黄芩总黄酮对博莱霉素致大鼠肺纤维化的干预作用及其机制研究

目的观察黄芩总黄酮对博莱霉素致大鼠肺纤维化的影响及其作用机制。方法 SD大鼠随机分为5组:对照组、模型组、泼尼松龙阳性对照(3.34 mg/kg)组、黄芩总黄酮高剂量和低剂量(50、25 mg/kg)组。大鼠气管内注射博莱霉素制备肺纤维化模型后,各给药组ig给予相应药物,每天给药1次。28 d后处死动物,观察大鼠血清中总抗氧化能力(T-AOC)、还原性谷胱甘肽(GSH)、髓过氧化物酶(MPO)的水平;取固定部位肺组织分别行HE、Masson染色,进行病理组织学检查;RT-PCR法检测黄芩总黄酮对大鼠肺组织中TGF-β1、Smad2、Smad7、α-SMA、胶原I的mRNA表达水平。结果与模型组相比,黄芩总黄酮给药组大鼠血清中T-AOC、GSH水平均升高,MPO水平显著降低;肺泡炎和肺纤维化程度明显减轻(P<0.05、0.01);TGF-β1、Smad2、α-SMA、胶原I基因表达显著降低,Smad7表达显著升高(P<0.05、0.01)。结论黄芩总黄酮对博莱霉素所致大鼠肺纤维化具有一定的治疗作用,其机制可能与抗氧化损伤、抑制炎症细胞的浸润活化及调控TGF-β1/Smad信号通路有关。     

黄芩苷对实验性肺纤维化大鼠肺组织TGF-β1 mRNA和蛋白表达的影响

目的:观察黄芩苷对实验性肺纤维化大鼠肺组织转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA和蛋白表达的影响。方法:24只SD大鼠分为对照组、模型组和治疗组。模型组和治疗组经气管内注入博莱霉素(BLM)5mg/kg,诱导形成肺纤维化,治疗组每日经胃管灌注黄芩苷(Bai)12.5mg/kg·d。各组动物于28天均处死,用肺组织羟脯氨酸(HYP)含量测定法来检测大鼠的肺纤维化程度,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织TGF-β1mRNA和免疫组织化学方法测定TGF-β1的蛋白表达水平。结果:(1)观察期间大鼠的一般情况:对照组大鼠表现活泼,反应灵敏,皮毛光滑。模型组大鼠精神差,活动减少,反应迟钝,毛发晦暗竖立,食欲差,发育迟缓,体重低。治疗组大鼠精神、食欲、毛色、体重及活动情况较模型组均有所好转。(2)大鼠肺组织HYP含量:与对照组比较,模型组肺组织HYP含量显著增高(P0.01)。治疗组与模型组肺组织HYP含量相比明显降低(P0.01),但治疗组肺组织HYP含量仍高于对照组(P0.01)。(3)模型组肺组织TGF-β1mRNA表达较对照组增高,差异有统计学意义(P0.01),治疗组TGF-β1mRNA表达较模型组下降,但较对照组增高.差异均有统计学意义(P0.01)。(4)免疫组化法TGF-β1的表达中,对照组阳性率为8.3%,模型组达66.7%,治疗组为25.0%,两两比较差异有统计学意义(P0.01)。结论:黄芩苷可以抑制BLM诱导的肺纤维化大鼠肺内TGF-β1mRNA表达上调,这可能是其防治肺纤维化的作用机制之一。     

肺纤灵Ⅱ对实验性肺纤维化的干预机制研究

目的探讨肺纤灵Ⅱ对实验性肺纤维化大鼠的干预作用及其作用机制。方法以气管内注射博莱霉素制备大鼠肺纤维化模型。观察该模型在给予肺纤灵Ⅱ后第7天、第14天、第28天对肺系数、肺组织病理形态、谷胱甘肽(GSH)活力、总抗氧化能力(T-AOC)及羟脯氨酸(HYP)水平的影响,并以醋酸泼尼松作为阳性药进行对照。结果肺纤灵Ⅱ能明显改善肺组织形态,降低肺系数和肺组织HYP含量,明显升高GSH活力及T-AOC水平(P<0.01或0.05),进而抑制肺泡上皮损伤及胶原纤维的增生。结论中药肺纤灵Ⅱ可对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化具有一定的抑制作用,其作用机制与抑制炎症反应、增强肺组织中GSH活力及T-AOC水平、减轻肺泡上皮损伤有关。     

