慢性乙型肝炎肝组织中HSP27、70和90α的表达及其意义

生物体细胞在受到各种理化因素刺激后 ,发生应激反应 ,诱导一类新的基因合成热休克蛋白 (HSP)。HSP广泛存在于原核、真核细胞中 ,能保护细胞并促进细胞从各种刺激所造成损伤中自身修复 ,调节靶蛋白的活性和功能[1,2 ] 。本研究应用免疫组织化学法对慢性乙型肝炎肝组织中HSP2 7、HSP70和HSP90α的表达进行了检测 ;应用免疫组织化学双重染色技术对HSP70 /HBcAg和HSP90α/HBcAg进行了检测 ,并探讨其意义。材料与方法一、材料慢性乙型肝炎肝穿刺活检组织取自 3 6例 1998～ 2 0 0 0年本院住院患者 ,男 2 9例 ,女 7例 ,平均年龄 ( 3 5 …     

人肝癌细胞膜上HSP70的表达

用流式细胞仪和Cell-ELISA检测了 4株人肝癌细胞膜上HSP70的表达。结果表明正常情况下人肝癌细胞膜上HSP70的表达较低 ,经热处理后表达增加 (P <0 0 1)并显示出细胞之间的差异 (P <0 0 1)。推测其低表达可能与肝癌细胞逃逸机体免疫监视有关 ,对制定肝癌的防治对策有重要的指导意义。     

大鼠肝脏增龄性变化和热休克蛋白70表达差异

目的 观察不同年龄大鼠肝脏的增龄性变化以及热休克蛋白70(HSP70)在肝组织中的表达,探讨HSP70在肝脏老化中的作用. 方法 雄性SD大鼠按月龄分为21 d组、3月龄组、12月龄组和18月龄组,每组各6只.进行常规血清学测试,光镜下观察肝组织结构,Real-time PCR法检测HSP70在各组大鼠肝组织中的表达. 结果 随着鼠龄增长,4组大鼠肝质量/体质量比值明显降低,分别为0.073、0.050、0.025和0.019(P=0.000);21 d组和3月龄组与12月龄组和18月龄组比较,血清白蛋白水平减低[分别为(35.0±2.7)g/L和(39.8±3.5)g/L比(27.3±9.3)g/L和(20.6±1.7)g/L,t=12.233,P=0.000];碱性磷酸酶(ALP)水平升高[分别为(68.8±23.3)U/L和(71.6±19.2)U/L比(185.9±41.5)U/L和(418.6±140.6)U/L,t=35.354,P=0.000].光镜下可见12月龄和18月龄大鼠的肝细胞排列紊乱,细胞内脂肪空泡明显增多.18月龄组大鼠肝细胞HSP70mRNA表达相对量(0.218),低于12月龄组(0.220)和3月龄组(0.230) (P=0.000). 结论 HSP70可能参与了肝细胞老化的进程,可以作为预测肝脏老化的检测指标之一.     

局灶性脑缺血小鼠皮层HSP60、HSP70表达的时序性变化

目的探讨热休克蛋白(HSP)60、HSP70在局灶性脑缺血小鼠脑缺血后不同时间点(1 h、2 h、3 h)皮层缺血核心区和半影区的蛋白表达变化。方法健康雄性BALB/c小鼠,建立脑中动脉阻塞缺血模型(MCAO),利用蛋白印迹技术分析HSP60、HSP70蛋白表达量在脑缺血1、2、3 h的时序性变化。结果与假手术组比较,MCAO小鼠脑皮层HSP60、HSP70的蛋白表达量明显升高(P<0.05),HSP60随缺血时间延长呈持续升高趋势,HSP70在缺血后1 h增加,2 h达高峰,3 h降低。结论 HSP60、HSP70是神经细胞损伤和耐受的敏感标志,局灶性脑缺血能引起HSP60、HSP70表达的时序性变化,为认识局灶性脑缺血损伤提供理论依据。     

HSP70,HSP90在结肠癌中表达及其和生物学行为的相关性

目的:探讨HSP70,HSP90在人结肠癌中的表达情况及其和结肠癌细胞生物学行为的相关性.方法:结肠癌患者手术标本40例,分别以癌组织、癌旁2cm组织和远离癌灶的正常黏膜组织作为病例组和对照组.用亲和免疫组织化学技术方法检测HSP70和HSP90,并收集该40例患者的临床Duke's分期,分析HSP70和HSP90蛋白的阳性程度和结肠癌临床分期是否存在相关性.结果:癌组织HSP70和HSP90的表达明显增高,癌组织、癌旁组织和正常黏膜组织三组之间HSP70和HSP90表达率有明显差异(HSP70:82.5%vs52.5%vs25%,χ2=26.58,P=0.000;72.5%vs42.5%vs22.5%,χ2=20.41,P=0.000);HSP70和HSP90蛋白的阳性程度和结肠癌临床分期存在相关性(HSP70:tau_b=0.392,P=0.006;HSP90:tau_b=0.396,P=0.006).结论:结肠癌细胞存在HSP70和HSP90蛋白的过度表达,HSP70,HSP90和结肠癌细胞的生物学行为存在相关性.     

