GSK3β在病理性瘢痕中的表达和意义

目的 研究Wnt/β-catenin 通路中糖原合成酶激酶3β(GSK 3β)在病理性瘢痕中的表达情况,以确定GSK3β在病理性瘢痕中的作用.方法 利用免疫组化技术检测GSK 3β在30例瘢痕疙瘩(A组),30例增生性瘢痕(B组)及20例正常皮肤(C组)中的表达,并进行统计学分析.结果 GSK 3β在A、B组中的表达与C组比较,其差异有统计学意义(P ＜0.05),但A、B组之间的差异无统计学意义(P ＞0.05).结论 GSK 3β是病理性瘢痕形成的重要机制之一,Wnt/β-catenin通路的激活在病理性瘢痕形成中起到重要作用.     

PTEN和COX-2在病理性瘢痕中的表达及其相关性研究

目的研究抑癌基因PTEN和COX-2在病理性瘢痕中的表达及其相关性。方法应用免疫组化SP法检测正常皮肤24例、扁平瘢痕20例、增生性瘢痕32例和瘢痕疙瘩16例组织中PTEN、COX-2蛋白的表达。结果病理性瘢痕（瘢痕疙瘩、增生性瘢痕）组织中PTEN蛋白表达显著低于正常皮肤、扁平瘢痕（P〈0．05）,而COX-2蛋白表达显著高于正常皮肤、扁平瘢痕（P〈0．05）;4类组织中PTEN蛋白和COX-2蛋白呈负相关（P〈0．05）。结论COX-2及PTEN是病理性瘢痕发生发展中重要的调控因子,两者呈负相关。     

I—TAC和MDC在病理性瘢痕中的表达及意义

目的 研究γ干扰素诱导的T细胞α亚族化学趋化因子(I-TAC)和巨噬细胞起源的趋化因子(MDC)在病理性瘢痕中的表达,探讨其在病理性瘢痕发病机制中的作用.方法 应用免疫组化技术检测I-TAC和MDC两种趋化因子在24例瘢痕疙瘩患者(A组)、33例增生性瘢痕患者(B组)及15例正常皮肤组织(C组)中的表达,并进行统计学分析.结果 I-TAC和MDC在A、B组中呈高表达,与C组比较其差异有统计学意义(P＜0.01),但A、B组之间比较其差异无统计学意义(P＞0.05).结论 I-TAC和MDC可能通过趋化T淋巴细胞定向迁移,引发一系列免疫炎性反应,从而促进病理性瘢痕的形成.     

β-catenin在病理性瘢痕中的表达和意义

目的 探讨β-连环蛋白(β-catenin)在病理性瘢痕组织中的表达及β-catenin和Wnt/β-catenin信号转导通路在病理性瘢痕发病机制中的作用.方法 应用western blotting法半定量检测β-catenin在30例增生性瘢痕(H组)、30例瘢痕疙瘩(K组)与30例正常皮肤(N组)中的表达情况,并进行统计学分析.结果 β-catenin在增生性瘢痕、瘢痕疙瘩中的表达量均明显高于正常皮肤,其差异有统计学意义(P ＜0.01),增生性瘢痕与瘢痕疙瘩之间比较存在差异,但无统计学意义(P ＞0.05).结论 β-catenin的过度表达与病理性瘢痕的形成有关,Wnt/β-catenin信号转导通路在病理性瘢痕的形成中起着重要作用.     

Smad2、Smad3和β-catenin在病理性瘢痕中的表达和意义

目的 研究Smad2、Smad3和β-catenin在病理性瘢痕中的表达,探讨TGF-β/Smad信号传导通路和Wnt/β-catenin信号传导通路在病理性瘢痕发病机制中的作用及相互关系.方法 应用免疫组化技术检测Smad2、Smad3和β-catenin在30例瘢痕疙瘩(A组)、30例增生性瘢痕(B组)及20例正常皮肤(C组)中的表达,并进行统计学分析.结果 Smad2、Smad3在A、B组中的阳性率高于C组,但其差异无统计学意义(P＞0.05),但在核内积聚较C组明显,且其差异有统计学意义(P＜0.05).βcatenin在A、B组中的表达与C组比较,其差异有统计学意义(P＜0.01),但A、B组之间的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 TGF-β/Smad信号传导通路与Wnt/β-catenin信号传导通路联合作用,导致病理性瘢痕形成.     