当归补血汤总苷联合水蛭治疗大鼠肺纤维化

目的研究当归补血汤总苷联合水蛭对大鼠肺纤维化的治疗作用及其机制。方法选取120只雄性SD大鼠,18只作为正常组(生理盐水),其余102只建立肺纤维化模型。72只造模大鼠随机分为模型组(生理盐水)、当归补血汤总苷组(13 mg/kg)、水蛭组(水蛭粉,4 g/kg)、联合组(当归补血汤总苷,13 mg/kg;水蛭粉,4 g/kg),每组18只,灌胃给药。结果造模后第7、14、28天,模型组肺泡炎性评分、肺纤维化程度评分、肺组织中转化生长因子β1(TGF-β1)和纤溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)、肺泡灌洗液中白细胞介素-4(IL-4)和白介素-17(IL-17)表达水平、肺组织中羟脯氨酸(HYP)含有量均显著高于正常组(P0.05);当归补血汤总苷组、水蛭组和联合组肺泡炎性评分、肺纤维化程度评分、TGF-β1、PAI-1、IL-4、IL-17表达水平、羟脯氨酸含有量均显著低于模型组(P0.05);联合组肺泡炎性评分、肺纤维化程度评分、TGF-β1、PAI-1、IL-4、IL-17表达水平、HYP含有量显著低于当归补血汤总苷组、水蛭组(P0.05)。结论当归补血汤总苷联合水蛭治疗大鼠肺纤维化的效果较好,主要是通过降低肺组织中TGF-β1、PAI-1表达水平、HYP含有量所致。     

苦参素抑制大鼠肺纤维化及机制研究

目的探讨苦参素(OM)对平阳霉素(BLM A5)致大鼠肺纤维化模型的保护作用和对TGF-β1/Smad3通路的影响。方法 Wistar雄性大鼠126只随机分为对照组、模型组、醋酸泼尼松组、OM30 mg/kg·d、OM 60 mg/kg·d和OM 120 mg/kg·d剂量组,于给药7、14、28 d每组分别处死7只大鼠,HE、Masson染色并做肺组织病理学评分,测定7、14、28 d时大鼠血清中透明质酸(HA)和肺组织中羟脯氨酸(HYP)含量以及肺组织TGF-β1和Smad3的表达水平。结果 OM能降低大鼠肺泡炎性评分和肺纤维化评分,降低血清中HA含量,降低肺组织中HYP含量和TGF-β1、Smad3的表达水平。结论OM可以有效抑制大鼠肺纤维化,其作用机制可能与减少肺组织中TGF-β1、Smad3的表达,降低HYP和HA有关。     

蜂毒素抑制博莱霉素诱导小鼠肺纤维化的机制研究

目的:观察蜂毒素对博莱霉素诱导小鼠肺纤维化的干预作用。方法:70只SPF级C57BL/6小鼠被随机分为正常组10只和模型组、地塞米松组、蜂毒素低剂量组、蜂毒素中剂量组、蜂毒素高剂量组各12只。除正常组外,均采用气管穿刺注入博莱霉素(BLM)制备肺纤维化小鼠模型。从术后第1天开始,地塞米松组按3 mg/kg的剂量腹腔注射,蜂毒素低、中、高剂量组分别给予5μg/(kg·d)、10μg/(kg·d)、20μg/(kg·d),对照组和模型组给予等体积生理盐水灌胃,连续2周。分别于第7、第14天处死动物,收集小鼠外周血样本,通过ELISA方法检测血清转化生长因子(TGF-β1)、胶原蛋白I(Collagen I)、胶原蛋白III(Collagen III)、基质金属蛋白酶2(MMP2)和基质金属蛋白酶9(MMP9)的水平。取肺组织进行苏木精-伊红(HE)分析,Masson染色和羟脯氨酸(HYP)评估以观察组织病理学变化和胶原沉积。采用实时荧光定量(Realime PCR)法和蛋白兔疫印迹法(Western blot)观察各组大鼠肺组织TGF-β1、Smad2、Smad3等蛋白和基因的表达变化。结果:与对照组比较,模型组大鼠肺纤维化明显,HYP、TGF-β1、Collagen I、Collagen I的含量升高(P 0. 05),肺组织TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白和基因表达升高(P 0. 05);与模型组比较,蜂毒素中高剂量组血清HYP、TGF-β1、Collagen I、Collagen I的含量下降(P 0. 05),肺组织TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白和基因表达降低,差异有统计学意义(P 0. 05)。结论:蜂毒素可以减轻博来霉素诱导的小鼠肺纤维化的程度,其机制可能与抑制TGF-β1/Smads通路有关。     

