Yes相关蛋白与结肠癌病理因素的相关性

目的 探讨新型转录共激活因子Yes相关蛋白(YAP)的表达与结肠癌临床病理因素及肿瘤转移的相关性。 方法 选取104例组织蜡块,其中80例为结肠癌组织,24例为结肠癌转移灶组织。应用免疫组织化学法检测结肠癌原发灶及其多器官转移灶中YAP及N-钙黏蛋白的表达,应用qRT-PCR和Western blotting检测YAP、N-钙黏蛋白及E-钙黏蛋白在6种结肠癌细胞中的表达。 结果 N-钙黏蛋白在结肠癌原发灶组织中的阳性表达率高于结肠癌转移灶组织(P<0.05),而 YAP阳性表达率的差异无统计学意义(P>0.05)。YAP与N-钙黏蛋白的共同表达仅在结肠癌原发灶中呈正相关(r=0.5003,P<0.001),在结肠癌转移灶中两者的表达没有相关性(r=0.0325,P>0.05)。YAP及N-钙黏蛋白的阳性表达与肿瘤浸润深度及远处转移有关(P<0.05),而与肿瘤发生部位、大体形态、组织学类型、分化程度、肿瘤大小、淋巴结转移及脉管内癌栓无关(P>0.05)。在SW480、SW620、SW1116、DLD-1、HCT116和HT29这6种细胞中,YAP表达量的差异无统计学意义(P>0.05),E-钙黏蛋白在HT29和SW1116中的表达显著高于其他细胞,N-钙黏蛋白在HCT116和SW620中表达最高。 结论 YAP蛋白能够通过调控上皮-间质转化过程,促进结肠癌的发展及转移。     

增强和抑制表达E-钙黏蛋白A549细胞株的构建

目的侵袭性肺曲霉病的发病率上升,病死率高,机制不明。为探讨E-钙黏蛋白在烟曲霉侵袭肺泡上皮细胞过程中的作用,拟建立高、低表达E-钙黏蛋白的A549细胞株。方法用基因转染技术,将人E-钙黏蛋白基因的cDNA和siRNA克隆至慢病毒载体,包装成病毒后感染A549细胞。结果经PCR及蛋白质印迹证明转染成功,得到E-钙黏蛋白稳定高、低表达株A549。结论成功构建高、低表达E-钙黏蛋白的A549细胞株。     

缺 氧 /PGC-1α/CXCR4 信号通路在肝癌侵袭转移中的作用研究

目的 探讨肝癌细胞系 HepG2 细胞缺氧状态下过氧化物酶体增殖物激活受体 γ 辅激活因子 -1α（PGC-1α）、趋 化因子受体 4（CXCR4）及 E- 钙黏蛋白的表达情况,及其在肝癌侵袭转移中的作用。 方法 将 PGC-1α 小干扰 RNA(siPGC-1α) 转染 HepG2 细胞,应用 RT-PCR 及 Western blot 法检测 PGC-1α、CXCR4 及 E- 钙黏蛋白的 mRNA 及蛋白表达水平,Transwell 试 验分析 HepG2 细胞迁移情况。 结果 与常氧状态下比较,缺氧状态下 HepG2 细胞的 PGC-1α、CXCR4 表达水平均增高（均 P＜0.05）,E- 钙黏蛋白表达水平降低（P＜0.05）,且迁移细胞数目增多。在 HepG2 细胞转染 siPGC-1α 后,CXCR4 及 E- 钙黏蛋白表达 水平均逆转,同时迁移细胞数目减少（均 P＜0.05）,而加入 CXCR4 拮抗剂（AMD3100）后,E- 钙黏蛋白表达水平增高,迁移细胞数目 减少（均 P＜0.05）。 结论 缺氧 /PGC-1α/CXCR4 信号通路在调控 E- 钙黏蛋白表达以及肝癌细胞迁移中起着重要作用,是肝癌侵 袭转移的新治疗靶点。     

4-氨基吡啶抑制肺癌SPCA1及PC9细胞侵袭转移

目的: 探讨4-氨基吡啶对肺癌细胞侵袭转移的影响及其分子机制。方法: 采用浓度为0、3、4.7或0、3.125、6.25 mmol/L的4 氨基吡啶分别处理SPCA1和PC9细胞48 h,Transwell实验观察肺癌细胞迁移侵袭能力, 蛋白质印迹法检测细胞侵袭转移相关的上皮间质转化标志蛋白N 钙黏蛋白、E-钙黏蛋白以及Snail的表达。结果： Transwell迁移实验和侵袭实验结果显示,4-氨基吡啶组细胞穿膜数明显减少（P＜0.05）。蛋白质印迹法结果显示,4-氨基吡啶组细胞E-钙黏蛋白表达上调,N-钙黏蛋白和Snail表达下调。结论： 4-氨基吡啶通过调控上皮间质转化蛋白的表达抑制肺癌细胞SPCA1及PC9侵袭转移。     

