鼠胚肝和全胚细胞悬液对荷瘤小鼠的影响

目的：试验鼠细胞悬液和全胚细胞悬液对荷瘤小鼠的影响。方法：本试验用ＴＡ２系小鼠孕中期和孕末期胚肝细胞悬液及全胚细胞悬液，经尾静脉注射于荷瘤小鼠（乳腺癌、纤维肉瘤、艾氏腹水痛）。观测移植瘤生长情况及支持机体存活时间的作用。结果：经实验观察及统计学处理、全胚细胞悬液及胚肝细胞悬液输注荷瘤小鼠均未见到抑瘤作用及支持机体延长寿命的作用。结论：我们的试验结果可能预示着细胞疗法对肿瘤的治疗是有限的，需进一步研     

黑质细胞移植于PD鼠纹状体及神经生长因子对移植细胞的影响

含和不含神经生长因子(NGF)的胚鼠黑质细胞悬液移植于单侧黑质损毁的帕金森病(PD)模型鼠纹状体,术后8周和16周分别进行行为测试、组织学观察和免疫电镜观察。移植后两组动物的异常行为均有极明显改善。组织学观察,NGF组动物纹状体内有突起的细胞和突起长度明显高于非NGF组。电镜下,NGF组动物纹状体内酪氨酸羟化酶免疫反应(TH-IR)细胞与宿主细胞建立了突触联系。     

改良的玻璃化液冻存乳鼠卵巢异体原位移植后生殖功能的恢复

目的 探讨一种改良的玻璃化液冻存乳鼠卵巢,复苏后进行异体原位移植,评价其对卵母细胞成熟、受精及胚胎发育潜能的影响。方法 乳鼠卵巢进行ED20和改良的EG5.5/30液玻璃化冻存,复苏后的乳鼠卵巢一部分酶解消化,通过荧光活力检测卵子的存活率;激光共聚焦显微镜观察α-tubulin的免疫荧光检测卵子内细胞骨架的变化。一部分乳鼠卵巢进行成年去势雌鼠的原位移植。标本随机分为新鲜组和新鲜移植组;ED20液冷冻组和ED20液冻融移植组;EG5.5/30液冷冻组和EG5.5/30冻融移植组。术后15 d,受体鼠同雄鼠合笼,统计移植6个月内的产仔情况;术后6个月,检测恢复动情周期的受体鼠雌二醇(E2)水平。结果 玻璃化冻融乳鼠卵巢后,ED20液冷冻组和EG5.5/30液冷冻组卵子存活率(87.0%,84.6%)低于新鲜组(92.6%)(P<0.05);冻融后卵子内微丝和微管结构受损,荧光强度均低于新鲜组(P<0.05);接受冻融卵巢原位移植的受体鼠可以实现自然产仔,但两冷冻液冻融移植组首窝产仔时间、平均每窝产仔数、产仔总数均较新鲜移植组差异有统计学意义(P<0.05)。结论 改良的EG5.5/30液冻存幼鼠卵巢复苏后异体原位移植同ED20液效果相似,受体鼠可诞生正常子代,但是生殖储备和生育力明显下降。     

神经营养因子NGF、BDNF对AD模型鼠海马移植的影响

目的　研究神经营养因子NGF、BDNF对AD模型鼠海马移植后行为和形态学变化。方法　 2 4只AD模型鼠随机分成 4组 :单纯胚基底前脑细胞悬液移植组 (ST组 )、含NGF或BDNF胚基底前脑细胞悬液移植组 (NGF组 )、(BDNF组 )和模型对照组 ,移植后 3月进行行为测试并比较移植区AchE细胞数和纤维密度 ,运用方差分析和SNK检验进行组间比较。结果　行为测试移植 3组明显优于模型组 ,含因子组又较ST组效果好 (P<0 .0 1) ,两因子组间差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ;因子组存活细胞数均高于ST组 ,NGF组细胞数多于BDNF组 (P <0 .0 5 ) ,纤维密度两组相似 (P >0 .0 5 )。结论　海马内存活胆碱能神经元能代偿受损胆碱能神经元的功能 ,改善动物的学习记忆功能 ;NGF、BDNF均能促进胆碱能神经元存活 ,增加AchE细胞数目和突起 ,但BDNF促进神经元突起延伸作用较好 ,而NGF则对神经元保护作用较强     