急性呼吸窘迫综合征患者血清HSP70和DcR3水平变化及其意义

目的 观察急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者血清热休克蛋白70(HSP70)、诱骗受体3(DcR3)水平变化,并探讨其与ARDS病情程度和患者预后的关系.方法 选择ARDS患者95例(观察组),其中病情程度轻度31例、中度38例、重度26例,同期选择与观察组性别、年龄匹配的健康志愿者52例(对照组),收集两组清晨空腹肘...     

慢性温和应激后老年大鼠抑郁症状及HSP70的变化

目的探究慢性温和应激下老年大鼠热休克蛋白70(HSP70)的表达及其对抑郁症状的影响。方法采用老年期(老年组)SD雄性大鼠(n=6),对比以标准鼠龄(青年组)SD雄性大鼠(n=6),经过3 w慢性温和应激前后,进行糖水偏好实验与敞箱实验,检测大鼠的抑郁症状;分别利用Western印迹法、RT-PCR、免疫组化的方法检测大鼠海马与额叶的HSP70水平。结果老年组糖水偏好程度的下降、垂直运动指数、水平运动指数、中央格停留时间均低于青年组(P0.05);Western印迹检测显示老年组的HSP70在海马与额叶均低于青年组(P0.05);RT-PCR检测显示老年组的HSP70在海马与额叶均低于青年组(P0.05);免疫组化显示老年组的HSP70在海马与额叶也低于青年组(P0.05)。结论慢性温和应激后,老年期大鼠的抑郁症状明显增加,同时老年大鼠的HSP70在蛋白水平与RNA水平均下降,故推测老年大鼠的抑郁症状可能与HSP70水平低有关。     

模拟失重大鼠胰腺组织HSP70表达的变化

目的 研究模拟失重环境下大鼠胰腺组织HSP70表达的变化.方法 健康雄性Wistar 大鼠64只,采用尾悬吊法建立模拟失重动物模型.按完全随机法分为悬尾6、12 h及1、2、3、5、7d组和未悬尾对照组.应用免疫组化法、蛋白质印迹法和RT-PCR法检测各组大鼠胰腺组织HSP70蛋白和mRNA的表达.结果 免疫组化染色显示,对照组大鼠胰腺组织无HSP70蛋白表达,悬尾组大鼠胰腺组织均有HSP70蛋白表达,尤其是胰岛细胞的胞质和胞核在早期即深染.蛋白质印迹法结果显示,悬尾6、12 h及1、2d组大鼠胰腺组织HSP70蛋白持续高表达,分别为0.921±0.078、0.862±0.048、0.838±0.063、0.807±0.071,较对照组的0.693 ±0.055显著增加(P＜0.05);3、5、7d组的HSP70蛋白表达恢复到对照组水平.HSP70 mRNA表达在6h组即明显增加至0.881 ±0.013,然后逐渐回落,3d组降至0.694±0.027,5d组出现回升,达0.836±0.014,7d组又回落至0.674±0.013.结论 模拟失重使大鼠胰腺组织中HSP70蛋白和mRNA表达发生明显变化,早期过表达,后期恢复正常水平.     

不同切肝量大鼠血清HSP70水平变化及其意义

目的观察不同切肝量大鼠血清HSP70水平的变化,并探讨其意义。方法将310只大鼠随机分为正常对照组10只、切肝组150只和谷氨酰胺（Gln）干预组150只。后两组又分为轻度、中度、重度切亚组各50只,分别建立不同切肝量手术创伤模型,干预组造模前经大鼠尾静脉注入Gln 0.75 g/kg。对照组只给予麻醉处理。检测对照组及其他两组术后2、8、12、24、48 h大鼠血清HSP70和肝功能指标。结果与正常对照组比较,切肝组和干预组血清HSP70于术后2 h开始升高,12 h达高峰,48 h仍较高;中、重度切肝组术后ALT、TB均增高,经Gln干预后均降低。结论手术创伤可导致大鼠血清HSP70水平明显升高;检测血清HSP70表达有助于诊断及预测手术创伤程度,术前诱导HSP表达对机体有保护作用。     

