高效液相法测定黄芪中性多糖的单糖组成

目的:采用高效液相法测定黄芪中性多糖的单糖组成。方法:正交设计优选三氟乙酸水解黄芪中性多糖的条件;水解产物直接采用高效液相-视差检测器(HPLC-RID)检测或经1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生化后高效液相-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)检测两种方法,以6种单糖为对照,测定水解产物中单糖的组成。结果:黄芪中性多糖的三氟乙酸完全酸水解最佳条件为采用1M TFA,水解温度100℃,水解时间5 h;两种高效液相色谱法测得水解产物中的单糖均为葡萄糖。结论:采用三氟乙酸完全酸水解条件和高效液相色谱法测定单糖的方法简便易行,可用于黄芪中性多糖的单糖组成研究。     

黄芪多糖分离与结构特征分析

目的从黄芪中提取分离多糖并对其进行理化性质及结构特征分析。方法采用DEAE-52和Sephadex G-100色谱柱分离纯化,得到黄芪均一多糖APS-Ⅰ和APS-Ⅱ,通过高效液相色谱(HPLC)、红外光谱(IR)和环境扫描电镜(ESEM)对APS-Ⅰ和APS-Ⅱ进行结构及形貌特征分析。结果 APS-Ⅰ和APS-Ⅱ为均一多糖,APS-Ⅰ中单糖组成为甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖和半乳糖,且摩尔比率为29.12∶1.89∶4.00∶1.35∶1∶81.97;APS-Ⅱ中单糖组成为甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和木糖,且摩尔比率为50.46∶1.16∶1∶2.27∶2.66∶15.72∶7.86。IR显示APS-Ⅰ和APS-Ⅱ均为酸性多糖。ESEM观察显示APS-Ⅰ形貌工整,APS-Ⅱ形貌不规则。结论 APS-Ⅰ是一种呈丝带状结构分子量约为1.06×104Da的杂多糖,APS-Ⅱ是一种分子量约为2.47×106Da的杂多糖。     

吴茱萸多糖的分离和组成研究

目的 对吴茱萸中多糖进行提取、分离和纯化,进一步研究吴茱萸多糖主要组分的单糖组成.方法 采用水提醇沉法提取粗多糖,H2O2脱色、Sevag法除蛋白、透析制备精制品,用DEAE-32纤维素阴离子交换柱、Sephacryl S-400 SF型凝胶柱分离纯化多糖,经酸水解后,1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化HPLC法分析单糖组成.结果 从吴茱萸中分离纯化得两个主要多糖组分ERPS2a、ERPS3,二者的单糖组成均为甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖,ERPS2a的单糖物质的量比为2.1:2.6:3.4:1.0:7.9:4.9,ERPS3的单糖物质的量比为1.0:17.6:2.7:3.2:19.8:9.4.结论 吴茱萸多糖得到有效分离纯化,两纯组分所含单糖种类相同,仅各单糖的组成比例不同.     

麻黄根多糖中单糖组成的 GC-MS 分析

目的：研究麻黄根多糖中单糖的种类和组成比例。方法：样品经三甲基硅醚化衍生,采用气相色谱法测定麻黄根多糖的单糖组成。采用 DB -17毛细管柱（60m ×0．25mm ×0．25 mm）,程序升温,柱温50℃,以40℃/min 至190℃,以0．5℃/min 至200℃,以1 C/min 至210℃,以20℃/min 至280℃,氦气作载气,进样口温度250℃,分流比1∶20,柱流速1．2mL/min。 EI（70 eV）,接口温度250℃,离子源温度250℃,扫描范围：m/z 43-500,扫描速率：2．5 scan /s。结果：麻黄根多糖中主要含阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖醛酸,其摩尔比为7．59∶5．93∶9．94,还有少量的半乳糖、葡萄糖、甘露糖。结论：该方法简便、灵敏、可以准确测定出麻黄根多糖中单糖的种类和组成比例。     

