流式细胞术白血病免疫分型中CD45设门的重要性

免疫分型在急性白血病的诊断中起着重要作用 ,它具有特异性强、客观等优点 ,从而降低了急性白血病形态学的误诊率。但也应注意到 ,所用的试剂质量、标本处理及染色方法等对结果会产生很大的影响 ,如不进行监测有可能导致结果的失真。本文就流式细胞术 (ｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ ,ＦＣＭ )白血病免疫分型中ＣＤ45设门的重要性谈些体会。运用ＦＣＭ检测白血病细胞免疫表型普遍采用ＣＤ45 /ＳＳＣ双对数散点图 (ｄｏｔｐｌｏｔ)对幼稚细胞设门来分析其抗原表达情况。白血病标本在ＣＤ45 /ＳＳＣ双对数散点图上一般可见到三群细胞 ,即成熟淋…     

CD45设门在流式细胞术检测急性白血病中的应用

流式细胞术 (Ｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ)为急性白血病免疫分型诊断提供了一项重要依据 ,但由于传统的前向角 /侧向角光散射设门法 (ｆｏｒｗａｒｄｓｃａｔｔｅｒ/ｓｉｄｅｓｃａｔｔｅｒ,又称ＦＳＣ/ＳＳＣ)不能将白血病细胞与正常细胞特别是正常淋巴细胞区别开来 ,因此一般要求样本中原始幼稚细胞占全部有核细胞 70 %以上 ,才可对检测结果做出准确判断。近年白细胞共同抗原ＣＤ4 5 的发现和应用为流式细胞术开辟了一种新的设门方法 ,恰好可以弥补这一弱点 ,本文对此进行了探讨和研究。1　对象和方法1 1　对象　急性白血病组 56例 ,全部…     

细胞分化抗原CD45辅助设门在白血病表型分析中的应用

目的建立在流式细胞仪上利用细胞分化抗原ＣＤ４５（ＣＤ４５）和侧向角光散射（ＳＳＣ）坐标图辅助门的方法，确保在白血病细胞免疫分型时设六的准确无误。方法根据ＣＤ４５在所有白细胞上都有表达，但在不同系成熟细胞和同系不同发育阶段细胞表面表达密度不同的特点，在不同荧光抗体检测组合中配以ＣＤ４５荧光单克隆抗有先按常规在前向角光散射（ＦＳＣ）与ＳＳＣ坐标图中设站，再利用ＣＤ４５－ＳＳＣ图辅助设门选择低ＣＤ４５表     

T淋巴细胞亚群绝对值测定CD45/SSC设门法和CD3/SSC设门法的比较研究

目的比较流式细胞仪两种设门方法测定外周血中T淋巴细胞亚群绝对值的差异。方法收集20例患者的外周全血,分别采用CD45/SSC、CD3/SSC两种设门方法测定T淋巴细胞亚群的百分率和绝对值,将同一标本测得的两个结果进行配对t检验,并对T淋巴细胞亚群绝对值做进一步分析,计算其线性方程。结果两种方法测得的CD3+、CD3+CD4+淋巴的绝对值差异无统计学意义(P>0.05);但CD3+CD8+淋巴的绝对值差异有统计学意义(P<0.05)。两种方法测定CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+淋巴绝对值的相关性良好。结论两种方法测定CD3+、CD3+CD4+淋巴的绝对值结果一致,均可作为CD3、CD4细胞绝对值的测定方法,并且可以相互补充。     

