提取方法对北沙参多糖性质及生物活性的影响

分别采用热水回流提取、超声波提取、微波提取、碱液提取、酸液提取、纤维素酶提取等方法提取北沙参多糖,得到各北沙参多糖:GLP-W、GLP-U、GLP-M、GLP-L、GLP-A和GLP-E。对各多糖的提取率、可溶性总糖含量、黏度、结构特征、固体形貌、抗氧化和降血糖活性等指标进行测定。结果表明:北沙参多糖的提取率依次为GLP-A(39.62%)GLPE(38.33%)GLP-L(24.80%)GLP-W(23.93%)GLPM(18.92%)GLP-U(12.68%);北沙参多糖溶液的黏度均随多糖溶液浓度的升高而升高,相同浓度下,GLP-L的黏度最大;可溶性总糖含量大小依次为GLP-A(74.05%)GLPL(67.57%)GLP-W(65.41%)GLP-U(63.25%)GLP-E(33.03%)GLP-M(28.71%);抗氧化和对α-葡萄糖苷酶的抑制活性结果表明,随着多糖浓度的升高,活性逐渐增强,当浓度达到一定时,活性趋于稳定。超声波提取的北沙参多糖对DPPH自由基和羟基自由基的清除率最高,IC_(50)分别为3.091,1.999mg/mL;碱液提取的北沙参多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制率最强,IC_(50)为1.437mg/mL。     

不同产地北沙参多糖的性质和生物活性研究

对10个产地北沙参中多糖的提取率、可溶性总糖含量、黏度、分子量分布、抗氧化及降血糖活性进行了研究。结果表明:产地不同,北沙参多糖的理化性质和生物活性存在差异,但具有相似的紫外、红外光谱学性质及分子量分布。多糖提取率范围在(13.20±0.07)%～(26.75±0.01)%之间,可溶性总糖含量范围为(81.28±0.02)%～(89.10±0.10)%,黏度范围为(6.55±0.05)Pa·s～(9.40±0.10)Pa·s;其中产地为河北安国的北沙参多糖对DPPH和羟基自由基的清除率以及对α-葡萄糖苷酶的抑制率最高,半数清除率浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)分别为0.237、0.564、10.614 mg/mL。     

向日葵茎髓多糖铁配合物的制备工艺

目的:优化向日葵茎髓多糖铁的制备工艺。方法:以向日葵茎髓多糖为原料、向日葵茎髓多糖铁产率和铁含量为评价指标,采用L9(34)正交试验设计,考察反应温度、反应pH值、反应时间及多糖与柠檬酸三钠的质量配比对向日葵茎髓多糖铁产率和铁含量的影响。结果:向日葵茎髓多糖铁的最佳制备工艺条件为:反应温度80℃、pH9、反应时间3h、多糖与柠檬酸三钠的质量配比3:1,向日葵茎髓多糖铁产率达1.26g/g,向日葵茎髓多糖铁中铁含量为22.82%。结论:所得向日葵茎髓多糖铁最佳制备工艺方法简单、可靠、适合工业生产。     

香菇多糖铁（Ⅲ）配合物的制备及性质研究

采用微波法从香菇中提取香菇多糖;在弱酸性条件下,香菇多糖水溶液与三氯化铁反应合成香菇多糖铁(Ⅲ),测定了其理化性质,结果:香菇多糖铁(Ⅲ)易溶于水,且水溶液呈中性.在pH值为3～12范围内不沉淀、不水解.香菇多糖铁(Ⅲ)的水溶液中几乎不存在游离的铁(Ⅲ),表明铁(Ⅲ)与香菇多糖形成了稳定的配合物.在37℃和模拟液体中香菇多糖铁中的Fe3+易被抗坏血酸还原成Fe2+.香菇多糖铁(Ⅲ)有望开发成为较好生物利用度的强化铁的食品添加剂和营养型口服补铁剂.     

