雷公藤内酯醇对大鼠胶原性关节炎和免疫功能的影响

目的研究雷公藤内酯醇(TP)对胶原性关节炎(CIA)的治疗作用。方法制备鸡Ⅱ型胶原诱导的CIA大鼠模型,im给予地塞米松2.0 mg·kg-1或TP 0.1,0.2和0.4 mg·kg-1,每3天1次,连续35 d,正常对照和模型对照组im给予等体积生理盐水。实验过程中观察CIA大鼠的一般情况、足爪肿胀度和关节炎指数的变化。给药结束后第2天,3%巴比妥钠麻醉处死大鼠,取足爪组织制备组织切片观察病理变化;无菌取脾制备脾细胞悬液,用MTT法检测脾T细胞和B细胞增殖反应;制备10%脾组织匀浆,用ELISA法检测脾组织白介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和IL-6;心脏取血,制备血清用ELISA法测定血清中抗CⅡ抗体水平。结果与正常对照组比较,模型对照组大鼠关节红肿,表面皮肤发亮充血,关节炎指数上升,脾T细胞和B细胞增殖反应、血清中抗CⅡ抗体水平和脾组织中IL-1β,TNF-α和IL-6水平明显升高(P<0.01),大鼠足爪皮下组织细胞排列紊乱且有大量炎性细胞浸润及血管增生。im给予TP 0.2和0.4 mg·kg-1可改善CIA大鼠一般状况,明显抑制CIA大鼠足爪肿胀(P<0.01);降低关节炎指数,在第22,26,30和35天由模型对照组的7.3±0.7,6.3±0.8,4.7±0.7和4.3±0.2分别降低到5.6±0.6,4.9±0.7,3.9±0.5,2.8±0.7和5.1±0.8,4.1±0.4,3.3±0.6,2.7±0.6;抑制脾T和B细胞增殖反应;血清中抗CⅡ抗体水平显著降低,A490 nm由模型对照组的0.765±0.018降低到0.583±0.024和0.575±0.034(P<0.01);脾组织中IL-1β由(159±23)ng·L-1降低到90±15和(79±15)ng·L-1(P<0.01),TNF-α由(125±23)ng·L-1降低到94±16和(83±17)ng·L-1(P<0.01),IL-6由(250±16)ng·L-1降低到193±18和(180±18)ng·L-1(P<0.01);能明显改善大鼠足爪组织病理改变,炎性细胞浸润及血管明显减轻(P<0.05)。TP 0.1 mg·kg-1对上述指标无明显影响。结论 TP对Ⅱ型胶原诱导的CIA具有一定的治疗作用。     

经方二妙散对胶原诱发关节炎大鼠脾和关节中CHRNA7表达的影响

目的研究不同浓度二妙散对胶原诱发关节炎(CIA)大鼠脾脏和关节中CHRNA7表达的影响。方法建立雌性Wistar大鼠CIA模型,不同浓度二妙散对CIA大鼠灌胃治疗,研究二妙散对CIA大鼠脾脏和关节CHRNA7表达的影响。通过反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白质印迹法分析不同实验组大鼠脾脏和关节中CHRNA7的表达特性。结果 CHRNA7 mRNA在关节中的表达量显著高于脾脏(P<0.05);在CIA大鼠脾脏中的表达量显著高于其他处理组(P<0.05);CHRNA7 mRNA在CIA大鼠关节中的表达量显著高于其他处理组(P<0.05);1.5 g/kg二妙散药物组CIA大鼠关节中CHRNA7的蛋白表达量显著低于其他处理组(P<0.05)。结论不同实验组关节和脾脏中CHRNA7均有不同程度的表达,二妙散治疗CIA最适药物浓度为1.5 g/kg,CHRNA7参与CIA大鼠炎性反应的形成,介导CIA炎性因子的形成和发展。     

