检测聚丙烯酰胺凝胶中蛋白质的一种改进型银染法

介绍一种改进型银染色法。与传统银染色法用于检测同一种蛋白质的灵敏度、快速性进行比较。结果显示 ,在灵敏度无差异的情况下 ,改进型银染色法具有操作简便 ,省时的特点。     

DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳三种银染方法比较

目的　探讨DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)三种银染方法的特点及其适用性。方法　采用非变性PAGE垂直板对不同稀释度的 pBR 32 2MspⅠ分子量标准进行电泳分离 ,利用二种硝酸银染色法和一种银氨染色法染色 ,分析其灵敏度和噪声。结果　分子量Marker的所有条带都能染出灵敏度均为 2 5ng。在至少一个条带能染出的灵敏度方面 ,银氨染色法 ( 6 .2 5ng)低于其他两种方法。结论　时间方面Carlos等所建立的银染方法最快 ,仅需 2 0min。银氨法的噪声最低 ,结果易于保存。Brant等所建立的银染方法在实际应用中不占优势     

变性聚丙烯酰胺凝胶制备体会

变性聚丙烯酰胺凝胶电泳是分子生物学常用技术之一，凝胶的灌制比水平电泳槽凝胶灌制困难，漏胶和产生气泡常在所难免，需经过反复实践才能掌握其灌制技巧。我们在用mRNA差异显示技术筛选成人难治性肾病与激素敏感性肾病综合征患者间差异基因的实验中，运用变性聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳分离PCR产物条带，硝酸银染色显示条带进而筛选两者间差异基因。现结合相关参考文献就凝胶制备的体会报道如下。     

聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳凝胶的干膜制作法

聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)操作简单,分辨率高,是生物化学技术和医学检验中常用的一种电泳方法。为便于电泳毕标本保存,一般将电泳毕凝胶制成干膜。具体制作方法文献中未见介绍。若制作不当,膜易发生皱缩、干裂。本人在工作中试验出一种凝胶干膜制作法,操作简单易掌握。制成的膜美观、光滑、平整。现介绍如下。     

一种聚丙烯酰胺凝胶板的简易干燥方法

1 试剂甲液 甲醇:水:乙醇5:5:1乙液10%甘油水溶液2 器材①取厚15mm、边长200mm、表面平整的有机玻璃两块.锯成两个内边长为160mm的正方形框架.用细砂纸将两框架的内外边及锯下其中的一块160mm的正方形四边磨平.磨至这个正方形能自如地套在框架上.②100mm长铁夹子4个.③300mm长正方形玻璃纸两张.     

三种染色方法用于检测聚丙酰胺凝胶中蛋白质的比较

用考马斯亮蓝染色、银染色、铜染色三种方法对同一种蛋白质的灵敏度、快速性进行比较,得出三种蛋白质染色方法的优缺点,为蛋白质电泳染色合理选用不同方法提供依据。     

蓝色非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳系统在多蛋白质复合体研究中的应用

多蛋白质复合体（MPCs）是蛋白质在体内发挥功能的重要形式之一。鉴定MPCs对于整体理解决定蛋白质功能和细胞行为的蛋白质-蛋白质相互作用网络具有至关重要的意义。鉴定MPCs的限制因素之一是MPCs的分离方法。蓝色非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（BN-PAGE）系统是研究这些复合体的强有效的工具。BN-PAGE系统是一种依赖于染料考马斯亮蓝（CBB）G-250给蛋白质加上负电荷的非变性蛋白分离方法,适用于分离相对分子质量10×103至10×106范围的MPCs。近年来,有关BN-PAGE系统用于哺乳动物细胞MPCs研究的报道有了很大的增长。本文重点对BN-PAGE系统的原理、发展及应用进行综述。     

聚丙烯酰胺水凝胶注射隆乳术并发症的MRI诊断

目的 分析聚丙烯酰胺水凝胶注射隆乳术后并发症的Mill表现，并探讨其诊断价值。方法 对20例26个出现并发症的乳腺及1例健康志愿者乳腺的MPd资料进行回顾性分析。结果 感染及感染合并脓肿5例7个，表现为假体内团状长T1WI、长T2WI信号，T2WI信号较假体更高；无菌性炎症2例3个，假体包膜增厚，表现为稍长T1WI、等T2WI信号；硬结10例13个，表现为皮下、乳腺腺体内或胸大肌下的单个或数个固定的长T1WI、长T2WI信号；假体包膜破裂5例6个，表现为多发条块状、结节状长T1WI、长T2WI信号。诊断结果与临床和术后诊断结果符合。结论 聚丙烯酰胺水凝胶注射隆乳术后并发症的MRI表现具有一定特点，诊断价值大，宜作为首选方法。     

