20阳性表达是影响肺鳞癌患者3年生存期的独立危险因素（P<0.05）。结论 IGF-1及CCL20高表达与肺鳞癌的侵袭转移密切相关,可作为判定肺鳞癌患者预后的指标之一。     

阿帕替尼抑制鼻咽癌CNE-2Z细胞的生长及机制研究

目的 探讨阿帕替尼对鼻咽癌CNE-2Z细胞生长抑制作用及其可能机制。方法 将鼻咽癌CNE-2Z细胞与不同浓度阿帕替尼（0，0.5，1，2 μmol·L^-1）共培养48 h，并分别定义为0，0.5，1，2 μmol·L^-1组。MTT法检测细胞生长抑制率，Annexin V-FITC/PI联合流式细胞仪检测细胞凋亡率，Western blotting检测Bcl-2、Bax、caspase-3、caspase-9、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白表达，RT-PCR检测p-PI3K、p-Akt mRNA表达。按药物不同，将鼻咽癌CNE-2Z细胞分为4组：对照组、阿帕替尼组、740YP组、阿帕替尼+740YP组，48 h后Annexin V-FITC/PI联合流式细胞仪检测细胞凋亡率，Western blotting检测p-PI3K和p-Akt蛋白表达。结果 MTT检测结果表明，阿帕替尼呈浓度依赖性抑制CNE-2Z细胞的增殖（P<0.05），阿帕替尼对鼻咽癌细胞的半数抑制浓度（IC₅₀值）为1.518 μmol·L^-1。Annexin-V/PI联合流式细胞仪检测结果表明，阿帕替尼呈浓度依赖性诱导CNE-2Z细胞凋亡（P<0.05）。Western blotting检测结果表明，阿帕替尼呈剂量依赖性地促进促Bax、caspase-3和caspase-9的表达（P<0.05），抑制Bcl-2的表达（P<0.05）。阿帕替尼能抑制p-PI3K、p-Akt的蛋白和mRNA表达（P<0.05），但对PI3K、Akt蛋白表达无影响。细胞培养48 h后，对照组细胞凋亡率为（10.5±0.96）%，阿帕替尼组为（25.3±1.67）%，740YP组为（6.30±0.52）%，阿帕替尼+740YP组为（11.9±0.61）%，与对照组相比，阿帕替尼组凋亡率上调（P<0.05），740YP组凋亡率下调（P<0.05），阿帕替尼和740YP联用时，凋亡率比740YP组上调（P<0.05）。与对照组相比，阿帕替尼组p-PI3K、p-Akt蛋白表达下调（P<0.05），740YP组p-PI3K、p-Akt蛋白表达上调（P<0.05），阿帕替尼和740YP联用时，p-PI3K、p-Akt蛋白表达比740YP组下调（P<0.05）。结论 阿帕替尼可通过抑制PI3K/Akt信号转导通路而诱导鼻咽癌CNE-2Z细胞凋亡，从而达到抑制其增殖的目的。     

FEZ1蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及其意义

目的探讨FEZ1蛋白的表达与食管鳞癌的发生及食管鳞癌病理指标的关系。方法采用免疫组化SP法检测120例食管鳞癌及20例正常食管组织中FEZ1的表达情况,进一步分析其与食管鳞癌患者各临床病理指标的关系。结果 FEZ1蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达率(36.67%)显著低于正常食管组织(60.00%),并且其在食管鳞癌组织中的阳性表达率及表达水平与浸润深度及淋巴结转移密切相关(P<0.05)。结论 FEZ1蛋白在食管鳞癌中低表达,并与浸润深度及淋巴结转移密切相关。     