土党参多糖铁配合物的制备及其理化性质

以土党参多糖（Campanumoea javanica polysaccharide,CJP）和氯化铁（FeCl3）为底物合成土党参多糖铁配合物（CJP-Fe3＋）。采用邻菲罗啉分光光度法测定配合物中铁含量,分析配合物的理化性质、稳定性和还原性,通过红外光谱法对其结构进行表征。结果表明：实验制备的CJP-Fe3＋为红棕色无定型粉末,铁含量达到22.81%;定性鉴定结果表明CJP-Fe3＋中不存在游离的Fe3＋,稳定性实验结果显示CJP与Fe3＋形成了稳定的配合物,在空气中不易分解。CJP-Fe3＋在pH 3～12范围内可以稳定存在,在此酸碱度范围内配合物结构不会被破坏。CJP-Fe3＋有望被开发为新型的补铁剂。     

茶叶多糖铁配合物的合成及一般性质研究

从茶叶中提取茶叶多糖，尔后与铁（Ⅲ）合成茶叶多糖铁配合物（TPC）。方法：热水浸泡法提取茶叶多糖；在碱性条件下，茶叶多糖水溶液与三氯化铁反应合成TPC；测定TPC的一般理化性质。结果：TPC是深棕红色无定型粉末．TPC易溶于水，且水溶液呈中性。TPC在pH值3～12范围内不沉淀，不水解。TPC的水溶液中不存在游离的铁（Ⅲ），表明铁（Ⅲ）与大枣多糖形成了稳定的配合物。TPC中的铁（Ⅲ）易被抗坏血酸还原成铁（Ⅱ）。结论：茶叶多糖铁有望开发成为理想的口服补铁剂。     

北沙参多糖的提取工艺、理化性质及生物活性研究

在单因素试验的基础上采用响应面法对北沙参多糖的提取工艺进行优化,得到超声波提取北沙参多糖的最佳工艺条件为:提取温度65℃,超声时间22 min,液料比22:1(mL/g),该条件下多糖提取率为12.13%。制备的北沙参多糖具有多糖的典型特征,总糖含量为90.4%,蛋白含量为1.22%,热降解温度为300.32℃。通过考察北沙参多糖对DPPH自由基(IC_(50)为1.99 mg/mL)、OH自由基(IC_(50)为1.71mg/mL)和α-葡萄糖苷酶(IC_(50)为5.23mg/mL)的清除或抑制能力,表明北沙参多糖具有一定的清除自由基的能力和潜在的降血糖活性。     

水溶性大豆多糖-铁（Ⅲ）配合物的制备及其理化性质研究

研究了水溶性大豆多糖-铁（Ⅲ）配合物的制备工艺,采用响应面法二次回归正交旋转组合方案,分析了水溶性大豆多糖与铁离子的质量比、pH和反应时间对铁离子络合量及络合率的影响。结果表明,其最佳制备工艺为:质量比1.03:1、pH4.76、反应时间5h。在此条件下,水溶性大豆多糖-铁（Ⅲ）配合物中铁离子的络合量为857.32mg/g,络合率为88.30%,配合物的得率为45.37%。水溶性大豆多糖-铁（Ⅲ）溶于水,在pH1～14范围内不沉淀、不水解。水溶性大豆多糖-铁（Ⅲ）有望开发成强化铁的食品添加剂和营养型口服补铁剂。      

水溶性大豆多糖-铁(Ⅲ)配合物的制备及其理化性质研究

研究了水溶性大豆多糖-铁(Ⅲ)配合物的制备工艺,采用响应面法二次回归正交旋转组合方案,分析了水溶性大豆多糖与铁离子的质量比、pH和反应时间对铁离子络合量及络合率的影响。结果表明,其最佳制备工艺为:质量比1.03:1、pH4.76、反应时间5h。在此条件下,水溶性大豆多糖-铁(Ⅲ)配合物中铁离子的络合量为857.32mg/g,络合率为88.30%,配合物的得率为45.37%。水溶性大豆多糖-铁(Ⅲ)溶于水,在pH1～14范围内不沉淀、不水解。水溶性大豆多糖-铁(Ⅲ)有望开发成强化铁的食品添加剂和营养型口服补铁剂。     

玛咖多糖-Fe（Ⅲ）配合物的制备与表征

采用热水浸提和超声辅助法制得玛咖多糖,通过检测玛咖多糖-Fe（Ⅲ）配合物在不同pH值、反应温度和时间的吸光度来优化玛咖多糖-Fe（Ⅲ）配合物的试验条件。结果表明：玛咖多糖-Fe（Ⅲ）配合物制备的最佳条件为pH9,反应温度70℃,反应时间150 min。采用铁盐的特殊反应、红外光谱及紫外-可见吸收光谱对玛咖多糖-Fe（Ⅲ）配合物进行定性表征;采用邻菲罗啉分光光度法测得产品中Fe（Ⅲ）含量为13.31%,精密度为0.46%。     

