The production of Strains Highly Expressing Human Interleukin-2 cDNA

(张大军)(冯博)(皇甫永穆)ＴｈｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆＳｔｒａｉｎｓＨｉｇｈｌｙＥｘｐｒｅｓｓｉｎｇＨｕｍａｎＩｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－２ｃＤＮＡ￥ＺＨＡＮＧＤａ－ｊｕｎ，ＦＥＮＧＢｏ，ＨＵＡＮＧＦＵＹｏｎｇ－ｍｕ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＭｅｄｉｃａ...     

Construction of Shuttle Expression Plasmid and Stable Expression of Foreign Gene in Mycobacteria and E．Coli

ＣｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｏｆＳｈｕｔｔｌｅＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎＰｌａｓｍｉｄａｎｄＳｔａｂｌｅＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆ　ＦｏｒｅｉｇｎＧｅｎｅｉｎＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａａｎｄＥ．ＣｏｌｉＨＵＡＮＧＦＵＹｏｎｇ－ｍｕ（皇甫永修）；ＺＨＡＮＧＤａ－ｊｕ...     

STRUCTURE AND FUNCTION OF THE BAND 3 CL~－／HCO_3~－ TRANSPORTER IN C

ＳＴＲＵＣＴＵＲＥＡＮＤＦＵＮＣＴＩＯＮＯＦＴＨＥＢＡＮＤ３ＣＬ－／ＨＣＯ－３ＴＲＡＮＳＰＯＲＴＥＲＩＮＣＨＲＯＮＩＣＲＥＳＰＩＲＡＴＯＲＹＦＡＩＬＵＲＥＰＡＴＩＥＮＴＳＹａｎｇＸｉａｏｊｉｎｇ杨晓静，ＱｉａｎＧｕｉｓｈｅｎｇ钱桂生ａｎｄＭａｏＢａｏ...     

稳定表达GDNF的MN9D／GDNF工程细胞要明显改善帕金森模型？…

目的：观察稳定表达ＧＤＮＦ的ＭＮ９Ｄ／ＧＤＮＦ工程细胞对６－羟基多巴胺损毁所致帕金森病（Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ ｄｉｓｅａｓｅ，ＰＤ）模型大鼠旋转行为有无治疗作用。方法：用６－羟基多巴胺损毁大鼠单侧中赤质多巴胺能神经元、２周后腹腔注射阿朴吗啡诱导大鼠出现偏侧旋转行为的方法制备ＰＤ模型大鼠。通过脑立体定位技术，将稳定表达ＧＤＮＦ的ＭＮ９Ｄ／ＧＤＮＦ工程细胞注入模型鼠损毁侧纹状体，１周后观察阿朴吗啡诱导的     

茶叶对甲基苄基亚硝胺诱发的大鼠食管癌变的影响

观察了红茶和绿茶对亚硝胺诱发的Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙ 大鼠食管癌变的影响。实验１，雄性Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙ大鼠，甲基苄基亚硝胺（Ｎ－ｎｉｔｒｏｓｏｍｅｔｈｙｌｂｅｎｚｙｌａｍｉｎｅ，ＮＭＢｚＡ）连续处理５周（２．５ｍｇ／ｋｇ，ｓ，ｃ每周２次）；３９周时，肿瘤发生率为６５％。在ＮＭＢｚＡ处理后绿茶或红茶，乳头瘤发生率降低５４％和６６％。实验２，提高ＮＭＢｚＡ到３．５ｍｇ／ｋｇ，１６周时     

FORMATION OF DES－ASP－ANGIOTENSIN Ⅰ IN THE HYPOTHALAMIC EXTRACT OF NORMOTENSIVE AND HYPERTENSIVE RATS

ＦＯＲＭＡＴＩＯＮＯＦＤＥＳ－ＡＳＰ－ＡＮＧＩＯＴＥＮＳＩＮⅠＩＮＴＨＥＨＹＰＯＴＨＡＬＡＭＩＣＥＸＴＲＡＣＴＯＦ　ＮＯＲＭＯＴＥＮＳＩＶＥ　ＡＮＤ　ＨＹＰＥＲＴＥＮＳＩＶＥＲＡＴＳＱｉｕＸｉｓｈｅｎｇ（邱喜盛）（ＳｈａｎｇｈａｉＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏ...     

