ERK1/2通路参与大鼠肠系膜动脉平滑肌细胞ETB受体上调表达

目的探讨细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)信号转导通路在血管平滑肌细胞内皮素-1 B型受体(ET_B)上调中的作用。方法用大鼠肠系膜上动脉离体培养模型，以敏感的离体小血管张力描记技术记录血管张力变化，实时PCR定量ET_B受体mRNA，PhosphoELISA法测定细胞内磷酸化的ERK1/2蛋白水平。结果大鼠肠系膜上动脉培养3 h，细胞内ERK1/2蛋白磷酸化水平明显增高，培养24 h ET_B受体mRNA表达水平显著上调，选择性ET_B受体激动剂蛇毒类似物(sarafotoxin 6c，S6c)引起的收缩增强；与特异性ERK1/2通路阻滞剂SB386023共同孵育24 h，S6c引起的最大收缩E_max明显下降，ET_B受体mRNA水平也显著降低。结论ERK1/2信号转导通路参与大鼠肠系膜上动脉离体平滑肌细胞ET_B受体上调过程。     

多沙唑嗪对映体对兔四种血管α受体的作用

多沙唑嗪(doxazosin，DOX)作为高选择性α₁受体阻断药，是临床上治疗良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia, BPH)的一线药物，但同时引起心血管系统的不良反应。本研究采用兔离体动脉环张力实验及电场刺激兔离体隐动脉诱发交感嘌呤能血管收缩实验观察R-多沙唑嗪(R-doxazosin，R-DOX)和S-多沙唑嗪(S-doxazosin，S-DOX)对兔耳动脉、肠系膜动脉和肺动脉血管平滑肌α₁受体的作用，以及较高浓度R-DOX和S-DOX对兔隐动脉交感神经突触前膜α₂受体的作用。结果表明，在兔耳动脉、肠系膜动脉和肺动脉，R-DOX和S-DOX竞争性拮抗去甲肾上腺素(noradrenaline，NA)诱发的血管收缩反应；其pA₂值分别为7.91±0.03和7.53±0.05，7.80±0.05和7.29±0.07以及8.32±0.06和7.97±0.07；且S-DOX的pA₂值均明显小于R-DOX的pA₂值(P<0.01)。R-DOX和S-DOX(0.1～10 μmol·L^-1)对电刺激诱发的血管收缩反应无明显影响；R-DOX或S-DOX(100 μmol·L^-1)显著抑制电刺激诱发的血管收缩反应，完全抑制外源性NA诱发的血管收缩反应，但对1 mmol·L^-1腺苷三磷酸诱发的血管收缩反应无明显影响。上述结果提示，R-DOX和S-DOX对NA诱发兔耳动脉、肠系膜动脉和肺动脉收缩反应具有竞争性拮抗作用，对上述三种血管S-DOX拮抗NA的pA₂值均明显小于R-DOX。此外，R-DOX和S-DOX的浓度升至10 μmol·L^-1时，对血管交感神经末梢突触前膜α₂受体仍无明显影响。     

天花粉对妊娠大鼠子宫中孕酮、孕酮受体和前列腺素含量的影响

天花粉对大鼠有抗早孕作用,使妊娠大鼠血浆孕酮浓度,子宫中孕酮和孕酮受体的含量下降,子宫中的PGF_2α含量增高,同时增敏子宫对15-Me-PGR_2α和催产素的反应性,消炎痛能抑制离体妊娠子宫自发收缩活动,但并不抑制天花粉增敏子宫对15-Me-PGF_2α和催产素反应性的作用,实验结果提示天花粉促进子宫PGF_2α的含量增加和增敏子宫对催产物质的反应性是它增加妊娠子宫自发收缩活动的重要机制,而天花粉的上述作用又可能与它使子宫中孕酮和孕酮受体下降有关。     