甲氨蝶呤联合环磷酰胺对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜细胞凋亡作用的研究

目的通过对类风湿关节炎(RA)动物模型胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的实验研究,从滑膜细胞凋亡的角度,探讨甲氨蝶呤(MTX)联合环磷酰胺(CTX)的协同作用和机制。方法建立Ⅱ型胶原诱导性雌性Wistar大鼠CIA模型,将造模成功的60只大鼠随机分成4组:CIA模型对照组、小剂量MTX治疗组(MTX0.9mg/kg,每周1次)、小剂量CTX治疗组(24mg/kg,每3周1次)及小剂量MTX联合小剂量CTX治疗组(0.9mg/kg,每周1次,CTX24mg/kg,每3周1次);再选8只为正常对照组。治疗24周后全部动物处死取材,再经固定、脱钙、包埋,通过TUNEL法检测滑膜细胞凋亡。结果各治疗组滑膜细胞凋亡均较CIA模型组增加,联合治疗组凋亡程度最高,各组间平均灰度值差异有统计学意义(P<0.05)。结论提示MTX和CTX联合治疗RA为协同作用。     

条件性免疫反应治疗胶原性关节炎的免疫学机制探讨

目的探讨条件免疫反应治疗胶原性关节炎(CIA)免疫学机制。方法建立大鼠CIA模型。将模型大鼠分为5组:条件免疫反应(CIR)组:以樟脑气味为条件刺激;甲氨蝶呤(MTX)+泼尼松(Pred)为非条件刺激,两者结合7次(7d)后可建立条件免疫反应,然后每日再现条件刺激,每周条件刺激与非条件刺激结合1次,共4周。MTX+Pred组:MTX+Pred治疗4周。MTX+Pred减量组:MTX+Pred治疗,7d内每天1次,7d后每周1次,共4周。单纯闻樟脑气味组:单纯闻樟脑气味4周。空白对照组:安慰剂治疗4周。用流式细胞技术检测大鼠外周血CD4+T淋巴细胞活化(表达CD71)状态,免疫散射比浊法检测大鼠外周血IgG、IgA、IgM、C3、C4、C反应蛋白(CRP)水平,免疫组织化学检测CD68(巨噬细胞标志)及肿瘤坏死因子(TNF)-α在滑膜组织的表达。结果CIR组与MTX+Pred组大鼠治疗2周后外周血活化的CD4+T淋巴细胞明显低于其他各组(P<0.01);4周后血清IgG、CRP水平降低,滑膜组织中CD68及TNF-α表达均明显低于单纯闻樟脑气味组、MTX+Pred减量组及空白对照组(P均<0.01)。结论以樟脑气味为条件刺激,以泼尼松和甲氨蝶呤联合免疫抑制作用为非条件刺激,通过强化训练,建立的条件免疫抑制反应可以通过调节机体的细胞免疫与体液免疫功能,抑制免疫细胞异常活化,降低自身抗体及炎性细胞因子水平,     

白芍总苷对胶原性关节炎大鼠血糖和葡萄糖转运体的影响

目的研究白芍总苷( TGP)对胶原性关节炎大鼠血糖和葡萄糖转运体的调控作用。方法将 30只大鼠采用随机数字表法分为正常组、模型组、 TGP组和甲氨蝶呤( MTX)组。采用在大鼠右后足跖和尾根部皮下注射弗氏完全佐剂和鸡 Ⅱ型胶原诱导胶原性关节炎。大鼠致炎后第 14天( D14)TGP组大鼠按照每天 50 mg/kg,MTX组按照每 3天 0.5 mg/kg,正常组和模型组给予等量溶媒,各组连续灌胃给药 16 d。在大鼠致,炎前和致炎后的不同时间点( D14-D30)观察大鼠足爪肿胀;大鼠致炎前和致炎后的 D14和 D30测量大鼠血糖浓度。末次给药( D30)结束后,酶联免疫吸附法检测血液中胰岛素水平和糖化血红蛋白水平,后处死大鼠,观察踝关节病理,蛋白质印迹法检测大鼠肝组织葡萄糖转运体 -2(GLUT-2)和肌肉组织 GLUT-4水平。结果与正常组相比,模型组大鼠足爪明显肿胀( P<0.01)模型组大鼠踝关节病理评分明显增高( P<0.01);与模型组相比, TGP组关节肿胀水平明显低于模型组,从 D22起差异有统计学,意义( P<0.01)而 MTX组从 D18起差异有统计学意义, TGP组与 MTX组大鼠踝关节病理评分均低于模型组( P<0.01)。与正常组相比较,模型组,大鼠空腹血糖水平明显升高( P<0.01),经 TGP给药后,关节炎大鼠血糖水平降为( 9.97±1.13)mmol/L,差异有统计学意义( P<0.01)。与正常组相比较,模型组大鼠空腹胰岛素水平与糖化血红蛋白所占总蛋白比例明显升高(P<0.01)经 TGP给药后,关节炎大鼠胰岛素水平降为(16.7±1.87)μg/L,糖化血红蛋白比例降为( 0.63±0.07)%,差异有统计学意义( P<0.0,1)。与正常组相比,模型组大鼠空腹肌糖原与肝糖原水平明显降低( P<     

