吗啡对人胃癌MGC-803细胞p53 mRNA和E2F-1 mRNA表达的影响

目的 探讨吗啡对人胃癌MGC-803细胞p53 mRNA和E2F-1 mRNA表达的影响.方法 人胃癌MGC-803细胞以1×103/ml或2×105/ml密度接种于6孔培养板中,1 ml/孔,随机分为2组(n=18),正常对照组(C组)不作任何处理,吗啡组(M组)加入吗啡,使其终浓度为10μmol/L.于吗啡孵育7 d时应用克隆形成实验测定细胞增殖情况,于吗啡孵育24 h时测定细胞中p53 mRNA、E2F-1 mRNA的表达情况,并采用透射电子显微镜观察细胞超微结构.结果 与C组比较,M组克隆形成率降低,p53 mRNA表达上调,E2F-1 mRNA表达下调(P＜0.05).C组细胞核膜完整、核仁及染色质清晰,M组细胞核膜破裂、核仁碎裂,并出现凋亡小体.结论 吗啡可上调人胃癌MGC-803细胞p53基因表达、下调E2F-1基因表达,从而抑制细胞增殖,促进细胞凋亡.     

E2F-1蛋白在胃癌中的表达及意义

目的探讨E2F-1蛋白在胃癌及正常胃黏膜组织中的表达与意义。方法采用免疫组化技术对80例原发性胃癌癌组织与癌旁黏膜中E2F-1的表达进行检测，同时对40例正常胃黏膜组织进行对照性研究，并进行统计学分析。结果E2F-1在癌组织与癌旁黏膜中的阳性表达率为72．5％（58／80）和30．0％（24／80），在正常胃黏膜组织中的阳性表达率为22．5％（9／40），差异有非常显著性（P〈0．001）。癌组织、癌旁黏膜中E2F-1的表达在不同的临床病理特征之间差异无显著性（P〉0．05）。结论E2F-1蛋白在胃癌组织中超表达，E2F-1的反常表达与胃癌的发生有关。     

胃癌p16、p53、C-erbB-2基因表达与淋巴转移关系的研究

本研究运用免疫组化SP法，对92例手术切除胃癌组织及所属淋巴结和28例癌旁正常黏膜组织石蜡标本进行了抑癌基因p16、p53突变型、原癌基因C-erbB-2蛋自进行了检测，就3个基因对胃癌淋巴转移的作用进行了分析。报告如下。     

吗啡和芬太尼对人胃癌MGC-803细胞迁移能力的影响

目的 观察吗啡、芬太尼对人胃癌MGC-803细胞迁移能力的影响.方法 将含0.1、10.0、1000.0μmol/L吗啡及0.0001、0.0100、1.0000 μmol/L芬太尼的细胞培养液,分别与胃癌MGC-803细胞一同孵育48 h,同时设空白对照组.应用划痕试验检测细胞迁移能力,应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot技术检测胃癌MGC-803细胞中磷酸酶基因(PTEN) mRNA和蛋白的表达.结果 划痕损伤48 h后,各吗啡组及各芬太尼组细胞的愈合率均低于对照组,细胞迁移能力下降(P＜0.05);RT-PCR和Western blot结果显示,吗啡或芬太尼均使胃癌MGC-803细胞PTEN mRNA和蛋白表达增高(P＜0.05).结论 吗啡和芬太尼可通过促进PTEN的表达而使胃癌MGC-803细胞的迁移能力降低.     

芬太尼对人胃癌MGC-803细胞活力的影响

目的 评价芬太尼对人胃癌MGC-803细胞活力的影响.方法 人胃癌MGC-803细胞,接种于6孔或96孔培养板中,随机分为3组(n=60),正常对照组(C组)不作任何处理,低浓度芬太尼(F1组)和高浓度芬太尼组(F2组)芬太尼的终浓度分别为0.01、1.00 μmol/L,分别于芬太尼孵育12、24、36、48、60、72 h时测定细胞活力,于芬太尼孵育7 d时测定细胞增殖情况,于芬太尼孵育24 h时测定细胞周期和细胞凋亡情况,于芬太尼孵育24 h时采用透射电子显微镜观察细胞超微结构.结果 与C组比较,F1组和F2组细胞活力、克隆形成率和S期比例均降低,细胞凋亡率和G2/M期比例升高(P＜0.05);F1组与F2组比较上述指标差异无统计学意义(P＜0.05);C组细胞核膜完整、核仁及染色质清晰,F1组细胞核膜及核仁碎裂、染色质边集,F2组细胞核膜破裂、核仁碎裂,并出现凋亡小体.结论 芬太尼可抑制人胃癌细胞的活力,其机制与诱导促细胞凋亡作用有关.     