12月龄自发性高血压大鼠肾动脉α1肾上腺素受体亚型与同龄WKY大鼠的比较

采用RNA酶保护分析法及离体血管收缩实验比较12月龄自发性高血压大鼠(SHR)和同龄WKY大鼠肾动脉α₁肾上腺素受体(α₁-AR)亚型. 功能实验结果表明去甲肾上腺素(NE)引起SHR肾动脉收缩的pD₂值和最大收缩反应与WKY大鼠相比没有显著差异. 但舍吲哚和WB4101抑制NE收缩SHR肾动脉的pA₂值与WKY大鼠相比显著增加,同时BMY7378抑制NE收缩SHR肾动脉的pA₂值与WKY大鼠相比无显著改变. 提示SHR肾动脉对NE的敏感性与WKY大鼠相比没有差异,但α_1A-AR在介导NE收缩SHR肾动脉中的作用与WKY大鼠相比增加. RNA酶保护分析法结果显示在SHR肾动脉α₁-AR三种亚型的mRNA水平与WKY大鼠相比没有显著改变. 提示α₁-AR亚型在介导收缩反应中的改变可能因受体蛋白水平和(或)受体后信号转导的改变所致.     

R,S-1-(取代苯基)-4-[3-(萘-1-氧基)-2-羟基丙基]哌嗪类化合物的设计、合成及血管舒张活性

设计合成具有血管舒张活性的苯基哌嗪类系列化合物。以naftopidil活性代谢产物为先导化合物，根据已报道的苯基哌嗪类α₁-受体拮抗剂构效关系研究结论对先导化合物进行结构优化，设计并合成一系列新的苯基哌嗪类化合物，确定其结构，并通过测定其对苯肾上腺素引起家兔胸主动脉条收缩的抑制作用评价其血管舒张活性。发现其中5个化合物显示出不同程度的活性，其中化合物16的血管舒张活性较强，其在0.01和1 μmol·L^-1条件下血管收缩抑制率分别达到7.03%和22.72%，化合物16拟采用自发性高血压大鼠降压试验等进行进一步抗高血压活性研究。以上研究提示已报道苯基哌嗪类化合物的构效关系研究结论可适合于naftopidil的结构修饰。     

四氢异喹啉类生物碱对大鼠脑内α肾上腺素受体的作用

应用放射受体结合法研究了近30种四氢异喹啉类(TIQs)生物碱对大鼠脑内α肾上腺素受体的作用。其中l-CBN,l-THC和l-STP对α₁受体亲和力最高,K_i值为～2.0×10^-7mol/L。其次是DHS,XLP和l-DCT,K_i值分别为4.7×10^-7,6.5×10^-7和7.6×10^-7mol/L。DHS对α₂受体亲和力最高(K_i=1.25×10^-6mol/L),l-REM次之。对α受体亚型亲和力选择比K_i(alpha-2)/Ki(alpha-1)最高的是l-STP(357) 和XLP(154),它们对α₂受体几无亲和力(K_i>10^-4mnl/L)。提示l-STP和XLP对α₁受体有较高的选择性。l-SPD和l-THP对α₁和α₂受体亲和力相近,均为中等强度。THJ,DRC及l-TTD等6种TIQs对α₁和α₂受体均无亲和力(K_i>10^-4mnl/L)。     

7α-和7β-甲基-10β,17β-二乙酰氧基-△4-雌甾烯-3酮的抗早孕作用

7α-和7β-甲基-10β,17β-二乙酰氧基-△⁴-雌甾烯-3酮(简称7α-和7β-甲-乙氧雌酮)对小鼠抗早孕ED₅₀分别为1.6和5.5 mg/kg。7α-甲-乙氧雌酮在大鼠也有抗早孕作用并使血浆孕酮浓度降低,应用10 μg/ml浓度能抑制离体妊娠大鼠卵巢孕酮合成。7α-和7β-甲-乙氧雌酮与兔子宫胞浆雌二醇受体的相对结合亲和力(RBA)分别为10.8和1.5,与孕酮受体的RBA均<1.7α-和7β-甲-乙氧雌酮都有较弱的雌激素和抗雌激素活性。     