黄芪毛状根多糖与黄芪多糖化学组成及免疫活性的比较

目的 比较生物技术培养的黄芪毛状根中多糖与栽培黄芪中多糖的化学组成和免疫活性。方法 采用乙醇分级沉淀和凝胶渗透柱层析分离纯化多糖;硫酸－苯酚法测定多糖含量;完全酸水解、乙酰化、气相色谱测定单糖组成;采用免疫器官重量,腹腔巨噬细胞吞噬细胞吞噬功能,溶血素生成,[^3H]-TdR掺入,诱生IFN－γ的含量测定等方法研究免疫活性。结果 黄芪毛状根中多糖为1.85%,黄芪中多糖为2.61%。黄芪毛状根多糖（HAPS）由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖组成,摩尔比为1：2.26：0.21:0.74:2.49:19.47。黄芪多糖（APS）组成与HAPS相同,摩尔比为1：4.34:3.92:1.95:11.41:20.52。采用乙醇分级沉淀各自获得3个部分多糖,经DEAE－Sepharose FF柱层析表明：HAPSI和APSI,HAPSⅡ和APSⅡ图谱相似,HAPSⅢ与APSⅢ有一定的差异。HAPS和APS均能显著增加小鼠脾脏重量;HPAS能提高小鼠胸腺重量;二者均增加小鼠腹腔巨噬细胞数量;APS显著促进小鼠腹腔巨大噬细胞巨噬功能;HAPS和APS均抑制小鼠溶血素生成;促进小鼠脾淋巴细胞增殖;APS使脾淋巴细胞诱生IFN-γ的作用高于HAPS。结论 HAPS和APS化学组成相似,二者具有相同的免疫活性,只是强度略有差异。     

银杏外种皮多糖的单糖组成分析

采用PMP柱前衍生化HPLC对水解后银杏外种皮多糖中的单糖组分进行研究。采用Agilent HC-C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）;流动相0.1 mol·L^-1磷酸盐缓冲液（pH 6.8）-乙腈（84：16）等度洗脱;柱温40 ℃,流速1 mL·min^-1,检测波长245 nm。从银杏外种皮多糖水解液中分析鉴定了6种单糖,分别为甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖,其摩尔比为0.032：0.14：0.296：0.403：0.106：0.046。     

基于LC-MS代谢组学技术的注射用黄芪多糖活性成分调控巨噬细胞代谢研究

目的采用LC-MS代谢组学方法,研究注射用黄芪多糖活性成分对小鼠单核巨噬细胞白血病细胞Raw264.7吞噬活性的影响。方法采用中性红法检测注射用黄芪多糖中不同相对分子质量多糖对Raw 264.7细胞吞噬活性的影响,筛选出活性成分,并对细胞培养液和细胞裂解液进行LC-MS分析,结合多元统计分析和代谢通路分析,探索其作用机制。结果注射用黄芪多糖的小相对分子质量多糖在质量浓度为30μg/m L时能显著增强Raw 264.7细胞的吞噬活性。与对照组比较,注射用黄芪多糖活性成分作用于Raw264.7细胞后,细胞内外共发现41种差异代谢物,主要涉及氨基酸代谢、能量代谢及抗氧化作用。结论注射用黄芪多糖的小相对分子质量多糖能提高巨噬细胞吞噬活性,其机制可能与氨基酸代谢、能量代谢及抗氧化作用密切相关。     

天花粉多糖的单糖组成和相对分子质量的测定

目的研究天花粉多糖的单糖组成、相对分子质量(Mr)及其分布。方法天花粉用超声波振荡提取、乙醇沉淀分离出多糖,并用重结晶、色谱柱纯化后,采用气相色谱-质谱(GC-MS)、高效液相色谱(HPLC)分析天花粉多糖的单糖组成,用凝胶渗透色谱(GPC)分析天花粉多糖的Mr及其分布。结果天花粉多糖是由鼠李糖、阿拉伯糖、果糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成的杂多糖,经色谱柱纯化得到的天花粉多糖与未经纯化的天花粉粗多糖的单糖组成相同,但质量分数有所差别;天花粉多糖的GPC图有两个多糖峰,天花粉粗多糖的两个GPC峰的数均相对分子质量(Mn)分别为1.8×105和1 460,天花粉多糖的两个GPC峰的Mn分别为1.60×105和4 554。结论两种天花粉多糖的Mr及单糖组成的质量分数有区别。     

黄芪多糖的组成分析

目的:为了对黄芪多糖的种类和相对分子质量的分布情况有一个大致的了解。方法:本实验通过高效凝胶渗透色谱技术和乙醇分级法,分析了黄芪多糖相对分子质量的分布情况。结果:黄芪多糖按照相对分子质量分布,明显分成2部分。结论:黄芪多糖低相对分子质量部分是一个纯度很高的多糖,具有一定的开发价值。     