转录因子Slug、E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白在胃肠道间质瘤中的表达及其意义

目的 探讨转录因子Slug、E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白在胃肠道间质瘤(GIST)中的表达及其临床意义.方法 收集2004年5月至2007年10月于中南大学湘雅医院行手术切除的胃肠间质瘤标本78例,患者年龄28～87岁,男48例,女30例.采用免疫组织化学技术检测GIST组织中Slug、E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白的表达情况,并分析其与GIST临床病理特征之间的关系.结果 Slug、E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白在78例GIST组织中的阳性表达分别为42例(53.8％),28例(35.9％)和59例(75.6％),差异有统计学意义(x2 =24.98,P＜0.05).Slug在发生远处转移、侵犯或转移的GIST组织中的表达率明显高于未发生远处转移、未侵犯或转移的GIST组织[75.0％ (18/24)比44.4％( 24/54),63.6％ (28/44)比41.2％ (14/34),均P＜0.05],E-钙黏蛋白在发生远处转移的GIST组织中的表达率明显低于未发生远处转移的GIST组织[16.7％ (4/24)比44.4％( 24/54),P＜0.05],N-钙黏蛋白在各项临床病理特征间的表达差异均无统计学意义(均P＜0.05).Slug与E-钙黏蛋白在GIST中的表达呈负相关(rs=-0.267,P=0.018),与N-钙黏蛋白的表达无明显关联(rs=0.056,P=0.625).结论 在远处转移的GIST组织中Slug的表达率明显高,而E-钙黏蛋白的表达率则明显低,二者的表达呈负相关,与GIST的转移有密切关系.     

半枝莲阻滞人结肠癌细胞周期的机制

目的研究半枝莲氯仿极性部位提取物（ECSB）阻滞人结肠癌细胞周期的机制。方法用ECSB干预结肠癌细胞株HCT-8、SW620,检测其细胞周期相关基因的表达。结果 ECSB干预SW620细胞后,其p16表达上升,PCNA表达下降;ECSB干预HCT-8细胞后,Cyclin D1、CDK2、CDK4表达下降。结论ECSB通过调控细胞周期相关基因的表达,抑制人结肠癌细胞的增殖。     

KL-6黏蛋白和E-钙黏蛋白在大肠癌组织中的表达及临床意义

目的研究KL-6黏蛋白和E-钙黏蛋白在结直肠癌中的表达和其对应的临床病理之间相互关系。方法于手术中收集大肠癌组织与癌旁组织各60例(所有手术患者在术前均未进行全身化疗、放疗及其他治疗),采用逆转录酶聚合酶链反应技术检测大肠癌组织及癌旁组织中KL-6黏蛋白与E-钙黏蛋白的RNA表达水平的变化。结果 (1)ELISA法检测结果显示:大肠癌组织中KL-6黏蛋白的表达明显高于癌旁正常组织,而E-钙黏蛋白表达明显低于癌旁正常组织,差异具有统计学意义(P<0.05)。KL-6黏蛋白和E-钙黏蛋白的表达与性别、年龄、临床TNM分期无关,且差异无统计学意义(P>0.05),但与不同肿瘤的分化程度以及有无淋巴结转移有关,且差异有统计学意义(P<0.05)。(2)相关性分析显示KL-6黏蛋白和E-钙黏蛋白在大肠癌中的表达呈显著负相关(P<0.05)。结论 (1)KL-6黏蛋白和E-钙黏蛋白的表达异常在大肠癌的发生、发展中起重要作用,KL-6黏蛋白和E-钙黏蛋白的表达与大肠癌的分化程度及淋巴结转移情况有相关性;联合检测两者在大肠癌中的表达可能有助于恶性程度的评估与预后判断。(2)KL-6黏蛋白其发挥作用的作用机制可能与其抗粘附作用以及Wnt/β一catenin信号通路的激活密切相关。     