DIFFEKENTIAL CALCIUM－BINDING ABILITY OF FREE AND BOUND PROTEINS－SUGGESTIONOFAN0VELPROTEINS／C4B－BINDINGPKOTE

ＤＩＦＦＥＫＥＮＴＩＡＬＣＡＬＣＩＵＭ－ＢＩＮＤＩＮＧＡＢＩＬＩＴＹＯＦＦＲＥＥＡＮＤＢＯＵＮＤＰＲＯＴＥＩＮＳ－ＳＵＧＧＥＳＴＩＯＮＯＦＡＮ０ＶＥＬＰＲＯＴＥＩＮＳ／Ｃ４Ｂ－ＢＩＮＤＩＮＧＰＫＯＴＥＩＮ－ＢＩＮＤ－ＩＮＧＦＡＣＴＯＲＩＮＨＵＭＡＮＰ...     

L－精氨酸和N~G－甲基－L－精氨酸对血管内皮细胞释放EDRF的影响

通过培养的大鼠胸主动脉内皮细胞（ＣＥＣ）及胸主动脉环，利用生物分析法，探讨ＣＥＣ释放内皮源性舒张因子（ＥＤＲＦ／ＮＯ）的检测方法，影响ＥＤＲＦ／ＮＯ分泌的因素。发现单纯ＣＥＣ或经乙酰胆碱（Ａｃｈ）预处理的ＣＥＣ对去内皮血管环张力无明显影响；而经Ｌ－精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）或Ｌ－Ａｒｇ和Ａｃｈ预处理的ＣＥＣ可引起去内皮血管环产生明显舒张；ＮＧ－甲基－Ｌ－精氨酸和Ａｃｈ预处理的ＣＥＣ则引起去内皮血管环明显收缩。提示ＣＥＣ在基础状态和经Ａｃｈ预处理后，其合成和分泌ＥＤＲＦ／ＮＯ的能力很低或丧失，可能存在内源性ＥＤＲＦ／ＮＯ前体Ｌ－Ａｒｇ不足，供给外源性Ｌ－Ａｒｇ有增强ＣＥＣ合成和释放ＥＤＲＦ／ＮＯ的作用。在Ｌ－Ａｒｇ供给充足情况下，Ａｃｈ可进一步刺激ＣＥＣ释放ＥＤＲＦ／ＮＯ。     

基于ＤＥＮＶ－ｐｒＭ／Ｅ基因构建ＤＥＮＶ－ＶＬＰ及其免疫学特性

摘 要：【目的】 构建和表达登革病毒４型病毒样颗粒,初步研究其免疫学特性。【方法】 用ＲＴ－ＰＣＲ法扩增ＤＥＮＶ４－ｐｒＭ／Ｅ基因,构建重组质粒ｐＧＡＰＺ－ｓｐｒＭ／Ｅ－Ｄ４,转化Ｘ３３酵母菌株,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ鉴定目的蛋白表达。切片电镜检测病毒样颗粒,蔗糖密度梯度离心纯化。免疫三组Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠,每组１５只。采用间接ＥＬＩＳＡ检测抗原特异性抗体,间接免疫荧光法检测免疫血清与天然病毒粒子的结合,流式细胞术分析小鼠脾淋巴细胞表型,酶联免疫斑点法（ＥＬＩＳＰＯＴ）检测脾分泌ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－α和ＩＬ－１０的细胞。【结果】重组质粒在酵母中以病毒样颗粒形式表达,为直径２０ ～ ３０ ｎｍ的球形颗粒,ＶＬＰ免疫组刺激小鼠产生抗体与灭活病毒组相似,流式及ＥＬＩＳＰＯＴ结果提示ＤＥＮＶ４－ＶＬＰ与灭活病毒组相似,用登革病毒抗原刺激后,分泌ＩＦＮ－γ,ＴＮＦ－α的细胞数目明显增加,各组分泌ＩＬ－１０细胞数目的整体水平均不高。【结论】应用毕赤酵母表达系统成功表达获得了ＤＥＮＶ４－ＶＬＰ,具有良好的免疫原性,可诱导Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠产生有效的体液免疫应答,并能诱导Ｔｈ１型免疫应答而诱导Ｔｈ２型免疫应答较弱。     

