兔肝VX2肿瘤移植模型的复制及其意义

目的：探讨建立兔肝VX2肿瘤模型，为该模型的应用提供实验依据。方法：采用VX2细胞株复制兔肝肿瘤模型，并改进其制作方法，观察其肿瘤的生长过程，并检测肝功能谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及总胆红素(TB)在模型制作前、后不同时相的变化，同时观察脏器转移、组织病理学改变、影像学表现及实验动物的自然生存时间。结果：接种后3周均可见到肿瘤生长，肿瘤直径为1．5～2．0cm左右，肿瘤接种成功率为100％；彩超检查显示肝脏有结节样增强回声，CT示肿瘤为低密度病灶，增强扫描见病灶不均匀强化。移植肿瘤外观呈灰白色，扪之质地较硬，无明显的包膜，剖开肿瘤中心可见灶性坏死；光镜下见肿瘤细胞核浆比例大，细胞排列紊乱，呈浸润性生长；动物接种后的自然生存时间为40～53d，死亡原因主要为肿瘤生长及转移引起的多脏器功能衰竭。结论：兔肝VX2肿瘤从病理表现、病理过程及转移均与人肝癌相似，该模型具有容易复制、生长周期短、成功率高及模型稳定等特点，是一种较理想的肝肿瘤实验动物模型。     

兔局限性肝肿瘤模型的建立

肝癌是常见的消化系统肿瘤。近年来,肝癌的介入治疗和微创治疗成为热门的研究课题。由于缺少可移植性的肝癌大动物模型。限制了其实验范围。我们结合国内外文献材料。并在此基础上进行了改进,建立了局限性生长的兔VX2肝癌模型。通过观察种植成功率。肺转移,腹腔转移和生存期等,证实了改良的VX2肝癌模型的可行性和稳定性,从而有效地解决了基础研究的关键环节。为观察肝癌治疗效果的实验研究提供了可靠的实验基础。现报道如下：     

高浓度乙酸注射治疗兔VX2肝肿瘤的实验研究

目的 利用兔VX2肝移植瘤模型探讨高浓度乙酸注射治疗肝肿瘤的价值，并探索注射治疗肝肿瘤的最适乙酸浓度。方法 用移植法建立兔VX2肝肿瘤模型，将40只携瘤兔随机分为A、B、C、D四组。术前以CT测量肿瘤直径。开腹向A、B、C、D组肝肿瘤内分别注人50％、75％、100％乙酸和生理盐水，48h后重复注射一次，术后一周处死兔子取肝脏观测比较各组肿瘤体积改变情况及坏死灶周围新生灶情况，并取肿瘤组织制作石蜡切片(HE染色)，镜下观察肿瘤组织坏死情况。结果 注射后一周各实验组肿瘤直径均减小，对照组肿瘤直径明显增大。100％乙酸组10例仅1例在坏死灶周围发现新生灶，而50％乙酸组发现5例，75％乙酸组发现7例。镜下显示100％乙酸组肿瘤中未坏死的肿瘤细胞团较75％和50％乙酸组少见。结论 高浓度的乙酸对兔VX2肝肿瘤的灭活效果显著；其中100％的乙酸效果最佳。     

兔脊柱VX2移植瘤模型的建立及生物学特性观察

目的探讨兔脊柱VX2移植瘤模型的建立方法及其生物学特性。方法新西兰大白兔25只,分为两组。实验组（20只）采用VX2瘤细胞悬液经横突椎弓根注射法建立兔脊柱VX2移植瘤动物模型,对照组（5只）以生理盐水注射代替VX2瘤细胞悬液进行同样操作。接种后每天观察下肢神经功能变化,接种术后第2周起每周行X线、CT影像学检查肿瘤生长情况。动物出现下肢瘫痪、死亡或接种后6周为观察终点,取出接种椎作组织学检查。结果对照组5只兔观察期内均未出现神经功能障碍,检查未见异常。实验组中1只兔因钻孔破人椎管,退出实验。19只兔成功接种,1只于接种术后9天感染死亡,1只经病理检查证实观察截止时仍无肿瘤生长,其余17只成瘤（89．5％）。观察期内9只出现完全瘫痪,5只不全瘫,其余3只未出现神经功能障碍。结论经横突-椎弓根种植法建立兔脊柱VX2移植瘤模型具有成瘤率高、可重复性好的特点。该模型能较好地模拟脊柱转移癌发展、压迫脊髓导致瘫痪的病理过程,有助于脊拄转移癌各种治疗模式的研究和探索。     