结肠癌中ILK及E-cadherin的表达及其预后意义

目的：探讨整合素连接激酶（Integrin-linked kinase，ILK）和E-钙黏蛋白（E-cadherin）在结肠癌发生发展中的临床意义。方法：采用免疫组织化学S-P法检测ILK和E-cadherin在50例结肠恶性肿瘤、相对应25例正常结肠标本中的表达情况。结果：结肠癌组织中ILK阳性表达率为66.0%（33/50）明显高于正常结肠组织24.0%（6/25）；而E-cadherin阳性表达率为42.0%（21/50）则明显低于正常结肠组织中的表达96.0%（24/25）；ILK与E-cadherin在结肠癌中的异常表达与浸润深度和淋巴结转移，临床分期有关（P<0.05），分化程度无关（P>0.05）；结肠癌组织中ILK与E-cadherin表达呈负相关（r= -0.413，P<0.05）。结论：ILK及E-cadherin与结肠癌侵袭、转移行为密切相关,在同一病例中ILK和E-cadherin的联合检测将有助于判断结肠癌患者的预后。     

消疕合剂对寻常型银屑病表皮更替时间和E-钙黏蛋白表达的影响研究

目的探讨消疕合剂治疗中度寻常型银屑病临床疗效及对表皮更替时间和E-钙黏蛋白表达的影响。方法将银屑病患者15例作为治疗组,予消疕合剂口服,疗程24周,采用PASI评分变化评估临床疗效,治疗前后取皮损处标本;另设健康对照组15例,皮肤标本取自整形外科手术。标本经处理后检测E-钙黏蛋白表达并测算表皮更替时间。结果治疗组治疗前后E-钙黏蛋白表达与原皮损处表皮更替时间比较差异均有统计学意义（P<0.05）。结论消疕合剂治疗寻常型银屑病有较好临床疗效,且对于表皮更替时间及E-钙黏蛋白表达有改善作用。     

涎腺腺样囊性癌组织中E-钙黏蛋白的表达及临床意义

目的 研究E-钙黏蛋白在涎腺腺样囊性癌(SACC)中表达水平、CDH1甲基化状态及临床意义.方法 用免疫组化的方法检测E-钙黏蛋白在SACC及正常涎腺组织中的表达,并用实时荧光甲基化特异性PCR分析CDH1甲基化状态.结果 与正常涎腺组织相比,E-钙黏蛋白在SACC表达低,差异有统计学意义(100.0％比55.6％,P＜0.05),E-钙黏蛋白表达与组织病理学类型、T-分期、神经侵犯、淋巴结转移及远处转移相关(P＜0.05);而与性别、年龄及肿瘤位置无关.30例E-钙黏蛋白表达阳性的SACC标本中,有3例标本检测到CDH1部分甲基化,24例E-钙黏蛋白表达阴性的SACC标本中,23例标本中检测到CDH1完全甲基化,经Spearman等级相关分析提示,随着CDH1基因甲基化增高,E-钙黏蛋白表达减弱,两者在SACC中呈负相关(r=-0.483,P＜0.001).结论 CDH1基因通过甲基化下调E-钙黏蛋白表达,其表达水平与SACC淋巴结转移、神经侵犯及远处转移等相关,这对评估SACC恶性程度及预后具有一定临床价值.     

上皮型钙黏蛋白与消化系统肿瘤

上皮钙黏蛋白是跨膜糖蛋白家族的一个成员,参与了钙依赖上皮细胞间的黏附。最近的研究证据表明上皮钙黏蛋白不仅参与细胞间黏附,而且与消化系统恶性肿瘤的低分化及侵袭和转移之间存在密切关系。     

埃兹蛋白、转移相关黏附分子44V6、E-钙黏附素在人结肠癌组织中的表达及其意义

目的 探讨埃兹蛋白(Ezrin蛋白)、转移相关黏附分子44V6(CD44V6)、E-钙黏附素在人结肠癌组织中的表达及意义.方法 应用免疫组化S-P法检测Ezrin、CD44V6、E-钙黏附素在78例结肠癌组织、30例结肠腺瘤组织、30例正常结肠黏膜中的表达,分析三者与临床病理特征的关系及相关性.结果 结肠癌组织中Ezrin、CD44V6蛋白表达阳性率显著高于结肠腺瘤组织及正常结肠组织(P＜0.01),而有淋巴转移者显著高于无淋巴转移者(P＜0.05);E-钙黏附素蛋白表达阳性率显著低于结肠腺瘤及正常结肠黏膜组织(P＜0.01),无淋巴转移组明显高于有淋巴转移组(P＜0.01).结肠癌组织中Ezrin、CD44V6蛋白表达水平与肿瘤进展及转移呈正相关(P＜0.05),而E-钙黏附素蛋白表达水平与肿瘤进展及转移呈负相关(P＜0.05).结论 Ezrin、CD44V6、E-钙黏附素可能与结肠癌的侵袭转移相关,三者联合检验能更准确地判断结肠癌的转移情况.     