虎芪活血煎对肺纤维化大鼠肺组织HYP含量及TGF-β1mRNA表达的影响

目的:观察中药虎芪活血煎对大鼠肺纤维化的干预作用,探讨其可能的作用机制。方法:通过气管内注射博莱霉素A5(BLMA5)5mg.kg-1复制大鼠肺纤维化模型,给予小、中、大剂量(分别为10g.kg-1.d-1、20g.kg-1.d-1和40g.kg-1.d-1)的虎芪活血煎干预后,用紫外分光光度计测定肺组织羟脯氨酸(HYP)含量,并用原位杂交法(ISH)检测肺组织转化生长因子-β1mRNA(TGF-β1 mRNA)表达水平。结果:虎芪活血煎中、大剂量组肺组织HYP含量及TGF-β1 mRNA表达均显著低于模型对照组(P<0.05或P<0.01)。结论:中、大剂量的虎芪活血煎能降低肺纤维化大鼠HYP含量、抑制TGF-β1 mRNA表达,减轻肺纤维化程度,对博莱霉素A5诱导的大鼠肺纤维化有良好的干预作用。其机制之一是通过抑制TGF-β1 mRNA的表达,减少胶原沉积,使纤维化病变减轻。     

人工冬虫夏草联合糖皮质激素对大鼠肺纤维化的干预作用

目的:探讨人工冬虫夏草(虫草菌液)联合糖皮质激素对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化的干预作用.方法:50只SD大鼠,随机分为5组:正常对照组、模型组、虫草菌液组、强的松组、虫草菌液联合强的松组(联合组).采用气管内注射博莱霉素建立模型,次日起分别给药灌胃治疗,正常组和模型组给予生理盐水.第28天处死动物,肺组织标本行HE染色及MASSON染色进行病理形态学观察、Ashcroft纤维化评分,碱水解法检测肺组织HYP含量,免疫组化检测肺组织CTGF蛋白表达,酶联免疫法检测肺泡灌洗液上清TGF-β1含量.结果:与模型组相比,虫草菌液、强的松组能够降低肺组织纤维化评分,减少肺组织胶原沉积、HYP含量,下调肺组织CTGF蛋白表达,降低BLAF中TGF-的含量;联合组分别与虫草菌液组、强的松组比较,能够进一步减少肺纤维化评分、胶原面积、HYP含量,进一步下调CTGF蛋白、TGF-蛋白表达.结论:虫草菌液、强的松对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化有治疗作用,且虫草菌液联合强的松能产生协同治疗效果.     

芪术合剂对博莱霉素致大鼠肺纤维化白介素-8和转化生长因子-β1的影响

目的探讨中药芪术合剂对博莱霉素致大鼠肺纤维化的影响及其作用机制。方法将60只健康SD大鼠随机分为正常组、模型组、芪术合剂组和强的松组,经气管滴入博莱霉素复制肺纤维化大鼠模型,并分组予以治疗,于治疗后第3、7、21日分批处死大鼠,每组每次6只;用免疫组化法观察肺组织转化生长因子-β1的表达,并测定支气管肺泡灌洗液中中性粒细胞和白介素-8的水平。结果在第3、7、21日模型组IL-8和TGF-β1表达均较正常对照组明显增高,芪术合剂组与同期模型组比较明显降低,芪术合剂第3日组高于同期强的松组,而第7、21日则明显低于强的松组。结论早期应用芪术合剂可抑制IL-8和TGF-β1的产生,从而预防和阻止实验性大鼠肺纤维化的形成。     

