蛋白质泛素化、去泛素化与肿瘤发生的关系

泛素-蛋白水解酶体途径（Ubiquitin proteasome pathway，UPP）是细胞质和核内蛋白ATP依赖性的非溶酶体降解途径，高效并高度选择性地进行细胞内蛋白转换，还参与某些重要蛋白质的编译后修饰和改造。因此，对维持细胞正常生理功能具有十分重要的意义。但随着对UPP研究的深入，发现蛋白泛素化调节是一个可逆的过程。细胞内同时还存在一些特异的去泛素化蛋白酶进行负向调节。     

去泛素化酶在炎症性肠病中的研究进展

炎症性肠病（inflammatory bowel disease,IBD）是一种慢性胃肠道炎症性疾病,包括克罗恩病和溃疡性结肠炎,其发病机制尚不明确。蛋白质泛素化是重要的蛋白质翻译后修饰过程,可参与炎症相关信号通路的调节。靶向去泛素化酶的相关研究可阐明部分IBD信号通路机制。本文就去泛素化酶介导泛素化修饰在IBD中的作用机制研究进展作一综述。     

去泛素化酶OTULIN研究进展

泛素是一种进化上高度保守的具有76个氨基酸构成的蛋白,分子量为8.6 kDa.泛素化,即泛素/泛素链与蛋白质共价结合的过程,是真核生物蛋白质翻译后修饰的重要途径之一[1].目前发现,线性泛素链(Linear ubiquitin/Met1-linked ubiquitin chains/Met1-Ub)中泛素连接方式由泛素蛋白N末端的蛋氨酸Met1的氨基基团与另一泛素分子C末端甘氨酸分子首尾相连形成[2].     

去泛素化酶USP35在癌症中的研究进展

USP家族是去泛素化酶中数量最多的家族,泛素特异性蛋白酶35(ubiquitin specific peptidase35,USP35)是USP家族成员。近年来的研究显示,USP35在癌症进展中发挥了关键作用,在肺癌、卵巢癌、前列腺癌、乳腺癌、皮肤黑色素瘤、结直肠癌、肾透明细胞癌等多种癌组织中有表达。本文就USP35作用机制、结构、以及近年来在癌症中的研究进展进行综述。     

去泛素化酶抑制剂PR-619抑制单纯疱疹病毒复制机制的研究

目的：探讨去泛素化酶抑制剂PR-619对人类单纯疱疹病毒(herpes simplex virus,HSV)复制的影响。方法：通过In-cell Western和Western blot技术检测病毒复制及蛋白表达,同时利用real-time PCR检测相关病毒基因的表达水平。着重考察广谱去泛素化酶抑制剂PR-619对病毒mRNA转录和病毒相关蛋白合成的作用。结果：在细胞感染体系中,PR-619可以抑制HSV极早期及晚期蛋白(ICP0、ICP4和gD)的表达,从而有效阻断病毒的复制;进一步研究发现,PR-619可以增加细胞内泛素连接蛋白含量,从而抑制细胞内泛素循环,这可能是PR-619抑制病毒复制的机制。结论：HSV的复制依赖于功能化泛素的存在,而抑制细胞去泛素化酶(DUBs)活性可以阻断细胞内正常的泛素循环,从而抑制HSV复制;该研究为寻找抗HSV治疗药物或生殖道杀微生物剂新靶点提供了新方向。     

泛素-蛋白酶体系统在核因子κB途径中的作用

核转录因子NF-κB控制着一系列的细胞和组织过程,包括从细胞的分裂、增殖、凋亡到组织器官的各种应答活动.泛素-蛋白酶体系统通过以下3个途径影响NF-κB信号转导:①泛素-蛋白酶体降解NF-κB的抑制因子IκB;②对NF-κB前体如p105和p100进行加工并使之成熟;③通过非降解依赖机制激活IκB激酶IKK,从而抑制NF-κB.本文对泛素-蛋白酶体系统对NF-κB信号转导途径的影响进行综述.     

