1．8GHz射频电磁场对大鼠神经元基因表达谱的影响

目的了解1．8GHz移动电话射频电磁场（RFEMF）对大鼠神经细胞基因表达谱的影响,筛选射频电磁场反应基因。方法将原代培养的大鼠神经细随机分为实验组（辐照组）和对照组（假辐照组）,经1．8GHz射频电磁场,SAR为2W·kg^-1,间断辐照24h（5min开／10min关）后,即刻抽提两组细胞的总RNA,用Affymetrix公司的Rat Neumbiology U34array基因芯片筛选其差异表达基因,寻找可能的RFEMF反应候选基因。结果在1200个候选基因中,筛选出34个差异表达基因,其中上调基因24个,下调基因10个。差异表达基因与多种细胞功能相关（细脆骨架、信号通路、细胞代谢等）。这些基因的变化均小于2倍,但具有统计学意义（P〈0．01）。结论1．8GHz射频辐射影响大鼠神经元多个基因的表达,某些基因的改变提示射频辐射对神经元可能产生不良影响。     

1.8 GHz射频电磁场对大鼠神经元基因表达的影响

目的 了解大鼠神经元对1.8GHz移动电话射频电磁场(RFEMF)的反应基因,及在不同辐照时间、不同辐照模式下的基因表达.方法 抽提经1.8 GHz,SAR为2 W/kg的射频电磁场辐照和假辐照24 h后原代培养神经元的RNA,用基囚芯片筛选其差异表达基因,反转录-聚合酶链反应(RTPCR)验证某些基因(Egr-1、Mbp和Plp),并观察在不同辐照时间(6、24h)、不同辐照模式(间断辐射与连续辐射)下的表达情况.结果 在1200个候选基因中,24个上调,10个下凋,差异表达基因与多种细胞功能相关(细胞骨架、信号通路、细胞代谢等).RT-PCR验证Egr-1、Mbp和PIp基因的变化与芯片结果较一致.神经元暴露于1.8GHz 2W/kg射频间断辐射24、6 h后,Egr-1、Plp基因表达发生明显改变,差异有统计学意义(P＜0.05),而Mbp的改变无统计学意义(P＞0.05);暴露于24 h连续辐射后,Eg-1、Mbp基因表达发生明显的改变,差异有统计学意义(P＜0.05),而Plp的改变无统计学意义(P＞0.05);暴露于6 h连续辐射后,Egr-1、Mbp、Plp基因表达均未发生明显的改变.不同辐照时间(24、6 h相比)和不同辐照模式(间断辐射和连续辐射相比)对神经元Egr-1、Mbp、Plp基因表达的影响存在明显差异.结论 1.8 GHz射频辐射影响大鼠神经元多个基因的表达;Egr-1基因表达下调、Mbp和Plp基因表达上调,提示其对神经元可能产生不良影响;1.8 GHz射频间断辐射引起大鼠神经元细胞基因表达改变的效应大于连续辐射;24 h射频辐照(间断或连续)引起大鼠神经元细胞基因表达改变的效应大于6 h射频辐照(间断或连续).     

1800 MHz射频电磁场对人乳腺癌细胞基因表达的影响

目的了解GSM 1800MHz射频电磁场对人乳腺癌细胞株MCF-7细胞基因表达谱的影响,筛选射频电磁场的可能反应基因,判断射频电磁场对细胞功能的影响。方法体外传代培养的MCF-7细胞分为2组,分别接受GSM 1800MHz射频电磁场辐照和假辐照24h,辐照组细胞受比吸收率为2．0W／kg或3．5W／kg的射频电磁场间断辐照（5min开、10min关）,辐照结束后,立即抽提细胞总RNA,用基因芯片进行全基因转录组水平分析,芯片实验数据采用MAS5．0软件和DMT3．0软件进行分析。采用定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）验证基因芯片分析筛选到的候选差异表达基因。结果MAS软件分析结果表明,MCF-7细胞受辐照后,有少量基因的表达水平发生变化。用DMT软件进行重复性和一致性分析后,在比吸收率为2．0W／kg的射频电磁场辐照组,未找到100％一致变化的差异基因;在比吸收率为3．5W／kg的射频电磁场辐照组,找到5个100％一致变化的候选差异基因,但定量RT—PCR结果未能验证基因芯片分析筛选到的差异基因。结论在本实验条件下,未能检测到GSM 1800MHz射频电磁场明显影响MCF-7细胞的基因表达谱,提示所用的射频电磁场辐照不影响本研究中所用的MCF-7细胞功能,或该MCF-7细胞对射频电磁场辐照反应性低。     