参龙煎剂对博莱霉素致大鼠肺纤维化模型HYP表达的影响

目的:观察参龙煎剂对博莱霉素(BLM)致大鼠肺纤维化的防治作用。方法:将大鼠按照体质量随机分为正常对照组、模型组、泼尼松组(5.4 mg/kg体质量)、参龙煎剂组(生药量1.2 g/ml)。按照BLM 5 mg/kg体质量气管内注入,复制大鼠肺纤维化模型。24 h后给药,观察各实验组7 d1、4 d2、8 d时肺组织中羟脯氨酸(HYP)含量表达的变化。结果:除正常对照组外,其他各组HYP含量明显增强,模型组最强。结论:参龙煎剂可下调BLM致肺纤维化大鼠HYP含量,对肺纤维化有一定的治疗作用。     

益气活血通络方对博莱霉素致肺纤维化大鼠TGF-β_1/ERK信号通路影响的研究

目的:探讨益气活血通络方对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化的作用机制。方法:将60只大鼠按体质量随机分为正常组、模型组、激素组、中药组。除正常组外,其于各组均建立博莱霉素诱导的肺纤维化模型。造模后,激素组和中药组给予相应药物灌胃,正常组和模型组以0.9%Na Cl溶液灌胃,每日1次。灌胃28 d后,观察肺组织病理学改变,检测大鼠血清TGF-β1含量、肺组织p-ERK1/2蛋白表达水平。结果:正常组、中药组、激素组一般状态良好,中药组肺组织纤维化程度较激素组轻,与模型组大鼠对比,中药组可显著下调肺纤维化大鼠血清中TGF-β1含量及肺组织中p-ERK1/2蛋白表达水平。结论:益气活血通络方具有明显逆转博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化作用。     

猪苓和泽泻对肺纤维化大鼠模型血清TGF-β1、TNF-α影响研究

目的:观察猪苓和泽泻对肺纤维化大鼠模型血清TGF-β1、TNF-α的影响。方法:将72只健康雄性Wistar大鼠随机分为6组,以支气管内注射博莱霉素的方法制作肺纤维化动物模型。给药后第14天、28天光镜下观察大鼠肺组织病理变化情况,ELISA法检测各组血清中TGF-β1、TNF-α的浓度。结果:各组病理学指标提示大鼠肺组织出现明显的肺间质纤维化,提示动物模型复制成功。通过肺纤维化模型大鼠的病理学改变及血清内TGF-β1、TNF-α浓度比较,各给药组与模型对照组均有显著性差异(P<0.05)。醋酸泼尼松组的指标改善程度最为显著,猪苓加泽泻组次之,猪苓组及泽泻组最弱。结论:猪苓、泽泻及其合用可降低肺纤维化大鼠血清中TGF-β1、TNF-α浓度,减轻博莱霉素诱发的肺纤维化进程。     

虫草复方对博莱霉素致大鼠肺纤维化的作用及其机制

目的探讨虫草复方对博莱霉素致大鼠肺纤维化的作用及其机制。方法 Wistar大鼠随机分为对照组,模型组,复方虫草高、低剂量(150、75 mg/kg)组和醋酸泼尼松(3.33 mg/kg)组,每组18只。除对照外其余各组大鼠采用气管内一次性滴注盐酸博莱霉素造模,对照组大鼠气管内一次性滴注等体积生理盐水。造模后第2天开始给药,对照组和模型组分别ig给予等体积生理盐水。各组动物于7、14、28 d随机处死6只,分别观察大鼠肺指数、肺组织羟脯氨酸(Hyp)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)活性及血清中MDA的量和SOD的活性。同时取固定部位肺组织进行病理组织学检查,并应用免疫组织化学法检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原在肺组织中的表达;观察各组大鼠动脉血气的变化。结果虫草复方能明显降低肺纤维化大鼠肺指数和肺组织Hyp的量,并可提高血清和肺组织中SOD活性,降低血清和肺组织中MDA和肺组织TGF-β1、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的表达;虫草复方可使肺纤维化大鼠动脉二氧化碳分压[p(CO2)]降低和血氧分压[p(O2)]提高;虫草复方明显改善实验性大鼠肺纤维化程度。结论虫草复方对大鼠肺纤维化具有一定的干预作用,其机制可能与抗脂质过氧化、抑制TGF-β1表达、减少肺泡间质胶原沉积及改善肺呼吸功能有关。     

