羧甲基茯苓多糖的制备及抗肿瘤药效学研究

目的探讨羧甲基茯苓多糖的制备方法及其抗肿瘤活性。方法在卤代酸存在下一步法简便制备羧甲基茯苓多糖,并分别研究其体内、体外抗肿瘤活性。结果同对照组相比,羧甲基茯苓多糖在抑制昆明种小鼠H22肝癌细胞及小鼠肿瘤U-14细胞活性方面具有显著效果。结论通过简便方法制备得到了可显著提高荷瘤小鼠免疫力的羧甲基茯苓多糖,适当剂量的羧甲基茯苓多糖具有良好的抗肿瘤活性。     

羧甲基茯苓多糖的干扰素促诱生效应

本文以中药提取物羧甲基茯苓多糖为ＩＦＮ－ａ的促诱生剂，以研制其对ＩＦＮ促诱生效应。本研究以献血员白细胞为诱生细胞，以自制ＩＦＮ－ａ为启动诱生剂，以新城鸡瘟病毒为诱生剂，以不同浓度羧甲基茯苓多糖为促诱生剂。     

羧甲基茯苓多糖诱导物的临床试验

为观察羧甲基茯苓多糖的诱导物 IFN-α与 IL-2的临床疗效 ,选择流行性出血热 1 2 8例 ,以不加 IFN-α的 65例作为对照组 ;另选择晚期肿瘤 71例 ,以不加 IL-2的 2 7例作为对照组 ,结果显示总有效率治疗组优于对照组 ( P<0 .0 5 ) ,说明羧甲基茯苓多糖的诱导物 IFN-α与 IL-2是流行性出血热与肿瘤的有效治疗药物。     

羧甲基茯苓多糖对小鼠子宫颈癌U_(14)肺转移的影响

本文观察了羧甲基茯苓多糖对近交系615小鼠子宫颈癌肺转移的抑制作用。结果表明肺转移率为64％(9/16),转移灶指数为1.43个;肿瘤对照组分别为94％(15/16)及5.88个;转移灶抑制率为75.68％。对照组瘤重明显大于实验组,分别为2.46g和1.88g,抑瘤率为23.58％。上述结果提示:羧甲基茯苓多糖确有一定的抗癌活性。     

羧甲基茯苓多糖及其注射液的稳定性试验

茯苓 [Poria cocos( Schw.) Wolf]菌核中的 β-茯苓多糖 (β- pachyman)约占菌核干重的 93% ,把提取的β-茯苓聚糖进行化学结构修饰 ,可以得到具有抗肿瘤活性的茯苓多糖。为了使茯苓多糖溶于水 ,便于人体吸收 ,必须把茯苓多糖进行羧甲基化。笔者于 1 979年采用液相不振荡 -碱化     

羧甲基茯苓多糖脂质体的制备及其包封率的测定

目的制备羧甲基茯苓多糖脂质体,并测定羧甲基茯苓多糖脂质体的含量和包封率,初步探讨最佳包封的药量。方法采用薄膜分散法制备羧甲基茯苓多糖脂质体,离心分离法测定羧甲基茯苓多糖脂质体的包封率。结果离心法所得羧甲基茯苓多糖脂质体检测浓度线性范围为1～100 mg/L。羧甲基茯苓多糖脂质体的最佳包封的药量为50 mg/L,包封率为37.99%。结论羧甲基茯苓多糖脂质体的制备需要分别处理,不同浓度的羧甲基茯苓多糖脂质体有不同的包封率,测定过程中需按要求进行,明确最佳包封药量。     

羧甲基茯苓多糖对人血肿瘤坏死因子的促诱生效应

肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor，TNF)是1975年由Carswell首先发现的，近几年来研究认为TNF不仅具有直接杀死肿瘤细胞和抑制肿瘤细胞增殖效应，而且可激活T细胞表达IL-2R释放淋巴因子，增强LAK活性，促进B细胞增殖，促进抗体产生，进而又可通过免疫调节作用发挥抗感染抗肿瘤作用。     