环氧合酶-2及表皮生长因子在结直肠肿瘤中的表达及意义

目的 探讨环氧合酶-2(COX-2)、表皮生长因子(EGFR)在结直肠癌组织中的表达及其意义。方法 选取结直肠癌54例,以病灶组织为观察组,癌旁正常组织为对照组,采用免疫组织化学Envision方法检测COX-2、EGFR的表达。结果 癌旁正常组织、癌组织中COX-2的阳性表达率分别为48%、76%;EGFR的阳性表达率分别为26%、63%。EGFR蛋白表达与浸润深度、淋巴结转移有相关性(P < 0.05);COX-2表达与肿瘤大小、淋巴结转移存在相关性(P < 0.05)。COX-2与EGFR之间具有相关性(r=0.375, P < 0.05)。结论 COX-2、EGFR对结直肠癌的发生、发展有协同作用,与结直肠的浸润、转移密切相关,可作为判断结直肠癌生物学行为和预后的重要参考指标。     

RNAi沉默PCDGF基因对喉鳞癌Hep-2细胞生物学特性的影响

目的 研究RNAi沉默畸胎瘤细胞源性生长因子（PCDGF）表达对喉鳞癌Hep-2细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响。方法 RT-PCR检测喉鳞癌组织中PCDGF的mRNA表达水平;Hep-2细胞分为空白对照组、阴性对照组和PCDGF-siRNA组,Western blot检测转染效果及Bcl-2、Bax、E-cadherin和MUC1蛋白表达;CCK8实验检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;Transwell 小室检测细胞侵袭能力。结果 喉鳞癌组织中的PCDGF mRNA表达水平显著高于声带息肉组织（t=6.88,P=0.005）。PCDGF在喉鳞癌组织中高表达。PCDGF-siRNA组喉鳞癌Hep-2细胞中PCDGF、Bcl-2、MUCI蛋白表达显著低于空白对照组（P<0.05）,Bax、E-cadherin蛋白表达显著高于空白对照组（P<0.05）,细胞增殖率显著低于空白对照组（P<0.05）,细胞侵袭数显著低与空白对照组（P<0.05）,细胞凋亡率显著高于空白对照组（P<0.05）。结论 抑制PCDGF的表达能够抑制喉鳞癌Hep-2细胞的增殖和侵袭能力,诱导细胞发生凋亡。     

Survivin基因在喉癌组织及声带息肉组织中的表达差异及临床意义

目的 探讨Survivin基因在喉癌组织及声带息肉组织中的表达及其与喉癌患者临床病理特征、Caspase-3、p53的关系。方法 收集2017年6月—2019年3月于我院行手术切除的135例原发性喉癌患者癌组织石蜡标本作为研究对象，另选择我院同期收治的100例声带息肉患者的息肉组织标本作为对照组。采用免疫组织化学染色法检测喉癌组织及声带息肉组织中Survivin、Caspase-3、p53的表达情况，PCR检测Survivin、Caspase-3及p53的表达水平。比较Survivin、Caspase-3、p53在喉癌组织及声带息肉组织中的表达及Survivin基因与喉癌患者临床病理特征、Caspase-3、p53的关系。结果 Survivin、p53在喉癌组织中的阳性表达率分别为68.15%、65.93%，均显著高于其在声带息肉组织中的阳性表达率（34.00%、38.00%）（P<0.001）。Caspase-3在喉癌组织中的阳性表达率（35.56%）显著低于其在声带息肉组织中的阳性表达率（77.00%）（P<0.001）。喉癌组织中Survivin、p53的表达水平显著高于声带息肉组织，Caspase-3表达水平显著低于声带息肉组织（P<0.001）。Survivin基因在中低分化、TNM分期Ⅲ-Ⅳ期、无淋巴结转移的喉癌患者中呈高表达（P<0.05）。Spearman相关性分析结果显示，Survivin基因与Caspase-3的表达呈负相关（r=-0.334， P<0.001），与p53的表达呈正相关（r=0.537， P<0.001）。结论 Survivin基因在喉癌组织中高表达，与喉癌患者临床病理特征及Caspase-3、p53等细胞因子关系密切。临床上对Survivin基因进行检测，可为喉癌的诊断、治疗及预后提供一定的指导依据。     