病理性瘢痕组织中SDF-1、CXCR4的表达

目的:检测病理性瘢痕组织中SDF-1、CXCR4的表达。方法:采用免疫组织化学SABC法检测58例病理性瘢痕(增生性瘢痕30例,瘢痕疙瘩28例)、30例非病理性瘢痕及28例正常皮肤组织中SDF-1、CXCR4的表达。结果:SDF-1在病理性瘢痕中的阳性表达率均高于非病理性瘢痕与正常皮肤组织(P<0.01),且在瘢痕疙瘩中的阳性表达率高于增生性瘢痕(P<0.05)。CXCR4在病理性瘢痕、非病理性瘢痕及正常皮肤组织中均为低表达或不表达,且各组间的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:SDF-1/CXCR4生物轴在病理性瘢痕形成过程中的作用是通过SDF-1的表达升高实现的。     

PI3K/AKT信号通路与结肠直肠癌关系的研究进展

丝/苏氨酸激酶(serine/threonine kinase,AKT)是多个信号转导通路中的关键中枢效应蛋白,在维持细胞正常生理功能方面发挥重要作用,通过对其磷酸化修饰产生快速的细胞内变化来应对环境的改变,而磷酸化修饰作用的失调导致癌蛋白异常活化是细胞恶性转化及肿瘤发生的重要原     

甲壳素衍生物调控瘢痕疙瘩中TSG-6/PI3K/AKT通路表达的临床研究

目的：甲壳素衍生物调控瘢痕疙瘩中肿瘤坏死因子α刺激基因6(TSG-6)/磷酸肌醇-3-激酶（PI3K）/丝苏氨酸蛋白激酶-B(AKT)通路表达的作用。方法：选择2020年1月-2021年10月笔者医院接受手术切除的76例瘢痕疙瘩患者为研究对象,根据术前是否使用甲壳素衍生物分为甲壳素组（n=41）和对照组（n=35）。手术后,收集瘢痕疙瘩组织,采用免疫组化法检测增殖细胞核抗原（PCNA）的阳性表达率;采用TUNEL法检测细胞凋亡率;采用western?blot检测TSG-6、p-PI3K、p-AKT、鼠双微基因2(MDM2)、B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）、裂解型caspase-3(Cleaved?caspase-3)的表达水平;采用酶联免疫吸附法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β、IL-6的含量。结果：甲壳素组瘢痕疙瘩组织中PCNA阳性表达率、p-PI3K、p-AKT、MDM2、Bcl-2的表达水平、TNF-α、IL-1β、IL-6的含量低于对照组（P<0.05）,细胞凋亡率、TSG-6及Cleaved?caspase-3的表达水平高于对照组（P<0.05）...     

TGF-β1、Smad 3和P-Smad 2/3在病理性瘢痕中的表达

目的检测瘢痕疙瘩、增生性瘢痕和正常皮肤组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad3和P-Smad2/3的表达情况,探讨上述细胞因子对瘢痕产生的重要性及影响。方法采用免疫组织化学的方法检测上述3种细胞因子在3种不同组织共36例标本中的表达,ImagePro-Plus6.0软件进行阳性面积测量和细胞计数。结果TGF-β1在瘢痕疙瘩和增生性瘢痕中均为增强高表达,而在正常皮肤中几乎不表达;Smad3在三组标本间表达水平无显著性差异;P-Smad2/3在瘢痕疙瘩中表达最强,增生性瘢痕次之,正常皮肤组织中最低。结论TGF-β1表达增强是病理性瘢痕产生的重要原因,P-Smad2/3的表达水平则可认为与瘢痕增生程度密切相关。     

p53基因在病理性瘢痕中的表达及意义

目的 探讨p53基因在病理性瘢痕中的表达及其发生机制,为临床防治病理性瘢痕提供分子生物学依据.方法 选取病理性瘢痕患者30例,将手术切除后弃用的瘢痕组织作为实验组,根据临床表现及病理性质分为瘢痕疙瘩A组(10例),增生性瘢痕增生期B组(10例),增生性瘢痕成熟期C组(10例).选取普通瘢痕患者及正常皮肤者各10例,分别设为对照D,E组.将每例标本行石蜡包埋后制成3张切片,1张行HE染色,2张行免疫组织化学染色.于显微镜下观察、拍照,并计算各组P53蛋白阳性细胞的表达率.结果 P53蛋白的表达:在A,B,C组中,主要表达于表皮基底层细胞和部分成纤维细胞的胞核中;在D组中,主要表达于少部分成纤维细胞的胞核中;在E组中,主要表达于表皮基底层细胞的胞核中.A,B,C组的阳性表达率分别为90%,80%,60%,D,E组的阳性表达率分别为30%,10%.实验组与对照组比较,其差异有统计学意义(P<0.01);在实验组中,A组与B组比较,差异有统计学意义(P<0.05),A组与C组比较,差异也有统计学意义(P<0.01),而B组与C组比较,差异无统计学意义(>0.05).在病理性瘢痕组织中,P53蛋白呈高表达;而在普通瘢痕及正常皮肤组织中,P53蛋白呈低表达.结论 p53基囚参与病理性瘢痕的形成,且在不同类型的瘢痕中所起到的作用不同.因此,抑制P53蛋白的表达,可能成为防治病理性瘢痕的一个有效途径.     