泛素-蛋白酶体系统在核因子κB途径中的作用

核转录因子NF—kB控制着一系列的细胞和组织过程,包括从细胞的分裂、增殖、凋亡到组织器官的各种应答活动。泛素-蛋白酶体系统通过以下3个途径影响NF-kB信号转导：①泛素-蛋白酶体降解NF-kB的抑制因子IKB;②对NF—kB前体如p105和p100进行加工并使之成熟;③通过非降解依赖机制激活IKB激酶IKK,从而抑制NF-kB。本文对泛素-蛋白酶体系统对NF—kB信号转导途径的影响进行综述。     

泛素蛋白酶体系统在脑出血后神经元死亡中的作用机制研究探析

泛素蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasome system,UPS)是细胞调节特定蛋白质浓度并降解折叠错误蛋白质主要机制的一部分,是主要的非溶酶体蛋白降解途径,可确保真核生物的活力、繁殖和信号传导.研究表明脑出血后神经元死亡与UPS有关,因此如何积极控制UPS、调节UPS,可能对治疗脑出血、保护受损神经元...     

安妮复苏模特模拟训练在危重病医学教学中的应用

危重病医学是一门研究危重病症发生、发展及其诊治且具有多学科交叉的边缘性学科。它包涵了急诊医学 ,要求培养医学生掌握规范化的院前急救训练。为此 ,我们连续对五届麻醉学专业医学生强化安妮复苏模特模拟训练。报告如下。1　对象与方法观察对象为 1995～ 1999年五届麻醉学专业在校大学生 ,男生 112人 ,女生 10 8人。模拟训练时间安排在危重病医学理论“复苏”结束后 1周 ,每次模拟训练时间 4小时 ,每 4人一组 ,每组 4 0分钟 ,采用挪威安妮复苏模特进行教学操作 ,该模特设有记分标准 ,带教老师现场示范后 ,医学生随机分组进行操作 ,每组共…     

无创机械通气在危重病医学中的应用

机械通气是在患者自身通气和／或氧合功能出现障碍时，运用人工装置（主要是呼吸机．Ventilator）使患者恢复有效通气、改善氧合功能并减少呼吸功的一种技术方法。它是当代临床医学最重要的技术手段之一．广泛应用于呼吸、ICU、急诊、麻醉、心血管等各科室危重症的治疗、抢救过程中。     

CRL4泛素化酶在卵巢癌中的功能和突变研究

目的 研究泛素化酶CRL4蛋白复合体家族成员CRL4WD40重复序列结构域蛋白70（WDR70）在卵巢癌细胞中的DNA修复功能,以及卵巢癌组织中该泛素化酶基因的突变规律。方法 利用免疫荧光方法,检测CRL4骨架蛋白DDB1及WDR70基因特异性沉默的卵巢癌细胞与其对应的对照组细胞在化疗药物或放射线照射诱导产生DNA双链断裂后,组蛋白H2AX（γH2AX）及单链DNA结合蛋白32（RPA32）磷酸化灶点显示的差异;BrdU标记和染色实验检测WDR70基因对DNA复制是否存在影响,同时利用免疫组化染色检测卵巢癌组织临床病理标本及正常卵巢组织标本中的WDR70和组蛋白H2B单泛素化（uH2B）染色差异,以阐明CRL4的DNA损伤应答特征,RTPCR测定卵巢癌组织中WDR70的基因表达水平,并采用DNA测序确定WDR70突变位点。结果 免疫荧光染色结果显示,CRL4WDR70的不同蛋白亚基（DDB1、WDR70）在细胞周期检验点激活和uH2B介导的DNA末端回切过程中起着不同的作用:DDB1参与以上两个机制的调控,而WDR70只促进末端回切、RPA32在DNA断裂点的招募和同源重组修复。BrdU标记和染色结果显示WDR70基因对DNA复制并不存在影响。免疫组化结果显示,卵巢癌组织临床病理标本及正常卵巢组织标本中的WDR70和uH2B表达存在差异。RTPCR结果显示WDR70基因的全长、5′和3′转录本水平在50%的卵巢癌组织中水平减低,出现多处外显子突变位点。结论 CRL4在DNA修复过程中具有促进H2B单泛素化、促进DNA末端回切和激活细胞周期检验点等多种重要功能,是维持基因组稳定性、遏阻卵巢癌发生的重要抗癌机制。     