WWOX、p53及Bcl-xl基因在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨WWOX、p53及Bcl-xl基因在食管鳞癌组织中的表达及其与临床病理学特征的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测10例高分化鳞癌、28例中分化鳞癌、14例低分化鳞癌及52例癌旁正常组织中WWOX、p53及Bcl-xl基因的表达并分析其与临床病理指标的相关性。结果 WW0X在食管鳞癌组织中的表达明显降低,与癌旁正常组织相比较其差异有统计学意义（P〈0.01）,且WWOX的表达与癌组织的分化程度、肿瘤的浸润深度及淋巴结转移情况密切相关（P〈0.05）,在低分化鳞癌中的表达低于高、中分化鳞癌。p53（突变型）基因在食管癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织,二者比较其差异具有统计学意义（P〈0.05）,其表达与癌组织的分化程度、肿瘤的浸润深度及淋巴结转移情况密切相关（P〈0.05）,以上两种基因的表达与患者的年龄和性别无关（P〉0.05）。Bcl-xl基因在食管鳞癌组织中的表达高于癌旁正常组织（P〈0.05）,其表达与癌组织的分化程度有关（P〈0.05）,与肿瘤的浸润深度及淋巴结转移情况及患者的年龄性别无关（P〉0.05）。WWOX基因与p53基因及Bcl-xl基因的表达均呈负相关。结论 WWOX在食管鳞癌组织呈低表达,p53（突变型）及Bcl-xl基因在食管鳞癌组织呈高表达。三基因在食管癌的发生、发展及转移过程中有明显的协同作用。     

EZH2和PCNA在食管癌中的表达及临床意义

目的探讨食管癌组织中PCNA和EZH2的表达及其临床意义。方法采用免疫组化染色SP法,检测50例食管癌组织、20例癌旁组织和20例正常黏膜组织标本中EZH2和PCNA的表达。结果 50例食管癌组织、20例癌旁组织和20例正常黏膜组织标本中EZH2的阳性表达率分别为76%、45%和10%,差异有统计学意义（P〈0.05）,PCNA的阳性表达率分别为70%、40%和5%,差异有统计学意义（P〈0.05）。同时两者的表达呈正相关（P〈0.05）。结论 EZH2和PCNA可能均参与了食管癌的发生、发展过程,并可能作为监测肿瘤恶性程度和判断预后的指标。     

P16、Ki-67基因蛋白在食管癌组织中的表达

目的探讨食管鳞状细胞癌中P16基因蛋白、Ki．-67基因蛋白的表达水平及与淋巴结转移、预后的关系。方法选择56例食管鳞状细胞癌及其癌旁正常黏膜,应用免疫组织化学染色S-P方法进行P16基因蛋白、Ki-67基因蛋白的检测。结果癌旁正常黏膜中,P16阳性表达率为89．29％（50／56）,食管鳞状细胞癌中其阳性表达率为42．86％（24／56）,经比较二者差异有统计学意义（P〈0．05）;癌旁正常黏膜中,Ki-67阳性表达率为8．93％（5／56）,食管鳞状细胞癌中其阳性表达率为33．93％（19／56）,经比较二者差异有统计学意义（P〈0．05）。食管癌高分化组P16阳性表达率明显高于中、低分化组（均P〈0．05）;食管癌组织分化差者Ki-67阳性表达率高于分化好者（p〉0．05）;P16、Ki-67阳性表达率在有、元淋巴结转移组比较,差异均有统计学意义（均（P〈0．05）。术后生存期〉3年者P16阳性表达率57．69％（15／26）显著高于术后生存期≤3年者30．00％（9／30）（x2=4．36,P〈0．05）,术后生存期≤3年者Ki-67阳性表达率46．67％（14／30）高于术后生存期〉3年者19．23％（5／26）（x2=468,P〈0．05）。结论P16、KJ-67可作为反映食管鳞状细胞癌生物学行为的客观参考指标,可作为评定食管鳞状细胞癌的进展、预测其转移的重要参考指标。     

