婴儿型GM1神经节苷脂贮积症的产前诊断

婴儿型ＧＭ１神经节苷脂贮积症的产前诊断张为民，施惠平，郭玉凤，高淑英，罗会元，孙念怙，赵时敏ＧＭ１神经节苷脂贮积症是由于溶酶体中酸性β－半乳糖苷酶缺乏所致，为常染色体隐性遗传。从临床上按发病早晚分为婴儿型、少年型及成人型，其中婴儿型出生时或生后不久即...     

GM2神经节苷脂沉积症发病的分子机理研究

目的：探讨GM2神经节苷脂沉积症发病的分子机理。方法：培养患者皮肤成纤维细胞，进行酶学、Western印迹杂交和免疫细胞化学分析。结果：4例GM2神经节苷脂沉积症患者成纤维细胞内β-氨基已糖苷酶（hexosaminidase,Hex）活性均显著降低，分别为正常人的12％、3％、15％和6％；两例Sandhoff病Hex成熟的α、β-亚基（αm、βm）明显减少，但婴儿型与成年型减少的程度不同，1例Tay-Sachs病只有αm明显减少，1例GM2激活蛋白缺陷症αm、βm与正常人无差异；4例患者成纤维细胞内均有不同程度的GM2神经节苷酯的堆积。结论：GM2神经节苷脂沉积症的发病与HEXA、HEXB、GM2A基因突变引起相应蛋白表达、成熟障碍有关。     

GM_2-神经节苷脂沉积病的命名

GM_2-神经节苷脂沉积病(GM_2G)的生化缺陷是由于溶酶体的β-氨已糖酶(HEX)活性降低引起的。正常情况下,HEX的活性是由三种功酶A、B和S所决定的,HEX的同功酶A、同功酶B和同功酶S各具有两种不同的多肽链(α-链和β-链),决定这两种多     

神经节苷脂沉积症的生物化学与遗传学

神经节苷脂的生物合成,由一类与膜结合的转移酶所催化。分解代谢中(见图1),神经节苷脂从细胞膜进入溶酶体的转运过程尚不了解。神经节苷脂在溶酶体酸性水解酶的作用下,从分子的亲水端开始逐步降解。这种水解酶的隐性遗传性缺陷,使底物降解过程受阻,因而使未降解的物质沉积。许多神经鞘脂类水解酶是键特异性水解酶,只降解几种有关的底物(寡糖、糖蛋白和脂类)。若缺乏这种水解酶,便导致底物在溶酶体内     

一例GM1-神经节苷脂贮积症患儿的临床与 GLB1基因变异分析

目的:探讨一例GM1-神经节苷脂贮积症患儿的基因型与表型的关系。方法:采用全外显子测序(whole-exome sequencing, WES)对患儿家系进行检测,并应用Sanger测序对可疑变异位点进行验证。取患儿外周血白细胞利用荧光法进行β半乳糖苷酶活性分析。结果:先证者为一名2岁3个月女性患儿,临床表现为精神运动...     

