抑癌基因联合转染对膀胱癌细胞的生长抑制作用研究

目的　探讨抑癌基因 p5 3和 Rb对膀胱癌细胞的生长抑制作用。方法　利用逆转录病毒和电穿孔法将 p5 3、Rb单独或联合导入膀胱癌细胞株 T2 4中 ,Northern杂交等证实外源目的基因的表达后 ,观测并比较不同转染后细胞的生长、增殖水平和成瘤性等。结果　获得 p5 3、Rb单独和联合转染的 T2 4细胞 ,Northern杂交等证实 T2 4细胞中 p5 3失活而 Rb正常 ,转入的外源野生型 p5 3基因和 Rb基因均被表达。与未转染的对照组 T2 4细胞相比 ,转入 p5 3的细胞其生长速率明显降低 ,细胞增殖受抑制 ,软琼脂克隆形成能力丧失 ;而只转染 Rb的细胞除软琼脂克隆形成能力有所降低外 ,细胞生长和增殖未受明显抑制。结论　外源野生型 p5 3能抑制 T2 4生长并降低其成瘤性 ,增加 Rb的表达对细胞生长无明显抑制作用。p5 3对 T2 4细胞的生长抑制作用与外源 Rb基因导入与否无明显关系 ,Rb表达水平正常的膀胱癌细胞其异常增殖可能与 Rb蛋白磷酸化状态的关系更为密切。     

前列腺癌的抑癌基因研究

前列腺癌是男性最常见的恶性肿瘤之一，也是男性重要的癌症致死原因，其发病与基因表达异常有关。本综述了前列腺癌的形成抑制基因和转移抑制基因的结构特点、抑制机理及基因表达异常对肿瘤的发生发展、癌细胞的生长、浸润和转移的研究进展情况，并对抑癌基因的研究前景进行了展望。     

脑肿瘤的癌基因与抑癌基因研究概况

脑肿瘤的癌基因与抑癌基因研究概况兰州军区总医院神经外科荔志云综述雷鹏审校癌基因的激活或／和抑癌基因的缺失、灭活是各种恶性肿瘤发生、发展的基础。对癌基因和抑癌基因的深入研究是揭示致癌机制，发展基因疗法和制备新的抗癌药物的必由之路。到目前为止，人类已发现...     

HepaCAM基因对人膀胱癌细胞增殖的抑制作用研究

目的:研究hepaCAM基因对人膀胱癌T24细胞增殖的影响.方法:运用脂质体转染方法,将pEGFP-N2-hepaCAM质粒转入T24细胞株,经G418筛选获得稳定表达的细胞株;RT-PCR及Western blot方法检测目的基因和蛋白表达;MTT法及克隆形成实验研究hepaCAM基因对T24细胞体外生长的作用;流式细胞仪检测细胞周期分布;RT-PCR技术测定周期调控蛋白CyclinD1的mRNA表达变化.结果:RT-PCR和Western blot方法分别检测到hepaCAM的基因表达和蛋白表达,MTT检测转染hepaCAM基因的细胞生长速度较对照组和空载体组明显减慢(P<0.01),克隆形成率明显小于对照组和空载体组(P<0.01).细胞周期中G0/G1期比例明显增高(P<0.05),而S期比例减少;CyclinD1 mRNA表达明显下调(P<0.05).结论:HepaCAM基因通过阻滞细胞于G0/G1期,减少CyclinD1 mRNA表达,抑制T24细胞的增殖.     

抑癌基因研究进展

０年代初，随着肿瘤分子生物学研究的不断深入，人们克隆出了与癌基因相拮抗的另一类与肿瘤发生密切相关的基因———抑癌基因（ｔｕｍｏｒｓｕｐｐｒｅｓｏｒｇｅｎｅｓ），并成为当今生命科学的研究热点。癌基因与抑癌基因是细胞增殖、分化的正负调控因子。抑癌基因对细...     