细胞分化抗原CD45辅助设门在白血病表型分析中的应用

目的建立在流式细胞仪上利用细胞分化抗原ＣＤ４５（ＣＤ４５）和侧向角光散射（ＳＳＣ）坐标图辅助设门的方法，确保在白血病细胞免疫分型时设门的准确无误。方法根据ＣＤ４５在所有白细胞上都有表达，但在不同系成熟细胞和同系不同发育阶段细胞表面表达密度不同的特点，在不同荧光抗体检测组合中配以ＣＤ４５荧光单克隆抗体，分析前先按常规在前向角光散射（ＦＳＣ）与ＳＳＣ坐标图中设门，再利用ＣＤ４５－ＳＳＣ图辅助设门选择低ＣＤ４５表达细胞群，并以此门返回检查ＦＳＣ－ＳＳＣ图，确认这群细胞恰好落在门中后再进行免疫表型分析。结果通过对１０例正常骨髓；髓系白血病Ｍ１～Ｍ７，慢性粒细胞性白血病，慢性单核细胞性白血病；淋巴系白血病急性淋巴细胞性白血病与慢性淋巴性白血病及多发性骨髓瘤等３００例实例分析，证实该方法易于掌握，重复性好，可正确捕获病理细胞群。结论ＣＤ４５辅助设门提高了白血病免疫学分型的准确性，特别对白血病残余病变，缓解与复发的监测提供了一个可靠的方法学手段     

应用流式细胞术对123例急性白血病进行免疫表型分析

目的研究急性白血病的免疫表型特点和诊断价值。方法采用四色荧光抗体直接标记初诊急性白血病患者骨髓,应用流式细胞仪CD45/SSC设门进行免疫表型分析。结果 123例的急性白血病免疫分型中急性髓系白血病82例,B细胞急性淋巴细胞白血病25例,T细胞急性淋巴细胞白血病13例,杂合型髓系/淋系2例,杂合型T系/B系1例。结论应用流式细胞仪四色荧光直接标记技术,CD45/SSC组合和设门,利用较少抗体特异性对白血病细胞进行多参数免疫分析,能准确判断细胞的来源和所处的分化阶段。     

流式细胞仪中CD45辅助设门在白血病免疫分型分析中的作用

ＣＤ４５是白细胞的共同抗原，但在不同系的成熟细胞上表达的抗原密度却不同，淋巴细胞＞单核细胞＞粒细胞＞红细胞／血小板，后者仅有很少非特异染色荧光。在同一系列的不同发育阶段，细胞表面ＣＤ４５的表达也不同。一般来说，细胞越幼稚，ＣＤ４５表达量越低。因此本文将ＣＤ４５作为所有白细胞的标记物，通过常规设门（ＦＳ－ＳＳ）和ＣＤ４５荧光强度对ＳＳ辅助设门对５例正常骨髓和１００例不同血液病免疫表型的分析，探讨ＣＤ４５在免疫分型中的作用。１材料和方法１．１免疫荧光染色标本来源为血液病患者骨髓。采用流式细胞仪（ＥＰ…     

232例急性白血病流式细胞术免疫表型分析

目的探讨急性白血病(AL)免疫表型的特点和临床意义。方法使用四色流式细胞仪,按照白血病分型四色方案添加抗体,对232例急性白血病患者进行的免疫分型检测,并分析抗原表达情况。结果其中T-ALL 9例,占3.9%,各类抗原的表达率依次为c CD3(100.0%)、CD7(100.0%)、CD2(88.9%)、CD5(88.9%)、CD34(66.7%)、CD1a(55.6%);B-ALL 51例,占22.0%,各类抗原的表达率依次为cCD22(100.0%)、CD19(100.0%)、HLA-DR(100.0%)、CD10(90.2%)、CD34(89.2%)、CD20(19.6%),其中7例患者伴有CD13、CD33等髓系抗原的表达。AML 172例,占74.1%,各类抗原的表达率依次为cMPO(87.8%)、CD13 (93.6%)、CD33 (97.7%)、CD117 (81.4%)、HLA-DR (62.2%)、CD34 (64.0%)、CD15 (26.2%)、CD11b (12.8%)、CD14(9.9%)、CD64(26.2%)。结论流式细胞术免疫分型能快速、多参数、客观地测定细胞膜和胞浆中多种抗原的表达,准确地判断白血病细胞的类别和所处的分化阶段,结果重复性好,从而能够更加精确的诊断出各类白血病所属的亚型,为白血病的预后判断和化疗方案的选择提供了科学的依据。     