铅对体外培养大鼠海马神经细胞生长和Oct-2蛋白表达的影响

目的　探讨铅对海马神经细胞生长发育和对Ⅱ型POU域蛋白Oct 2表达的影响。方法　采用大鼠海马神经细胞体外培养建立细胞模型 ,醋酸铅的染毒浓度分别为 10 -1、10 0 、10 1、10 2 、10 3μmol/L ,对照组给予等量培养液。染毒后 2 4h用免疫组织化学法检测神经细胞和神经胶质细胞的标志物神经丝 (NF)和神经胶质原纤维酸性蛋白质 (GFAP)以及Oct 2蛋白的表达。结果 10 μmol/L及 以上浓度醋酸铅组海马神经细胞胞体减小、轴突突起长度和细胞间连接减少。GFAP免疫组化结果发现1μmol/L醋酸铅即可使GFAP阳性细胞数明显增加 ,与对照组相比差异具有统计学意义。此外 ,1μmol/L的醋酸铅可导致神经元和神经胶质细胞Oct 2表达阳性面积比与对照组相比差异具有统计学意义 ,10 μmol/L以上浓度醋酸铅作用下 ,Oct 2表达阳性面积比和吸光度均高于对照组 ,差异具有统计学意义。结论　醋酸铅在抑制神经元生长和分化的同时可刺激神经胶质细胞增生 ,铅对中枢神经系统的部分毒作用至少与其导致的Oct 2表达增加有关     

暴露于移动电话的电磁场损伤哺乳动物神经细胞

经常暴露于移动电话产生的电磁场(EMF)可能引起健康危害的设想，由于缺乏可靠的科学证据而流为都市传闻。然而瑞典Lund大学的一个科研小组的新研究结果又使这个问题成为令人担忧的原因。     

1800 MHz射频电磁场对人乳腺癌细胞蛋白质表达的影响

目的采用高通量的蛋白质组学技术研究人乳腺癌细胞株MCF-7细胞受GSM 1800MHz射频电磁场辐照后,其蛋白质表达谱的变化,以探索移动电话信号对细胞正常生理功能的可能影响。方法比吸收率为3．5W／kg时,采用不同时间（1、3、6、12和24h）和辐照模式（间断辐射和连续辐射）的GSM 1800MHz射频电磁场处理MCF-7细胞后,直接抽提蛋白质,然后进行双向凝胶电泳。凝胶经银染后,使用PDQuest软件分析假辐照组与电磁场辐照组间的差异表达蛋白质斑点。每个实验重复3次。结果凝胶上平均可检测到1100个蛋白斑点。3．5W／kg连续辐射6h未发现差异点,其他暴露情况下均可检测到不同数量的差异蛋白,以3．5W／kg间断辐射3h和连续辐照12h检测的差异蛋白点较多,分别为18个和7个。通过搜索SWISS-PROT蛋白数据库,对差异蛋白的类别和功能进行了初步推测,结果表明差异蛋白主要与生物分子的合成和调控、信号转导、DNA损伤修复等功能相关。结论GSM 1800MHz射频电磁场对MCF-7细胞蛋白质表达谱具有一定程度的影响,且依赖于暴露的强度、时间和模式,影响环节可能涉及多个生物学过程。     

硝酸铅诱导大鼠肝组织及L-02细胞热应激蛋白70基因表达的研究

目的 研究铅诱导热应激蛋白70(HSP70)基因表达的变化.方法 以5、10、20μmol/L硝酸铅染毒胚胎肝细胞株L-02细胞,运用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增技术观察HSP70 mRNA表达的变化.将Wistar大鼠以180、60、20mg/kg3个剂量染毒硝酸铅,并设正常对照组,每组16只,雌雄各半,连续染毒28 d;运用RT-PCR扩增技术观察肝组织HSP70 mRNA表达的变化,并用原子吸收光谱法检测动物肝脏铅含量.结果 在L-02细胞未出现明显细胞毒作用的20μmol/L染铅组HSPT0基因表达明显上调.大鼠肝组织HSP70 mRNA表达与硝酸铅浓度呈剂量-反应关系,180、60 mg/kg染铅组HSP70 mRNA表达明显增加,与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);20 mg/kg染铅组与对照组的差异无统计学意义(P＞0.05).各染铅组大鼠肝脏铅含量较对照组明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 硝酸铅能够诱导大鼠肝组织及L-02细胞HSP70 mRNA表达明显增强.     

