紫檀芪对小鼠缺血性脑损伤的神经保护机制研究

目的:探索紫檀芪(PTE)对小鼠缺血性脑损伤中的保护作用及机制。方法:将C57雄性C57BL/6J小鼠分为假手术组(sham)、脑缺血再灌注损伤组(IR)、紫檀芪治疗组(PTE+IR)和紫檀芪阻断剂ZnPP抑制紫檀芪治疗组(PTE+ZnPP+IR),其中PTE的剂量为5 mg/kg,于脑缺血再灌注损伤(IR)前连续5 d每天腹腔给药1次,ZnPP以3 mg/kg的剂量于IR前30 min及IR后24 h分别腹腔给药1次;然后于缺血性脑损伤后0、2、12、24 h及48 h(IR0、IR2、IR12、IR24 h及IR48 h)对小鼠进行神经行为学评分;最后于IR48 h对小鼠进行干湿比重法脑水含量测定,TUNEL试剂盒检测细胞凋亡,Western Blot检测caspase-3及cleaved caspase-3蛋白的表达。结果:PTE可降低缺血性脑损伤后小鼠神经行为学评分、减轻脑水含量、降低细胞凋亡率及下调凋亡蛋白cleaved caspase-3的表达而保护神经细胞,但是PTE的这些神经保护作用可被其抑制剂ZnPP逆转。结论:PTE在鼠脑缺血再灌注损伤中具有明确的保护作用,其机制与减少细胞凋亡有关。     

Aβ25-35致PC12细胞凋亡和线粒体跨膜电位损伤关系研究

目的:探讨不同浓度Aβ25-35致PC12细胞凋亡和线粒体跨膜电位相关性。方法:体外培养大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞,Aβ25-35160、80、40、20、10、5、2.5μmol.L-17个浓度刺激PC-12细胞,CCK-8法观察细胞活力,Annexin-V/FITC双染后流式细胞仪检测细胞凋亡率,荧光显微镜观察hochest33342/PI双染后细胞形态,罗丹明染色后荧光显微镜检测细胞线粒体跨膜电位变化。结果:同正常组比较,Aβ25-35刺激PC-12细胞后,细胞活力逐渐下降,并呈时间和剂量依赖性,20μmol.L-1以上浓度Aβ25-35刺激12 h后PC-12细胞的细胞活力呈明显下降(P<0.05),凋亡率明显增加(P<0.05)。PC-12细胞有核浓缩和凋亡小体的产生,甚至出现死亡现象,线粒体跨膜电位下降。20μmol.L-1以下各浓度组对PC12细胞活力、细胞凋亡率、线粒体跨膜电位无明显影响(P>0.05)。结论:Aβ25-35刺激PC-12后致细胞凋亡与线粒体跨膜电位下降呈正相关,20μmol.L-1刺激12 h即可致理想的PC12细胞凋亡模型。     

紫檀芪对人结直肠癌细胞生物行为的影响及作用机制研究北大核心CSCD

目的:探讨紫檀芪对人结直肠癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响及其对LncRNA ELFN1-AS1/miR-1205的调控作用。方法:体外培养结直肠癌细胞Caco-2,加入不同剂量的紫檀芪处理细胞,将正常培养的Caco-2细胞作为对照组;si-NC、si-ELFN1-AS1分别转染至Caco-2细胞(si-NC组、si-ELFN1-AS1组),pcDNA、pcDNA-ELFN1-AS1分别转染至Caco-2细胞后加入含有紫檀芪的培养基处理细胞(紫檀芪+pcDNA组、紫檀芪+pcDNA-ELFN1-AS1组);qRT-PCR检测ELFN1-AS1、miR1205的表达量;CCK-8、平板克隆形成实验、流式细胞术、划痕实验与Transwell小室分别检测细胞增殖、克隆形成、凋亡、迁移及侵袭;双荧光素酶报告基因实验检测ELFN1-AS1与miR-1205的靶向关系。结果:与对照组相比,紫檀芪不同剂量组ELFN1-AS1的表达水平均降低(P<0.05),miR-1205表达水平均升高(P<0.05),并可抑制细胞活性、克隆形成、迁移及侵袭(P<0.05),促进细胞凋亡(P<0.05);与si-NC组相比,si-ELFN1-AS1组miR-1205表达水平升高(P<0.05),可抑制细胞活性、克隆形成、迁移及侵袭(P<0.05),促进细胞凋亡(P<0.05);ELFN1-AS1可靶向调控miR-1205;ELFN1-AS1过表达可明显逆转紫檀芪对结直肠癌细胞生物学行为的调控作用。结论:紫檀芪可通过调控ELFN1-AS1/miR-1205从而降低结直肠癌细胞的增殖、克隆形成、迁移、侵袭能力,并可促进细胞凋亡。     