去泛素化酶在皮质神经元缺糖缺氧再灌注损伤后坏死样凋亡中的表达

目的 探讨去泛素化酶(Cylindromatosis,CYLD)在皮质神经元中的定位及缺糖缺氧再灌注损伤后神经元坏死样凋亡中的表达变化.方法 ①皮质神经元培养6d,免疫荧光观察4,6-联脒-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)核染及神经元特异性标志物β3-tubulin表达,验证培养神经元的纯度.②原代皮质神经元细胞培养14 d,通过成熟神经元特异性标志物NeuN鉴定神经元,DAPI染核,同时用免疫荧光共定位观察目的蛋白CYLD在神经元内的定位.③培养14 d的神经元首先被分为正常对照组(Control组),无糖Earle's平衡盐组(EBSS组),Dmso组缺糖缺氧(OGD)复灌不同时间组(0h、2h、6h、8h、12 h)组.预给予广谱抗凋亡抑制剂(zVAD-fmk,zVAD) 20 μmol/L、30 min,缺糖缺氧2h,复灌不同时间点,通过Western、比色法检测神经元CYLD蛋白水平变化、乳酸脱氢酶(LDH)水平.④随后神经元被分为正常对照、OGD组,给予缺糖缺氧2h,复灌8h,通过Western blot观察细胞浆、核内CYLD蛋白表达变化情况.结果 CYLD在神经元中定位于细胞核、胞浆,胞浆CYLD随着缺糖缺氧后复灌时间的延长,8h到达高峰(P＜0.05),与LDH[分别为Control组(1.00±0.00),EBSS组(1.07 ±0.03),DMSO组(1.09±0.03),0h组(1.40±0.12),2h组(1.74±0.08),6h组(2.25±0.12),8h组(2.97±0.15),12 h组(3.01±0.08)]水平变化一致(P＜0.05),随后降低;细胞核内CYLD蛋白在缺糖缺氧2h,复灌8h后无明显变化(P＞0.05).结论 去泛素化酶CYLD在胞浆中参与皮质神经元缺糖缺氧再灌注损伤后的坏死样凋亡,下调其表达可能保护脑缺血再灌注损伤.     

基于RLR信号通路的去泛素化酶对EV71感染的调控机制研究

目的 探讨基于维甲酸诱导基因Ⅰ样受体(RLR)信号通路的去泛素化酶对肠道病毒71型(EV71)感染的调控机制.方法 将人横纹肌肉瘤细胞A-204分为空白对照组、空载质粒组、去泛素化酶组,空白对照组不作任何处理,空载质粒组转染10 nmol/L空载质粒48 h后加入EV71(MOI=0.5),去泛素化酶组转染10 nmo...     

课程思政融合CBL教学法在危重病医学见习教育中的初探

目的 研究并评价融合课程思政的基于案例的学习（case-based learning,CBL）教学法在危重病医学临床见习中的应用效果。方法 选择笔者医院2018级麻醉专业本科见习学生62名为对照组[授课为基础的学习（lecture-based learning,LBL）教学法],2019级97名为教改组（课程思政融合CBL教学法）。效果评价方式以综合考核（包括理论考核、案例分析、技能操作）和问卷调查形式进行。结果 教改组学生理论考核、案例分析和操作考核成绩均优于对照组（P<0.05）;问卷调查结果显示教改组学生课程理解和运用能力、团队协作能力、临床思维和自学能力提升方面均优于对照组,学习兴趣和时政评析能力也优于对照组（P<0.05）,教学满意度获得有效提高（P<0.05）。结论 应用课程思政融合CBL教学法在危重病医学见习教育中能够增强学生学习兴趣,提高学生重症思维能力,对培养学生掌握重症技能有积极意义。     