北沙参多糖复合酶提取工艺及理化性质研究

采用响应面分析法优化复合酶提取北沙参多糖（GLP-E）提取工艺,利用DEAE-52离子交换剂对北沙参多糖进行分离纯化,并考察其单糖组成、相对分子质量及对DPPH自由基的清除作用。结果表明,北沙参多糖的最优提取工艺为酶解温度70 ℃,酶解时间3 h,液料比301 （mL/g）,酶添加量3.0%,纤维素酶和木瓜蛋白酶质量比31,北沙参多糖提取率为（22.04±0.23）%。GLP-E水洗脱得到GLP-E1,NaCl洗脱得到GLP-E2。GLP-E、GLP-E1和GLP-E2在单糖组成、相对分子质量上有所差异,但均具有一定的清除DPPH自由基能力。     

北沙参多糖的提取工艺、理化性质和生物活性研究进展

北沙参是伞形科植物珊瑚菜的干燥根,为常用药食两用资源。北沙参多糖作为北沙参主要成分之一,具有良好的生物活性。北沙参多糖的提取分为溶剂提取和辅助提取两大类,然而不同的提取方法的多糖得率、结构及生物活性不尽相同,本文介绍了其总糖含量、分子量、单糖组成、糖苷键构型等理化性质。目前对北沙参多糖的生物活性研究主要集中在免疫调节、抗氧化、抗肿瘤、抗炎及降血糖等方面,在医药、保健功能食品等领域有着良好的前景。本文就国内外学者对北沙参多糖的提取工艺、分离纯化、结构特征及生物活性研究进行了系统性的总结和归纳,同时也指出了北沙参多糖的高级结构、作用机制及构效关系尚不明确的问题,为其深入研究及有效开发利用提供科学参考。     

气相色谱法测定北沙参中有机氯农药的残留量

目的建立同时测定北沙参中9种有机氯农药残留量的气相色谱法(gas chromatography,GC)。方法以丙酮为提取剂,使用Elite-1701毛细管色谱柱,采用程序升温,ECD检测器检测,外标法定量测定北沙参中有机氯农药残留量。结果 Elite-1701柱对9种有机氯农药的分离度良好,在1.5~250μg/L范围内,浓度与峰面积呈现出良好的线性关系。平均加标回收率为79.47%~104.03%,相对标准偏差(relative standard deviations,RSDs)为2.61%~10.1%(n=6)。结论本研究的方法简便、快速、准确、稳定,可用于测定北沙参中9种有机氯农药残留量。     

响应面法优化超声波提取北沙参多糖的工艺研究

采用响应面法(Response Surface Methology)优化超声波提取北沙参多糖的工艺条件。在单因素试验的基础上,选取水料比、超声波功率、提取时间为影响因子,应用Box-Behnken中心组合进行3因素3水平的试验设计,以北沙参多糖的提取率作为响应值,进行响应面分析。通过分析得到的超声波提取北沙参多糖的最佳条件为:水料比为19:1,超声波功率为460W,提取时间为23min,在这个条件下,北沙参多糖的提取率为60.15%,与传统的热水浸提法相比,提取率提高了60%。     