高浓度乙酸注射治疗兔VX2肝肿瘤的实验研究

目的利用兔VX2肝移植瘤模型探讨高浓度乙酸注射治疗肝肿瘤的价值,并探索注射治疗肝肿瘤的最适乙酸浓度.方法用移植法建立兔VX2肝肿瘤模型,将40只携瘤兔随机分为A、B、C、D四组.术前以CT测量肿瘤直径.开腹向A、B、C、D组肝肿瘤内分别注入50%、75%、100%乙酸和生理盐水,48 h后重复注射一次,术后一周处死兔子取肝脏观测比较各组肿瘤体积改变情况及坏死灶周围新生灶情况,并取肿瘤组织制作石蜡切片(HE染色),镜下观察肿瘤组织坏死情况.结果注射后一周各实验组肿瘤直径均减小,对照组肿瘤直径明显增大.100%乙酸组10例仅1例在坏死灶周围发现新生灶,而50%乙酸组发现5例,75%乙酸组发现7例.镜下显示100%乙酸组肿瘤中未坏死的肿瘤细胞团较75%和50%乙酸组少见.结论高浓度的乙酸对兔VX2肝肿瘤的灭活效果显著;其中100%的乙酸效果最佳.     

兔肝VX2肿瘤模型的建立及影像学研究现状

VX2肿瘤细胞株是一种可移植的肿瘤细胞株,可接种到兔的肝脏、肾脏等部位,建立原位肿瘤动物模型。兔VX2肝癌模型是目前较常用的实验性动物肝癌模型,本文就兔肝VX2肿瘤模型的建立和影像学表现进行综述。     

CEUS观察兔肝VX2肿瘤坏死演变

目的应用CEUS技术观察兔肝VX2肿瘤坏死过程,探讨VX2肿瘤生长坏死规律及其对实验产生的影响。方法应用超声引导下经皮穿刺种植法成功建立24只兔VX2肝肿瘤模型,并通过CEUS技术分别在肿瘤种植后10、14、21、28天动态观察肝肿瘤演变过程,测量肿瘤体积及坏死体积,计算瘤内坏死率。结果在肿瘤种植后10、14、21、28天兔肝VX2肿瘤体积、坏死灶体积和坏死率比较,差异均有统计学意义(P均0.05);肿瘤种植后10、14、21、28天的CEUS表现能反映出肿瘤的病理学特征。实验依据CEUS和病理特点将肿瘤生长过程细分为5个时期,0~10天为肿瘤实质前期;11~14天为肿瘤实质后期;15~21天为肿瘤坏死初期;22~28天为加速坏死期;28天后为肿瘤囊变期。结论 CEUS可准确判断肝肿瘤实质及坏死范围;VX2肿瘤的生长演变及肿瘤坏死具有规律性,可根据不同实验要求选择适宜的研究时间段。     

CT引导下建立兔背部肌肉VX2肿瘤动物模型

目的探讨CT引导下建立兔双侧背部肌肉内VX2肿瘤动物模型的可行性。方法 CT引导下用套管针将VX2肿瘤悬浮液注入5只新西兰大白兔腿部肌肉,作为肿瘤兔;选取20只兔,在CT引导下用穿刺活检法将肿瘤兔腿部肿瘤接种于其双侧背部肌肉内。接种后每周行CT增强扫描检查,观察肿瘤成活率、大小、种植部位满意度、影像学表现,并于14天后行穿刺活检病理学检查。结果 20只兔全部接种成功,定期增强扫描显示两侧背部孤立肿瘤逐渐变大,周边强化明显,接种后21天肿瘤内出现明显低密度液化坏死区;光镜下见组织内多灶浸润性癌巢,瘤组织间见坏死瘤细胞形态不规则,胞浆丰富,异型性明显,并可见核分裂象。种植兔未出现腹腔种植转移等并发症。结论 CT引导下新型双侧背部肌肉内VX2肿瘤动物模型成瘤率高,接种后肿瘤生长速度快,可为肿瘤微创治疗基础研究提供新型适用动物模型。     