射频电磁场对阿尔茨海默病的影响

射频电磁场（radio-frequency electromagnetic field,RF-EMF）广泛存在于生产生活中,以非热效应作用于机体,通过长期RF-EMF暴露可能产生不同的生物学效应。大脑是对RF-EMF暴露敏感的靶器官之一,常表现在学习和记忆功能的改变,目前RF-EMF对学习和记忆功能的影响仍存在争论。近年来,研究发现RF-EMF长时间暴露与阿尔兹海默病（Alzheimer’s disease,AD）的发病和病程进展有关,可能通过影响AD患者脑内β-淀粉样蛋白（β-amyloid,Aβ）水平和Aβ通路下游的其他反应、激活自噬和抑制凋亡,起到保护神经元作用,从而改善AD的学习和记忆功能。目前对AD的研究仍处于初级阶段,仍未发现AD的病因和有效治疗方法。研究RF-EMF暴露对AD的影响可能为AD相关研究提供新线索。本文对射频电磁场对AD病理性改变和认知功能的影响进行综述,为AD相关研究提供依据。     

微波暴露对原代培养大鼠海马神经元热休克蛋白家族表达的影响

目的 研究微波暴露对原代培养大鼠海马神经元中热休克蛋白(heat shock proteins,HSPs)表达调控的影响.方法 采用平均功率密度为90 mW/cm2微波辐照成熟的原代培养大鼠海马神经元10 min,于辐照后0、3、6、12、24 h提取细胞总蛋白,采用免疫印迹(Western blot)法检测HSP27、HSP70、HSP90和热休克转录因子(heat shock factor 1,HSF1)蛋白表达情况;于辐照后0、3、6、12、24 h分别提取细胞总RNA和总蛋白,采用实时定量聚合酶链反应(PCR)检测hsf1的mRNA表达水平;于辐照后20、40 min提取细胞核蛋白,凝胶迁移滞后实验(electrophoretic mobility shift assays,EMSA)法检测HSF1的活性变化.结果 90 mW/cm2微波辐照10 min后,HSP27蛋白表达水平在辐照后3、6、12 h分别明显升高22%、36%、18%,HSP70蛋白表达水平在辐照后3、6、12 h分别明显升高23%、32%、26%,与辐照前比较,差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).HSP90蛋白表达水平在辐照后6、12 h分别明显升高27%、33%,与辐照前的差异亦有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).HSF1 mRNA和蛋白表达水平未见明显变化,但微波辐照可激活HSF1的DNA结合活力. 结论微波辐照后大鼠海马神经元发生热休克反应,被活化的HSF1在转录水平上调控HSPs的表达,从而发挥拮抗微波损伤的作用.     

低频电磁场对大鼠生精细胞凋亡基因表达影响

目的 探讨极低频电磁场对大鼠生精细胞凋亡相关基因Bax和Bcl-2表达的影响。方法 Wistar大鼠60只随机分为低剂量(0.1mT)、高剂量(12.8mT)电磁场暴露组及对照组,每组20只,分别有10只持续暴露2和12周;用苏木苏-伊红(H-E)染色及免疫组织化学法观察睾丸形态学和细胞凋亡相关基因Bax、Bcl-2表达的变化,用图像分析系统进行测定。结果 低、高剂量电磁场暴露组暴露2周Bax灰度值分别为(25.58±4.98),(39.17±4.33);Bcl-2灰度值分别为(68.12±3.64),(39.62±4.35);暴露12周Bax灰度值分别为(40.12±2.45),(62.32±5.90);Bcl-2灰度值分别为(55.78±2.43)(23.84±3.62)。结论 随着电磁场暴露频率的升高和时间的延长,大鼠生精细胞Bax的表达明显上调,Bcl-2的表达逐渐下调。     