薯蓣皂苷对大鼠胶原性关节炎治疗作用的实验研究

目的评价薯蓣皂苷对大鼠胶原性关节炎(collegeninduced arthritis,CIA)的治疗作用并探讨其可能的作用机制。方法于大鼠左后足底皮内注射胶原乳剂制备CIA模型造模两周后灌胃给药14 d,每4天测量1次右后足跖容积。处死后取右后足作病理切片。Western blot法测定踝关节滑膜组织中NF-κBp65亚基和环氧化酶-2蛋白表达。用放射免疫法检测了足爪TNF-α及PGE2含量。结果薯蓣皂苷可抑制CIA大鼠的足趾肿胀,与模型相比差异有显著性;降低足爪TNF-α及PGE2含量;明显降低NF-κBp65亚基和COX-2的水平。结论薯蓣皂苷对CIA大鼠具有较强的抗炎作用,机制可能与抑制NF-κBp65亚基和COX-2的表达有关。     

胶原诱导性关节炎大鼠Th17细胞相关因子表达的研究

目的观察胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠外周血中T辅助细胞17(Th17)相关细胞因子白细胞介素(IL)-6,IL-17和IL-23水平的变化。方法取40只Wistar雄性大鼠,随机分为正常对照组、CIA模型组,利用牛Ⅱ型胶原建立CIA大鼠模型,造模成功后观察CIA大鼠的关节肿胀程度,免疫后第48天处死大鼠,抽取静脉血,取血清,同时留取大鼠的肿胀的关节,留取滑膜组织。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)观察各组对血清中细胞因子IL-6,IL-17和IL-23水平。结果 CIA鼠与正常对照组比较关节肿胀度明显升高。CIA大鼠外周血血清IL-6,IL-17和IL-23水平明显高于正常对照组。2组比较差异均有统计学(P<0.05)。结论 Th17相关细胞因子IL-6,IL-17和IL-23在CIA鼠的外周血中过度表达,提示Th17型细胞因子在RA的免疫致病机制中可能起重要作用。     

自拟除痹温经汤对寒湿痹阻型类风湿关节炎患者关节肿胀和免疫功能的影响

目的 探究自拟除痹温经汤对寒湿痹阻型类风湿关节炎患者关节肿胀和免疫功能的影响。方法 选取2019年10月至2021年9月于驻马店市中心医院治疗类风湿关节炎的患者136例,根据乱数表法随机分为中药组与常规组各68例。常规组给予西医常规治疗,同时中药组增加自拟除痹温经汤治疗,两组均连续治疗4周。对比治疗后两组临床疗效;治疗前后两组中医证候积分（关节冷痛、关节麻木、关节屈伸不利）,关节功能（关节压痛数、关节肿胀数、晨僵时间）,免疫功能[免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、补体3(C3)、类风湿因子（RF）],对比治疗期间两组不良反应发生率。结果 治疗4周后,中药组临床疗效高于常规组（P<0.05）;两组中医证候积分较治疗前均降低（P<0.05）,且中药组低于同期常规组（P<0.05）;两组关节压痛数、关节肿胀数、晨僵时间较治疗前均降低（P<0.05）,且中药组低于同期常规组（P<0.05）;两组IgA、IgG、IgM、RF水平较治疗前均降低（P<0.05）,且中药组低于同期常规组（P<0.05）,两组C3水平较治疗...     