HSP70-GST融合蛋白表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达

目的构建小鼠热休克蛋白70(HSP70)重组原核表达质粒,获取小鼠HSP70-GST融合蛋白。方法先用RT-PCR方法从小鼠脑基因组中扩增出HSP70基因cDNA序列,应用T-A克隆技术,克隆到质粒pMD—Tvector,经DNA测序证实基因碱基无误后,亚克隆到原核表达质粒pGEX-4T-1 中进行表达。结果表达产物经Western Blot分析,在109 KD处有一明显特异带,与预期结果相符。结论构建重组融合表达载体pGEX—HSP70,用基因工程的方法在原核细胞中成功表达出小鼠 HSP70-GST融合蛋白。     

Sclerosing cholangitis secondary to hepatic artery ligation after abdominal trauma

Several causes have been postulated as responsible for secondary sclerosing cholangitis (SSC), mainly in adults, and, although in very different situations, ischaemia seems to be one of the most important factors. The term 'ischaemic cholangitis' has been used as a collective label for all these ischaemia-induced bile duct lesions. The biliary epithelium is dependent on arterial blood flow, unlike the hepatic parenchyma, which receives a dual blood supply from the hepatic artery and the portal vein. This makes the biliary epithelium very susceptible to changes in arterial blood flow. We present one adolescent patient who developed SSC after abdominal trauma with hepatectomy and ligation of the right hepatic artery. Different factors could have helped in the development of SSC in our patient (septicaemia, bile duct destruction, cholecystectomy) but right hepatic artery ligation seems to be the most important aetiological factor in the development of secondary ischaemic cholangitis.     

Regional distribution of HSP 70 proteins after myocardial infarction

Hypoxia and altered hemodynamic status, both components of myocardial infarction, have been shown to be potent inducers of the 70 kD family of heat shock proteins (HSP70). We hypothesized that after infarction, the surviving myocardium would synthesize HSP70 proteins in a temporally and regionally distinct pattern. We believed that there would be a lack of an HSP70 response in the infarcted area (I), reflecting the loss of viable cells. We further postulated that tissues bordering infarctions (M) would have a compromised HSP70 response. Conversely, we proposed that HSP70 would be induced in septal tissues (S) of the infarcted heart, as a hypertrophic adaptation. A rat model of myocardial infarction was used to examine the changes in relative concentration and distribution of three major HSP70 family proteins; cytoplasmic HSP72, mitochondrial HSP75, and endoplasmic reticular GRP78 (glucose regulated protein) during 21 days of recovery. While all three HSP70 family proteins investigated were detected in all hearts from all groups at all time periods, experimental treatment (infarction) induced changes in relative protein concentrations that varied with time and sample site location. Relative concentrations of HSP72 and GRP78 were unchanged in the 24 h following infarction while relative HSP75 concentrations were halved in M tissues during the same time period. Between days 5 and 7, several changes were noted. M samples displayed nearly twice the relative concentrations of HSP75 and GRP78 after infarction, but showed no change in HSP72. S tissues showed two-fold or larger increases in all three HSP70 family proteins. I samples showed unanticipated increases in HSP75 and GRP78 during this time period. After 14 to 21 days of recovery, HSP70 family protein concentration levels in M, S, and I tissues from infarcted hearts had returned to levels similar to those seen in control animals. We conclude that the myocardium is unable to, or does not, mount an immediate HSP70 response after infarction but does recover such activity by 5–7 days after infarction.This study was supported in part by a grant from the American Heart Association-Kansas Affiliate (KS-94-GS-30)     

退行性心脏瓣膜病患者血清中MHC、IRF4、HSP70、HSP22mRNA表达的变化及意义

目的 研究肌球蛋白重链（MHC）、干扰素调节因子-4（IRF-4）、热休克蛋白70（HSP70）、热休克蛋白22（HSP22）mRNA在老年退行性心脏瓣膜病（SDHVD）患者血清中的表达,探讨SDHVD的可能发病机制。方法根据彩色多普勒检查结果将所有入选者分为单纯主动脉瓣钙化组（AVC组,n=25）、单纯二尖瓣钙化组（MVC组,n=19）、主动脉瓣钙化合并二尖瓣钙化组（AVC＋MVC组,n=21）,24例心脏瓣膜无钙化的老年患者设为对照组（NVC）。应用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测入选者血清MHC、IRF-4、HSP70、HSP22mRNA的表达。结呆SDHVD组与对照组相比MHC和IRF-4mRNA表达量明显降低（P〈0．01）,HSP70和HSP22mRNA表达量则明显增高（P〈0．01）,不同瓣膜钙化损伤间无明显差异（P〉0．05）。SDHVD患者血清MHCmRNA、IRF-4mR—NA表达与LVEF呈正相关（r分别为0．394、0．427,P〈0．05）,HSP70mRNA、HSP22mRNA表达量与LVEF呈负相关（r分别为-0．409、-0．422,P〈0．05）。结S-g-SDHVD患者血清MHC、IRF-4、HS1070、HSP22mRNA表达及心功能较心脏瓣膜无钙化者有明显变化,提示免疫炎性损伤参与SDHVD的发生发展。     