热休克蛋白90在胃癌组织中表达的初步研究

目的 探讨热休克蛋白90(HSP90)在胃癌组织中的表达及意义.方法 利用免疫组化87-8973二步法,检测80例胃癌及20例癌旁正常胃黏膜组织中HSP90的表达.结果 胃癌组织中HSP90的阳性率显著高于正常黏膜组织,差异有统计学意义(P<0.05).胃癌组织中HSP90的阳性率与肿瘤分化程度、侵犯深度、淋巴结有无转移及TNM分期相关(P<0.05).结论 HSP90可能在胃癌的发生、发展和淋巴结转移中发挥重要作用.     

HPV16-E6蛋白在梅州地区客家人食管鳞癌组织及非癌组织中的表达

目的：通过分析HPV16-E6蛋白在食管正常组织、不典型性增生组织和癌组织中的表达,探讨HPV16-E6蛋白在梅州地区客家人食管鳞癌组发生、发展中的生物学意义。方法应用免疫组织化学方法检测对68例食管正常黏膜组织、20例上皮不典型增生组织及68例癌组织中HPV16-E6蛋白的表达情况进行研究。结果 HPV16-E6蛋白阳性率在正常食管黏膜组织中为14.7％,在上皮不典型性增生组织中为45.0％,在癌组织中为70.6％,各组间差异有统计学意义（ P＜0.05）。结论 HPV16-E6蛋白与梅州地区客家人食管鳞癌的发生、发展关系密切。     

褪黑素通过诱导铁死亡抑制食管鳞癌生长的机制研究

目的 探讨褪黑素通过抑制溶质运载蛋白7家族成员11（SLC7A11）表达对食管鳞癌细胞铁死亡的影响。方法 使用不同浓度（0.25、0.5、1.0、2.0、4.0 mmol/L）的褪黑素处理人食管鳞癌KYSE150细胞，筛选建立KYSE150细胞铁死亡模型的褪黑素浓度；将KYSE150细胞分为对照组、褪黑素（1.0 mmol/L）组、褪黑素（1.0 mmol/L）＋pcDNA（转染空载质粒）组、褪黑素（1.0 mmol/L）＋SLC7A11（转染SLC7A11过表达质粒）组。透射电子显微镜观察KYSE150细胞线粒体形态；碘化丙啶（PI）染色检测细胞死亡；试剂盒检测细胞Fe²⁺、谷胱甘肽（GSH）及活性氧（ROS）水平；Western blotting法检测细胞SLC7A11蛋白表达。建立食管鳞癌裸鼠荷瘤模型，将BALB/c裸鼠分为模型组、褪黑素（ip 25 mg/kg褪黑素）组、褪黑素＋pcDNA（ip 25 mg/kg褪黑素＋裸鼠右侧腋下注射转染空载质粒的KYSE150细胞）组、褪黑素＋SLC7A11（ip 25 mg/kg褪黑素＋裸鼠右侧腋下注射转染SLC7A11过表达质粒的KYSE150细胞）组；分别检测各组小鼠肿瘤体积、质量及肿瘤组织中SLC7A11蛋白表达。结果 1.0 mmol/L褪黑素可诱导KYSE150细胞铁死亡；与对照组比较，褪黑素组KYSE150细胞死亡数目增多，细胞内的线粒体变小，线粒体膜密度增加，细胞内Fe²⁺及ROS水平显著增加（P＜0.05），SLC7A11蛋白表达水平及细胞内GSH水平显著降低（P＜0.05）；与褪黑素＋pcDNA组比较，褪黑素＋SLC7A11组细胞死亡数目减少，细胞内的线粒体增大，线粒体膜密度减少，细胞内Fe²⁺及ROS水平显著降低（P＜0.05），SLC7A11蛋白表达水平及细胞内GSH水平显著升高（P＜0.05）；褪黑素可通过抑制SLC7A11蛋白表达抑制食管鳞癌裸鼠肿瘤生长。结论 褪黑素可能通过抑制SLC7A11表达诱导细胞铁死亡，抑制食管鳞癌细胞生长。     