稀硫酸和无水乙醇注射治疗兔肝脏移植性VX2肿瘤

目的　探讨稀硫酸和无水乙醇兔VX2肝肿瘤内注射的临床价值。方法　移植性VX2肿瘤兔 16只 ,随机分为稀硫酸和无水乙醇组 ,分别于肿瘤内注射 10 %稀硫酸和无水乙醇各 0 .5ml。结果　兔移植性VX2肿瘤内分别注射 10 %稀硫酸和无水乙醇各 0 .5ml,2 4h后 ,稀硫酸组肿瘤坏死率大于乙醇组 (P <0 .0 5 )。电镜观察肿瘤细胞表现为变性 ,坏死及凋亡改变。MRI扫描肿瘤术前T1WI、T2WI和T2DWI分别表现为均匀低信号、高信号和高信号 ,边界清楚 ;术后表现为混杂不均匀信号。肿瘤凝固性坏死在T1WI和T2WI上表现为高信号和稍低信号 ,增强时病灶无明显强化。结论　稀硫酸是一种新型肿瘤细胞灭活物质 ,经皮硫酸注射疗法创伤小 ,无明显副作用 ,可成为肝癌治疗的一种新方法。     

羟基磷灰石纳米粒子瘤内注射对兔肝VX2种植瘤生长的影响

目的 研究羟基磷灰石纳米粒子瘤内注射对兔肝VX2种植瘤生长的影响.方法 将接种VX2肝肿瘤的新西兰白兔随机分成4组,每组10只.A组:肝种植瘤内注入含0.2%羧甲基纤维素钠的生理盐水1 ml;B组:注入20 mg/ml 5-Fu 1 ml;C组:注入20 mg/ml Nano-HAP溶胶1 ml;D组:注入同样浓度5-Fu和Nano-HAP混合液2 ml.四组实验动物于注药后7、14、21 d行肝脏B超扫描,记录生存时间,取肝肿瘤组织病理学检查.结果 术后7、14、21 d A组平均肿瘤体积分别为(4.93±0.76)cm3、(15.67±2.75)cm3和(52.36±10.57)cm3 ; B组为(4.16土0.33)cm3、(10.26±1.60)cm3和(18.89±4.65)cm3;C组为(1.43±0.13)cm3、(3.69±0.77)cm3和(9.51±2.09)cm3;D组为(2.80±0.46)cm3、(3.77±0.91)cm3和(8.46±0.95)cm3.B、C、D三组肿瘤体积均小于同期对照组,D组肿瘤体积最小.四组动物中位生存期分别为34、41、51和44 d.B、C、D三组生存期较对照A组延长.超声监测显示C、D组羟基磷灰石纳米粒子溶胶瘤内注射时可见肿瘤内强回声光点.多次注射后瘤体内可见钙化样强回声光团.HE染色后光镜下观察见A组和B组肿瘤组织出现多处片状坏死,C、D组注射区域呈片状坏死,被条索状或片状钙化灶分隔.结论 羟基磷灰石纳米粒子瘤内注射治疗兔VX2肝肿瘤是安全、可行的,对肿瘤生长有明显的抑制作用,未见毒性反应.     

转筒法创伤性休克兔模型的制作

目的制作兔创伤性休克模型。方法制作直立式电动转筒法动物休克器。健康家兔20只,随机分为转筒法休克组(n=10)和麻醉组(n=10)。休克组兔直立置于旋转筒内,以900 r／min转速旋转3 min。观察精神状态、体表血液灌流、心率(Hr)、呼吸(R);测股动脉血压(SM、DM),动脉血作血气分析,并与麻醉组对照比较。结果休克组家兔均出现昏迷,持续时间66.25±2.06 min;胡须牵拉反应及眶上神经反射均消失;大部分针刺疼痛反应消失(n=8);瞳孔散大;口唇颜色为紫色、温度冷。休克组Hr、R、SM、DM、PO2、％SO2C均高于麻醉组,且差异极显著(P<0.001);HCO3、TCO2、BEb、SBC、BEecf低于麻醉组,差异极显著(P<0.001);pH、PCO2略低于麻醉组,但差异不显著(P>0.5,P>0.1)。结论转筒法可制作创伤性休克兔模型,休克时间可持续1 h。     