实验性关节炎动物模型建立及病理机制研究进展

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种慢性系统性的免疫性炎症疾病,病因和发病机制尚未完全清楚。胶原性关节炎大鼠、小鼠模型,佐剂性关节炎大鼠模型,多聚糖蛋白诱导的关节炎小鼠模型,链球菌细胞壁诱导的关节炎大鼠、小鼠模型和转基因小鼠模型与人RA发病机制和病理变化等有着相似特点,是研究RA、筛选抗炎免疫药物较理想的实验性病理模型。探讨RA动物模型的发病机制及其与临床的关系,对进一步了解RA病理、生理、免疫等特点及寻找安全有效的治疗RA的药物十分重要。该文将对几种常用的实验性关节炎模型的建立、造模特点、发病机制、与RA的异同等方面进行综述。     

吡格列酮可抑制胶原诱导性关节炎大鼠的骨吸收

目的探讨吡格列酮是否可抑制胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的炎症性骨吸收。方法分别用肿瘤坏死因子(TNFα)拮抗剂(注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体抗体融合蛋白,TNFR Ⅱ-Fc)腹腔注射,低、中、高剂量(3、10、30mg.kg-1.d-1)吡格列酮灌胃治疗CIA大鼠3周。比较各治疗组与正常对照组、模型对照组的病理差异、骨代谢指标——骨保护素(OPG)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)及TNFα的蛋白水平差别。用酶联免疫吸附法(ELISA)、免疫组织化学、蛋白印迹法等方法检测OPG、RANKL及TNFα的蛋白表达。结果模型对照组后踝关节炎性细胞浸润、滑膜组织增生及软骨不同程度破坏;各治疗组关节炎症和滑膜增生不同程度改善,无软骨及骨破坏。相比模型对照组,各治疗组血清及软骨中OPG水平明显增高,而血清中TNFα及软骨中RANKL水平明显降低(P<0.05)。相比低剂量吡格列酮治疗组,高剂量吡格列酮治疗组OPG水平较高,而TNFα及RANKL水平较低(P<0.05)。相比TNFα拮抗剂治疗组,高剂量吡格列酮治疗组软骨中OPG水平较高,而RANKL水平较低(P<0.05)。结论吡格列酮可通过下调CIA大鼠血清中的TNFα及关节软骨中的RANKL,上调关节软骨、滑膜及血清中OPG的蛋白表达,起到抑制CIA大鼠的炎症性骨吸收的作用;并且有随剂量增大而增强的趋势,高剂量吡格列酮治疗时此作用可能稍强于TNFRⅡFc。     

瑞香素通过含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶通路对胶原诱导性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨瑞香素(DAP)通过含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)通路对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖与凋亡的影响。方法体外培养 CIA-FLS,选取对数生长期细胞以不同浓度 DAP(0、5、10、20、40、80 mg/     