流式细胞术白血病免疫表型分析的临床应用

白血病免疫分型是用已知的单克隆抗体(单抗)去鉴定细胞表面或细胞内的免疫标志，可以客观的反映白血病细胞的来源及分化阶段。单克隆抗体与流式细胞仪的结合应用，使诊断白血病的准确率提高到90％～99％。成为白血病诊断、治疗和判断预后的重要依据。我们对209例白血病患者进行了免疫表型检测，并对其结果进行了分析。     

常用的流式细胞术白血病表型分析的系列标志有哪些?

答 :　流式细胞术白血病表型分析 ,又称免疫分型 ,是国内外公认的诊断白血病的必要指标。常用的检测和鉴别白血病各系列的特异性标志为 :T淋巴细胞白血病 :胞浆抗原(c)CD3、抗T细胞受体 (TCR)αβ、抗TCRγδ、CD2、CD5、CD8、CD1 0和CD7;B淋巴细胞白血病 :cCD79a、CD2 2、CD1 9、CD1 0和CD2 0 ;髓系白血病 :抗髓性过氧化物酶 (cMPO)、CD1 1 7、CD1 3、CD33、CD1 4、CD1 5和CD6 4 ;NK淋巴细胞白血病 :CD1 6、CD5 6和CD5 7;红白血病 :血型糖蛋白A(GlyA)和CD36 ;巨核细胞白血病 :CD4 1、CD4 2和CD6 1 ;其中 ,cCD79…     

624例白血病三色流式细胞术免疫表型分析

目的用三色流式细胞术探讨白血病免疫表型的特点。方法采用单克隆抗体直接免疫荧光标记法,对624例白血病患者进行免疫表型分析。结果以CD45/SSC双参数散点图设门方法分析：急性髓细胞白血病421例,占67.46%,主要表达CD13、CD33、CD117,急性T淋巴细胞白血病42例,占6.73%,主要表达CD2、CD7;急性B淋巴细胞白血病122例,占19.55%,主要表达CD19、CD22;慢性淋巴细胞白血病8例,占1.28%,主要表达CD5、CD19;双表型白血病12例,占1.92%,均出现双系列细胞质抗原阳性表达。结论运用流式细胞术对白血病进行免疫表型分析,可以极大提高诊断的准确性,为临床合理治疗,判断疗效与预后提供重要依据。     

为什么流式细胞术多色分析时要进行荧光补偿调整?

答 :　在进行流式细胞术多色分析时 ,待测细胞通常携带两种或两种以上的荧光素 ,如异硫氰荧光素 (FITC)、藻红蛋白 (PE)、别藻红蛋白 (PECY5 )等。这些荧光素被激光激发后发出不同波长的荧光 ,理论上每一种荧光通过选择恰当的滤光片可被相应的检测器检测到 ,而不受其他荧光的干扰。但目前这些荧光染料都具有宽发射谱性质 ,尽管它们的发射峰各不相同 ,但发射谱范围有一定的重叠 ,也就是说 ,相邻的检测器会检测到彼此的荧光信号 ,例如 ,FITC检测器会检测到少量的PE光谱 ,而PE检测器会检测到较多的FITC光谱。这样就影响了检测结果的准…     

CD45在白血病表型分析中应用价值的探讨

目的 探讨流式细胞术ＣＤ４５辅助设门在白血病表型分析中的应用。方法 根据ＣＤ４５在所有白细胞上都有表达,但在不同系成熟细胞或同系不同发育阶段细胞表达量不同的特点,在流式细胞仪上采用对数ＣＤ４５－线性侧向角光散射（ＳＳＣ）图设门及前向角光散射（ＦＳＣ）－侧向角光散射（ＳＳＣ）图设门进行免疫表型分析。结果 用ＦＳＣ－ＳＳＣ表示则白血病细胞群与正常淋巴细胞群分布领域的境界不清,而用ＣＤ－４５ＳＳＣ图表示     