1800 MHz射频电磁场对中国仓鼠肺成纤维细胞DNA损伤的影响

目的研究全球移动通讯系统(GSM)1800 MHz射频电磁场对中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL)DNA损伤的影响.方法采用DNA双链断裂的早期标志性事件H2AX的磷酸化作为检测指标,将细胞间断(5 min开,10 min关)暴露于比吸收率为0或3.0 W/kg的1800 MHz射频电磁场1或24 h后,用4%多聚甲醛固定后进行γH2AX免疫荧光分析,即用鼠源抗γH2AX单克隆抗体为一抗和异硫酸酯荧光素标记的山羊来源抗鼠抗体为二抗,显示细胞核内γH2AX的形成情况.以4,6-二咪基-4-联苯基吲哚标记细胞核,采用Image Pro-Plus图像软件分析数据,以20 mg/L的DNA损伤剂二乙酰氨基芴(AAF)作用2 h作为阳性对照.各处理条件至少检测50个细胞的γH2AX 焦点数,焦点超过5个的细胞定义为γH2AX焦点阳性细胞,将该焦点阳性细胞率作为评价细胞DNA损伤程度的指标.结果γH2AX焦点阳性细胞率在1800 MHz射频暴露24 h后为(37.9±8.6)%,在阳性对照组为(50.9±9.4)%,与假辐照组的(28.0±8.4)%比较,明显增高;而射频暴露1 h后的γH2AX焦点阳性细胞率为(31.8±8.7)%,增加不明显.结论 1800 MHz 比吸收率为3.0 W/kg的射频电磁场辐照24 h对CHL细胞DNA有损伤作用.     

亚慢性染毒苯并[a]芘对大鼠海马热休克蛋白70表达的影响

目的 研究亚慢性染毒苯并[a]芘(B[a]P)对大鼠海马热休克蛋白70( Hsp70)的影响。方法 选择48只健康雄性SD大鼠,饲养1周后将动物随机分为空白对照组、溶剂对照组及0.5、1.5、4.5、10.0 mg/kg B[a]P染毒组,隔日腹腔注射染毒90d,Morris水迷宫试验进行行为学测试。免疫印迹(Westem-blot)法和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法分别检测大鼠海马Hsp70蛋白和Hsp70 mRNA的表达水平,免疫组织化学法观察大鼠海马各区Hsp70表达情况,图像分析系统测定Hsp70平均灰度值。结果 Morris水迷宫结果显示,4.5、10.0 mg/kg B[a]P组大鼠平均潜伏期和平均总路程明显高于空白对照组、溶剂对照组、0.5、1.5 mg/kg B[a]P组,差异有统计学意义(P＜0.05);10.0 mg/kg B[a]P组平台象限滞留时间明显低于空白对照组、溶剂对照组和0.5mg/kg B[a]P组,差异有统计学意义(P＜0.05)。B[a]P染毒组大鼠海马hsp70蛋白和hsp70 mRNA的表达水平均随染毒剂量增高而下降。其中,4.5、10.0 mg/kgB[a]P组Hsp70蛋白表达水平明显低于空白对照组、溶剂对照组和0.5mg/kg B[a]P组,差异有统计学意义( P＜0.01,P＜O.05);0.5、4.5、10.0 mg/kg B[a]P组hsp70 mRNA表达水平明显低于空白对照组、溶剂对照组,差异有统计学意义(P＜0.01),10.0 mg/kg B[a]P组hsp70 mRNA表达水平明显低于其他染毒组。免疫组化结果显示,海马CA1、CA2、CA3、DG区Hsp70表达平均灰度值均随着B[a]P染毒剂量的增高而呈下降趋势。Pearson相关性分析结果显示,大鼠海马Hsp70表达水平与平均潜伏期呈负相关（r=-0.428,P＜O.05）;大鼠海马hsp70 mRNA表达水平与平均潜伏期、平均总路程呈负相关(r值分别为-0.677、-0.594,P＜0.01),与平台象限滞留时间呈明显正相关(r=0.597,P＜O.01)。结论 亚慢性染毒B[a]P可抑制大鼠海马Hsp70的表达,与大鼠学习记忆和空间探索能力损害相关,该抑制作用无区域特异性。     