温敏型聚(N-异丙基丙烯酰胺/丙烯酰胺)纳米凝胶的制备及其性质研究

目的 调节N-异丙基丙烯酰胺(NIPA)的临界相转变温度,研究聚(N-异丙基丙烯酰胺/丙烯酰胺)P(NIPA/Aam)微凝胶的释药性质.方法 不同比例的NIPA与丙烯酰胺(Aam)单体自由基聚合法制备温敏型水凝胶,测定不同温度下的平衡溶胀率及其溶胀动力学,筛选合适配比,乳液聚合法制备纳米凝胶.以羟基喜树碱为药物模型,动态透析法测定纳米凝胶的释药特性.结果 P(NIPA/Aam)纳米凝胶粒径范围为50～200nm,包裹率、载药率分别为42.2%、2.45%.在37℃、43℃人工肠液中,2h药物释放累积率分别为10.4%、25.8%,6h分别为16.2%、35.2%.结论 Aam可调节NIPA的临界相转变温度至有临床意义的41～43℃之间,随着Aam比例的增加,凝胶机械强度增大,溶胀率减小,对温度的敏感性下降.P(NIPA/Aam)纳米凝胶对药物的释放具有明显温度响应性.     

B型超声在聚丙烯酰胺水凝胶注射隆乳并发症处理中的应用价值

目的:探讨B型超声在聚丙烯酰胺水凝胶注射隆乳术后并发症诊治中的应用及优缺点,探讨其诊断价值.材料和方法:回顾性分析228例聚丙烯酰胺水凝胶注射隆乳并发症水凝胶取出术前、后B型超声资料.结果:感染及感染俣并脓胶,表现为急性乳腺炎12例、16例个乳房,假体包膜增厚36例、72个乳房,表现硬结112例、共201个乳房;表现为皮下、乳腺体内或胸大肌下的单个或数个形态不规则异常回声68例.诊断绳索果与临床和术后诊断结果符事.结论:聚丙烯酰胺水凝胶注射隆乳术后并发症的B型超声表现具有一定特点,诊断价值大,宜作为首选方法.     

蛋白质组研究中双向聚丙烯酰胺凝电泳图谱的计算机分析

建立蛋白质组研究中双向聚丙烯酰胺凝胶电泳（ｔｗｏ－ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌｐｏｌｙａｃｒｙｌａｍｉｄｅｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ，２－ＤＰＡＧＥ）图谱的计算机分析方法。方法：利用（ＩＭＡＧＥｍＡＳＴＥＲ２－Ｄ）分析软件，结果我们对人肝癌细胞株ＨｅｐＧ２蛋白质组的２－ＤＰＡＧＥ图谱进行了计算机分析，识别了１０００以上的蛋白斑点同时获得了所识别斑点的等电点，相对分子质量、斑点面积、Ｄ值、Ｄ％、     

蛋白质组研究中双向聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱的计算机分析

目的：建立蛋白质组研究中双向聚丙烯酰胺凝胶电泳（ｔｗｏ－ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌｐｏｌｙａｃｒｙｌａｍｉｄｅｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ，２－ＤＰＡＧＥ）图谱的计算机分析方法。方法：利用ＩｍａｇｅＭａｓｔｅｒ２－Ｄ分析软件。结果：我们对人肝癌细胞株ＨｅｐＧ２蛋白质组的２－ＤＰＡＧＥ图谱进行了计算机分析，识别了１０００以上的蛋白斑点（其中肉眼可视斑点为４００左右），同时获得了所识别斑点的等电点、相对分子质量、斑点面积、Ｄ值、Ｄ％、斑点体积及相对体积等参数。结论：建立了蛋白质组研究中图像分析体系，为今后蛋白质组２－ＤＰＡＧＥ数据的分析与比较、数据库的建立、蛋白质的功能预测以及大规模斑点的模式识别奠定了基础。     

聚丙烯酰胺水凝胶注射隆乳术及其并发症的MRI表现

目的：分析聚丙烯酰胺水凝胶（PAHG）注射隆乳术及其并发症的MRI表现,探讨其临床价值。方法：收集25例经MRI检查的PAHG注射隆乳术后患者,分析隆乳假体及并发症的MRI表现。结果：25例50乳,正常3例6乳,硬结10例12乳,感染6例7乳,无菌性炎症2例4乳,血肿1例1乳,水凝胶扩散14例20乳,MRI可明确显示乳房内假体的信号、形态、位置、假包膜及向周围组织扩散情况。结论：MRI可明确PAHG注射乳房假体的位置、类型,观察隆乳术后各种并发症,有助于临床诊断和治疗。     