类风湿关节炎与银屑病关节炎患者血清抗环瓜氨酸肽抗体水平及临床意义探讨

目的检测血清抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP抗体)在类风湿关节炎(RA)与银屑病关节炎(PsA)中的阳性率,探讨抗CCP抗体与RA、PsA疾病活动指标、骨侵蚀的关系。方法收集RA110例,PsA48例,41名健康对照者,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)定量检测血清抗CCP抗体浓度,并分析RA、PsA患者血清抗CCP抗体水平与肿胀关节数(SJC)、压痛关节数(TJC)、疾病活动指数(DAS)及骨侵蚀之间的关系。结果血清抗CCP抗体在RA阳性率为82%(90/110),在PsA阳性率为15%(7/48),正常对照组均为阴性。RA抗CCP抗体阳性率与PsA、正常对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.01),PsA与正常对照组抗CCP抗体阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05)。抗CCP抗体阳性RA患者SJC、TJC及DAS28评分均高于阴性患者,差异有统计学意义(P<0.05)。抗CCP抗体阳性PsA患者SJC及TJC高于阴性患者,差异有统计学意义(P<0.05),7例抗CCP抗体阳性的PsA患者均表现为对称性多关节炎。RA及PsA抗CCP抗体阳性和阴性患者之间骨侵蚀的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论在RA,抗CCP抗体与疾病活动度相关。抗CCP抗体可出现在PsA患者血清中,抗CCP抗体阳性的PsA患者多表现为对称性多关节炎,且与SJC、TJC有关。     

新风胶囊调控巨噬细胞 M1/M2型极化对 DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎的影响

目的探究新风胶囊调控巨噬细胞 M1/M2型极化对 DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎( CIA)的影响。方法按体质量将 DBA/1小鼠采用随机数字表法分为空白对照组( NC组)、模型组( M组)和新风胶囊组( XFC组)三组。 M组和 XFC组建立 Ⅱ型胶原合并弗氏佐剂诱导的 CIA小鼠模型,第二次免疫当天, NC组和 M组给予生理盐水, XFC组按照规定剂量给予新风胶囊混悬液 1.5 mL/100 g,每天 1次,连续 21 d灌胃处理。利用小鼠关节炎指数( AI)评分评估新风胶囊对 CIA模型小鼠关节的作用, HE染色检测滑膜组织病理损伤程度;蛋白质印迹法( Western blotting)检测巨噬细胞中 CD68、iNOS蛋白表达水平。研究时间自 2020年 6月至 2021年 5月。结果实验结果表明,与 NC组相比,滑膜炎性细胞浸润数量及血管翳增生数量较前升高,第 30天 M组发病关节炎爪数［(3.83 ± 0.41)只］明显增多( P<0.05)右后爪关节炎严重程度评分［(2.83 ± 0.75)分］上升(P<0.05),四肢关节炎评分均值［( 2.17 ± 0.38)分］升高( P<0.05),CD68相对,表达量( 0.964±0.080)高于 NC组( 0.430±0.0186)(P<0.05)iNOS相对表达量(0.738±0.052)高于 NC组( 0.477±0.016)(P<0.05)。与 M组比较,第 30天 XFC组滑膜炎性细胞浸润数量及血管翳增,生数量均下降,发病关节炎爪数［(1.50 ± 0.55)只］低于 M组［(3.83 ± 0.41)只］(P<0.05)右后爪关节炎严重程度评分［(1.00 ±     

黄芪桂枝五物汤对胶原诱导性关节炎大鼠血清中白细胞介素-20的影响

目的观察黄芪桂枝五物汤对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的一般情况、体质量、血红蛋白、血清中白细胞介素-20(IL-20)水平的影响,以阐明黄芪桂枝五物汤治疗类风湿关节炎的作用机制。方法选用健康清洁级SD大鼠32只,随机分为4组,正常对照组、模型组、雷公藤多苷组、黄芪桂枝五物汤组。除正常对照组外,其余各组均行CIA大鼠模型。观察造模后大鼠一般情况及造模后第1、2、3、4周的体质量变化情况;采用全自动血细胞分析仪测定各组大鼠血红蛋白含量,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法测定各组大鼠血清中IL-20的水平。结果造模后第1、2、3周大鼠体质量各组之间差异无统计学意义(P>0.05),造模后第4周模型组体质量低于正常对照组、雷公藤多苷组、黄芪桂枝五物汤组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗1个月后,与正常对照组相比,模型组大鼠血清中IL-20水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,黄芪桂枝五物汤组血红蛋白水平高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);经雷公藤多苷、黄芪桂枝五物汤治疗后大鼠血清中IL-20的水平下降,差异有统计学意义(P<0.05);雷公藤多苷组、黄芪桂枝五物汤组血清IL-20差异无统计学意义(P>0.05)。结论黄芪桂枝五物汤能升高CIA大鼠血红蛋白含量,有抑制CIA大鼠血清中IL-20升高的作用。     