益气养阴活血化痰汤对肺纤维化大鼠干预作用的实验研究

[目的]探讨益气养阴活血化痰汤对肺纤维化大鼠的干预作用.[方法]将40只大鼠随机分为正常组(A)、模型组(B)、中药组(C)和西药组(D),每组各10只,并分组给与治疗.建立博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化动物模型,观察大鼠体质量、肺指数等一般状况,检测肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达情况.[结果]与正常组比较,模型组体质量降低、肺指数增加、TGF-β1高表达,P＜0.05;益气养阴活血化痰汤可有效地增加大鼠体质量、抑制肺指数的升高、降低TCF-β1的过度分泌和表达,与模型组比较有显著性差异(P＜0.05).[结论]益气养阴活血化痰汤可改善博莱霉素诱导肺纤维化大鼠的一般状况,并通过抑制其肺组织TGF-β1的表达,以达到抗肺纤维化的作用.     

甘草干姜汤对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化SIRT1和TGF-β1蛋白表达的影响

目的:探讨甘草干姜汤对肺纤维化信号转导通路影响作用及机制研究。方法 :SD大鼠60只,随机分为正常对照组,模型组,醋酸泼尼松组,甘草干姜汤0.5g/kg、1g/kg和2g/kg剂量组。采用博莱霉素气管注入法,制备肺纤维化模型,于实验第28天留取标本,分别测定大鼠肺组织活性氧、谷胱甘肽、超氧化物歧化酶和丙二醛及羟脯氨酸含量,采用免疫组化实验观察肺组织病理学改变,免疫印迹法检测SIRT1和TGF-β1等相关蛋白的表达。结果:与模型组相比,1g/kg和2g/kg甘草干姜汤作用28天后能够显著提高大鼠肺组织超氧化物歧化酶活力,降低活性氧、丙二醛和羟脯氨酸含量,同时,显著下调TGF-β1、Smad3、α-SMA、ColⅠ和SIRT1蛋白表达并上调Smad7蛋白表达。结论:甘草干姜汤能够减轻博莱霉素导致的大鼠肺纤维化程度,并通过增加抗氧化防御系统和调控SIRT1和TGF-β1发挥作用。     

基于"肝藏血"理论采用"养血柔肝"法的中药复方对肝纤维化细胞因子的影响

目的:研究养血柔肝丸对大鼠肝纤维化细胞因子的影响。方法:选用雌雄各半大鼠,随机分为正常对照组、模型组、养血柔肝丸6. 25 g/kg、12. 5 g/kg和25. 0 g/kg组、扶正化瘀胶囊0. 75 g/kg组。采用50% CCl_4(1 ml/kg)复制肝纤维化模型。按组别分别给药治疗,治疗结束后,测定血清白介素-1(IL-1)、白介素-6(IL-6)、转化生长因子β(TGF-β1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α),取肝制备10%肝匀浆,测定其丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、羟脯氨酸(HYP)及基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)水平,并做肝脏病理组织学检查。结果:肝纤维化模型大鼠造模后,血清IL-1、IL-6、TNF-α及TGF-β1显著升高;大鼠肝匀浆MDA活性显著升高、SOD活性显著下降; TIMP-1和HYP的含量明显升高,说明肝纤维化模型成立。给予养血柔肝丸治疗后,大鼠血清中IL-1、IL-6、TNF-α和TGE-β1含量显著降低;肝匀浆MDA、TIMP-1及HYP含量显著降低,SOD含量显著升高;肝脏病理损伤明显改善。结论:养血柔肝丸对大鼠四氯化碳肝纤维化因子有明显的影响,起效剂量为6. 25 g/kg。     