cdk5、p35和p53基因在砷诱导的神经细胞凋亡中的改变

目的 研究cdk5、p35和p53基因表达量在As2O3诱导的神经细胞凋亡中的改变,为探讨As2O3神经毒性的机制提供基础资料.方法 将原代培养的大鼠神经元分为未处理对照组,DMSO溶剂对照组,1、5、10 μmol/L As2O3染毒组,分别用1、5、10 μmol/L As2O3溶液染毒,未处理对照组只加入培养液.染毒8h后,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测神经细胞活力,用流式细胞仪检测神经细胞凋亡率,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测cdk5、p35、p53基因的表达.结果 1、5、10 μmol/L As2O3染毒组神经细胞活力抑制率分别为16.77％、19.72％、27.81％.与未处理对照组和溶剂对照组相比,5和10μmol/L As2O3染毒组细胞凋亡率明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05).各染毒组cdk5、p35、p53基因的表达量随着染毒剂量的增加而升高,各组间p35基因表达量的差异无统计学意义(P＞0.05);cdk5和p53基因表达量的组间差异有统计学意义(P＜0.05),5和10 μmol/L As2O3染毒组cdk5基因表达量明显高于未处理对照组和溶剂对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);1、5和10 μmol/L As2O3染毒组p53表达量明显高于未处理对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);其中10 μmol/L As2O3染毒组p53基因表达量明显高于DMSO溶剂对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 cdk5、p35和p53可能参与了As2O3诱导的神经细胞凋亡过程.     

极低频磁场对F0F1-ATPase活力的影响及其与F1旋转频率的关系

目的 研究极低频正弦磁场对F0F1-ATPases活力的影响及其机制.方法 强度为0.1～0.5 mT、频率为4.7～96.0 Hz的磁场分别处理从光合细菌(Rhodospirillum rubrum)中提取的细菌色素体(chromatophores)外膜上的F0F1-ATPases.结果 0.5 mT,4.7、12.0、60.0、72.0、84.0、96.0 Hz磁场对F0F1-ATPases水解起促进作用,0.5 mT、24.0 Hz磁场对F0F1-ATPases水解起抑制作用,差异均有统计学意义(P＜0.05);0.3 mT,4.7、24.0、60.0 Hz的磁场对F0F1-ATPases仍有明显影响,但0.1 mT的磁场则对F0F1-ATPases无明显影响.0.5 mT,24.0、60.0 Hz的磁场对二环己基碳二亚胺(DCCD)抑制的F0F1-ATPases仍分别有明显地抑制和促进酶活力的影响,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 影响F0F1-ATPases活力的极低频磁场具有频率窗口,强度阈值在0.1～0.3 mT之间;F0F1-ATPases,特别是F1是磁场作用的一个重要的位点.     

极低频电磁场对雄性小鼠生殖的影响

目的　研究极低频电磁场 (ELFEMFs)对雄性小鼠生殖的影响。方法　 94只昆明种清洁级雄性小鼠分别暴露于 5 0Hz,0 .2、3.2、6 .4mT电磁场下 ,持续 2周或 4周 ,观测小鼠睾丸重量、睾丸组织学变化 ,计量其精子数、精子活动率及精子头部畸形率 ,采用流式细胞术检测睾丸不同倍体细胞的百分比、DNA含量以及各时相的细胞百分比。结果　 6 .4mT电磁场暴露 4周后 ,小鼠睾丸重量为( 76 .0 6± 32 .2 5 )mg ,比对照组 [( 111.4 4± 19.99)mg]明显下降 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;电磁场暴露各组小鼠睾丸组织学无明显改变 ;电磁场暴露 4周组小鼠精子数量均下降 ,其中 0 .2mT和 6 .4mT暴露组分别为 ( 4 .87± 0 .94 )× 10 6 ml和 ( 4 .30± 1.89)× 10 6 ml,与对照组 [( 6 .6 7± 0 .70 )× 10 6 ml]比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;电磁场暴露各组小鼠精子活动率均下降 ,0 .2、3.2、6 .4mT电磁场暴露组小鼠 2周和 4周的精子畸形率分别为 ( 7.4 16± 3.35 2 ) %、( 6 .86 2± 2 .94 7) %、( 8.112± 4 .6 15 ) %和 ( 10 .2 6 7±3.836 ) %、( 11.0 2 7± 7.0 5 9) %、( 8.814± 3.6 78) % ,与对照组 [( 4 .0 98± 2 .0 2 8) %、( 3.714± 1.830 ) % ]的差异有显著性 (P <0 .0 1) ;6 .4mT电磁场暴露 2周组小鼠