光敏胞质雄性不育小麦NAD激酶和NADP磷酸酶对光周期的反应

研究了光敏感胞质雄性不育小麦及其对照可育系，在不同生育期叶片内ＮＡＤ激酶和ＮＡＤＰ磷酸酶的活性对不同光周期的反应．ＬＤ下可育核供体小麦叶片内的ＮＡＤ激酶总活性、ＣａＭ依赖性和ＣａＭ非依赖性ＮＡＤ激酶活性均略高于ＳＤ，但差别不显著；ＮＡＤＰ磷酸酶活性在孕穗、抽穗和籽粒灌浆期均高出ＳＤ一倍以上．光敏胞质雄性不育小麦在ＬＤ和ＳＤ下，叶片中的ＮＡＤ激酶总活性、ＣａＭ依赖性和ＣａＭ非依赖性ＮＡＤ激酶活性以及ＮＡＤＰ磷酸酶活性均有明显差别，而且ＬＤ下ＣａＭ依赖性ＮＡＤ激酶活性逐渐被ＣａＭ非依赖性ＮＡＤ激酶活性所取代．这反应出光敏胞质雄性不育小麦体内的ＮＡＤ激酶和ＮＡＤＰ磷酸酶活性比核供体正常可育系对光周期的反应更敏感，这可能是ＬＤ导致光敏小麦育性转换和花粉败育的原因之一．     

HPGMR叶片中Ca2+/CaM依赖性蛋白激酶的初步研究

以 HPGMR农垦 5 8S为材料 ,研究了光周期处理前、后 Ca2 /Ca M依赖性蛋白激酶 (Ca2 /Ca M- PK)活性及其酶谱特征 .结果表明 :随着幼穗的发育 ,Ca2 /Ca M- PK活性均有提高 ,并且长日照和自然日照条件下的酶活提高程度大大高出短日照处理 .不同时期、不同处理的 Ca2 /Ca M- PK酶谱带数未见明显差异 ,但在总体上 ,不育植株 (L D和 ND)的酶带弱于可育植株 (SD)     

大麦光温敏雄性不育系的基本特性研究

雄性不育系 40 A是由核基因和环境条件互作而致的光温敏雄性不育新品系 .对其在不同播期下的育性表现及 F1 杂种优势的研究结果表明 :该不育系早播表现为雄性可育 (武汉地区在 10月 2 0日以前播种 ) ,晚播表现为雄性不育 (武汉地区在 12月上、中旬播种 ) .与多个测交恢复系配制的 F1 杂种育性完全正常 ,具有较强的杂种优势 .     

不同细胞质雄性不育小麦中依赖钙/钙调素 的蛋白激酶的SDS-PAGE电泳图谱分析

以几种新型细胞质雄性不育型小麦为材料,对分蘖期小麦叶片中的依赖钙/钙调素的蛋白激酶(Ca2+/CaM-PK)的SDS-PAGE电泳图谱进行了分析,实验结果表明,不育系与保持系的蛋白激酶酶带之间存在差别,并且不育系之间也有差别,说明不育细胞质对核基因的表达也有影响,这可能与雄性不育有关,而且不育材料中存在潜在优势,可用来选育具有更强优势组合的核质杂种.     

饲料中添加复合芽孢杆菌对三疣梭子蟹生长性能和消化酶活性的影响

通过室内和室外养殖试验,探讨饲料中添加复合芽孢杆菌(纳豆芽孢杆菌+枯草芽孢杆菌)对三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus Miers)生长性能、消化酶活性及养殖效益的影响.试验结果表明:添加1‰(T1)和21‰(T2)的复合芽孢杆菌饲料组幼蟹的蜕壳率、成活率和增重率均高于对照组(T0);摄食率随着芽孢杆菌浓度上升而呈现下降趋势;T1和T2组分别降低幼蟹饲料系数为15.38%和18.80%.芽孢杆菌添加显著影响胃、胰蛋白酶以及肝胰腺脂肪酶活性,但淀粉酶活性没有明显变化.室外池塘养殖结果表明:商品饲料中添加2‰复合芽孢杆菌的饲料组(D2)平均产量最高,比只投喂商品饲料组(D1)增产14.4%;D2组起捕时蟹平均壳宽比D1组大3.4%.饲料系数方面,D1组和D2组差异不大.认为三疣梭子蟹养殖饲料中添加2‰的芽孢杆菌具有较好的效果.     