膀胱癌复发与p53、p21WAF1/CIP1和细胞周期素E基因表达的相关性研究

目的：探讨膀胱癌p53、p21^WAF1/CIP1和细胞周期素E(CyclinE)基因的表达、相互间的调控及其与膀胱肿瘤复发生为的关系。方法：采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白过氧化物酶法（SP）检测64例有随访资料的膀胱癌患者p53、p21^WAF1/CIP1、CyclinE基因和Ki-67抗原表达，并用双变量相关分析、Kaplan-Meier分析及Cox regression多因素分析。结果：p53与p21WAF1/CIP1之间有明显相关（rs=-0.630，P=0.000）。p21^WAF1/CIP1与CylinE之间无明显相关（rs=-0.160，P=0.206），p53、Ki-67阳性表达患者有较高的肿瘤复发率。结论：肿瘤的临床病理特征、p53、Ki-67可作为评估膀胱肿瘤恶性程度及预后的指标。     

膀胱癌MDM2、p53基因表达的临床意义

我们运用点杂交、ＰＣＲ ＳＳＣＰ、免疫组化技术 (ＩＨＣ)分别对膀胱移行细胞癌(ＴＣＣ)组织和配对癌旁组织 ,以及非ＴＣＣ正常膀胱粘膜组织中ＭＤＭ2 基因扩增和表达 ,ｐ5 3表达和点突变情况进行对比检测 ,报告如下。材料与方法　ＴＣＣ及对应的癌旁组织标本各 2 3例 ,非ＴＣＣ正常膀胱粘膜标本 2 0例 ,ＨＥ染色诊断。按ＵＩＣＣ和ＷＨＯ标准 ,Ⅰ级 5例 ,Ⅱ～Ⅲ级 18例 ;Ｔｉｓ～Ｔ16例 ,Ｔ2 ～Ｔ4 17例。组织ＤＮＡ提取 ,测定样品浓度并判断纯度。根据ｐ5 3基因核苷酸序列 ,设计四对引物分别扩增 ｐ5 3基因第 5、6、7、8外显子。外显子包…     

E2F-1在胃癌组织中的突变、表达及其意义

随着研究的深入，E2F-1成为肿瘤基因研究领域中极具争议的一个基因。一方面，E2F-1在某些特定条件下发挥癌基因的作用，例如：E2F-1过度表达可以诱导大鼠胚胎成纤维母细胞转变成肿瘤细胞；另一方面，E2F-1基因缺失小鼠的肿瘤发生率明显增加，如生殖道肉瘤、肺腺瘤和淋巴瘤等，提示E2F-1具有抑癌基因的作用。本实验旨在观察E2F-1在胃癌中的基因突变、表达情况以及E2F-1过表达对MKN-45胃腺癌细胞株的影响，探讨E2F-1在胃癌发生发展中的可能作用。     

p53对胃癌细胞BGC823中Survivin基因表达的影响

目的 探讨p53基因对胃癌细胞株BGC823中Survivin基因表达的影响及其作用机制。方法 应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot技术检测胃癌细胞株BGC823中Survivin和p53基因表达情况；利用质粒pcDNA3．0-rpS3转染该细胞株。应用实时聚合酶链反应（PCR）和Western blot检测细胞在培养后不同时间点Survivin mRNA和蛋白表达水平。结果 确认了胃癌细胞株BGC823中Survivin和突变型p53基因的表达。受野生型p53质粒转染的胃癌细胞在培养16和24h后，Survivin mRNA和蛋白质水平呈明显下降趋势。结论 野生型p53在转染胃癌细胞株BGC823后可显著抑制后者Survivin基因的转录和表达。     

p53和c-erbB-2与胃癌关系的研究进展

目的介绍近年来抑癌基因p53和癌基因c-erbB-2与胃癌关系的研究进展。方法收集近年来国内、外关于胃癌中p53和c-erbB-2的相关文献并进行综述。结果 p53基因突变和c-erbB-2的过表达是胃癌发生中的常见事件。p53突变与胃癌的发生部位及其侵袭性生物学行为有关;c-erbB-2的过表达可作为判断胃癌预后的独立参数。针对p53及c-erbB-2的基因靶向治疗药物也在不断研究中。结论深入研究p53与c-erbB-2基因在胃癌发生、发展中的作用,将有助于清楚地认识胃癌的生物学行为,并为胃癌的基因治疗提供理论依据。     

细胞周期相关转录因子E2F-1在结直肠癌中的表达及临床意义

目的 研究E2F-1在结直肠癌中的表达情况及其临床意义.方法 采用免疫组织化学技术检测35例原发性结直肠癌标本中E2F-1的表达情况,并统计分析其阳性率与临床病理特征的相关性；采用蛋白印迹技术比较结直肠癌组织与癌旁正常组织间E2F-1表达量的差异.结果 35对结直肠癌及癌旁对照组织标本中,E2F-1阳性率分别为60.0％和5.7％,肿瘤组中E2F-1的表达明显高于癌旁对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).E2F-1在肿瘤组织中的表达情况与患者年龄、性别、分化程度及部位等因素无相关性,与淋巴结转移及TNM分期均显著相关(P＜0.05).肿瘤组中E2F-1的蛋白表达量高于癌旁对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 结直肠癌组织中表达E2F-1的细胞数目及其表达量均显著增加,E2F-1与结直肠癌临床病理特征相关.     