两种结直肠癌肝转移动物模型建立方法的比较及评价

建立小鼠结直肠癌细胞肝转移动物模型,为研究结直肠癌肝转移机制及筛选评估抗转移药物提供工具。采用60只6～8周龄BALB／c小鼠,选取鼠大肠癌细胞株CT26接种于BALB／c小鼠直肠黏膜下层后,再随机选择30只小鼠行盲肠造口,观察其原位移植瘤体积大小、肝转移癌情况（包括肝脏表面转移癌结节大小、数目和转移率）,成瘤时间及小鼠的生存期。结果显示,两种造模方法均能复制出结直肠癌肝转移动物模型,病理结果证实肝转移肿瘤符合典型的低分化腺癌特征。术后30d两组肝脏转移情况的比较,直肠直接接种组肝转移率（15．7％）和直肠接种盲肠造口组肝转移率（61．5％）,差异有统计学意义（P〈0．05）。术后30d两组淋巴结转移情况比较,直肠直接注射组及直肠接种盲肠造口组淋巴结转移率分别为5．2％和46．2％,差异有明显统计学意义（P〈0．05）。结果表明,两种小鼠大肠癌细胞株肝转移动物模型均能较好模拟结直肠癌体内肝转移过程,直肠接种盲肠造口法的小鼠肝转移模型具有肝脏转移率高,小鼠生存期长,成瘤时间较短等优点。     

Ablation of High-Intensity Focused Ultrasound Assisted with SonoVue on Rabbit VX2 Liver Tumors: Sequential Findings with Histopathology, Immunohistochemistry, and Enzyme Histochemistry

Background  We investigated sequential effects of HIFU ablation combined with contrast agent SonoVue by using histopathology examination, immunohistochemistry, and enzyme histochemistry. Materials and Methods  Forty rabbits with VX2 liver tumors were subjected to HIFU ablation. Before ablation, a bolus injection of 0.2 mL SonoVue was administrated in group II (n = 20), and normal saline solution was injected in group I (n = 20). On day 0, 3, 7, and 14 after ablation, 5 animals in each group were sacrificed. The tissue in ablated zone, transient zone (within 3 mm around ablated area), and surrounding zone (beyond 3 mm around ablated area) were collected. Coagulated volume measurement, hematoxylin-eosin staining, immunohistochemistry of Ki 67, Bcl-2, CD54, and MMP-2 to determine cell proliferation and tissue repair, and nicotinamide adenine dinucleotide phosphate-diaphorase (NADPH-d) and succinic dehydrogenase (SDH) staining to evaluate tissue viability were performed. Results  The coagulated volume in group II at each time point was larger than that in group I (P < .05). After day 3, hematoxylin-eosin staining demonstrated necrosis in ablated zones and increasing surrounding fibra bands in group I and group II, while increasing expression of Ki 67, Bcl-2, CD54, and MMP-2 in transient zones was detected using immunohistochemistry in both groups (P > .05). NADPH-d and SDH staining showed dramatic decrease of enzyme activities in ablated zones immediately after ablation, while residual viable tissues in ablated zones of group II were less than those of group I (P < .05). Conclusion  Contrast agent SonoVue enables improvement of HIFU ablation on rabbit VX2 liver tumors.     

Ablation of High Intensity Focused Ultrasound Combined with SonoVue on Rabbit VX2 Liver Tumors: Assessment with Conventional Gray-Scale US, Conventional Color/Power Doppler US, Contrast-Enhanced Color Doppler US, and Contrast-Enhanced Pulse-Inversion Harmonic US

Background  We investigated effects of high intensity focused ultrasound (HIFU) combined with contrast agent SonoVue on rabbit VX2 liver tumors by using conventional gray-scale ultrasonography (US), color/power Doppler (CD/PD) US, contrast-enhanced color Doppler (CE CD) US, and contrast-enhanced pulse-inversion harmonic (CE PIH) US. Methods  Fourteen days after implantation of VX2 tumors in livers of 50 rabbits, animals were randomly separated into two groups. Based on principles of HIFU, the volume of the tumor was divided into several parallel “planes” to be ablated. Before ablation on each “plane,” 0.2 mL SonoVue was injected in bolus via ear veins of rabbits in group II and normal saline solution was administrated in group I. Conventional gray-scale US, CD US, PD US, CE CD US, and CE PIH US were performed before and after ablation. Results  Twenty-three surviving rabbits in each group underwent HIFU ablation. Conventional gray-scale US showed ablated areas diffusely hyperechoic. On CE PIH US, coagulated areas presented perfusion defect. Both conventional gray-scale US and CE PIH US showed the ablated volume in group II was larger than that in group I. CD US and PD US demonstrated residual vessels in periphery ablated areas in group I, but no residual vessels in group II. CE CD US and CE PIH US depicted less residual vessels in periphery ablated areas in group II than that in group I. Conclusion  By enlarging ablated volume of tissue and reducing residual vessels, effects of HIFU ablation on rabbit VX2 liver tumors were enhanced by contrast agent SonoVue.     