紫檀芪对宫颈癌细胞自噬及SIRT1-FoxO信号通路的影响

目的:探讨紫檀芪(PTE)对宫颈癌细胞自噬及SIRT1-FoxO信号通路的影响。方法:以人宫颈癌HeLa细胞作为研究对象。采用CCK-8法和流式细胞术分别测定不同浓度的PTE对HeLa细胞活力和凋亡率的影响;透射电镜观察细胞中自噬体数目;qPCR测定细胞中SIRT1和FoxO的mRNA表达;Western blot测定细胞中SIRT1、FoxO、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、p62、Bax和Bcl-2水平。结果:PTE作用于HeLa细胞24和48 h后,细胞活力抑制率随浓度增加而升高。与0μmol/L PTE相比,15、30和60μmol/L PTE处理后,HeLa细胞凋亡率、细胞中自噬体数目及Bax、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、SIRT1和FoxO水平显著升高(P0.05),Bcl-2和p62水平显著降低(P0.05),且呈浓度依赖性。结论:PTE可能通过激活SIRT1-FoxO信号通路诱导HeLa细胞自噬和凋亡,从而抑制HeLa细胞活力。     

p53AIP1基因转染对PC-3M人前列腺癌细胞生物学特性的影响

目的观测p53调节的凋亡诱导蛋白1(p53AIP1)对PC-3M人前列腺癌细胞的增殖、细胞周期、凋亡、侵袭及迁移的影响。方法构建真核载体pDC316-p53AIP1,并进行双酶切及PCR鉴定。在LipofectamineTM2000介导下转染至体外培养的PC-3M人前列腺癌细胞系中,Western blot法检测其表达,CCK-8法检测PC-3M细胞增殖情况,流式细胞术分析PC-3M细胞周期变化和annexinV-FITC/PI结合流式细胞术凋亡情况,TranswellTM实验检测p53AIP1对细胞迁移及侵袭能力的影响。结果成功构建了pDC316-p53AIP1真核表达载体,重组质粒转染PC-3M细胞后,Western blot法检测p53AIP1在PC-3M细胞中有表达,CCK-8结果显示表达的p53AIP1能抑制PC-3M细胞增殖(P0.05),流式细胞术检测细胞周期阻滞在S/G2-M期(P0.05)且p53AIP1能促进PC-3M细胞凋亡,TranswellTM侵袭和迁移实验显示p53AIP1使细胞侵袭迁移能力均降低(P0.05)。结论p53AIP1抑制PC-3M细胞的周期、增殖、侵袭及迁移,并能促进其凋亡。     

E2F陷阱DNA对前列腺癌PC-3M细胞凋亡的诱导

目的：为观察转录因子E2F陷阱DNA 对雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC-3M增殖和凋亡的影响。方法：采用脂质体lipofectamine将E2F decoy DNA、ARE decoy DNA和control decoy DNA分别转染PC-3M细胞，MTT检测其对细胞增生的影响，倒置相差显微镜观察细胞形态变化，流式细胞术检测细胞凋亡率，并进行染色体DNA断裂的测定；通过RT-PCR检测转染的PC-3M细胞中c-Myc mRNA、cyclin D1 mRNA表达水平的变化，通过Western blotting检测细胞中c-Myc蛋白、cyclin D1蛋白表达水平的变化。结果：E2F decoy DNA转染后的PC-3M细胞的生长受到明显抑制;转染后的细胞形态变化符合凋亡的典型改变，染色体断裂明显,细胞凋亡率为26.35%；c-Myc、cyclin D1的表达受到抑制。结论：E2F decoy DNA可诱导雄激素非依赖性前列腺癌PC-3M凋亡和抑制细胞增殖,其机制可能涉及到c-Myc mRNA、cyclin D1的表达变化。     

DIM增强顺铂抑制PC-3细胞增殖及诱导凋亡的效应

目的：观察顺铂(DDP)和3，3-二吲哚基甲烷(3,3-diindolylmethane ,DIM)联合应用对人前列腺癌PC-3细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用MTT法检测PC-3细胞增殖抑制情况，用流式细胞术及吖啶橙染色法分析细胞凋亡的变化，用RT-PCR检测抑癌基因p21的表达变化。结果:60 μmol.L-1的DIM 与0.4 mg·L^-1的DDP 联合可有效抑制PC-3细胞增殖并诱导其凋亡，其效果与单用4 mg·L-1DDP相同。DIM与DDP联合试验中细胞生长抑制率和凋亡率也明显高于单用DIM处理组（P＜0.05）。RT-PCR结果表明：单用DIM和DIM与DDP联合用药都能明显增强p21基因的表达，但联合用药的效果更明显。结论:DIM能显著增强DDP对PC-3细胞的增殖抑制和诱导凋亡的效应。     