羧甲基茯苓多糖抑制人外周血源性树突状细胞凋亡的体外研究

目的 :探讨羧甲基茯苓多糖(carboxymethytl pachymaram,CMP)对人外周血源性树突状细胞(dendritic cells,DC)凋亡的影响。方法:人外周血单核细胞经rh GM-CSF和IL-4诱导分化为不成熟DC。LPS诱导成熟的基础上分别加入不同浓度的CMP(终浓度为10、50、100 mg/L),以不加CMP为对照组,应用流式细胞术检测细胞凋亡率和趋化因子受体CCR7表达情况,Q-PCR检测CCR7基因表达情况,Western blot检测磷酸化Akt、Akt蛋白表达情况。结果:经CMP处理后DC凋亡率低于对照组,而CCR7的表达高于对照组,磷酸化Akt蛋白表达亦增高,且呈剂量依赖趋势。100 mg/L CMP处理组细胞凋亡率显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。50 mg/L和100 mg/L CMP处理组CCR7的表达和磷酸化Akt蛋白均显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:CMP能抑制成熟DC的凋亡,其机制可能是通过上调CCR7的表达,经PI3K/Akt信号通路发挥作用。     

羧甲基茯苓多糖(CMP)对类淋巴细胞的干拢素促诱生效应及其动力学研究

用不同浓度(1.25～100μg/ml)的羧甲基获苓多糖(CMP)对类淋巴细胞的干扰素促诱生,其效价比常规诱生组高10～20倍,CMP的促诱生最适浓度为25～50μg/ml,可见该药物是理想的干扰素促诱生剂。用50μg/ml浓度的CMP对本室自建的S_(801)白血病细胞系进行干扰素促诱生动力学试验,结果表明CMP加启动的促诱生动态曲线和常规诱生及启动诱生干扰素的动态曲线均在4～20小时逐渐上升,20～24小时达高峰,后逐渐下降,但在各相应时期的促诱生干扰素效价均明显高于常规诱生及启动诱生。促诱生效应的最佳时间在20～24小时。     

PED/PEA-15在前列腺癌中的表达及对前列腺癌细胞凋亡的影响

目的 通过构建PED／PEA-15特异的siRNA载体-探讨PED／PEA-15对前列腺癌细胞（PC-3）凋亡的影响。方法 应用免疫组化SP法检测前列腺癌和正常前列腺组织中PED／PEA-15的表达；用RT-PL、R法检测PC-3细胞中PED／PEA-15的表达。体外合成PED／PEA-15特异性siRNA序列．并克降入真核表达载体psiRNA-hHlnco。以脂质体法转染psiRNA-PED／PEA-15至PC-3细胞中．以RT-PCR和Western blot法检测psiRNA-PEI）／PEA-15对PED／PEA-15表达的影响；用MTT和流式细胞术检测其对PC-3细胞凋亡的影响。结果 免疫组化和RT-PCR均显示PED／PEA-15在前列腺癌中高表达；正常前列腺组织没有或只有很弱的表达。酶切和DNA测序证实合成的siRNA基因序列正确，并已被准确克隆入psiRNA-hHlnco载体。psiRNA-PEI）PEA-15可特异性抑制PC-3细胞中PED/PEA-15的表达。转染psiRNA-PED／PEA-15的PC-3细胞凋亡显著增加（P＜0．05）。结论 PED／PEA-15可阻抑前列腺癌细胞凋亡。其表达对前列腺癌的发展有重要作用。     