实验性关节炎大鼠滑膜组织核因子-κB基质金属蛋白酶-9表达相关性分析

目的观察核因子κB(NF-κB)、基质金属蛋白酶(MMP)-9在实验性关节炎(CIA)和对照组大鼠滑膜组织中不同时间点的表达差异及其血浆中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β的含量变化,探讨这些细胞因子在CIA发病中的作用机制,为类风湿关节炎(RA)今后的治疗提供理论依椐。方法将42只雄性Wistar大鼠随机分为模型组和对照组,通过免疫组织化学的方法检测各组大鼠不同时期滑膜组织NF-κB、MMP-9的表达水平,用放射免疫法(RIA)测定TNF-α、IL-1β的血浆含量,同时观察其发病时间与关节炎指数(AI)积分、病理评分及上述细胞因子之间的关系。结果随着CIA大鼠发病时间延长,AI和病理评分逐渐增加,NF-κB、MMP-9表达水平和TNF-α、IL-1β血浆含量也随之增加。CIA大鼠这些细胞因子的测定值都显著高于对照组(P<0.01),AI、病理评分与NF-κB、MMP-9呈正相关关系(P<0.05);CIA大鼠滑膜组织NF-κB、MMP-9表达水平之间呈正相关(P<0.05),而且它们的表达水平与IL-1β、TNF-α血浆含量之间亦呈正相关(P<0.05)。结论通过与TNF-α和IL-1β相互作用,滑膜组织中NF-κB、MMP-9的表达之间可能互相影响、互相促进,形成正反馈式的损坏机制,在CIA大鼠病情进展中起着重要作用,可能是RA发生发展以及骨质侵蚀的关键因子。     

女性早期类风湿关节炎患者血清雌雄性激素比例变化及临床意义

目的探讨女性类风湿关节炎(RA)患者雌二醇与睾酮比值的变化及其临床意义,为类风湿关节炎患者早期诊断及疗效判断提供理论依据。方法用酶联免疫法测定30例女性活动性RA患者和30名女性健康对照组血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、泌乳素(PRL)、睾酮(T)和雌二醇(E2)水平,计算雌二醇与睾酮比值,用SPSS11.0对2组患者雌激素水平及雌二醇与睾酮比值进行统计学分析。结果 RA组雌激素水平显著高于健康对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);2组睾酮对比,差异无统计学意义(P>0.05);2组患者雌二醇与睾酮比值对比,RA患者比值高于健康对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论血清雌激素及血清雌激素与雄激素比值失调可能是导致RA发病因素之一,可作为女性RA早期诊断的参考指标,并可能成为判断治疗RA疗效的新指标。     

胶原关节炎大鼠滑膜组织中血管内皮生长因子与金属蛋白酶3表达相关性分析

目的研究胶原诱导的关节炎（CIA）大鼠不同时期滑膜组织中血管内皮生长因子（VEGF）、金属蛋白酶（MMP）-3的表达及其相关性,从而探讨它们在类风湿性关节炎（RA）发病机制中的作用。方法通过免疫组化的方法检测模型组和对照组不同时期滑膜组织中VEGF、MMP-3的表达水平,观察二者相互之间以及与病理评分、关节炎指数（AI）积分之间的相互关系。结果VEGF、MMP-3在CIA大鼠滑膜组织中的不同时期均呈高表达（P〈0．01）;随着CIA大鼠免疫时间的延长二者表达水平、AI积分和病理评分逐渐增加;AI积分、病理评分与VEGF、MMP-3分别呈正相关关系（P〈0．05）;CIA大鼠滑膜组织中VEGF、MMP-3表达水平之间亦呈正相关关系（P〈0．01）。结论VEGF、MMP-3与CIA的发病过程密切相关,二者在滑膜组织中相互影响,共同促使CIA不断进展,可能是RA血管翳的形成及骨与软骨破坏过程中的重要因子。