柱前衍生HPLC法分析蔓菁多糖中单糖的组成

目的建立柱前衍生HPLC法测定藏药蔓菁多糖中单糖的组成。方法以2 mol/L硫酸水解蔓菁多糖,水解产物加入1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮进行衍生化,采用反相高效液相色谱法,测定蔓菁多糖中单糖的衍生物。Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);乙腈为A流动相,0.1 mol/L磷酸盐(KH2PO4-Na OH,p H 6.8)缓冲液为B流动相,梯度洗脱;检测波长250 nm。结果蔓菁多糖由半乳糖、D-甘露糖、鼠李糖、阿拉伯糖、D-无水葡萄糖、D-葡萄糖醛酸、D-半乳糖醛酸7种单糖组成,其摩尔比为1∶0.26∶0.54∶1.06∶0.84∶0.05∶4.17。结论柱前衍生HPLC法表明蔓菁多糖主要由半乳糖醛酸、半乳糖和阿拉伯糖构成。     

不同来源黄芪多糖提取物对淋巴细胞增殖的影响及其化学组成分析

目的 考察不同来源黄芪多糖提取物对体外脾淋巴细胞增殖的影响,明确其活性差异,对比分析其化学组成.方法 MTT法分别检测黄芪多糖提取物对正常脾淋巴细胞、ConA活化脾淋巴细胞增殖的影响;硫酸苯酚法结合重量法分别测定样品中总糖、多糖、醇不溶组分含量.结果 各批样品对正常脾淋巴细胞均有显著的促增殖作用(P＜0.01或P＜0.05),除SSK外,各样品在低浓度时促增殖作用较强,促增殖率为39.4％ ～ 186.4％;XZX、XHS、SLH1对ConA诱导的脾淋巴细胞增殖具有显著抑制作用(P＜0.01),且在4 mg·ml-时抑制作用最强,抑制率为52.9％～104.0％,作用大小为XZX＞XHS＞SLH1,其余各批样品无明显抑制作用;各批样品醇不溶组分含量为18.74％～60.67％,多糖含量为7.22％～44.74％,大小顺序为XZX＞ XHS＞ SLH1＞ SLH2＞ SSK.结论 不同来源黄芪多糖提取物的质量差异十分显著.     

柱前衍生化高效液相色谱法分析淫羊藿多糖中单糖的组成

目的测定淫羊藿多糖(EPS)中单糖的组成及其摩尔比。方法将淫羊藿多糖样品用1 mol/L硫酸溶液降解成单糖后,用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生,通过简化衍生方法,优化分析条件,采用反相高效液相色谱250nm紫外检测和使用梯度洗脱,分离测定各单糖。结果淫羊藿多糖由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖6种单糖组成,其物质的量之比为0.60∶0.74∶1.00∶0.29∶2.29∶1.43。结论该改进后的衍生化方法以及优化的高效液相色谱法具有简单、快速、重现性好等特点,可用于淫羊藿多糖中单糖组成的测定。     

柱前衍生化高效液相色谱法测定地稔多糖中单糖组成

目的:从地稔中提取分离地稔多糖,并对单糖组成进行研究。方法:采用水提醇沉法提取地稔粗多糖,再用DEAE纤维素柱色谱进行分离纯化,获得一种水溶性较好的中性多糖和一种酸性多糖,然后采用高效液相柱前衍生法对其单糖组成进行测定。结果:地稔中性多糖主要是由葡萄糖、半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖、鼠李糖等5种单糖组成,摩尔比为123∶84∶27∶19∶5,另有极少量木糖。地稔酸性多糖单糖组成主要是半乳糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖醛酸、鼠李糖7种单糖组成,摩尔比为14∶10∶7∶6∶4∶1∶1,另外还有少量的木糖。结论:本研究建立了分离及测定地稔多糖组成成分的分析方法,该方法操作简单,方便可行。     