股骨干骺端髓内血运阻断诱发兔膝关节骨性关节炎模型

目的：髓腔内血供阻断可能诱发邻近软骨退变，利用此方法可制作骨性关节炎的动物模型。方法：以髓腔内髓质刮除、骨蜡填充的方法，将20只成年大耳白兔的股骨远端干骺端髓内血供阻断。在术后8、16周时进行关节软骨的组织切片和透射电镜观察。结果：在术后8周时，关节软骨无显著性改变。在16周时关节软骨出现显著的退行性变。结论：实验证实，采用干骺端髓内血供阻断是获得满意的骨关节炎动物实验模型的好方法，并为骨关节炎的研究提供了一种新的动物模型。     

The Facilitation of Peritoneal Dissemination of a Tumor by Laparotomy in a Rabbit Model

(Received for publication on Dec. 14, 1998; accepted on July 13, 1999)     

射频消融联合亚砷酸局部治疗对兔肝VX2肿瘤MVD和VEGF表达的影响

目的探讨射频消融(RFA)联合亚砷酸(AA)局部治疗对兔肝VX2肿瘤微血管密度(microvesseldensity,MVD)和血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)表达的影响。方法建立新西兰兔肝VX2肿瘤模型28只,按随机数字表法随机均分为4组,分别给予AA(AA组)、RFA(RFA组)、RFA AA(RFA AA组)和生理盐水(对照组)治疗,于治疗后第14d处死所有实验动物,通过免疫组织化学方法检测肿瘤组织MVD及VEGF的表达,并分析MVD与VEGF表达的相关性。结果对照组、AA组、RFA组及RFA AA组肿瘤组织MVD依次降低,分别为(38.50±0.44)、(23.07±0.47)、(18.65±0.39)和(11.36±0.36)个/HP,4组间两两比较均P<0.05;肿瘤组织VEGF表达阳性例数比也依次降低,分别为7/7、5/7、4/7和2/7,4组间两两比较均P<0.05。VEGF表达强度与MVD成正相关关系(r=0.47,P<0.01)。结论RFA AA联合治疗能减少肿瘤组织的MVD,抑制VEGF的表达。     

幼年大鼠阿霉素肾病模型的复制

目的：复制幼年大鼠阿霉素肾病模型,以期有助于研究儿童微小病变型肾病综合征的发病机制,预防肾小球硬化的发生。方法：给予4～5周龄SD雄性大鼠一次性尾静脉注射阿霉素6．5mg／kg体重,复制阿霉素肾病模型。动态观察24h尿蛋白定量、血清生化指标和病理形态学的变化。结果：与对照组比较,模型组大鼠从第2周开始出现大量蛋白尿、低白蛋白血症和高脂血症（均P〈0．01）,从第4周开始出现水肿,一直持续到第12周试验结束。第4周前,模型组大鼠光镜下肾小球形态正常,透射电镜显示模型组大鼠第2周时足突轻度融合,第4周时足突弥漫性融合、消失,第8周光镜下可见肾小球局灶节段性硬化,电镜下肾小球基底膜局部增厚,第12周时肾小球硬化的表现进一步加重。结论：本模型早期呈现微小病变型肾病综合征的表现,后期出现肾小球局灶节段性硬化,提示幼年大鼠阿霉素肾病模型复制成功。     

改良单人操作大鼠原位肝移植模型的建立

目的探索改良传统手术方法单人操作大鼠原位肝移植模型的建立方法。方法 200只(100对)大鼠建立原位肝移植模型,其中80只(40对)进行正式实验,采用改良的Kamada二袖套法,再对手术中关键步骤进行改良,并对术中及术后恢复情况进行分析。结果本组80只大鼠原位肝移植手术均顺利完成。供体手术时间为(28.5±2.4)min,供肝修整时间为(10.2±1.8)min;肝上下腔静脉吻合时间为(15.3±1.9)min,门静脉吻合时间为(3.4±1.2)min,受体无肝期为(23.8±1.9)min,肝下下腔静脉吻合时间为(5.1±2.1)min,胆道重建时间为(3.1±0.9)min。整个手术过程中供、受体出血量均不足0.5 ml。40只受体大鼠,术后2 d成活率为90.0%(36/40),3只死于肝上下腔静脉缝合处出血,1只死于无肝期过长;术后7 d成活率为82.5%(33/40),3只均死于腹腔内感染。结论在单人操作建立大鼠原位肝移植模型中,通过腹主动脉和下腔静脉整块游离行腹主动脉灌注供肝、精细解剖左隔下静脉三角、术中热凝控制出血等方面的改良可减少手术并发症的发生,保证供肝质量,提高大鼠成活率。