PTEN、P13 K和Akt蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨PTEN、PI3K和Akt在膀胱移行细胞癌(BTCC)中的表达及其与BTCC临床病理特征的关系,以及PTEN、PI3K和Akt三者之间的相关性。方法:采用免疫组织化学S-P法检测60例BTCC组织和10例正常膀胱黏膜中PTEN、PI3K和Akt的蛋白的表达。结果:BTCC组织中PTEN、PI3K、Akt蛋白的阳性表达率分别为58.33%(35/60)、71.67%(43/60)和56.67%(34/60)。BTCC中PTEN、PI3K、Akt蛋白的阳性表达率与正常膀胱黏膜组织相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。在60例BTCC组织中,PTEN分别与PI3K、Akt表达之间均呈显著负相关性(P<0.05),PI3K与Akt表达呈显著正相关性(P=0.001)。结论:PTEN、PI3K、Akt蛋白的表达均与BTCC发生发展及侵袭有关,但PTEN与BTCC发生发展的关系更加密切。在BTCC的发生发展中,PI3K、PTEN的作用可能互相拮抗;PTEN蛋白的表达缺失可能与Akt过表达有关;PI3K和Akt协同促进BTCC的恶性进展。     

病理性瘢痕中整合素链激酶、磷脂酰肌醇3激酶蛋白和mRNA表达及其临床意义

目的探讨正常皮肤、非病理性瘢痕及病理性瘢痕中整合素链激酶和磷脂酰肌醇3激酶的表达情况。方法统计整形外科病理性瘢痕40例,非病理性瘢痕12例,正常皮肤组织16例;采用免疫组织化学法和蛋白印迹及荧光实时定量PCR,检测3种组织中整合素链激酶和磷脂酰肌醇3激酶蛋白及mRNA表达情况。结果整合素链激酶蛋白在正常皮肤、非病理性瘢痕及病理性瘢痕中的阳性率分别是25．00％,41．67％,85．00％。磷脂酰肌醇3激酶蛋白在3种组织中的阳性率分别是12．50％,16．67％,80．00％;蛋白印迹及荧光实时定量PCR结果显示,与正常皮肤及非病理性瘢痕相比,病理性瘢痕中整合素链激酶、磷脂酰肌醇3激酶蛋白及mRNA表达均有统计学意义。病理性瘢痕中整合素链激酶与磷脂酰肌醇3激酶蛋白表达呈正相关（P=0．001,r=0．614）。结论整合素链激酶和磷脂酰肌醇3激酶蛋白可能通过磷脂酰肌醇3激酶／PKB信号通路参与病理性瘢痕的形成;整合素链激酶和磷脂酰肌醇3激酶蛋白协同促进病理性瘢痕的形成;整合素链激酶和磷脂酰肌醇3激酶蛋白靶向治疗阻止组织病理性瘢痕的形成有望成为可能。     

PTEN基因转染对人膀胱癌细胞BIU-87中P13K—Akt信号通路的影响

目的研究抑癌基因PTEN转染对人膀胱癌细胞BIU-87中P13K—Akt信号通路的作用。方法将携有PTEN基因的重组真核表达质粒pBp-PTEN转化大肠杆菌DH5=并扩增，抽提纯化质粒并进行酶切鉴定，pBp-PTEN体外转染BIU-87细胞（pBp-PTEN—BIU87），筛选稳定转染的细胞并扩增培养，以转染了空质粒pBp的BIU-87细胞（pBp—BIU87）和正常BIU-87细胞为对照，用RT—PCR检测PTEN的表达情况。将PTEN基因的真核表达质粒转染膀胱癌细胞BIU一87（pBp—PTEN—BIU87），以BIU87细胞和pBp-BIU87细胞为对照，应用Wester blot方法检测三组细胞P110（P13K的催化亚单位）、磷酸化P110、Akt和磷酸化Akt表达的情况。结果3种细胞P110和Akt蛋白总水平没有变化，但磷酸化P110和磷酸化Akt在PTEN转染细胞中的表达明显弱于对照组。结论PTEN是通过对PI3K—Akt信号传导途径的负调控而抑制肿瘤的形成。PTEN—PI3K—Akt途径可能是PTEN抑癌作用的重要机制。     