人消化道癌组织HSP70的检测及其多肽复合物的分离研究

目的 分析人消化道癌组织蛋白表达谱的差异并分离纯化食管癌组织中HSP70-多肽复合物.方法 提取人食管、胃及大肠的癌组织、癌旁组织和正常组织的蛋白质,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法进行电泳分析;同时以食管癌组织为材料,通过层析柱分离纯化HSP70-多肽复合物.结果 相同器官的不同组织中不同分子量蛋白的种类基本一致,但丰度则表现出差异;同时分离到食管癌细胞的HSP70-多肽复合物.结论 不同分子量的蛋白质在不同组织中表达的丰度不同,可能与组织细胞生命活动状态相关.HSP70-多肽复合物的分离为提取肿瘤HSPT0-多肽复合物提供了具体方法,为深入研究和利用HSP70蛋白奠定了基础.     

HSP70对急性白血病预后的影响及其与mdr-1的关系

目的探讨热休克蛋白-70（HSP70）对急性白血病（AL）预后的影响及与多药耐药基因mdr．1的关系。方法应用反转录聚合酶链反应半定量分析50例初治AL患者（其中难治组10例,缓解组40例）细胞中HSP90、mdr-1的表达水平。结果难治组HSPT0表达水平明显高于缓解组（P〈0．01）;mdr-1阴性组HSPT0表达水平明显低于mdr-1阳性组;mdr-1mRNA的表达与HSP70mRNA的表达呈显著正相关。结论HSP70mRNA的高表达是AL疗效差、预后不良的标志,且HSP70与mdr-1协同影响耐药。     

老年重下中暑患者血浆热应激蛋白70及其抗体水平的变化

目的　探讨热应激蛋白 70 (HSP70 )水平及其抗体滴度在老年人重症中暑发生、发展中的特点及意义。　方法　应用 Western blot法测定血浆中 HSP70水平 ;应用酶联反应技术经倍比稀释测定血浆 HSP70抗体滴度。　结果　重症中暑的老年、非老年组 HSP70水平分别为 42 2 6± 12 49、385 6± 15 92 ,均明显低于健康的老年、非老年对照组的 6 0 91± 196 1、5 991± 90 5 (均为 P<0 .0 1)。重症中暑的老年组 HSP70抗体 1∶ 10以上阳性率为 80 .6 % ,明显高于其他各组 (均为 P <0 .0 1) ,且死亡的 5例老年患者 H SP70抗体滴度均呈高水平状态。　结论　 HSP70表达水平下降及 HSP70自身抗体产生可能与老年人重症中暑的发生有关。     

Incidence investigation and analysis of hepatic stress injury after trauma

Objective To investigate the etiology and pathogenesis of hepatic stress injury after trauma.Methods 4 677 patients with severe trauma in 153th Hospital of PLA from Jan.2004 to Jul.2005 were enrolled in this study to investigate the incidence of hepatic stress injury,and furthermore,in combination with medical information,the possible pathogenesis was analyzed.Results The main manifestation of hepatic stress injury was the elevated ALT or AST levels(387 cases,8.3%).The incidence of hepatic stress injury after hand injury,burn injury,head injury,bone injury,abdominal injury,and thoracic injury were 16.6%,6.9%,5.6%,5.0%,3.8% and 2.0%,respectively,and among which,the incidence of hepatic stress injury after hand injury was statistically highest(P<0.01).Conclusion The total incidence of hepatic stress injury after trauma was 8.3%.Intestinal endotoxemia might be one of the beginning components of hepatic stress injury after trauma.     

氟桂利嗪对高血压大鼠脑缺血再灌注后HSP70表达的影响

目的探讨高血压大鼠急性脑缺血再灌注后氟桂利嗪对热休克蛋白70(HSP70)表达的影响.方法将大鼠用双肾动脉狭窄术制成高血压大鼠模型,喂养2个月.随机分为氟桂利嗪组、缺血再灌注组和假手术组.除假手术组大鼠外,其他大鼠均制成大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,MCAO时间均为2小时,再灌注时间为1天.经免疫组化染色后用病理图像分析仪测出HSP70阳性细胞数,并计算阳性细胞率.比较三组HSP70阳性细胞率.结果氟桂利嗪组HSP70表达高于缺血再灌注组(P＜0.05).结论氟桂利嗪能促进HSP70表达,对缺血再灌注引起的受损脑组织起保护作用.