氧氟沙星镍配合物的合成、红外光谱、热分析与抗肿瘤活性

合成了以氧氟沙星为配体的镍(Ⅱ)配合物Ni(ofo)2*4H2O,通过红外光谱和热分析等方法对配合物的结构进行了表征,推测了配合物的可能结构,并利用液体稀释法测定了药物配体和配合物对两种革兰氏阳性菌和两种革兰氏阴性菌的体外抑制活性.结果表明配合物与药物配体的抗菌活性和抗菌谱相同.采用MTT比色法测定了配体及配合物对HL-60(人急性早幼粒白血病)细胞的抑制作用,采用SRB蛋白染色法测定了配体及配合物对BEL-7402(人肝细胞性肝癌)细胞的抑制作用.结果表明Ni(ofo)2*4H2O对BEL-7402细胞没有抑制作用,对HL-60细胞在较高浓度时有一定的抑制作用.     

小麦液泡膜H~ -ATPase的Ca~(2 )激活特性

纯化小麦液泡膜H -ATPase,测定了纯化的小麦液泡膜H -ATPase 受Mg2 和Ca2 双重激活的特性及两种激活状态下酶的特性. Mg2 激活时酶水解活性受DCCD的抑制,受磷脂酰丝氨酸(PS)影响明显,ATP水解和泵质子活性相偶联.而在Ca2 激活时酶水解活性不受DCCD抑制,受PS影响微弱,Ca2 激活时ATP水解与泵质子活性解偶联. Mg2 和Ca2 对小麦液泡膜H -ATPase的激活作用不具有叠加效应.     

通过融合白蛋白结合域延长抗CD47纳米抗体的半衰期

纳米抗体是一类在生物医药中具有重要应用前景的蛋白药物,然而由于其分子过小极易被清除.为了获得更好的体内代谢,我们通过CD47纳米抗体融合表达白蛋白结合域(ABD),从而提高其体内半衰期.使用分子克隆技术合成构建带有CD47-ABD基因的原核表达载体pET22b-3D3-2-ABD,转入BL21(DE3)中进行表达及Ni~+亲和层析柱纯化,并使用酶联免疫吸附剂(ELISA)法测定其生物学活性.给小鼠尾静脉注射融合蛋白后在不同时间点采血,用双抗体夹心ELISA测定融合蛋白的血浆浓度,并计算药代动力学参数.获得了pET22b-3D3-2-ABD重组质粒,并在BL21(DE3)表达了CD47-ABD融合蛋白.通过Ni~+亲和柱纯化,获得了较高纯度和浓度的CD47-ABD融合蛋白;改造后的CD47-ABD融合蛋白仍保留抗原结合活性,与CD47抗原及人血清白蛋白(HSA)的结合活性均具有剂量依赖性.CD47-ABD融合蛋白的半衰期从改造前的35.82 min延长至了501.52 min.本研究证明了融合ABD能够显著延长CD47纳米抗体体内半衰期而不影响其抗原结合,为解决纳米抗体自身半衰期短的缺点提供了理论和技术参考.     

扁穗冰草PLD基因cDNA序列克隆及生物信息学分析

利用RT-PCR技术和RACE方法克隆得到扁穗冰草(Agropyron cristatum(L.)Gaertn)PLD基因cDNA的全长,并对该cDNA序列、氨基酸序列的相似性、组成成分、理化性质、疏水性/亲水性、进化树、二级结构、三级结构、无序化特性进行了预测和分析.结果显示:扁穗冰草PLD基因具有2967个核苷酸,含有PLD所特有的HKD基序和C2结构域,属亲水性蛋白,二级结构以无规卷曲为主,蛋白质的三级结构显示两个HKD基序靠近形成具功能的活性位点,蛋白质无序化分析发现无序化区域较少;进化树分析表明与蒙古冰草亲缘关系最近,与草莓亲缘关系最远.为研究扁穗冰草PLD在干旱胁迫信号转导及应答过程的机理奠定基础.     