黏脂贮积症Ⅱ型α/β和Ⅲ型α/β家系的溶酶体酶学分析CSCD

目的分析总结黏脂贮积症(mucolipidosis,ML)Ⅱ型α/β和Ⅲ型α/β溶酶体酶酶学检测的特点,为选择酶学检测指标提供依据。方法检测两例确诊为MLⅡ型α/β和Ⅲ型α/β患者及10例健康个体血浆及白细胞中的多种溶酶体酶活性,比较患者与健康个体的差异;分别以"mucolipidosis"及"黏脂贮积症"为关键词,检索PubMed、CNKI、万方数据库,分析总结已报道的MLⅡ型α/β和Ⅲ型α/β的酶学检测结果。结果两例患儿血浆中多种溶酶体酶活性与健康个体相比均明显增高,程度由高至低分别为:芳基硫酸酯酶A(arylsulphatase A,ASA)和α-L-艾杜糖醛酸酶(α-iduronidase,IDUA)(20倍以上)、β-葡萄糖醛酸酶(β-glucuronidase,GUSB)(10倍以上)、β-D半乳糖苷酶(β-galactosidase-1,GLB1)和α-半乳糖苷酶(α-galactosidase A,GLA)(5倍以上)、α-N-乙酰葡萄糖胺酶(α-N-acetylglucosaminidase,NAGLU)(2倍),葡萄糖脑苷酯酶(glucocerebrosidase,GBA)(无明显变化)。两例患儿白细胞中多种溶酶体酶的活性与健康个体相比无差异,均在正常范围。筛选出22篇文献,共报道了15个溶酶体酶学指标,血浆中升高最明显的是总己糖胺酶(hexosaminidase A and B,Hex A+B)(平均升高24.4倍)和α-甘露糖苷酶(α-mannosidase,α-man)(24.7倍),其次是ASA(22.4倍),GUSB为18.8倍;选用较多的指标分别是Hex A+B(12篇)、α-man(11篇)和GUSB(10篇)。结论溶酶体酶学分析是MLⅡ型α/β和Ⅲ型α/β不可或缺的辅助诊断手段,通过对两例患儿的血浆酶学的分析和文献复习,推荐选用ASA、GUSB、Hex A+B和α-man为二者的血浆溶酶体酶学分析指标。     

神经节苷脂在神经系统发育过程中的作用

1935年，Klenk首先在大脑灰质的Ganglionzellen细胞中发现了一种新物质，命名为ganglioside-神经节苷脂，其种类繁多，至今已分离鉴定出70余种。神经节苷脂是一组含有唾液酸的鞘糖脂，分子由疏水的神经酰胺和亲水的含唾液酸的寡糖链组成，广泛分布于脊椎动物各组织的细胞膜上，其中以神经系统含量最为丰富。通常根据唾液酸数目不同分为GM(单唾液酸神经节苷脂)、GD(二唾液酸神经节苷脂)和GT(三唾液酸神经节苷脂)等。又根据糖基数目不同将GM分为GMl(含4个糖基)、     

孕早期诊断一例罕见的α-甘露糖苷贮积症

α-甘露糖苷贮积症是由于溶酶体内α-甘露糖苷酶(α-Man)缺乏导致的遗传性代谢病,伴有富含甘露糖的寡聚糖在患者组织中累积。诊断该病必须确认患儿的白细胞和成纤维细胞中α-Man活性下降或缺失,同时有双亲的该酶活性下降。这里报道一例孕早期诊断的罕见的α-甘露糖苷贮积症,除了测定绒毛组织中的α-Man活性,我们还测定了缺乏酶的酶动力学指标。     

脑肿瘤病人血清中抗神经节苷脂的抗体检测

<正> Yokoyama等(1962)报道中枢神经系统损伤的人和动物,血清中存在抗神经节苷脂的抗体;而4例脑肿瘤中有一例有抗神经节苷脂的抗体,滴度为1:8。 Tai等(1985)指出神经节苷脂是良好的     

大肠杆菌β-半乳糖苷酶EA、ED融合蛋白的表达

大肠杆菌β-半乳糖苷酶(E.C.3.2.1.23)是由四个相同亚基组成的四聚体,相对分子质量(Mr)为540000,通过溴化氰裂解或基因重组技术可得到一系列无酶活性的突变肽段,其中有些突变体在体外能重新聚合成全酶活性的四聚体,这一现象被称为α-互补[1].β-半乳糖苷酶的这种α-互补性已被用于分子生物学、蛋白质与蛋白质相互作用的监控、克隆酶供体免疫分析技术(CEDIA)、表达免疫分析等[2,3].通常具有α-互补活性缺失大部分C端氨基酸的小片段突变体如CNBr2被称为α-供体或酶供体(ED);而缺失N端约40个氨基酸的大片段突变体如M15蛋白被称为α-受体或酶受体(EA).为了进一步研究β-半乳糖苷酶的α-互补特性并促进其应用,我们通过DNA重组技术构建了一对编码β-半乳糖苷酶突变体EA、ED的质粒,并以融合蛋白的方式进行表达制备.     