小鼠组织相容性抗原的提取与纯化

用９９＾ｍＴＣ－ＦＤＸ淋巴管显像剂，对雄性Ｆ３４４大鼠睾丸进行显民病理分析，Ｆ３４４大鼠尾静脉注射０．１ｍｌ显像剂，放射强度为１８．５ＭＢｑ，用单光子发射计算机断层仪（ＳＰＥＣＴ）分别观察不同时相睾丸显像情况。然后手术摘除大鼠睾丸，巨检取材作铁－－苏木素染色和ＨＥ染色，与显像情况对比分析。结果有１例大鼠左侧睾丸呈阳性显像病理学观察证实此睾丸有肿瘤，肿瘤类型为间质细胞瘤。铁－苏木素染色显示肿瘤细胞     

一个灵长类种属特异基因——XAGE-3转基因

目的比较研究F344fNSIc与WistarNWN两种大鼠对1．溴丙烷（1-BP）引发的毒性发应。方法雄性WistarNWN和F344／NSIc大鼠各6只,吸入染毒5030mg／m31-BP1周。取睾丸做病理切片,过碘酸希夫氏染色;切取胫后支神经,Kliiver．Barrera法染色,光镜下观察。结果睾丸组织病理学显示,1．BP染毒后第VIII发育阶段的生精上皮中出现长形精子细胞滞留。胫后支神经组织病理学显示,1-BP染毒后周围神经的髓鞘出现卵圆形的缺失变性。Wistar和F344fNSIc两种大鼠均出现了上述病理学改变。结论1-BP毒性的典型病理学改变在F344／NSIc与WistarNWN两种大鼠中均得以重现。F344／NSIc纯种大鼠是进行1-溴丙烷毒效应基因水平的研究的适宜品系。     

采用电泳法对近交系大鼠进行遗传监测

采用电泳技术对大鼠Amy-1,Cat,Es-1,Es-2,Es-3,Es-4,Es-6,Es-7,Es-8,Es-9,Es-10,Es-12,Gc,Hbb,Svp-1 15个基因标志进行检查,建立了F344/N,F344/Ola,LOU/cN,SHR/Ola,WKY/Ola5个近交品系大鼠的电泳遗传概貌,为上述品系提供了遗传学基本数据和质量控制的方法。     

二乙基亚硝胺诱导建立Apc基因突变大鼠与F344大鼠肝癌模型的比较

目的 采用二乙基亚硝胺(DEN)在F344大鼠、Kyoto Apc Delta(KAD)大鼠体内诱发制备肝癌模型,并比较其优劣.方法 KAD大鼠25只,随机法分组,阴性对照组(5只)给予正常饮水;DEN造模组(20只)前5周饮水中添加40 μg/mL DEN,6～20周给予正常饮水;定期解剖大鼠,肉眼观察肝脏病变并取病变组织及癌旁组织制作病理切片.25只F344大鼠采用相同方法进行实验.结果 F344大鼠和KAD大鼠均可成功诱发肝癌,且肝癌发生病理过程与人类相似.造模16周时KAD大鼠就可见灰白色病灶点,3/4大鼠成瘤,平均病灶数为1.00士0.82个;造模20周时,KAD大鼠全部(4/4)成瘤,病灶数为3.50±1.29个;而F344大鼠迟至20周时才可观察到类似病灶,3/4大鼠成瘤,病灶数为1.25±0.96个.KAD大鼠的诱导成瘤性显著高于亲代F344大鼠(P＜0.05).结论 与亲代F344大鼠相比,抑癌基因Apc突变的KAD大鼠经DEN诱导更易发生肝癌,且该模型具有肝癌诱发时间短、相同诱导时间肝癌发生率高、诱发病灶数多等优点,是化学诱发制备肝癌动物模型的良好模式动物.     