食管鳞癌IGF-1R、EGFR蛋白的表达及其临床意义

目的：研究IGF-1R、EGFR蛋白在食管鳞癌患者中的表达情况及其临床意义。方法应用免疫组织化学SP法检测50例食管鳞癌患者IGF-1R、EGFR蛋白的表达情况,取20例手术标本正常组织作为对照组。结果食管鳞癌中IGF-1R蛋白阳性表达率明显升高（χ2=28.29, P〈0.05）, EGFR蛋白阳性表达率明显升高（χ2=4.56, P〈0.05）。IGF-1R的阳性表达与食管癌的病理分级有关,分级越高阳性率越高,与浸润深度有关,侵及深肌层及外膜IGF-1R的表达明显高于侵及浅肌层及黏膜的表达,与TNM分期有关,分期越晚阳性率越高,差异均有统计学意义。淋巴结转移组IGF-1R或EGFR的表达明显高于非转移组。结论初步结果分析显示IGF-1R可能与食管鳞癌的病理分级及侵袭、转移有关, EGFR可能与食管鳞癌的转移有关。     

MMP-9与TIMP-1蛋白在食管鳞癌中的表达及其与肿瘤浸润、转移的关系

目的检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)蛋白在食管鳞癌组织中的表达,并探讨其临床病理学意义。方法应用免疫组化SP法检测56例食管鳞癌组织和26例非典型增生食管黏膜组织、23例正常食管黏膜组织中MMP-9和TIMP-1的表达,分析其与食管鳞癌的患者性别、浸润深度、淋巴结转移的关系及后两者的相关性。结果MMP-9和TIMP-1在食管鳞癌组织中的表达明显高于正常食管黏膜(P<0.05),在侵及纤维膜组中的表达明显高于未侵及纤维膜组(P<0.05),在有淋巴结转移组中的表达明显高于无淋巴结转移组(P<0.05),在不同性别患者中的表达差异无统计学意义(P>0.05);两者的表达呈负相关关系(rs=-0.626,P<0.01)。结论MMP-9和TIMP-1在食管鳞癌组织中的表达和浸润深度、淋巴结转移有关,和患者性别无关。     

miRNA-154在皮肤鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的 分析miRNA-154在皮肤鳞状细胞癌（CSCC）中的表达水平以及其在CSCC发展过程中的临床意义。方法 采用RT-PCR法和原位杂交法检测98例CSCC组织和60例正常皮肤组织中miRNA-154的表达水平。研究对入组患者均进行了5年的跟踪随访,对患者的生存情况进行统计和总结,同时对miRNA-154表达水平和CSCC患者预后的关系进行进一步分析。结果 CSCC组织中miRNA-154相对表达量为（0.57±0.09）,明显低于其在正常组织中的表达量（1.56±0.02）,差异有统计学意义（P<0.001）。CSCC组织中miRNA-154表达的平均光密度为（63.26±10.08）,明显低于正常组织的（109.56±30.05）,差异有统计学意义（P<0. 001）。CSCC组织中miRNA-154表达水平越低,则临床分期越高、肿瘤分化程度越低,同时越容易发生淋巴结转移,差异均有统计学意义（P<0.05）。miRNA-154高表达组患者的总生存期显著长于miRNA-154低表达组（41.9个月 vs. 31.4个月,P<0.001）。Cox回归分析结果显示,miRNA-154低表达、肿瘤低分化、高临床分期及淋巴结转移与CSCC患者死亡预后显著相关（P<0.05）。结论 在CSCC发生发展过程中,miRNA-154是重要的抑癌基因,其表达水平与肿瘤分化程度呈负相关,与临床分期、淋巴结转移以及生存期呈正相关,可能是潜在的抗肿瘤生物治疗靶点。