膀胱癌细胞p16抑癌基因失活的研究

目的 探讨膀胱癌中p16基因失活情况。方法 采用PCR、PCR—SSCP和DNA甲基化分析技术等方法对25例膀胱癌组织中p16基因进行检测。结果 25例膀胱癌标本中有6例存在p16基因纯合性缺失，缺失率为24％；无1例出现点突变；16例出现异常甲基化，检出率为69．6％(16／23)。结论 外显子2的纯合性缺失在安徽区域发生的膀胱癌中可能不是一个较频繁发生的事件；通过CpG岛异常甲基化失活可能是膀胱癌p16基因失活的主要机制。     

p16基因转染对肺癌细胞SPC-A1的抑制作用

目的　探讨抑癌基因p16对肺癌细胞SPC A1的抑制作用。方法　以Escort脂质体介导p16基因转染肺癌SPC A1细胞 ,MTS法测定OD值 ,计算细胞生长抑制率 ,描绘p16基因转染后SPC A1细胞增殖曲线。结果　p16基因转染对SPC A1细胞具有明显抑制作用 (P <0 0 5 ) ,细胞抑制率为 2 3 18% ,细胞增殖曲线较SPC A1细胞明显降低。紫杉醇对SPC A1细胞亦有明显抑制作用 ,抑制率为对 3 7 12 %。结论　p16基因转染对肺癌SPC A1细胞具有明显抑制作用     

乳腺癌抑癌基因研究近况

对乳腺癌抑癌基因的研究 ,有助于推动乳腺癌病因、发生、发展及预后的研究 ,从而使乳腺癌的发病机理更加明确。现将近几年乳腺癌几个新的抑癌基因概述如下。1　maspin基因1994年 ,Zou等用减数杂交技术从人正常乳腺肌上皮细胞中分离出一个新基因maspin基因 (mammaryserpin)。定位于18q2 1.3,其 5′端有 75个核苷酸无转录功能 ,3′端有 1381个核苷酸 ,产物为丝氨酸蛋白水解酶抑制剂 (serineproteaseinhibitor,Serpin)超家族中的一种 ,由 375个氨基酸构成。研究表明 ,通过转录激活 ,p5 3可引导maspin表达 ,p5 3在maspin启动子的一个位点上与之…     

野生型p53基因转染对人胃癌细胞系HGC27生长的抑制作用

目的 研究野生型p53基因对人未分化胃癌细胞系HGC27生长的抑制作用。方法 用表达人野生型p53基因全长cDNA的真核载体pcDNA3—p53，转染人未分化胃癌细胞系HGC27，对转染后细胞进行生长曲线、细胞生长抑制率及流式细胞术分析，观察其生物学特性变化。结果 外源野生型p53基因在HGC27细胞内稳定表达，经pcDNA3—p53转染的HGC27细胞生长速度受到明显抑制，流式细胞分析显示G1期增加，S期下降，细胞出现凋亡。结论 野生型p53基因能在HGC27细胞内表达，且能抑制其生长并促进细胞凋亡。     

P16基因对膀胱癌细胞系BIU—87恶性生长抑制作用的研究

为了探讨Ｐ１６基因在人膀胱癌中的肿瘤抑制作用及其在膀胱癌抑癌基因替代治疗中的在价值。构建了Ｐ１６基因表达载体并将其导入有内源性Ｐ１６基因缺失的人膀胱癌细胞系ＢＩＵ－８７中,观察转染细胞的生长速率,双层软琼脂集落试验及细胞周期的改变,发现转染了Ｐ１６的细胞生长速率明显降低,     

食管癌与相关抑癌基因

抑癌基因的发现和研究标志着对肿瘤的研究进入了分子时代,为更进一步阐明基因的结构、调控以及功能的改变与肿瘤形成之间的关系提供了科学依据和可能性。抑癌基因的失活是细胞癌变的分子基础,抑癌基因失活将导致细胞增殖失控。本文就食管癌相关的抑癌基因p16、DPC4基因、PTEN、Rb基因、E-cad基因的分子结构、分子特性以及在食管癌发生发展中的变化作简要阐述,为食管癌的早期诊断、预后判断及预防和治疗提供理论基础。     