不同品系大鼠肝脏卵圆细胞增殖模型的比较研究

目的 对不同品系大鼠肝卵圆细胞增殖模型进行比较,筛选建模效率较高的大鼠品系.方法 选择F344、Wistar和SD大鼠各10只,经2-乙酰氨基芴灌胃和四氯化碳腹腔注射建立肝脏卵圆细胞增殖模型,组织学和免疫组织化学检测鉴定.荧光激活细胞筛选法分选并纯化各品系大鼠肝脏卵圆细胞,分析Thy-1.1~+细胞百分率,观察Thy-1.1~+细胞培养结果.结果 成功建立三种品系大鼠肝脏卵圆细胞增殖模型.流式细胞仪分选结果显示,F344、wistar和SD大鼠Thy-1.1~+细胞百分率分别为(9.46±0.99)%、(2.46±0.37)%和(1.46±0.12)%;各品系大鼠间Thy-1.1~+细胞百分率比较,差异有统计学意义(P<0.05).细胞培养观察发现,与Wistar和SD大鼠比较,F344大鼠分选得到的肝脏卵圆细胞生长状态好且纯度较高.结论 在用于建立肝脏卵圆细胞增殖模型最为常见的三种品系大鼠中,F344大鼠所建模型的肝脏卵圆细胞活化效率最高.     

不同品系大鼠肝脏卵圆细胞增殖模型的比较研究

目的 对不同品系大鼠肝卵圆细胞增殖模型进行比较,筛选建模效率较高的大鼠品系.方法 选择F344、Wistar和SD大鼠各10只,经2-乙酰氨基芴灌胃和四氯化碳腹腔注射建立肝脏卵圆细胞增殖模型,组织学和免疫组织化学检测鉴定.荧光激活细胞筛选法分选并纯化各品系大鼠肝脏卵圆细胞,分析Thy-1.1~＋细胞百分率,观察Thy-1.1~＋细胞培养结果.结果 成功建立三种品系大鼠肝脏卵圆细胞增殖模型.流式细胞仪分选结果显示,F344、wistar和SD大鼠Thy-1.1~＋细胞百分率分别为（9.46±0.99）%、（2.46±0.37）%和（1.46±0.12）%;各品系大鼠间Thy-1.1~＋细胞百分率比较,差异有统计学意义（P〈0.05）.细胞培养观察发现,与Wistar和SD大鼠比较,F344大鼠分选得到的肝脏卵圆细胞生长状态好且纯度较高.结论 在用于建立肝脏卵圆细胞增殖模型最为常见的三种品系大鼠中,F344大鼠所建模型的肝脏卵圆细胞活化效率最高.     

雄性F344大鼠睾丸间质细胞瘤的癌前期病变及其生物学意义

采用全自动图象分析仪结合ＨＥ染色和免疫组织化学染色，对已有不育史的５个年龄组雄性Ｆ３４４大鼠的睾丸进行形态定量研究及病理形态分析。结果提示：睾丸间质细胞为增生为睾丸间质细胞瘤的癌前期病变，两者对引起雄性Ｆ３４４大鼠不育均有重要意义。     