四例GM_2神经节苷脂沉积症的临床及病理研究

４例患者脑活检组织经组织化学和电镜检查，证实为ＧＭ２神经节苷脂沉积症。临床表现为发育停滞，精神运动衰退（３例），视力减退，视神经萎缩（３例），眼底樱桃色红点（１例），对声音有异常惊吓反应（１例），顽固性抽搐（２例），听觉减退、眼震、共济失调（各１例），锥体系征（４例）。电镜下见沉积物主要为膜性胞浆体、斑马体和类脂褐素体，有别于蜡样质脂褐质沉积症，脑组织的电镜检查对诊断ＧＭ２神经节苷脂沉积症有十分重要的价值。     

辣根过氧化酶标记神经节苷脂免疫测定法检测霍乱肠毒素、类毒素和破伤风毒素、类毒素

Heymlngen(1974)报道了神经节苷脂(Gauglloslde)能结合破伤风毒素,但仅能延缓其毒性,不久,又报导霍乱肠毒素也能与Gm结合,并被灭活。随之许多学者,利用神经节苷脂建立了各种体外测定细菌毒素的方法,如琼脂双扩散,Gm1神经节苷脂酶联免疫吸附法等。     

利用串联质谱技术筛查新生儿溶酶体贮积症的性能验证及应用

目的利用串联质谱技术(Tandem?Mass?Spectrometry,MS/MS)检测6种溶酶体贮积症(lysosomal?storage?disorders,LSDs):戈谢病(Gaucher)、尼曼匹克病A/B(Niemann-pick-A/B)、克拉伯病(Krabbe)、黏多糖贮积症I型(MPS-I)、法布里病(Fabry)和庞贝病(Pompe)的筛查指标:酸性β-葡萄糖脑苷脂酶(ABG)、酸性鞘磷脂酶(ASM)、β-半乳糖脑苷酯酶(GALC)、a-L-艾杜糖苷酸酶(IDUA)、a-半乳糖苷酶(GLA)和酸性a-葡糖苷酶(GAA)的活性,分析MS/MS检测性能,建立新生儿这6种酶活性的正常参考范围,并通过检测确诊的溶酶体贮积症样本,评估该方法用于新生儿LSDs筛查的可行性。方法 (1)检测溶酶体贮积症筛查试剂盒自带质控品,评估MS/MS检测LSDs的性能;(2)收集1430例未检测的新筛样本进行检测,建立ABG、ASM、GALC、IDUA、GLA和GAA的酶活性的正常参考区间;(3)检测15?例确诊的LSDs样本,评估该方法用于新生儿LSDs筛查的可行性;(4)分析Pompe患儿ERT治疗前后的酶活差异。结果 (1)MS/MS检测6种酶活性的批内和批间精密度分别为:ABG(2.19-3.74%,1.67-2.08%)、ASM(1.97-3.21%,1.80-1.89%)、GALC(4.77-5.87%,3.22-3.35%)、IDUA(2.49-3.0%,0.88-0.92%)、GLA(1.72-1.76%,0.84-1.65%)和GAA(1.15-1.52%,0.64-1.29%),符合精密度要求;(2)初步确定新生儿6种酶活性参考区间分别为ABG(3.12-28.11?μmol/L*h)、ASM(1.57-18.76μmol/L*h)、GALC(0.97-11.23μmol/L*h)、IDUA(2.67-14.12μmol/L*h)、GLA(3.22-21.09μmol/L*h)和GAA(1.81-20.33μmol/L*h);(3)15例LSDs患儿酶活性明显低于参考区间,MS/MS能有效检出Gaucher、Niemann-pick-A/B、Fabry和Pompe患者;(4)接受ERT治疗后,Pompe患儿的GAA活性显著升高。结论 (1)串联质谱筛查方法可用于新生儿LSDs筛查;(2)初步确定了新生儿6种溶酶体酶活性的参考区间;(3)Pompe患儿ERT治疗后GAA活性显著升高,该方法可用于LSDs患儿用药后的酶活监测。     