氯哌胺对15-甲基前列腺素F2α致泻和兴奋子宫作用的影响

氯哌胺(Loperamide)是一种新型止泻药,能拮抗15-M-PGF_2α引起的小鼠小肠内碳粉推进加速和腹泻,作用比吗啡和阿托品强,对离体大鼠回肠的抑制作用也比吗啡、阿托品强。氯哌胺能降低肠平滑肌张力,抑制离体大鼠回肠对15-M-PGF_2α的反应性,但却增强子宫平滑肌对15-M-PGF_2α的反应性。氯哌胺对离体大鼠子宫自发收缩活动低浓度兴奋、高浓度抑制。氯哌胺对15-M-PGF_2α促进大鼠空肠水和钠离子分泌也有拮抗作用,此作用不能被纳洛酮翻转。氯哌胺在小鼠的急性半数致死量为77.9 mg/kg。     

微血管张力测定技术在血管内皮去除中的应用

目的通过建立离体小动脉血管内皮去除的研究方法,提高微血管测量技术研究数据的可信度。方法选取♂自发性高血压大鼠(SHR)和正常血压大鼠(WKY),测量血压后,获取肠系膜动脉环。采取机械(血管环围绕电极尖端旋转、推注气体)和药物(L-NAME和吲哚美辛)相结合的方式去除内皮。采用压力肌动图技术检测苯肾上腺素(PE)、乙酰胆碱(ACh)、硝普钠(SNP)对肠系膜动脉直径变化的影响。结果(1)SHR血压值高于WKY大鼠(P<0.01);(2)PE浓度依赖地收缩肠系膜动脉。内皮完整和内皮去除时,与WKY相比,SHR的收缩增强(P<0.05);(3)ACh、SNP能够浓度依赖地舒张肠系膜动脉。内皮完整时,与WKY相比,SHR的舒张减弱(P<0.01);内皮去除时,与WKY相比,SHR的舒张增强(P<0.01)。结论(1)成功建立离体微小动脉血管内皮去除的研究方法。(2)高血压大鼠存在明显的血管舒缩功能障碍。     

醋酸棉酚对大鼠输卵管平滑肌收缩活动的影响

观察了醋酸棉酚水溶性制剂对离体大鼠输卵管平滑肌收缩活动的影响并对其作用机制作了初步探讨。结果表明,醋酸棉酚可提高大鼠输卵管平滑肌收缩张力,但并非为激动α兴奋性肾上腺素能受体,而与促输卵管组织前列腺素(PGs)的生物合成、释放并与促Ca²⁺内流机制有关。棉酚的这种药理作用还与性周期有密切关系,对动情期输卵管的作用明显高于间情期。结果还表明,前列腺索E₁(PGE₁)和前列腺素E₂(PGE₂)均可提高大鼠输卵管平滑肌收缩活性,以PGE₁的作用较强且较持久,此作用可为醋酸棉酚所明显增强。     

哇巴因对豚鼠主动脉环平滑肌作用及与Ca2+、去甲肾上腺素的相互关系

目的观察哇巴因（ouabain,Oua）对豚鼠血管平滑肌的作用，及其与Ca₂₊和去甲肾上腺素（NE）的相互作用关系。方法利用豚鼠离体胸主动脉环，观察药物对其张力的影响。结果无论有无内皮存在，Oua均能剂量依赖性地直接收缩血管平滑肌。在无钙溶液中，Oua不能引起血管收缩。Oua可使ＮＥ的量效曲线平行左移，E_max不变；Oua可使CaCl₂的量效曲线左移上移，E_max增大。硝苯地平和维拉帕米可使Ｏua所致的血管收缩曲线下降。结论Oua所致的血管收缩作用不依赖于血管内皮的存在，但依赖于细胞外钙，并且能被钙拮抗剂所拮抗；NE与Oua，Ca₂₊对血管平滑肌的收缩呈协同作用。     