E3泛素连接酶MG53在胰岛素抵抗及代谢性疾病中的作用

泛素是一种存在于大多数真核细胞的小蛋白,它的主要功能是标记需要分解掉的蛋白质;附有泛素的蛋白质在桶状蛋白酶的作用下会发生降解。蛋白质泛素化是后翻译修饰的一种常见形式,这一过程是一个三酶级联反应,即需要泛素活化酶（E1）、泛素交联酶（E2）和泛素连接酶（E3）的参与。其中E3泛素连接酶能识别特定的需要被泛素化的靶蛋白,并催化泛素分子转移到靶蛋白上。Mitsugumin53（MG53）是一种存在于人类、鼠类及其他哺乳动物体内的天然蛋白质,它特异性表达于骨骼肌和心脏中,是一种含三个特定模序结构的家族蛋白。该家族蛋白能结合在细胞不需要的蛋白质上,并将其降解。     

肺浸润性腺癌组织中去泛素化酶USP17与基质金属蛋白-9的表达研究

目的 :检测肺浸润性腺癌术后组织中去泛素化酶USP17(USP17)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达特征,分析其在临床病理特征中的表达差别,探讨二者的相关性,关注对判断预后的价值。方法:本实验以75例肺浸润性腺癌作为观察组,以32例正常肺组织作为对照组,应用免疫组化方法检测二组中USP17和MMP-9的表达。结果:二组中USP17和MMP-9的表达差别有统计学意义,观察组中二者的表达与癌栓、分化及淋巴结转移有关,USP17的表达与Ki67指数和最大径有关。相关分析显示观察组中USP17和MMP-9的表达具有正相关性。二者表达与预后有关。结论:USP17和MMP-9在肺浸润性腺癌术后组织高表达,具有相关性,对病变的进展有一定调节作用,联合检测二者可能对判断预后有一定价值。     

几丁质酶在医学真菌学中的研究现状

要探讨几丁质酶(chitinase)，首先不得不提及几丁质(chitin)。几丁质又称甲壳素，化学名称为(1，4)-2-乙酰基-2-脱氧-β-D-葡糖胺多聚体，英文缩写为(GlcNAc)n，几丁质脱乙酰基后即为几丁糖(chitosan)。几丁质在地球上的含量非常丰富，仅次于纤维素，而它义具有比纤维素更加丰富的功能性质。它作为结构内容物存在于许多物种的外壳中．     

USP22、FoxM1在结直肠癌中的表达研究

目的探讨去泛素酶基因（USP22）和叉头框M1基因（FoxM1）表达在结直肠癌发生、发展中的作用,以及与患者临床病理特征的关系。方法选取行手术切除的结直肠癌组织标本120例和正常结直肠黏膜组织标本32例;采用免疫组织化学EnVision二步法和Westernblot检测结直肠癌组织及相应癌旁正常组织中USP22、FoxM1及Wnt/β-catenin通路相关蛋白（β-catenin、LEF/TCF、c-myc）的表达。结果结直肠癌组织中USP22、FoxM1的阳性表达率均明显高于癌旁正常组织（均P＜0.05）。结直肠癌组织中USP22、FoxM1、β-catenin、LEF/TCF、c-myc蛋白的表达水平均明显高于癌旁正常组织（均P＜0.05）。结直肠癌组织中USP22、FoxM1表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移、肝脏转移及Duke''s分期均有关（均P＜0.05）;且USP22/FoxM1共表达与肿瘤淋巴结转移、肝脏转移及Duke''s分期亦均有关（均P＜0.05）。结论结直肠癌组织中USP22、FoxM1的异常高表达可能参与了结直肠癌的发生、发展过程,且两者具有协同作用。