水杨酸、茉莉酸甲酯及超声波对北沙参愈伤组织生长及产香豆素的影响

研究水杨酸（salicylic acid,SA）、茉莉酸甲酯（methyl jasmonate,MeJA）和超声波对北沙参愈伤组织生长的影响,并利用高效液相色谱法测定了经诱导处理后愈伤组织中香豆素（欧前胡素、异欧前胡素及补骨脂素为主要指标）含量的变化。结果表明：SA和MeJA均对北沙参愈伤组织的生长具有抑制作用,而一定时间的低强度超声波处理则能够促进北沙参愈伤组织生物量的增长;同时,结果表明此3 种诱导因子均能够不同程度地促进香豆素合成,即当SA质量浓度达到8 mg/L时,欧前胡素的含量达到最大值,为对照的3.8 倍;SA质量浓度为16 mg/L时,补骨脂素含量达最大值,为对照的1.70 倍;当SA质量浓度在28～30 mg/L之间时,异欧前胡素的含量达到最大值,此范围内总香豆素含量也达最大值,约为对照的2.33 倍;当MeJA浓度达400 μmol/L时,补骨脂素和异欧前胡素含量达到最大值,分别为对照的6.09 倍和5.53 倍,总香豆素含量也达最大值14.86 μg/g,为对照的5.11 倍;当超声波处理30 min时,愈伤组织中欧前胡素和异欧前胡素的含量达最大值5.51 μg/g和3.69 μg/g,分别为对照的5.15 倍和4.20 倍;总香豆素含量也达最大值11.90 μg/g,为对照的3.55 倍;而补骨脂素含量则在超声处理10 min后达到最大值3.60 μg/g,为对照的1.50 倍。综上,比较3 种诱导子对北沙参愈伤组织诱导处理后香豆素含量的变化发现,与SA和超声波相比,MeJA更能够有效地促进北沙参中次生代谢产物--香豆素的合成。     

Simultaneous determination of 15 components in Radix Glehniae by high performance liquid chromatography–electrospray ionization tandem mass spectrometry

A novel qualitative and quantitative method using high performance liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometry was developed for simultaneous analysis of 15 components including 10 coumarins, four phenolic acids and adenosine in Radix Glehniae, an important traditional Chinese medicine. The separation was performed on a C₁₈ column with isocratic elution consisted of 0.1% formic acid and methanol (30:70, v/v). The identification and quantification of the analytes were achieved on a hybrid quadrupole linear ion trap mass spectrometer. Multiple-reaction monitoring (MRM) scanning was employed for quantification with switching electrospray ion source polarity between positive and negative modes in a single run. Full validation of the method was carried out (linearity, precision, accuracy, limit of detection and limit of quantification). The results indicated that the method was simple, rapid, specific and reliable. And we successfully applied it to analyze 20 Radix Glehniae samples from different sources.     

油松花粉多糖提取及其清除羟自由基活性研究

通过单因素试验和正交设计试验,研究油松花粉多糖水提取条件。结果表明:提取温度和提取时间是影响多糖提取得率的主要因素,最佳提取条件为:料液比1:25,90℃水浴条件下浸提,每次浸提3h。在此条件下油松花粉多糖提取得率达1.4%;另外采用水杨酸法检测油松花粉多糖对羟基自由基清除作用。结果表明油松花粉多糖对羟基自由基有较明显的清除能力,清除率达50%,所需多糖浓度为0.75mg/ml。     

三叶青根多糖提取工艺优化、分离纯化及结构表征

采用水浴提取三叶青根多糖(Polysaccharides from roots of Radix Tetrastigma,RTP),以多糖提取得率为响应指标,在单因素试验的基础上,通过响应面分析方法确定三叶青根多糖提取的最佳工艺为:提取温度96℃、液料比34:1(mL/g)、提取时间2h,该条件下三叶青根多糖提取得率为(21.23±0.77)%。通过Sevage法除蛋白,并依次经DEAE-52离子交换柱、Sepharose CL-4B凝胶柱分级纯化,得到组分RTP-3-1。高效液相凝胶渗透色谱分析RTP-3-1为高纯度多糖,其分子量为1 244.2kDa,傅里叶红外光谱分析显示RTP-3-1是酸性多糖,核磁共振氢谱显示RTP-3-1为α型多糖。     

酶法制备葛根纤维低聚糖

以葛根膳食纤维为原料,采用酶法制备功能性纤维低聚糖,并采用高效阴离子交换色谱法测定所制备样品的糖分组成。研究酶制剂、酶解时间和酶用量对纤维低聚糖组分及含量的影响。结果表明：选择β-葡聚糖酶制备纤维低聚糖优于纤维素酶,酶解产物主要成分为葡萄糖、纤维二糖和纤维三糖。β-葡聚糖酶法制备纤维低聚糖,酶解时间2h、酶用量3U/g时所得酶解产物中纤维二糖和纤维三糖所占比例均较高,纤维低聚糖得率为11.8g/100g。