土槿皮乙酸诱导脑胶质瘤细胞株U87阻滞于M期并发生凋亡

目的:通过研究土槿皮乙酸对脑胶质瘤细胞株U87增殖与凋亡的影响,探讨土槿皮乙酸对脑胶质瘤的潜在应用价值。方法:用不同浓度土槿皮乙酸处理U87细胞,并于不同时点观察细胞形态改变;采用MTS法对U87细胞进行细胞活力测定;采用流式细胞术和Western blot法检测土槿皮乙酸对细胞周期的影响;采用Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;利用Western blot法检测caspase通路相关蛋白(cleaved PARP、caspase-3、procaspase-9和caspase-8)的变化情况。结果:土槿皮乙酸明显抑制脑胶质瘤U87细胞的活力,能使细胞阻滞于M期,并通过caspase通路诱导细胞发生凋亡。结论:土槿皮乙酸能使脑胶质瘤细胞株U87细胞阻滞于M期,并诱导其凋亡。     

麦冬皂苷B对前列腺癌PC-3细胞增殖、侵袭和迁移的影响

目的 探讨麦冬皂苷B对前列腺癌PC-3细胞增殖、侵袭和迁移的影响及可能机制.方法 体外培养PC-3细胞,分别以5、10、20μmol/L麦冬皂苷B处理后,MTT实验检测PC-3细胞增殖能力;Transwell实验检测PC-3细胞迁移和侵袭能力;流式细胞术检测PC-3细胞的细胞周期变化及细胞凋亡水平;Western blot检测细胞周期蛋白Dl(cyclin D1)和基质金属蛋白酶-2/9(matrix metalloproteinase-2/9,MMP-2/9)的表达.结果 不同浓度麦冬皂苷B处理后,PC-3细胞的细胞增殖能力、迁移和侵袭能力降低(P＜0.01);G0/G1期细胞比例与细胞凋亡率明显升高(P＜0.01);PC-3细胞cyclinD1、MMP-2与MMP-9的表达水平均明显降低(P＜0.01).结论 麦冬皂苷B抑制人前列腺癌PC-3细胞增殖、侵袭及迁移,促进凋亡.     

NEU3对人前列腺癌DU145细胞生物学行为的影响

目的:探讨神经氨酸酶3(NEU3)与人前列腺癌DU145细胞活力、侵袭和凋亡的关系,并探讨其分子机制。方法:体外培养人前列腺癌DU145细胞,并分为空白对照组和处理组,处理组再分别给予神经氨酸酶活性抑制剂DANA处理和RNA干扰靶向沉默NEU3,采用CCK-8法检测细胞的活力;Transwell法检测细胞侵袭能力;q PCR法检测2种处理方式对凋亡抑制蛋白Bcl-2 mRNA水平的影响;Western blot法检测2种处理方式对NEU3、基质金属蛋白酶2(MMP2)和Bcl-2表达的影响;流式细胞术检测细胞凋亡水平。结果:与空白对照组相比,DANA处理后前列腺癌细胞的NEU3表达无明显变化,细胞活力增强,MMP2蛋白表达减少,侵袭力减弱,凋亡无明显变化,Bcl-2的mRNA和蛋白表达减少(P 0.05);NEU3沉默后NEU3蛋白表达减少,细胞活力增强,MMP2蛋白表达和细胞侵袭力无明显变化,凋亡能力增强,Bcl-2的mRNA和蛋白表达均下降(P 0.05)。结论:抑制NEU3可以减弱人前列腺癌DU145细胞活力,增强细胞凋亡能力,但对侵袭能力无明显影响。     

局部注射辛伐他汀对骨质疏松大鼠股骨髁骨小梁的改建效应

背景：局部注射具有成骨作用的辛伐他汀,可显著增加骨质疏松大鼠股骨颈及股骨髁部的骨密度及力学强度,分析局部注射辛伐他汀对股骨髁骨小梁的影响。 目的：进一步研究骨质疏松大鼠股骨内局部注射辛伐他汀对股骨髁骨小梁的影响。为将辛伐他汀应用于临床骨质疏松局部治疗提供实验基础。 方法：18只雌性SD大鼠双侧卵巢切除后3个月,制备大鼠骨质疏松模型。实验大鼠随机数字表法均分为3组,分别在实验大鼠的右侧股骨髓腔内单次注射辛伐他汀溶液5 mg、10 mg,对照组单纯注射空白载体。分别在注射后1个月处死大鼠并取材。Micro-CT扫描并定量分析骨组织形态变化。 结果与结论：给药后1个月,Micro-CT扫描结果显示,辛伐他汀治疗组的骨微结构参数如骨皮质厚度、骨小梁密度及连接率明显优于对照组。说明疏松骨骼单次注射小剂量辛伐他汀可显著促进股骨髁部骨小梁改建,改善骨骼微结构,可为强化局部、防治骨质疏松骨折的新选择进一步提供实验基础。     