肾透明细胞癌细胞系中NOTCH1调控PTEN／PI3K／AKT信号通路促进肿瘤进展

目的：研究NOTCH1在肾透明细胞癌细胞系中的生物功能及其对PTEN／P13K／AKT信号通路的调控。方法：在肾透明细胞癌细胞系Caki-2及人肾小管上皮细胞系HKC中沉默NOTCH1,检测其对细胞增殖,细胞周期,凋亡以及肿瘤细胞侵袭和迁徙能力的影响。Western—blot和qrtPCR检测HESl,PTEN,AKT、（p-S473）蛋白及mRNA的变化。结果：在两株细胞中,沉默NOTCH1均能抑制细胞生长,促进细胞周期阻滞,抑制肿瘤细胞的侵袭和迁徙。沉默NOTCHl引起HESl与AKT（p-s473）蛋白下降,PTEN的蛋白及mRNA水平明显升高。沉默HES1引起PTEN蛋白及mRNA升高。结论：在肾透明细胞癌细胞系中,过度活化的NOTCHl通过调节PTEN/PI3K/AKT信号通路起促癌作用,这为肾透明细胞癌的治疗提供了新的治疗策略。     

磷脂酰肌醇-3-激酶在结直肠癌组织中的表达及意义

目的:通过检测结直肠腺癌组织中磷酯酰肌醇-3-激酶(PI3K)蛋白的表达情况,探讨其表达特点及临床意义。方法:采用免疫组织化学光波/微波(Lightwave/Microwave,LW/MW)-EliVisionTM法检测100例结直肠癌、30例正常黏膜组织中PI3K的表达情况,并分析其与结直肠癌临床病理特点的关系。结果:PI3K蛋白在正常黏膜及结直肠癌组织中表达阳性率分别为6.67%(2/30)、56.00%(56/100),差异有统计学意义(P0.01)。PI3K蛋白表达与结直肠癌TNM分期、浆膜浸润和淋巴结转移相关(P0.05);而与年龄、性别、肿瘤大小、分化程度等指标不相关(P0.05)。结论:PI3K过度激活在结直肠癌的发生、发展、侵袭、转移中起着重要作用,这为其进行药物治疗及分子靶向治疗提供了新的着眼点。     

软骨细胞凋亡与PI3K/Akt途径及相关信号分子的研究进展

骨性关节炎(osteoarthritis,OA)是指关节面软骨发生原发性或继发性退变及结构紊乱,伴随软骨下骨质增生、软骨剥脱,从而使关节逐渐破坏、畸形,最终发生关节功能障碍的一种退行性疾病.     

Dual efficacy of Fasudil at improvement of survival and reinnervation of flap through RhoA/ROCK/PI3K/Akt pathway