聚丙烯酰胺水凝胶注射式隆乳术后感染的处理

我院自 2 0 0 0 - 0 2～ 2 0 0 1- 0 7开展聚丙烯酰胺水凝胶注射式隆乳手术共 375例 ,其中双侧 372例 ,单侧 3例。术后 4例发生严重感染 ,经抽出隆乳材料 ,对症治疗后均治愈。1　临床资料本组感染 4例 ,年龄 2 6～ 36岁 ,平均 31岁 ,均为已婚已育妇女。 2例因哺乳后乳房萎缩 ,2例因小乳症要求丰乳。各项术前检查均正常 ,采用聚丙烯酰胺水凝胶注射式隆乳。其中 3例使用乌克兰引进的英捷尔法勒 ,1例使用吉林富华医用高分子材料有限公司的奥美定。注射量 2 0 0～ 30 0ｍｌ,注射层次为双侧乳房后间隙。术后常规静滴抗生素 5ｄ。并发感染均为单侧…     

蛋白质组分析中双向聚丙烯酰胺电泳技术瓣初步建立与优化

初步建立并优化用于蛋白质组分析的双向电泳技术，提高其分辨率及重复性。方法以ＨｅｐＧ２细胞为例，对以固相ＰＨ梯度为第一向的双向电泳的关键因素与环节，如样品处理，电泳参数和凝胶浓度进行一系列的优化。     

蛋白质组分析中双向聚丙烯酰胺电泳技术的初步建立与优化

目的：初步建立并优化用于蛋白质组分析的双向电泳技术，提高其分辨率及重复性。方法：以ＨｅｐＧ２细胞为例，对以固相ｐＨ梯度为第一向的双向电泳的关键因素与环节，如样品处理、电泳参数和凝胶浓度进行一系列的优化。结果与结论：本研究采用增溶、排异的裂解法处理样品，选择适中的样品量，用预制固相ｐＨ梯度——ＩＰＧ胶条（ｐＨ＝３～１０）第进行第一向等电聚焦，并选用１２％～１４％的梯度胶进行第二向ＳＤＳ分离，可获得质量较好的双向电泳图谱     

MRI对聚丙烯酰胺水凝胶注射隆乳术后并发症的诊断

目的 分析聚丙烯酰胺水凝胶注射隆乳术后并发症的MRI表现,并探讨其诊断价值.方法 对28例52个出现并发症的乳腺MRI资料进行回顾性分析.结果 MRI显示28例中:①假体囊壁局限性破裂10例(18只),假体内有多发"丝线征",MRI示假体内有多发丝线状长T1短T2低信号;②硬结17例(21只),表现为皮下、乳腺腺体内或胸大肌下的单个或数个固定的长T1、长T2信号;③无菌性炎症8例(10只),假体包膜增厚,表现为稍长T1、等T2信号影;④假体形态异常11例(16只),注入物形成的假体不规整.全部病例均经手术治疗.结论 MRI对聚丙烯酰胺水凝胶注射隆乳术后并发症能提供有价值的信息,可以作为首选影像学检查.     

银染端粒重复扩增技术检测乳腺癌组织端粒酶活性的研究

目的 探讨应用银染端粒重复扩增技术（ＴＲＡＰ）检测乳腺癌组织端粒酶活性。方法 用银染ＴＲＡＰ法对３６例乳腺癌组织和２４例乳腺良性病变组织进行端粒酶活性检测。结果 ３６例乳腺癌外科手术切除组织中，３３例检测到端粒酶活性（９１．７％），而其它良性乳腺病变组织无１例阳性，两组有非常显著性差异（Ｐ〈０．０１）。结论 端粒酶激活在乳腺癌的发生中起着重要作用，端粒酶活性检测可望成为乳腺癌诊断的有用标志物。     

聚丙烯酰胺水凝胶注射隆乳术后MRI表现与远期组织病理学变化

目的:探讨聚丙烯酰胺水凝胶(PAAG)注射隆乳后并发症、MRI表现、组织病理学变化与注入时间的关系.方法:选取PAAG隆乳术后要求取出假体的35例个体(70只乳房假体)为研究对象,注入时间1周～6年,按注入时间分为2年以内组(n=7),2～4年组(n=11),4～6年组(n=17) 3组.以术前乳房触诊结果记录各组临床...