钆(III)-喹诺酮配合物的合成、抗菌活性与抗肿瘤活性

合成了以喹诺酮药物分子(诺氟沙星、氧氟沙星和环丙沙星)为配体的钆(III)配合物Gd(L)3·6H2O(L为药物配体).通过红外光谱、摩尔电导率、元素分析和顺磁共振等方法对配合物进行了表征,推测了配合物的可能结构,并用液体稀释法测定了药物配体和配合物对2种革兰氏阳性菌和2种革兰氏阴性菌的体外抑制活性,结果表明配合物与药物配体的抗菌活性和抗菌谱相同;采用MTT比色法测定了配体及配合物对HL-60(人急性早幼粒白血病)细胞的抑制作用,采用SRB蛋白染色法测定了配体及配合物对BEL-7402(人肝细胞性肝癌)细胞的抑制作用,结果表明Gd(OFLX)3·6H2O对BEL-7402细胞有强效抑制作用,Gd(CPLX)3·6H2O对HL-60和BEL-7402细胞均有强效抑制作用.     

光敏细胞质不育小麦花药发育过程中ABA免疫电镜定位

运用胶体金免疫电镜定位方法研究了不同光周期条件下光敏细胞质不育小麦发育过程中ABA的分布,短日照条件下,花粉母细胞细胞质基质及小液泡内有金颗粒分布;单核至二核花粉时期花粉内金颗粒逐渐增多,二核至成熟花粉时期花粉内金颗粒逐渐减少,不同发育时期的花粉内金颗粒的分布位置有变化,绒毡层或降解中的绒毡层细胞内有较多金颗粒分布,长日照条件下花粉败育,不同发育时期的花粉内金颗粒分布数量均比同时期的可育花粉内明显增多,单核期以前败育的花粉,解体的花粉细胞质及细胞核内有较多金颗粒分布;后期败育的花粉,花粉母细胞至二核花粉时期花粉（母细胞）内金颗粒有不断增加的趋势,二核期以后,花粉逐渐液泡化,解体的花粉细胞质及逐增大的中央液泡内在大量的金颗粒分布,绒毡层细胞内金颗粒有逐渐减少的趋势,文中对ABA在雄蕊,花粉发育过程中的作用,由光周期诱导的ABA含量增加在雄性不育中的作用进行了讨论。     

不同细胞器的ATPase在农垦58S育性转换中的变化

通过对长、短日照条件下,湖北光敏核不育水稻农垦58S在光敏感期叶绿体、线粒体、细胞核的Mg^2 -ATPase,Ca^2 -APTase活性变化的研究及Ca^2 -ATPase同工酶图谱的分析,发现在不同发育时期,所研究细胞器的Ca^2 -APTase都是短日照处理植株的酶活性明显大于长日照处理株,其同工酶图谱也分别显示短日照条件下比长日照条件下多一条酶带．细胞核Mg^2 -APTase的活性也是长日照条件下较高,而线粒体Mg^2 -APTase在不同日照条件下的变化规律不同．这表明不同细胞器的ATPase所起的作用不同,并且与农垦58S的育性转换可能有密切关系．     

不同细胞质雄性不育小麦阳离子过氧化物酶和IAA-氧化酶活性的研究

选用Ｃ－型、Ｍ－型、Ｍｔ２－型、Ｇ－型４个不同类型的细胞质雄性不育（ＣｙｔｏｐｌａｓｍｉｃＭａｌｅＳｔｅｒｉｌｉｔｙ，ＣＭＳ）小麦为材料，以其保持系中国春作对照，用低ｐＨ值（ｐＨ４．６）提取酶液，对分蘖期、拔节期、孕穗期和抽穗期叶、穗和花药中的阳离子过氧化物酶和ＩＡＡ－氧化酶活性进行了研究．结果表明：分蘖期和拔节期不育系叶中阳离子过氧化物酶和ＩＡＡ－氧化酶活性都比保持系略低；抽穗期叶、穗和花药中不育系两种酶的活性都比保持系高．故认为，小麦植株随着发育进程，其体内尤其是穗和花药中阳离子过氧化物酶和ＩＡＡ－氧化酶活性增强，导致ＩＡＡ亏缺，引起雄性不育的发生     

马协细胞质雄性不育水稻线粒体能量释放特征

测定了马协细胞质雄性不育系及其保持系水稻线粒体能量释放热谱和DSC曲线,探讨了它们在恒温和变温条件下能量释放规律和特性.结果表明马协细胞质雄性不育水稻线粒体在其能量释放过程中放热量较大,能垒较高且机制较为复杂,故其能量释放速率则较其可育系小.     