流式细胞术对1例白血病病例的免疫表型分析

目的 探讨白血病免疫分型在临床诊断、治疗中的作用。方法 采用免疫荧光标记的方法，用流式细胞仪分析患者血细胞表面各种抗原标记物的表达情况。结果 形态学最初诊断为再生障碍性贫血（AA）的这例病例，经流式细胞术检测出有异常幼稚细胞群体的存在，两次的免疫表型分析显示异常细胞群体由最初的两群细胞克隆演变为一个克隆群体，并带有B细胞系列的抗原标记，临床最终诊断为急性淋巴细胞白血病。目前采用针对B系的化疗方案，疗效较显著。结论 流式细胞术的免疫表型分析对临床的诊断、治疗方案具有重要的参考价值。     

CD45-和CD45+急性B淋巴细胞白血病的临床特点和免疫表型分析

CD45是一种蛋白酪氨酸磷酸酶,它可以通过其蛋白酪氨酸磷酸活性使蛋白酪氨酸激酶去磷酸化从而激活激酶,在淋巴细胞的活化中发挥重要作用.CD45+细胞广泛分布在除红细胞、血小板以外的所有造血细胞表面[1].正常B淋巴细胞表面CD45荧光强度略低于正常T细胞,而在急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者中差异较大[2],部分患者表现为原始细胞CD45低表达或不表达.为研究CD45在B-ALL患者中的表达规律,我们应用四色流式细胞术CD45/SSC设门法分析了92例B-ALL患者的免疫表型与其B-ALL分型间的关系.     

流式细胞仪多参数分析白血病免疫表型

用流式细胞仪５种参数和单克隆抗体（ＭｃＡｈ）１２项指标，对１０５例急性白血病（ＡＬ）思考骨髓进行免疫学分型。先用３种ＭｃＡｂ为一组染色，区分ＡＬ的主要系列：ＣＤ＿（１３）／ＣＤ＿（３３）急性髓系白血病（ＡＭＬ），ＣＤ＿（１９）－Ｂ淋巴细胞白血病，ＣＤ＿７－Ｔ淋巴细胞白血病。然后进一步用各种ＡＬ亚型相关的ＭｃＡｂ分析抗原表达，ＡＭＬ表现为低分化抗原表达型，分化抗原表达丰富型及异常分化抗原表达型。ＡＬ各亚型在流式细胞仪上的表现特征有助于了解白血病细胞恶性增殖和分化的程度，对白血病预后的判断有意义。     

流式细胞术在急性双表型白血病诊断中的应用

流式细胞术针对细胞内外的特异性抗原，用免疫荧光标志物进行急性双表型白血病的免疫分型，检测和分析其来源及分化情况，提高了急性双表型白血病诊断的准确性，并在其治疗和预后判断方面有着广阔的应用前景。     

流式细胞术在急性双表型白血病诊断中的应用

流式细胞术针对细胞内外的特异性抗原,用免疫荧光标志物进行急性舣表型白血病的免疫分型,检测和分析其来源及分化情况,提高了急性双表型白血病诊断的准确性,并在其治疗和预后判断方面有着广阔的应用前景.     

流式细胞术在急性双表型白血病诊断中的应用

流式细胞术针对细胞内外的特异性抗原,用免疫荧光标志物进行急性舣表型白血病的免疫分型,检测和分析其来源及分化情况,提高了急性双表型白血病诊断的准确性,并在其治疗和预后判断方面有着广阔的应用前景.     

流式细胞术在急性双表型白血病诊断中的应用

流式细胞术针对细胞内外的特异性抗原,用免疫荧光标志物进行急性舣表型白血病的免疫分型,检测和分析其来源及分化情况,提高了急性双表型白血病诊断的准确性,并在其治疗和预后判断方面有着广阔的应用前景.