紫杉醇纳米粒腹腔给药对大鼠卵巢癌的抑制作用及淋巴靶向性

目的:探讨紫杉醇纳米粒(PLA)腹腔给药对大鼠卵巢癌的治疗效果及作用机制,并研究PLA在大鼠体内的分布.方法:用超声乳化法合成PLA.制备大鼠腹腔种植性卵巢癌模型,将40只荷瘤鼠随机分为4组,PLA组及市售紫杉醇(PTX)组各15只,生理盐水及PLA空白支架组各5只.每周腹腔给药5 mg/kg,共5次.末次给药后处死大鼠,比较荷瘤量及腹水量,用免疫组化法检测肿瘤组织增殖与凋亡.以高压液相色谱(HPLC)方法检测大鼠血浆及肝、心、肿瘤组织及盆腔淋巴结中的药物浓度.结果:合成的PLA包封率达70%,粒径分布为185～385 nm.PLA组大鼠荷瘤量及腹水量分别为(4.55±0.11) g及(3.55±0.50) mL,显著低于PTX组(10.13±0.52) g 及(30.45±1.55) mL,P＜0.01.免疫组化检测PLA组TUNEL阳性细胞数为(105±15),PCNA 阳性细胞数为(20±5),与PTX组[分别为(55±10)及(85±10)]相比,差异有统计学意义(P＜0.01).HPLC结果显示,末次给药后48 h PLA组肿瘤及盆腔淋巴结紫杉醇的药物含量分别为(1.53±0.35) μg/g及(0.75±0.05) μg/g,明显高于PTX组[(0.0636±0.015) μg/g及(0.188±0.045) μg/g, P＜0.01].结论:PLA腹腔给药可显著抑制大鼠卵巢癌生长,并具有淋巴靶向性.     

混合胸腺裸小鼠移植模型的建立及重建T细胞功能的体外研究

目的　建立混合胸腺移植模型 ,并在体外观察重建T细胞的功能状况。方法　首先建立混合胸腺裸小鼠左肾包膜下移植模型 ,流式细胞仪检测受体动物外周血中T细胞的重建情况 ,并利用刀豆素A(concanavalinA ,ConA)增殖实验和混合淋巴细胞培养检测其体外功能状态。结果　混合胸腺移植 3个月后 ,移植的胸腺组织在裸小鼠肾包膜下能够正常发育 ,并有效重建了受体外周血中的CD4 T和CD8 T细胞。体外功能检测显示 ,受体的脾细胞对ConA的刺激有良好的反应性 ,并对供体胸腺来源的F3Q44大鼠抗原刺激表现为特异性的低反应。结论　混合胸腺移植不仅在数量上可重建受体裸小鼠外周血中CD4 T和CD8 T细胞 ,而且受体中重建的T细胞还可发挥正常的免疫功能     

PDIA3在大鼠同种异体移植肾组织中的表达及意义

目的探讨蛋白质二硫键异构酶A3(protein disulfide isomerase A3,PDIA3)在大鼠同种异体移植肾组织中的表达及意义。方法实验分2组。实验组(异基因移植组):近交系雄性F344和Lewis大鼠分别作为供体和受体,共8对。对照组(同基因移植组):近交系雄性F344大鼠作为供体和受体,共8对。分别建立原位大鼠肾移植模型。术后7 d获取移植肾组织,分别应用免疫组化、RT-PCR和Western blot等方法检测实验组和对照组移植肾组织中的PDIA3的表达情况。结果 PDIA3主要表达在细胞质,在实验组移植肾组织中的表达呈阳性或强阳性,而在对照组表达呈弱阳性。实验组移植肾PDIA3的mRNA表达量为(0.821±0.046),对照组移植肾PDIA3的mRNA表达量为(0.187±0.154),2组比较差异有统计学意义(P<0.01)。实验组移植肾PDIA3的蛋白表达量为(0.812±0.045),对照组移植肾PDIA3的蛋白表达量为(0.237±0.134),2组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论大鼠同种异基因肾移植急性排斥反应组移植肾组织中的PDIA3的表达明显高于同基因移植对照组。PDIA3可能参与肾移植急性排斥反应的发生、发展过程。     

小肠移植排斥反应期移植肠基因表达的研究

目的 了解大鼠小肠移植排挤反应期移植肠粘膜白细胞介素２（ＩＬ－２）、γ于扰素（ＩＦＮ－γ）、穿孔素、粒细胞酶Ｂ的ｍＲＮＡ表达的变化。方法 选用近交系大鼠Ｆ３４４／Ｎ和Ｗｉｓｔａｒ／Ａ进行全小肠异移植,实验分４组,第１组：非手术对照组;第２组：同基因移植对照组;第３组：异基因移植组;第４组：环孢菌素Ａ治疗组（６ｍｇ．Ｋｇ＾－１．ｄ＾－１）。术后第３、５、７天取各组动物移植肠标本进行病理学检查,检测移