细胞质雄性不育小麦抽穗期阳离子过氧化物酶同工酶的研究

选用Ｃ－型、Ｇ－型、Ｍ－型、Ｍｔ２－型４种细胞质类型的７个不育系小麦为材料，以其保持系中国春作对照，用低ｐＨ值（ｐＨ４．６）提取酶液，采用正极和负极向垂直板聚丙烯酸胺凝胶电泳，对抽穗期时、穗和花药的阳离子过氧化物酶同工酶进行了研究．结果表明：花药中不育系和保持系之间无论是正极向还是负极向的过氧化物酶差异均显著．负极向的过氧化物酶不育系比保持系多了两条带且酶带显色更深，反映其酶活性更强；正极向的过氧化物酶中，不育系也比保持系多了两条带，但没有保持系特有的４条酶带（Ａ７～Ａ１０），并且快带也只有一条．花药中阳离子过氧化物酶同工酶谱带数增多，活性增强，可能是小麦雄性不育发生的原因之一．     

5种G型细胞质小麦雄性不育系遗传效应的研究

研究了５种Ｇ型不育细胞质在普通小麦１０个品种核背景下的遗传效应，结果表明：１．东方山羊草不育细胞质引起部分供试小麦雄性高不育，Ｔ型恢复系不易恢复其育性，该胞质在杂种小麦利用中价值可能不大．２．拟斯卑尔脱山羊草、野生二粒小麦、阿拉拉特小麦和茹可夫斯基小麦４种Ｇ型不育细胞质引起供试小麦雄性全不育且稳定，对供试小麦品种诸性状无明显不良影响，大多数供试Ｔ型恢复系都能恢复其育性且恢复度较高，在杂种小麦应用中有较大利用价值     

热分析法研究马协水稻花药的发育及败育过程

用热分析法研究了花粉不同育期马协保持系与不育系水稻花药的热分解过程，获得了花粉不同育期马协保持系与不育系水稻花药的ＴＧ／ＤＴＡ曲线，初步探讨了马协水稻花药的热分解规律及发育过程中花药干物质含量与发育期的关系．计算了马协保持系水稻花药发育的表观动力学参数，建立了相应的动力学经验式，并讨论了马协不育系水稻花药的败育过程．     

吲哚乙酸氧化酶和过氧化物酶关系的同工酶研究

用细胞质雄性不育系小麦（Ａｅ．ｔｒｉｕｎｉｃｉａｌｉｓ）ｃｓ；（Ａｓ．Ｚｈｕｋｏｖｓｋｙｉ）ｃｓ；（Ｔ．ｔｉｍｏｐｈｅｅｖｉ）ｃｓ；（Ａｅ．ｓｐｅｌｔｏｉｄｅｓ）ｃｓ和普通小麦中国春（Ｔ．ａｅｓｔｉｖｕｍ，保持系，ｃｓ）与鄂恩１号（Ｔ．ａｅｓｔｉｖｕｍ）为材料，用Ｄａｖｉｓ和Ｒｅｉｓｆｅｌｄ不连续聚丙烯酰胺垂直板凝胶电泳技术进行吲哚乙酸氧化酶（ＩＡＡ－ｏｘｉａｓｅ）和阴、阳离子过氧化物酶同工酶分析；并用ＳＣ９１０型双波段薄层扫描仪进行扫描，记录其谱带数及强弱．结果表明阳离子过氧化物酶同工酶谱与ＩＡＡ－氧化酶同工酶谱十分相似；而阴离子过氧化物酶酶谱相差甚远．由此表明具有吲哚乙酸氧化酶活性位点的过氧化物酶，应主要是阳离子过氧化物酶．