血根碱基于PI3K/AKT通路抑制结肠癌细胞增殖和迁移的机制研究

目的 研究血根碱在结肠癌细胞增殖和迁移中的作用及其机制。方法 使用不同剂量(2、4、8μmol/L)血根碱对结肠癌细胞系(HCT-8、SW-620)进行处理，利用光学显微镜观察结肠癌细胞形态变化；细胞计数试剂CCK-8及细胞克隆试验观察血根碱对结肠癌细胞生长的影响；细胞划痕实验测定血根碱对结肠癌细胞迁移的影响；蛋白质印迹法测定相关蛋白E-钙黏蛋白(Ecad)、N-钙黏蛋白(N-cad)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、丝氨酸/苏氨酸激酶(AKT)、磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶(p-AKT)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达。建立HCT-8皮下瘤体模型，分别采用生理盐水和10 mg/kg的血根碱液进行腹腔内灌注，以探讨其对结肠癌的抑制作用。结果 CCK-8实验表明，血根碱对结肠癌细胞有明显杀伤作用[HCT-8和SW-620的IC₅₀分别是(3.40±0.03)μmol/L和(5.32±0.12)μmol/L]，而对正常结肠黏膜细胞具有较小的杀伤作用[IC₅₀为(14.98±1.34)μmol/L]。不同浓度(0、2、4、8μmol/L)的血根碱以剂...     

E-钙黏蛋白在食管鳞癌中的表达及其临床意义

目的:探讨食管鳞癌组织中E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)的表达及其与肿瘤侵袭和转移的关系。方法:应用免疫组织化学S-P法检测76例食管鳞状细胞癌组织标本中E-cad的表达,以30例食管癌旁正常黏膜组织作对照,并结合食管癌的临床病理特征进行分析。结果:E-cad在76例食管鳞癌中异常表达率59.21%;而在30例癌旁正常黏膜中异常表达率为6.67%,两者差异有统计学意义(P<0.01),同时E-cad的异常表达率与食管鳞癌的浸润深度、细胞分化程度及淋巴结转移均有一定关系(P<0.05~P<0.01)。结论:E-cad在食管鳞癌中呈异常表达,其异常表达率与肿瘤的浸润深度、分化程度、淋巴结转移密切相关。     

LI-钙黏蛋白和胃癌关系的研究进展

钙黏蛋白是一组钙依赖性的、介导细胞间连接的糖蛋白超家族,对组织细胞乃至机体维持正常功能意义重大。其中LI-钙黏蛋白作为钙黏蛋白超家族成员之一,在介导细胞连接等方面有其自身特点。国内外研究认为,其表达与胃癌的发生、发展、转移及预后均呈明显相关;在针对胃癌的临床处理方面,LI-钙黏蛋白将会是有用的标志物。     

脂肪因子Chemerin调节结肠癌细胞系迁移及侵袭能力的机制研究

目的:探讨Chemerin对结肠癌细胞侵袭与迁移能力的影响及作用机制。方法:采用不同浓度的Chemerin(0、100、200、300、400、500 ng/mL)处理结肠癌细胞系HCT116、SW480,通过Transwell法检测细胞的侵袭与迁移能力;以HCT116、SW480细胞为材料进一步研究,分为4组,pEGFP-N1阴性对照组(vector control)、si-Chemerin阴性对照组(si-NC)、pEGFP-N1-Chemerin组与si-Chemerin组,转染后检测各组细胞的侵袭与迁移能力,采用qRT-PCR检测上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin, E-cad)、神经钙黏附蛋白(N-cadherin, N-cad)和波形蛋白(vimentin)mRNA水平,采用Western blot法检测E-cad、N-cad和vimentin蛋白表达水平。结果:外源性Chemerin可提升结肠癌细胞HCT116、SW480侵袭率与迁移数(P<0.05),且存在剂量依赖性,细胞迁移数与侵袭率pEGFP-N1-Chemerin组>vector control组...     