羟乙葛根素对大鼠脑缺血再灌注损伤后TNF-α表达及NF-κB活性的影响

观察羟乙葛根素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后TNF-α表达及NF-κB活性的影响。采用大鼠大脑中动脉内栓线阻断法(MCAO)建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型，分别于缺血前30 min及再灌注即刻由尾静脉注射羟乙葛根素(10，20及40 mg·kg^-1)，缺血2 h再灌注24 h后取缺血侧脑组织，HE染色观察大鼠脑组织病理学变化并计数海马CA1区存活神经元数目，放射免疫分析测定脑组织匀浆中TNF-α含量，逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)测定脑组织中TNF-α mRNA表达情况，凝胶电泳迁移率实验(EMSA)观察NF-κB DNA结合活性改变，Western blotting检测观察IκBα蛋白表达情况。羟乙葛根素可明显改善大鼠海马CA1区损伤程度，升高锥体存活神经元数目，减少TNF-α蛋白及mRNA表达，抑制NF-κB DNA结合活性。羟乙葛根素可减轻大鼠脑缺血再灌注损伤后炎症反应，这可能是其发挥脑保护作用的机制之一。     

一种新的α1A肾上腺素受体选择性拮抗剂—Sertindole

本工作分别在稳定表达α_1A,α_1B和α_1D肾上腺素受体(adrenoceptor,AR)的人胚胎肾脏细胞( human embryonic kidney 293,HEK 293)和大鼠离体血管上,用放射配体结合实验和离体血管收缩功能实验方法以确定sertindole对α₁-AR亚型的选择性拮抗作用。结果显示sertindole与克隆α_1A-AR的亲和性分别是与克隆α_1B-AR和克隆α_1D-AR的69倍和132倍。Sertindole拮抗去甲肾上腺素引起的主动脉和肾动脉收缩反应的pA₂值分别与其对α_1D和α_1A亚型的pKI值相符。分别稳定表达3种亚型受体的HEK293细胞膜标本经与sertindole预温育30min后,受体与¹²⁵IBE2254结合的B_max值显著降低,KD值无显著变化;而在 sertindole 存在条件下,α₁-AR3种亚型与¹²⁵IBE2254 结合的KD值显著增大,但B_max值无显著改变。上述结果表明sertindole为不可逆性竞争性α₁-AR拮抗剂,并有α_1A亚型选择性。     

国产醋酸甲地孕酮的质量研究:6-羟基-6-甲基-17α-乙酰氧基黄体酮差向异构体的分离与鉴定

用柱层析及薄层层析对国产醋酸甲地孕酮的杂质进行了分析,共分离出7个杂质点:Ⅰ₁,Ⅰ₂,Ⅰ₃,Ⅰ₄,Ⅰ₅,Ⅰ₆,Ⅰ₇,并对其中Ⅰ₃和Ⅰ₄进行分离纯制及光谱分析,确定其结构为6β-羟基-6α-甲基-17α-乙酰氧基黄体酮及其差向异构体6α-羟基-6β-甲基-17α-乙酰氧基黄体酮。本文报道了薄层层析条件(硅胶GF₂₅₄,展开剂:醋酸乙酯-甲苯=7:3)以及光谱鉴别的依据。     

肾血管性高血压大鼠内脏血管多巴胺１受体反应性的变化

采用狭窄左肾动脉的方法建立肾血管性高血压大鼠模型,观察在高血压形成过程中内脏血管多巴胺1 (DA₁)受体反应性的变化. 结果表明在左肾动脉狭窄后2,4和12周, 肾动脉和肠系膜动脉对去甲肾上腺素引起的收缩反应增强,12周时收缩反应较4 周时有所减弱(P<0.05);对DA₁受体激动剂非诺多泮介导的舒张反应减弱,4周时达高峰,12周时舒张反应减弱保持在4 周水平. 提示血管舒张性降低在高血压维持期中起重要作用.     