番茄红素对人前列腺癌PC-3细胞周期的阻滞作用

目的:研究番茄红素对人前列腺癌PC-3细胞周期的阻滞作用及分子机制.方法 体外培养PC-3细胞,采用MTT、细胞计数法、流式细胞仪和Western blotting方法分析番茄红素对PC-3细胞增殖的抑制作用、对细胞周期分布的影响及细胞周期相关蛋白的表达.结果 不同浓度番茄红素(1.5、3.0、6.0和12.0μmol/L)处理PC-3细胞48 h后,生长抑制率分别为11.34%、19.59%、30.92%、52.58%;常规培养PC-3细胞群体倍增时间为29.04 h,番茄红素浓度由1.5 μmol/L增加到12.0 μmoL/L时,其细胞群体倍增时间由36.58 h延长到88.32 h;流式细胞仪分析显示,番茄红素呈浓度依赖性将PC-3细胞阻滞在G0/G1期;在细胞周期阻滞的同时有P21 WAF1蛋白表达上调.结论 番茄红素对PC-3细胞的抑制增殖作用与G0/G1期阻滞有关,其分子机制可能与调节P21 WAF1表达有关.     

miR-370-5p对前列腺癌细胞周期及增殖的影响

目的 研究miR-370-5p导入对前列腺癌细胞株DU-145和LNCaP细胞周期和增殖的影响。方法 合成miR-370-5p（实验组）和dsControl（阴性对照组）,分别转染至两个细胞株。利用Real-time PCR和Western blot法分别检测细胞转染后p21、CDK4、Cyclin D1 mRNA和蛋白的表达变化。流式细胞术分析细胞周期变化,利用MTT法和集落形成实验分析细胞活力和增殖能力。结果 Real-time PCR结果提示,转染miR-370-5p后DU-145和LNCaP细胞中p21 mRNA水平分别上调3.43倍（P<0.01）和3.06倍（P<0.01）,CDK4 mRNA水平分别下调0.51倍（P<0.01）和0.43倍（P<0.01）,Cyclin D1 mRNA水平分别下调0.31倍（P<0.01）和0.35倍（P<0.01）。Western blot法检测结果符合这一趋势。流式细胞术检测结果显示,转染miR-370-5p后,位于S期和G₂/M期的细胞比例下降,位于G₀/G₁期的细胞比例则上升,说明细胞周期被阻滞在G₀/G₁期。MTT分析结果显示,与dsControl组相比,转染miR-370-5p后,DU-145和LNCaP细胞活力明显降低。集落形成实验显示,miR-370-5p组的集落数数量明显较少,细胞增殖能力降低。结论 miR-370-5p能显著激活前列腺癌细胞中p21蛋白的表达,抑制前列腺癌细胞周期的进展和增殖。     

康力欣胶囊对胃癌细胞株细胞周期和细胞凋亡的影响

目的 研究抗肿瘤药康力欣胶囊对胃腺癌细胞株SGC-7901细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响。方法 以康力欣胶囊2,1,0.1mg·mL-1接种于细胞12,24,36,48h后,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法测定细胞抑制率,采用流式细胞仪检测细胞周期各时相比率的变化,荧光显微镜观察法检测各组细胞凋亡的形态变化。结果 MTT检查结果显示,康力欣胶囊抑制率呈明显的时间-剂量-效应关系;细胞周期检测结果显示,康力欣胶囊作用SGC-7901细胞后将细胞周期阻滞在G1期,同时下调S期和G2期细胞比例。荧光显微镜观察结果显示,康力欣胶囊组SGC-7901出现大量激发绿色荧光的早期凋亡细胞和同时激发红色荧光的晚期凋亡细胞。结论 康力欣胶囊对SGC-7901的抑制作用可以通过阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡来实现。     

雷公藤甲素对大肠癌细胞细胞周期的调控作用

目的:观察雷公藤甲素对大肠癌SW480细胞生长增殖、细胞周期及凋亡的影响。方法:体外培养大肠癌SW480细胞,分别给予不同浓度的雷公藤甲素进行干预,采用四甲基耦氮唑蓝(MTT)比色法测定不同浓度药物对SW480细胞生长的抑制率,流式细胞术(FCM)测定SW480细胞周期及凋亡率变化。结果:MTT实验结果显示当药物浓度在20～100 mol/L之间时,体外雷公藤甲素可明显抑制SW480细胞的生长;FCM检测显示药物作用后,细胞凋亡率没有明显变化,但是S期细胞数目显著增多,细胞周期受到明显阻滞。结论:雷公藤甲素对细胞生长有明显的抑制作用,呈现时效-量效关系,其机制可能是使细胞周期发生阻滞。     