鼻咽癌的演变与某些相关癌基因及抑癌基因

目的：探讨癌基因(C—erbB2，C—myc，EBV，CDK4)和抑癌基因(E—CD，p16，p53)在鼻咽癌演变中的相互关系。方法：复习近期国内外有关癌基因和抑癌基因在鼻咽癌中的关系，作一综述。结果：癌基因和抑癌基因在鼻咽中相互制约。结论：抑癌基因的低表达和癌基因的过表达在鼻咽癌中起重要作用。     

结直肠癌抑癌基因研究新进展

结直肠癌在全球癌谱中的地位逐渐上升。据联合国欧洲消化病联合会统计，2000年结直肠癌在欧洲癌谱中高居第三位；而我国2000年结直肠癌发病率也仅次于肺癌位居第二。研究已表明，结直肠癌是结直肠上皮细胞受遗传和环境等多种因素作用导致基因畸变的结果。迄今，结直肠癌的确切发病机制仍不十分清楚，但随着分子生物学技术的发展和广泛应用，结直肠癌的分子遗传学特征已逐渐被人们所了解。     

抑癌基因TIP30对肾癌细胞系786-0的生长抑制作用

目的：筛选含有外源性TIP30的人肾透明细胞腺癌细胞系786-0,探讨TIP30基因对786-0的生长抑制作用,寻找肾癌基因治疗的潜在靶点。方法：采用RT-PCR技术扩增TIP30基因,构建真核表达载体pcDNA3.1-TIP30,转染786-0细胞,利用RT-PCR及Western blotting检测稳定转染pcDNA3.1-TIP30载体、转染pcDNA3.1(+)空载体及未处理的786-0细胞中TIP30的表达,另通过MTT法检测转染后细胞增殖能力的变化,流式细胞仪测定细胞周期分布的变化。 结果：与未处理的和转染pcDNA3.1(+)的786-0细胞比较,转染pcDNA3.1-TIP30的786-0细胞中TIP30基因的mRNA和蛋白表达水平均明显增加(P<0.05);未处理与转染pcDNA3.1(+)的786-0细胞中TIP30的表达水平比较差异无显著性(P>0.05)。转染pcDNA3.1-TIP30的786-0细胞生长抑制率明显高于未处理的和转染pcDNA3.1(+)的786-0细胞(P<0.01)。流式仪检测细胞周期,与未处理的和转染pcDNA3.1(+)的786-0细胞比较,转染pcDNA3.1-TIP30的786-0细胞G₀-G₁期细胞比例显著增加,S和G₂-M期细胞比例降低(P<0.01)。结论: 786-0细胞能够稳定表达外源基因TIP30;提高肾癌细胞中TIP30蛋白的表达,可抑制肿瘤细胞的生长;TIP30是肾癌基因治疗的潜在靶点。     

脂质体介导p53基因对腩癌细胞生长的抑制作用

目的观察外源野生型p53基因在肝癌基因治疗方面的可行性。方法：将载有人野生型p53-cDNA的真核表达质粒pcDNA3-p53，用阳离子脂质体介导转染人肝癌细胞系HepG3B细胞，用流式细胞仪检测pcDNA3-p53对HepG3B细胞生长的影响。结果：通过观察细胞生长曲线与流式细胞仪检测细胞周期和细胞的凋亡指数发现，HepG3B细胞生长受到明显的抑制。结论：脂质体介导的p53基因可在HepG3B细胞中表达，且明显抑制该细胞的生长。     

癌基因H-ras与抑癌基因P16在膀胱癌发生中关系的探讨

目的：了解膀胱移行细胞癌中H—ras基因突变与P16抑癌基因缺失两者的关联。方法：应用PCR—SSCP银染和双重PCR对31例膀胱移行细胞癌分别进行缺失和突变检测。结果：H—ras基因突变发生率为38．7％，P16抑癌基因缺失率为22．6％，7例P16抑癌基因的缺失中同时存在3例H—ras基因突变，两者的相关性为42．9％。结论：H—ras基因突变与P16抑癌基因缺失在膀胱移行细胞癌的发生中是否有密切相关性，还待进一步研究。