灯盏生脉胶囊对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化的干预作用

目的:研究灯盏生脉胶囊对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化的干预作用.方法:将40只C57BL/6雌性小鼠随机分为盐水对照组(NS)、模型组(Model)、灯盏生脉组(DZSM)和N-乙酰半胱氨酸阳性对照组(N-AC),NS组气管滴注0.1 mL生理盐水,其余3组按5 mg·kg-1剂量滴注博莱霉素溶液复制肺纤维化模型,以后每天分别给予生理盐水、灯盏生脉溶液(222mg· kg-1·d-1)、N-乙酰半胱氨酸溶液(489.6 mg·kg-1)ig治疗,连续给药21 d.实验过程中隔天记录小鼠的生存状态及体重变化,在完成给药后观察肺顺应性和肺阻力的改变状况.留取肺泡灌洗液检测细胞转化生长因子-β(TGF-β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)含量,观察博莱霉素引起的肺炎症改变;留取肺组织,测定肺组织中羟脯氨酸含量,并分别行HE染色和Masson's染色,观察肺组织的炎症变化和纤维化程度.结果:给予博莱霉素后,各组小鼠体重显著下降,进食减少,肺阻力升高(P＜0.05),肺泡灌洗液中TGF-β,TNF-α,IL-1β含量显著升高(P＜0.05);灯盏生脉胶囊干预组小鼠体重下降减缓,肺阻力显著下降(P＜0.05),肺泡灌洗液中TGF-β,TNF-α,IL-1β含量明显降低(P＜0.05);肺组织的病理切片显示肺部炎症及肺纤维化程度均有不同程度的减轻.结论:灯盏生脉胶囊能改善博莱霉素诱导的肺纤维化小鼠的虚弱状态,增强小鼠肺顺应性,降低肺阻力,抑制小鼠的肺组织炎症反应,减轻肺纤维化程度.     

补肾通络方对肺纤维化大鼠肺组织TGF-β1/Smads通路的影响

目的:观察补肾通络方对博莱霉素所致肺纤维化大鼠肺组织病理及转化生长因子β_1(TGF-β_1)/Smads通路蛋白的影响,揭示该方抑制肺纤维化的作用机制。方法:48只清洁级雄性SD大鼠随机分为正常组8只,模型组、补肾通络低、高剂量组、氢化可的松琥珀酸钠组各10只。除正常组外,各组均采用博莱霉素法诱导肺纤维化制备模型。从术后第3天开始,补肾通络高、低剂量组分别给予14. 2,7. 1 g·kg~(-1)补肾通络方药灌胃,氢化可的松琥珀酸钠组给予4. 58 g·kg-1氢化可的松琥珀酸钠溶液腹腔注射,正常组和模型组给予等体积生理盐水灌胃,共治疗28 d。大鼠处死后测定血清羟脯氨酸(HYP),透明质酸(HA),层粘连蛋白(LN)的含量,取肺组织,采用苏木精-伊红染色法(HE)及马松(Masson)三色染色法观察肺组织病理形态变化,采用实时荧光定量PCR法(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)观察各组大鼠肺组织TGF-β_1,Smad2,Smad3,Smad7等mRNA和蛋白表达变化。结果:与正常组相比,模型组大鼠肺纤维化明显,HYP,HA,LN含量升高(P 0. 05,P 0. 01),肺组织TGF-β_1,Smad2,Smad3蛋白和mRNA表达升高(P 0. 05,P 0. 01),Smad7蛋白和mRNA表达降低(P 0. 01);与模型组相比,补肾通络高剂量组血清HYP,HA,LN的含量下降(P 0. 05,P 0. 01)肺组织TGF-β_1,Smad2,Smad3蛋白和mRNA表达降低(P 0. 05),Smad7蛋白和mRNA表达升高(P 0. 01)。结论:补肾通络方可有效改善肺纤维化的病变进程,其机制可能与调节TGF-β_1/Smads通路有关。     