Regulatory Effect of Triptolide on Cell Cycle of Colorectal Cancer Cells

目的:观察雷公藤甲素对大肠癌SW480细胞生长增殖、细胞周期及凋亡的影响.方法:体外培养大肠癌SW480细胞,分别给予不同浓度的雷公藤甲素进行干预,采用四甲基耦氮唑蓝(MTT)比色法测定不同浓度药物对SW480细胞生长的抑制率,流式细胞术(FCM)测定SW480细胞周期及凋亡率变化.结果:MTT实验结果显示当药物浓度在20～100 mol/L之间时,体外雷公藤甲素可明显抑制SW480细胞的生长;FCM检测显示药物作用后,细胞凋亡率没有明显变化,但是S期细胞数目显著增多,细胞周期受到明显阻滞.结论:雷公藤甲素对细胞生长有明显的抑制作用,呈现时效-量效关系,其机制可能是使细胞周期发生阻滞.     

人参胡核汤对人前列腺癌PC-3细胞周期的影响

目的：探讨人参胡核汤对人前列腺癌PC-3细胞周期的影响。方法：参照血清药理学方法,制备4组合药血清,即人参胡核汤高、中、低剂量及空白组。各组作用PC-3细胞48h、72h后,观察细胞形态学变化、细胞周期分布、凋亡率变化。结果：人参胡核汤各组含药血清作用48h、72h后,表现出不同程度的细胞皱缩,边缘毛糙,细胞核固缩或碎裂,细胞体积缩小;各组均可阻滞G1期向S期的转化;促进细胞不同程度的凋亡。结论：人参胡核汤含药血清可使PC-3细胞的形态发生改变、阻滞G1期向S期的转化、促进PC-3细胞凋亡。     

青藤碱对人结肠癌细胞株SW480增殖和细胞周期的影响

目的 研究青藤碱对人结肠癌SW480细胞增殖和细胞周期的影响.方法 用不同浓度的青藤碱处理体外培养的人结肠癌SW480细胞24、48、72h后,采用CCK法检测细胞的增殖活性,采用流式细胞术检测细胞的细胞周期分布,并用光镜和透射电镜观察SW480细胞的形态学变化.结果 青藤碱在体外可抑制SW480细胞的增殖,并呈时间和剂量依赖性.干预48h后,中、低浓度的青藤碱（8mmol/L、4mmol/L）可诱导SW480细胞G1期细胞比例增加,而高浓度的SIN（16mmol/L、10mmol/L）可诱导G1期、G2期细胞比例增加.光镜与电镜下均见凋亡细胞增多.结论 青藤碱在体外能抑制人结肠癌SW480细胞增殖和诱导该细胞系的凋亡,其机制可能与其阻滞细胞周期进程有关.     

去势抵抗性前列腺癌形成机制的研究进展

前列腺癌是男性最常见的恶性实体肿瘤之一,去势治疗是其主要的初期治疗手段,但其中大部分患者仍会复发、转移及进展为去势抵抗性前列腺癌。机体通过多种途径再激活雄激素受体(AR),如AR基因扩增及过度表达、AR的突变、AR共抑制因子及共激活因子的相互作用、生长因子及细胞因子介导的信号通路的加强、AR剪接变异体的作用等确保了AR在持续低水平雄激素的环境下仍能发挥重要功能。肿瘤干细胞可能是前列腺癌耐药、转移、复发及出现放射性耐受的主要原因。前列腺癌细胞发生神经内分泌分化可能是肿瘤细胞对药物抵抗的一种自身反应,而神经内分泌化分细胞的过度增殖导致神经内分泌前列腺癌的发生。