胃癌组织中细胞周期素G和p53的表达及意义

目的研究胃癌组织中细胞周期素G(cyclin G)和p53基因的表达以及它们与胃癌生物学特性可能存在的相关关系。方法应用免疫组织化学S-P法检测42例胃癌组织的cyclin G和p53蛋白表达情况。结果胃癌组织中的cyclin G和p53的阳性表达率分别为69.0%和28.6%,二者呈低相关性,cyclin G的表达与肿瘤分期、淋巴结转移有关。结论cyclin G和p53可能是胃癌相对独立的始动因素,并互相促进参与胃癌的发生和发展。     

野生型p53基因对人胃癌细胞端粒酶逆转录酶mRNA转录的影响

目的 研究野生型p53基因对人胃癌细胞端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA转录及端粒酶活性的影响。方法 将含人野生型p53基因的pcDNA3—p53转染人胃癌细胞系BGG—823，通过半定量逆转录—聚合酶链反应(RT—PCR)检测转染后细胞hTERT基因mRNA的转录，聚合酶链式反应结合酶联免疫吸附(PCR ELISA)方法检测端粒酶活性。结果 转染野生型p53基因后48、72h BGC-823细胞的hTERT基因mRNA转录量由对照组的( )下降为( )和( )；转染前BGC—823细胞表达高水平的端粒酶活性(3．049)，而转染48、72h后的端粒酶活性分别为1．678和0．757。结论 野生型p53基因能够显著抑制人胃癌细胞hTERT基因mRNA的转录，通过下调hTERT、基因mRNA的转录来抑制胃癌细胞的端粒酶活性。     

吗啡对胃癌细胞Survivin和Caspase-9表达的影响

目的 观察吗啡对人胃癌MGC-803细胞Survivin和Caspase-9基因表达的影响.方法 胃癌MGC-803细胞分为两组:对照组和吗啡组.对照组不加任何药物,吗啡组将吗啡加入细胞培养液中使吗啡终质量浓度为0.1 μmol/L.孵育24h后应用流式细胞仪检测细胞凋亡,并应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot技术检测胃癌MGC-803细胞中Survivin和Caspase-9基因mRNA和蛋白的表达.结果 吗啡组胃癌细胞凋亡率为(17.20±2.95)％,明显高于对照组的凋亡率(11.40±2.86)％(P＜0.05);RT-PCR和Western blot结果显示,吗啡组胃癌细胞中Survivin mRNA和蛋白表达降低,而Caspase-9 mRNA和蛋白表达增高(P＜0.05).结论 0.1μmol/L吗啡通过抑制Survivin的表达、增强Caspase-9的活性而促进胃癌细胞的凋亡.     

Cyclin G在胃癌组织中对p53-鼠双微基因2的负反馈调节作用

目的 探讨Cyelin G在胃癌组织中对p53-鼠双微基因2（Mdm2）负反馈调节循环中的作用及可能的相互关系。方法 应用免疫组织化学SP法检测48例胃癌及相应癌旁组织Cyclin G、Mdm2和p53的表达情况。结果 Cyclin G高表达于胃癌细胞核。Cyelin G，Mdm2和p53阳性率分别为64．6％、47．9％、29．1％，显著高于相应的癌旁组织（P〈0．05），Cydin G与Mdm2呈高相关性（Kappa=0．506），与p53呈低相关性（Kappa=-0．364），并且和胃癌组织学分类和Borrmann分型无关（P〉0．05）。结论 胃癌组织中Cyclin G、Mdm2和p53的异常表达可能与胃癌的发生与发展有关。Cyclin G通过Mdm2调节p53及其通路，可以作为胃癌基因治疗的靶点。     

RNA干扰E2F-1表达对胃癌MGC803细胞生物学行为的影响及其机制

目的 利用基因表达谱芯片技术探讨E2F-1小分子干扰RNA(E2F-1-siRNA)影响胃癌细胞MGC803生物学行为的分子机制.方法 分别抽取E2F-1-siRNA转染组和对照组(negative control-siRNA)的细胞总RNA,分离纯化mRNA并逆转录合成荧光分子(Cy3/Cy5)标记cDNA探针,与含有21522条人类22k基因表达潜芯片进行杂交.采用LuxScan 10K/A双通道激光扫描仪扫描芯片上两种信号,应用LuxScan3.0图像分析软件对芯片图像进行处理和分析.结果 在21522条基因中,两组胃癌细胞间差异性表达基因为18条,其中上调基因8条,下调基因10条,下调的基因中有1条功能信息不明.结论 体外干扰E2F-1基因表达后,胃癌MGC803细胞生物学行为的变化是多基因相互作用、多种信号通路相互调节的结果,其中的关键基因和信号传导通路值得进一步研究.