骨髓间充质干细胞移植并用单唾液酸神经节苷脂治疗大鼠脑梗死

背景：神经节苷脂是目前世界公认的惟一具有修复神经损伤,重塑神经网络的特效物质。单唾液酸神经节苷脂是神经节苷脂的一种。 目的：观察骨髓间充质干细胞移植并应用单唾液酸神经节苷脂治疗大鼠脑梗死的效果。 方法：Wistar大鼠应用线栓法建立大脑中动脉阻塞模型后随机分为3组,建模成功6 h后通过尾静脉注射浓度为1×1010 L-1的骨髓间充质干细胞悬液或细胞培养液1 mL,同时经腹腔注射单唾液酸神经节苷脂水溶液或生理盐水,1次/d,连续3 d。静脉移植后24 h,3 d及伤后1、2 周行Longa行为学评分,检测神经功能的损伤情况。治疗3 d后用RT-PCR、Western Blot检测脑组织中AQP4mRNA表达和蛋白合成的变化。2周后行BrdU免疫组化和苏木精-伊红染色观察移植细胞的存活和对组织的修复情况。 结果与结论：移植后1,2周,大鼠神经功能障碍评分细胞移植+单唾液酸神经节苷脂组低于细胞移植组,细胞移植组低于梗死组(P < 0.05);移植后3 d,脑梗死周围组织AQP4蛋白及其mRNA的表达梗死组高于细胞移植组,细胞移植组高于细胞移植+单唾液酸神经节苷脂组(P < 0.05);2周后BrdU免疫组化和苏木精-伊红染色切片中的神经元数量细胞移植+单唾液酸神经节苷脂组多于细胞移植组,细胞移植组多于梗死组(P < 0.05)。结果提示骨髓间充质干细胞移植的同时应用神经节苷脂治疗可明显改善脑梗死大鼠的神经学功能。     

神经节苷脂治疗急性脑梗死国内随机对照文献的系统评价

背景：目前已有一些文献报道神经节苷脂治疗急性脑梗死的有效性和安全性,但单个研究的样本量均较小,其疗效仍不肯定。 目的：应用偱证医学方法评价神经节苷脂治疗急性脑梗死的有效性和安全性。 方法：采用计算机与手工检索相结合的方法,在中国生物医学光盘数据库(CBM,1990/2010)、清华期刊数据库(CNKI,1990/2010)与维普数据库(VIP,1990/2010)及主要的神经内科相关学术期刊中,检索神经节苷脂治疗急性脑梗死的随机对照试验(RCT),文献质量评价参照Cochrane协作网推荐的偏倚风险评价工具,统计分析采用RevMan5.0软件,对同质研究进行Meta分析。 结果与结论：初检得到119篇文献,通过阅读标题、摘要和全文,9篇文献满足纳入排除标准,但文献的方法学质量均偏低。以神经功能改善的临床疗效和以中华医学会标准(NDS)评分为结局指标分别进行的Meta分析,均提示神经节苷脂疗效优于对照措施。但由于方法学质量偏低,神经节苷脂治疗中国急性脑梗死患者的有效性和安全性,有待高质量的临床试验证实。 关键词：神经节苷脂;急性脑梗死;神经功能;神经功能;系统评价 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.11.041     

唾液酸沉积症——人的唾液酸苷酶缺陷

近年来,在几种临床疾病中记述了唾液酸苷酶(neuraminidase)活性缺陷的情况。Cantz等还发现以前被分类为Ⅰ型粘脂沉积症(mucolipidosis)的患者,也有唾液酸苷酶的严重缺陷。这些病人有胡尔勒样特征(Hurleroid features)、骨骼发育不良、眼底樱红斑等神经变性的表现。除此之外,病     