二氢青蒿素对博莱霉素诱导大鼠肺纤维化抑制作用的实验研究

目的观察二氢青蒿素对博莱毒素诱导的大鼠肺纤维化的干预作用并探讨可能机制。方法博莱霉素一次性气管内注射复制大鼠肺纤维化模型,随机分为造模组(BLM组)、地塞米松组(DXM组)、二氢青蒿素组(DHT组)。正常对照组(NC组)大鼠气管内注射生理盐水。用药28d后,HE染色及Masson染色分别观察各组大鼠肺泡炎症及纤维化程度,测定肺组织羟脯氨酸含量,Real-time PCR法检测肺组织转化生长因子β-1(TGF-β1)mRNA水平,Western-blot法检测肺组织核因子κb(NF-κb)含量。结果与BLM组比较,DHT组大鼠肺泡炎及肺纤维化程度均明显降低(P0.01),肺组织羟脯氨酸含量显著减少(P0.01),肺组织TGF-β1mRNA水平明显下降(P0.01),NF-κb含量也显著减少(P0.01)。结论二氢青蒿素可通过下调NF-κb及TGF-β1表达对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化进程产生抑制作用。     

甘利欣对肺纤维化大鼠的TGF-β1、IFN-γ、IL-4的影响

目的: 建立大鼠肺纤维化动物模型,探讨甘利欣治疗博莱霉素致肺纤维化大鼠的作用机制。 方法: 将SD级雄性大鼠60只,体重(180±20)g,随机分成4组:博莱霉素所致大鼠肺纤维化模型组(BLM组)、生理盐水对照组、甘利欣治疗组、地塞米松(Dexamethasone,DXM)治疗组,每组10只。博莱霉素致肺纤维化动物模型第28 d开始,各治疗组在每天同一时间段内连续14 d腹腔内注射。治疗的剂量分别为地塞米松注射液3 mg/(kg ·d)(浓度为5 mg/mL)、甘利欣150 mg(kg ·d);在治疗后第15 d取大鼠左肺下叶1 cm×1 cm×l cm大小的组织,固定于10%甲醛溶液,供免疫组化TGF-β₁、IFN-γ、IL-4表达观察;同样取大鼠右肺下叶供HE染色病理观察。抽取大鼠6~8 mL血液静置30 min后中速离心15 min,取其血清用ELISA双抗体夹心法测定各组大鼠血清TGF-β₁ IL-4、IFN-γ含量。 结果: ①采用分级方法定性评价HE染色大鼠肺组织的肺纤维化程度,发现甘利欣治疗组、DXM治疗组大鼠肺纤维化程度均较轻微。②模型组大鼠肺组织TGF-β₁染色呈强阳性反应,IFN-γ染色较淡,而甘利欣治疗组、DXM治疗组TGF-β₁、IFN-γ染色则相反。免疫组化TGF-β₁定量分析结果显示:与模型组均数相比,对照组、地塞米松组、甘利欣组的P值分别为0.007,0.000,0.001;而甘利欣组与地塞米松组相比,P值为0.018。免疫组化IFN-γ定量分析:模型组与甘利欣组、地塞米松组相比,P值分别为0.004,0.010;而甘利欣组与地塞米松组相比,P值为0.618。③模型组大鼠血清TGF-β₁,IL-4含量较高,IFN-γ含量较低,而甘利欣治疗组、DXM治疗组则相反。模型组大鼠血清TGF-β₁均数与对照组、地塞米松组、甘利欣组相比,P值分别为0.008,0.044,0.005;地塞米松组与甘利欣组相比P值0.169。模型组大鼠血清IL-4均数与对照组、地塞米松组、甘利欣组相比,P值分别为0.013,0.029,0.013,地塞米松组、甘利欣组两两相比无差异(P>0.05)。地塞米松组、甘利欣组大鼠血清IFN-γ均数两两相比无差异(P=0.389),但两者与模型组相比P值分别为0.001,0.000。 结论: 甘利欣可以减轻大鼠肺纤维化损伤和肺组织的TGF-β₁、IL-4的表达,并降低他们在血清中的含量,增加血清中的IFN-γ含量,增强肺组织IFN-γ的表达,为临床治疗肺纤维化提供理论支持。