转化生长因子-β1诱导人肺上皮细胞E-钙黏蛋白表达的变化

目的观察重组人转化生长因子-β1（rhTGF-β1）诱导人肺上皮细胞（A549）E-Cad蛋白表达的变化。方法将体外培养的A549用不同浓度的rhTGF-β1干预,48h后收集蛋白用Westerblot和间接免疫荧光方法检测上皮细胞表型E-钙黏蛋白（E-Cad）表达的变化。结果rhTGF-β1诱导A549下调上皮细胞表型E-Cad表达,并呈浓度依赖性。结论rhTGF-β1可诱导A549细胞E-Cad表达下调,支持在肺上皮细胞发生上皮细胞-间质转化（EMT）的观点。     

过表达CCR9对SW480结肠癌细胞侵袭的影响

目的初步探讨人CCR9基因对SW480结肠癌细胞侵袭功能的影响。方法取人外周血单个核细胞提取总RNA逆转录为c DNA,扩增提取CCR9的CDS序列,连接p LVX-puro质粒,Lipo2000感染人SW480结肠癌细胞,嘌呤霉素筛选并建立稳定转染细胞株。免疫印迹证实CCR9基因在SW480结肠癌细胞高效表达。Transwell方法检测SW480结肠癌细胞侵袭。结果免疫印迹证实成功构建p LVX-puro-CCR9质粒,相比SW480细胞组,CCR9过表达SW480结肠癌细胞中CCR9显著表达[(26.0±10.7)vs(10.0±4.5),n=8,P=0.0078],且在体外能够促进SW480结肠癌细胞侵袭(P=0.0136)。结论成功构建CCR9稳定表达结肠癌细胞株,并能够在体外显著促进其侵袭功能。     

胰腺癌患者表皮生长因子受体-2和E-钙黏蛋白表达的临床意义

目的探讨胰腺癌组织中表皮生长因子受体-2(Her-2)和E-钙黏蛋白的表达水平。方法收集山西医科大学第一医院病理科2010年3月至2016年6月期间诊断为胰腺癌患者的标本45例,采用免疫组织化学方法检测胰腺癌组织中Her-2和E-钙黏蛋白的表达水平。结果 Her-2在胰腺癌组织中表达上升;E-钙黏蛋白在胰腺癌组表达降低,且E-钙黏蛋白高表达随胰腺癌组织分化程度进展、淋巴结出现转移以及临床分期增加而降低。结论 Her-2和E-钙黏蛋白参与胰腺癌的发生、发展、侵袭、转移过程。     

沉默HE4对结肠癌细胞增殖、侵袭、凋亡和JAK/STAT3信号通路的影响

目的 探讨沉默人附睾蛋白4(HE4)对结肠癌细胞增殖、侵袭、凋亡和JAK/STAT3信号通路的影响.方法 选取124例结肠癌患者和40例健康人.用Western blot和免疫组织化学染色法检测结肠癌组织和癌旁组织中HE4的表达水平.酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结肠癌患者和健康人血清中HE4的表达水平.Western blot检测结肠癌细胞株Caco-2、SW480、HT-29、HCT-116和正常结肠上皮细胞株HCoePic 中 HE4的表达水平.用 HE4 si-RNA 或 si-control 分别转染HT-29细胞,CCK-8法检测细胞增殖能力,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,Annexin-V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡情况.Western blot检测JAK1、p-JAK1、JAK2、p-JAK2、STAT3和p-STAT3的蛋白表达水平.结果 结肠癌组织HE4蛋白相对表达量高于癌旁组织(P＜0.05).HE4在结肠癌组织中呈阳性表达,其中高表达78例(62.90％),而癌旁组织中高表达仅24例(19.35％),差异有统计学意义(P＜0.05).结肠癌患者血清HE4浓度高于健康人(P＜0.05).结肠癌 Caco-2、SW480、HT-29、HCT-116细胞的HE4蛋白相对表达量均高于正常结肠上皮HCoePic细胞(均P＜0.05).HE4表达水平与性别、年龄、肿瘤大小无关,而与分化程度、TNM分期、淋巴结转移和远处转移有关(P＜0.05).沉默HE4后,HT-29细胞的增殖和侵袭能力下降,而凋亡率提高(均P＜0.05).沉默HE4对JAK1、JAK2和STAT3总蛋白无明显影响,但是可以下调p-JAK1、p-JAK2和p-STAT3蛋白表达量(均P＜0.05).结论 沉默HE4可以抑制结肠癌细胞增殖、侵袭、凋亡,并且下调JAK/STAT3信号通路相关蛋白的表达.