细胞色素P450介导的氯沙坦钾对瑞格列奈在大鼠肝微粒体中代谢的影响

目的 研究瑞格列奈在大鼠肝微粒体中的酶促反应动力学，并考察氯沙坦钾对其在大鼠肝微粒体中代谢的影响。方法 建立大鼠肝微粒体体外孵育体系对瑞格列奈的代谢进行研究；以洛伐他汀为内标，应用UPLC测定大鼠肝微粒体中瑞格列奈的浓度。采用底物减少法，通过GraphPad Prism 5.0软件计算瑞格列奈的酶促反应动力学常数V_max和K_m；分别以系列浓度氯沙坦钾（2.5~50μmol·L^-1）与瑞格列奈（44 μmol·L^-1）于37℃水浴中共同孵育，并测定肝微粒体中瑞格列奈的减少量，考察氯沙坦钾对瑞格列奈的抑制作用。结果 瑞格列奈在大鼠肝微粒体的最佳孵育时间为40 min，最佳蛋白质量浓度为1 mg·mL^-1；瑞格列奈酶促反应动力学参数V_max=47.29μmol·min^-1·（mg·protein）^-1，K_m=51.41 μmol·L^-1；氯沙坦钾对瑞格列奈在体外肝微粒体抑制作用的IC₅₀值为17.89 μmol·L^-1。结论 氯沙坦钾对瑞格列奈在大鼠肝微粒体中的代谢具有较强的抑制作用，两药联合应用可能发生相互作用，具有诱发低血糖的风险。     

可乐定中枢降压作用与中枢胆碱能神经系统的关系

从猫第四脑室给药。毒扁豆碱降压作用可被阿托品及育亨宾阻断;可乐定降压作用可被育亨宾、密胆碱及阿托品阻断,不被可卡因阻断,破坏中枢去甲肾上腺素能末梢后,阿托品的阻断作用消失;可乐定减少脑室灌流液Ach释出量。提示猫延髓胆碱能和去甲肾上腺素能神经在心血管调节功能上相互影响,它们似有可能同在一心血管神经原形成突触联系共同对血压行抑制性调节;可乐定可能通过激动通路上突触后α₂受体产生降压作用。     

硝苯吡啶对兔输卵管活动和卵子运行的影响

钙道阻断剂硝苯吡啶(NIF)可明显延缓卵子在兔输卵管内的运行速度。在HCG处理的麻醉兔,NIF抑制输卵管的自发收缩,并说明减弱去甲肾上腺素(NA)和15-甲基PGF_2α所致输卵管腔内压升高和电活动增强。在离体兔输卵管环肌标本,NIF能明显压低NA使峡部和壶腹部环肌张力提高的浓度—反应曲线。以上提示NIF延缓兔卵子运行可能与其阻断钙通道,抑制平滑肌收缩和/或降低输卵管平滑肌对内源性NA和PGF_2α的反应性有关。     

一氧化氮合酶抑制剂(L-NAME)的药理作用与慢性血管效应

目的：探讨N^ω-硝基L-精氨酸甲酯(L-NAME)对不同动脉的慢性血管效应及其与抑制内皮依赖性一氧化氮(EDNO)合成的关系。方法：采用大鼠离体动脉环的张力测定,一氧化氮合酶活性测定及组织学、生化学等方法。结果：给药8周后大鼠尾动脉压明显升高、体重及胸主动脉的内皮依赖性舒张功能明显下降并释放内皮依赖性收缩因子,肠系膜微动脉的内皮依赖性舒张功能无改变。给药8周后出现了动脉中膜肥厚及其周围纤维化。N^ω-硝基D-精氨酸甲酯(D-NAME)的慢性给药亦可引起与L-NAME同样的动脉周围纤维化。结论：L-NAME对大鼠胸主动脉及肠系膜微动脉的作用不同,其慢性血管效应与抑制EDNO合成以外的其它机制相关。     

异常D1和D3多巴胺受体在高血压中反式-调控作用

多巴胺通过抑制肾脏近端小管(RPTs)钠的转运和松弛血管平滑肌以调节血压。多巴胺受体可以互相调节和作用，因此，Zeng等研究京都种Wistar大鼠(WKY)和自发性高血压大鼠(SHRs)的RPT细胞和肠系膜动脉及人类冠状动脉平滑肌细胞(CASMCs)和D1和D3受体的相互作用。在WKY大鼠中，D1样促效药fenoldopam，