黄芪多糖对免疫性肝损伤小鼠免疫调节的影响

目的观察不同剂量的黄芪多糖对免疫性肝损伤小鼠的肝功能、骨桥蛋白（OPN）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响,初步探讨黄芪多糖治疗病毒性肝炎的作用机制,为其在临床上的应用提供理论依据。方法各组小鼠给予不同因素干预,造模结束后各组小鼠摘眼球采血,脱椎处死取肝脏。检测血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）,ELISA检测OPN、TNF-α,免疫组织化学法检测肝脏中OPN、TNF—α蛋白的表达。结果黄芪多糖可降低血清中的ALT、AST（P〈0．05或0．01）,高剂量黄芪多糖使OPN、TNF-α水平显著降低（P〈0．05）,OPN与TNF-α呈正相关。结论黄芪多糖对免疫性肝损伤模型具有一定的保护肝脏和免疫调节作用,可减轻炎症和肝细胞损伤、改善肝功能。     

黄连多糖中单糖组成的HPLC-MS~n法快速识别

目的:探讨采用HPLC-MS~n法快速识别黄连多糖中的单糖组成。方法:黄连药材经过提取、分离、除蛋白、除色素,最终得到黄连多糖,用2 mol/L的三氟乙酸水解黄连多糖,以1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)作单糖衍生化试剂,利用HPLC-MS~n识别黄连中单糖的组成,并解析其衍生物的裂解规律。结果:通过分析,得到的黄连多糖中含有甘露糖、核糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖/木糖、岩藻糖,其中核糖、岩藻糖为首次在黄连多糖中报道的单糖。结论:HPLC-MS~n法对中药多糖组分中的单糖成分进行分析具有重要的指导意义。     

复方丹参注射液合黄芪注射液为主治疗急性心肌梗死的疗效观察

目的 观察复方丹参注射液合黄芪注射液为主治疗急性心肌梗死的临床疗效.方法 将100例急性心肌梗死患者随随机分为两组各50例,对照组:口服肠溶阿斯匹林,第1天服用300 mg,后75 mg/次,1次/d,共10 d;尿激酶150万U加入100 ml的生理盐水中,30 min内滴完,共1次;硝酸甘油10 mg加入500 ml的5%葡萄糖或生理盐水中,10～20 μg/min持续静滴3 d后,改为静滴1次/d,治疗4d;皮下注射低分子肝素,7500U/次,2次,d,共3～5 d;静滴极化液(5%葡萄糖500 ml+氯化钾10 ml+胰岛素6 U),1次,d,共10 d.治疗组在对照组基础上静脉滴注复方丹参注射液20 ml、黄芪注射液10 ml,1次/d,10 d为1个疗程.结果 治疗后两组均可改善患者血液流遍学指标,治疗组优于对照组(P＜0.05).结论 丹参、黄芪注射液为主治疗急性心股梗死有效.     

黄芪注射液治疗糖尿病肾病疗效观察

目的：观察黄芪注水病肾病的疗效。方法：收集糖尿病患者２４ｈ尿液,均经防腐处理,准确记录尿量贸取６ｍｌ,冷藏备用,以测定尿微量白蛋白（Ａｌｂ）和肌ｒ）β２微球蛋白（尿β２－Ｍ）。按２４小时尿排泄率（ｕＡＥ）将受试者分成３组大量白蛋白尿组（ｕＡＥ〉３０ｍｇ／２４ｈ）微量白蛋白尿组（μＡＥ～３００ｍｇ／２４ｈ）和正常白蛋白尿组（ｕＡＥ〉３０ｍｇ／２４ｈ）。每组又随机分成治疗组和对照组且的年龄、病程、病情     

丹参注射液主要成分的HPLC及LC—MS定性分析

利用高效液相色谱（HPLC）以及液质联用（LC-MS）对丹参注射液进行分析。初步建立了丹参注射液指纹图谱所需的HPLC分析方法,同时确定了注射液中几个强峰的组分及其分子量,为今后建立丹参注射液的指纹图谱提供了定性依据。     

反相高效液相色谱法测定盐酸帕洛诺司琼注射液的含量

 目的建立盐酸帕洛诺司琼注射液含量测定的高效液相色谱方法。方法采用Alltima C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以0.02 mol·L^-1磷酸二氢钠溶液(含0.25%的三乙胺与0.01 mol·L^-1己烷磺酸钠,用磷酸调节pH值至3.0)-乙腈(40∶60)为流动相;检测波长为254 nm,流速为1.5 mL·min^-1。结果线性范围为10.3～103.1 mg·L^-1,r=0.999 9;平均回收率为100.4%,RSD为0.95%(n=9)。结论本方法简便、可靠,可用于盐酸帕洛诺司琼注射液的含量测定。