神经节苷脂注射液与脑蛋白水解物注射液对脑出血的疗效对比分析

目的：对比分析神经节苷脂注射液与脑蛋白水解物注射液对脑出血的疗效。方法选取自2012年9月~2013年6月我院收治脑出血患者200例，将他们随机分成两组，除常规治疗外，两组分别给予神经节苷脂注射液和脑蛋白水解物注射液，比较两组的疗效。结果神经节苷脂组的显效率和有效率(69.00%、97.00%)均高于脑蛋白水解物组(46.00%、68.00%)，均<0.05，差异具有统计学意义。结论与脑蛋白水解物注射液相比，神经节苷脂注射液治疗脑出血的疗效更好，为减少并发症和改善患者预后带来希望，适于在临床中推广。     

神经节苷脂ELISA检测Graves病病人血清中甲状腺刺激抗体

本文采用神经节苷脂酶联免疫吸附法(Gn-ELISA法),对125例(怀疑为Graves病)病人血清和20例正常(献血)人血清进行检测。结果表明,经Gn-ELISA法检测125例(怀疑为Graves病)病人血清中TSAb,12例为阳性;放射免疫法检测TT_2和TT_4,125例(怀疑为Graves病)病人血清,95例为阳性。TSAb阳性12例血清,其中11例TT_3和TT_4值高于正常值。20例正常(献血)人血清,两法检测结果均为阴性。     

孕早期羊水用于产前诊断粘脂贮积病Ⅱ型

Ⅰ-细胞病或粘脂贮积病Ⅱ型(MLⅡ)是常染色体隐性遗传贮积病,具有骨骼异常,精神运动性阻滞,面容粗糙,某些溶酶体酶的血清水平升高,而在细胞外活性降低的特征。此病的病因是N-乙酰葡萄糖胺磷酸转移酶缺乏。通常是根据溶酶体水解酶血清水平的显著升高及培养的细胞中多数酶缺乏进行诊断。     

waaF空肠弯曲菌变异株神经节苷脂表位的改变

目的:探索waaF空肠弯曲菌(CJ)变异株是否失去神经节苷脂模拟结构,不再能诱导抗神经节苷脂抗体产生,为CJ诱发Guillain-Barr啨综合征的分子腄饫砺厶峁┲ぞ荨7椒?将26只日本大耳兔随机分为CJ亲代株组(10只)、waaF变异株组(10只)、对照组(6只),分别用弗氏佐剂加入亲代株CJ、waaF变异株及生理盐水,对三组动物皮下注射免疫。ELISA动态检测三组动物免疫前及免疫后2周和4周血清中CJ脂寡糖(LOS)及多种神经节苷脂(GM1、GD1a、GD1b、GD3、GT1b)抗IgG抗体水平的变化。结果:免疫后2周,亲代株及waaF变异株组动物血清抗LOS-IgG抗体滴度(0.758±0.136及0.744±0.125)较免疫前(0.250±0.101及0.226±0.083)明显增高(P0.05),4周进一步增高为(0.971±0.214及0.975±0.172),亲代株及waaF变异株两组间无明显差异(P0.05),对照组免疫前后LOS-IgG抗体水平无明显改变;免疫后2周,亲代株组动物血清抗GM1-IgG、GD1a-IgG及GT1b-IgG抗体水平(0.661±0.290、0.487±0.041及0.457±0.071)较免疫前(0.173±0.081、0.151±0.038及0.182±0.101)明显增高(P0.05),4周进一步增高为(0.984±0.025、0.541±0.178及0.574±0.156),waaF变异株组及对照组免疫后未见神经节苷脂抗体增高。结论:CJ的LOS外核上神经节苷脂样结构是诱导抗神经节苷脂抗体产生的关键结构,为CJ感染后GBS的分子模拟机制提供证据,waaF变异株丧失了多种神经节苷脂模拟的抗原表位,但保留LOS免疫原性,可能成为安全减毒活菌苗的候选株。