Level of functioning of siblings and parents of probands of varying degrees of retardation

A further analysis of already published data supports the position that retardates of low ability level less frequently have retarded siblings, retarded parents, and parents low in occupational level than do retardates higher in ability level. The analysis supports the position that there are two types of retarded individuals, persons retarded as a result of gene or chromosomal anomalies, brain injury, etc., who more frequently occur in the lower-level retardate group, and persons whose retardation represents polygenic segregation, who more frequently occur in the higher-level group.     

石斛属民族药用植物的分类及生药学研究

中药石斛早在《神农本草经》中就被列为上品,其应用历史悠久,具有养阴生津、补肾益气、润喉护嗓、活血明目、抗癌防老等功效。本文对国内外石斛属民族药用植物的分类及生药学研究进行了综述。     

Effect of route of antitoxin administration on efficacy of treatment of experimental tetanus

The efficacy of treatment with Diaform-3 antitoxin, given by either intracisternal or intralumbar injection in a dose of 400 i.u./kg, was compared in experiments on 100 rabbits with ascending, hematogenous, and cerebral tetanus caused by injection of 1 c.l.d. of tetanus toxin. Intracisternal injection of the antitoxin was found to be three times more effective than intralumbar (the proportion of animals cured was 31.4 and 10.2% respectively). The latter was effective only in animals with ascending tetanus, evidently because the portal of entry of the toxin into the CNS was along the peripheral nerves of the hind limbs.Central Research Laboratory, L'vov Medical Institute. (Presented by Academician of the Academy of Medical Sciences of the USSR A. M. Chernukh.) Translated from Byulleten' Éksperimental'noi Biologii i Meditsiny, Vol. 86, No. 8, pp. 212–213, August, 1978.     

膝关节骨性关节炎的关节镜治疗体会

目的我科自2001～2005年4月对59例67膝的骨性关节炎（0A），进行关节镜检查及镜下清理术。方法镜检：膝关节骨性关节炎伴不同程度滑膜炎，滑膜皱壁粘连纤维片，关节软骨不同程度破坏。镜下清除增生滑膜，松解粘连，去除剥脱软骨、修复关节面。结果随访2月～4年，平均1.5年，术后综合评估2月～1年，优良率94％；1～2年，优良率79.2％；2年以上优良率54.8％。结论关节镜对膝关节骨性关节炎诊断能提供了比较全面的资料，并对骨性关节炎早期有良好疗效，具有创伤小、恢复快、并发症少和重复治疗等优点。     

Effect of ultralow doses of thyroliberin on microviscosity of lipid components of biological membranes

Effects of the regulatory peptide thyroliberin on microviscosity of lipid components of endoplasmic reticulum biological membranes in mouse hepatocytes were studied by electron paramagnetic resonance. Thyroliberin in a concentration of 10⁻³–10⁻¹⁸ M decreased microviscosity of surface layers of membrane lipids. This decrease was the most pronounced (30%) under effects of 10⁻¹⁰ and 10⁻¹⁶ M thyroliberin. Physiological effects of thyroliberin corresponded to its influence on the membrane structure. Translated fromByulleten' Eksperimental'noi Biologii i Meditsiny, Vol. 129, No. 1, pp. 38–40, January, 2000     

Assessment of the efficacy of treatment of hemangiomas

Assessment of the aftereffects of cryoexposure and ultrahigh-frequency cryoexposure on hemangioma tissue of various types, cavernous and squamous, showed a higher cryogenic effect in hemangiomatous tissue preexposed to ultrahigh-frequency waves. A quantitative criterion is proposed for assessing the efficacy of the studied methods of exposure. Translated fromByulleten' Eksperimental'noi Biologii i Meditsiny, Vol. 119, N ^o 6, pp. 669–672, June, 1995     

Localization of cytoplasmic antigens of cells of differentiated layers of the epidermis in epithelium of the human thymus

N. F. Gamaleya Research Institute of Epidemiology and Microbiology, Academy of Medical Sciences of the USSR, Moscow. (Presented by Academician of the Academy of Medical Sciences of the USSR S. V. Prozorovskii.) Translated from Byulleten' Éksperimental'noi Biologii i Meditsiny, Vol. 109, No. 3, pp. 308–310, March, 1990.