Fasudil is reported to be effective at protecting against ischaemic diseases, and at augmenting axon growth. In this study, we aim to evaluate its efficacy in promoting flap survival and reinnervation. Ninety‐two Institute of Cancer Research (ICR) mice were used and divided into the control, Fasudil, LY294002, Fasudil+LY294002 groups, receiving a daily intraperitoneal injection of normal saline, Fasudil (10 mg/kg), LY294002 (5 mg/kg), and Fasudil (10 mg/kg) + LY294002 (5 mg/kg), respectively. On days 0 and 5, the blood perfusion and diameter of the iliolumbar artery in the pedicle of the flaps in the four groups were evaluated using laser speckling contrast imaging (LSCI). On day 5, the flaps were photographed and the necrosis rate of the flaps was calculated using Photoshop CS6. In addition, tissues were harvested from the flaps and divided into two parts. One part underwent routine cryosection and immunofluorescent staining using the antibody against CD31 for evaluation of the microvascular density in the four groups. In the other part, the expression of RhoA, ROCK1+2, p‐CPI‐17, p‐MYPT, p‐PTEN, p‐PI3K, p‐Akt, and vascular endothelial growth factor (VEGF) within the flaps were determined using western blotting. Moreover, at days 0, 7, 15, and 30 after flap surgery, the axons within the flaps were evaluated using immunofluorescent staining with the antibody against Neurofilament‐200. It turned out that the necrosis rate was (24.4 ± 7.7)%, (5.2 ± 1.6)%, (29.8 ± 4.2)%, and (30.9 ± 7.1)%, respectively, in the control, Fasudil, LY294002, LY294002+Fasudil groups. There was a significant reduction in the necrosis rate of the flaps in the Fasudil group (P < .001). The LSCI and immunofluorescent staining demonstrated that Fasudil could significantly expand the diameter of the iliolumbar artery in the pedicle, boost the overall blood perfusion, and increase the microvascular density of the flaps in the Fasudil group (P < .05), which could all be abolished by PI3K inhibitor LY294002. On day 5, the expression of p‐CPI‐17, p‐MYPT, and p‐PTEN were downregulated, whereas pPI3K, p‐Akt, and VEGF were upregulated in the Fasudil group (P < .001). As for reinnervation, Neurofilament‐200 fluorescent staining revealed that at days 15 and 30 after flap harvest, only in the Fasudil group could new axons be observed. It can be concluded that Fasudil could simultaneously improve the survival and axon growth after flap harvest, a dual efficacy achieved by inhibition of the RhoA/ROCK pathway, which in turn activates /PI3K/AKT pathway.     

PI3K突变与出现镶嵌血管的结直肠癌远处转移

目的 探讨出现镶嵌血管的结直肠癌中癌细胞PI3K的突变与结直肠癌远处转移间的关系.方法 收集手术切除,并经免疫组织化学染色证实存在镶嵌血管的168例结直肠癌标本;PCR测序鉴别PI3K突变,并分析其临床、病理与随访资料,进而探讨PI3K突变在出现镶嵌血管的结直肠癌远处转移中的意义.结果 168例出现镶嵌血管的结直肠癌标本,其PI3K突变率为25.0％,外显子9突变率为15.5％,外显子20突变率为9.5％.56例患者术前即出现远处转移,其中发生PI3K突变的为20例,其远处转移率为47.6％,而未出现PI3K突变的36例,其远处转移率为28.6％,两者差异有统计学意义.随访中,发生PI3K突变的复发率及复发伴转移率与未发生PI3K突变相比,其差异均有统计学意义.结论 PI3K突变为出现镶嵌血管结直肠癌转移的相关影响因子之一,在出现镶嵌血管的结直肠癌中检测PI3K基因的突变有利于进一步判断患者预后.     

Panax Notoginseng Saponins suppresses TRPM7 via the PI3K/AKT pathway to inhibit hypertrophic scar formation in vitro

BackgroundHypertrophic scar (HS) formation, a type of dermal fibroproliferative condition, is a frequent complication in wound healing resulting from burns, severe trauma, and surgical procedures. The effects of Panax Notoginseng Saponins (PNS) on the HS formation remain relatively under-explored. Hence, this study was intended to interrogate anti-apoptosis and anti-fibrosis effects of PNS on the hypertrophic scar fibroblasts (HSFs) during HS formation and assess the involvement of TRPM7 and PI3K/AKT signaling pathway.MethodsUsing MTT and CCK-8 assays, we evaluated cell cytotoxicity and cell viability. Collagen I/III (col 1/3) and α-SMA expression levels were assessed through immunofluorescence and western blot, and cell migration, cell apoptosis and cell cycle were examined with applications of wound healing, TUNEL staining and flow cytometry. TRPM7, PI3K/AKT, TGF-β1 and related-proteins were quantified using RT-qPCR and western blot.ResultsPNS administration could suppress TRPM7 expression and the viability of HSFs in a dose-dependent manner. Moreover, PNS could restrain the HS formation and ECM deposition by decreasing col 1/3 and α-SMA synthesis, suppressing cell migration, and boosting apoptosis and G1 arrest. Notably, this study revealed that PNS inhibited PI3K/AKT activation in HSFs. Besides, knockdown of TRPM7 enhanced therapeutic effects of PNS on HSFs, but overexpression markedly reversed above mentioned effects of PNS on HSFs.ConclusionThis study suggested that PNS hampered scar formation might via inhibiting ECM and stimulating cell apoptosis by modulating the PI3K/AKT signaling. Overall, these findings in the present study could support the use of PNS for preventing HS formation, and TRPM7 may be a novel molecular target for treating HS.