胚中脑黑质移植入震颤麻痹模型大鼠脑内的实验研究

将6 - 羟基多巴胺(6 - OHDA) 分两点注入SD大鼠左侧中脑黑质内侧端,制成震颤麻痹模型,毁损后6 ～8 周,用胚龄14～16 天同种胚鼠中脑黑质细胞悬液植入模型鼠尾壳核。实验分正常对照组,模型对照组,单纯胚中脑黑质移植组(MS组) ,含层粘蛋白Laminin 胚中脑黑质移植组(LMS组) ,含雪旺氏细胞胚中脑黑质移植组(SMS组) 。于移植后2 ～4 个月分别测试旋转试验,MS组、LMS组及SMS组与模型组间均有显著差异(P< 0-01) 。动物经测试后处死。脑切片观察发现,损伤侧中脑黑质DA神经元95% 以上死亡,移植组织位于尾壳核背侧或突入侧脑室,LMS组移植区> SMS组移植区> MS组移植区。三个移植区均见TH、GABA 免疫阳性细胞,其形态及大小与正常对照侧中脑黑质所见相似。LMS组与SMS组多巴胺阳性细胞突起较MS组多且长。本实验证明中脑黑质移植物Laminin 与雪旺氏细胞均能促进DA能神经元突起生长。     

建立Duchenne型肌营养不良鼠的骨髓移植模型

【目的】建立Duchenne型肌营养不良鼠(mdx鼠)的骨髓移植模型,摸索有效的放疗剂量。【方法】用体外培养的不同数量的C57BL/6雄鼠的骨髓细胞、骨髓基质细胞、骨髓悬浮细胞,用不同方法移植给不同剂量放疗后的mdx鼠,观察受体鼠的存活率及存活时间,并对死亡鼠作GVHD(移植物抗宿主病)的病理学检测。【结果】16只mdx鼠移植前3d12Gyγ射线照射,在移植后7d内全部死亡,且注射细胞数较多者,存活时间相对较长;8只经6Gyγ射线照射的mdx鼠,移植后60d,存活4只,其中1例经腹腔注射骨髓细胞、1例肌肉局部注射骨髓细胞,移植后7d内死亡;而8Gyγ射线照射的14只mdx鼠,移植后60d10例存活,4例死亡。【结论】本实验条件下,移植前8Gyγ射线放疗较合理,在有效剂量放疗破坏受体骨髓造血系统后,静脉注射移植同种鼠的骨髓细胞、基质细胞、悬浮细胞,mdx鼠存活率较高,且移植细胞数量以1×10     

华西Ⅲ号液保存鼠肾的实验研究

采用大鼠异体肾移植模型,以UW液为对照,研究华西Ⅲ号液对鼠肾的保存效果。实验采用封闭群SD 大鼠, 体重200～280g,供受体同性。随机分为对照组(UW液组)和实验组 (HX-Ⅲ液组)2组。各组又根据保存48及72小时分为两个亚组,每个亚组各10只大鼠。原位灌注切取供体大鼠左肾后低温保存48、72小时行异体肾移植。结果: UW液保存鼠肾48、72小时移植后的存活率分别为100%和90%;HX-Ⅲ液保存鼠肾48、72小时移植后的存活率分别为100%和60%;UW液组与HX-Ⅲ液组比较,保存48小时术后血肌酐值差异无显著性(P>005),保存72小时术后HX-Ⅲ液组血肌酐高于UW液组,差异有显著性(P<0.05);术后14天,保存48小时的UW液组与HX-Ⅲ液组肾脏组织学改变无明显差别,保存72小时的HX-Ⅲ液组肾脏损害较UW 液组重。术后28天,各组肾脏的组织学基本正常。以上提示HX-Ⅲ液能有效保存鼠肾48小时。     

胚鼠腹侧中脑组织联合胚肾组织脑内移植治疗帕金森病的实验研究

目的 :观察胚肾组织对DA细胞的作用 ,为临床治疗PD提供实验依据。方法 :采用 6-OHDA损毁黑质区和腹侧被盖区制作成功的PD大鼠模型 46只。随机分组 :实验组 1:分为VM 1组 (胚VM组织和胚肾组织联合培养移植组 ;N =6)和VM2组 (单纯VM组织培养移植组 ;N =6)。分别取 14天和 18天大鼠胚VM和肾组织 ,制备成约 (1～ 1.5 )× 10 5个细胞的细胞悬液 ,植入PD大鼠毁损侧尾壳核内。移植后 1天 ,行TUNEL、TH染色和流式细胞仪检测。实验组 2 :分为VM单独移植组 (singleVM组 ,N =12 ) ;VM和胚肾组织联合移植组 (Co移植组 ,N =12 ) ;空白对照组 (N =10 )。取 14天和 18天的胚VM和肾组织 ,制备胚VM细胞悬液 ,同时将肾组织修成 0 .2mm3的组织块。singleVM组每只动物分两点植入 9μlVM细胞悬液 ;Co移植组每只动物亦植入 9μl的VM细胞悬液 ,留针 10分钟后再植入0 2mm3的胚肾组织块。动物分别存活 3、6个月 ,存活期间用APO诱导 ,观察旋转行为行TH和HE染色。结果 :实验组 1:TH染色显示 ,移植后 1天VM 1移植组和VM 2移植组纹状体针道部位有大量THir阳性细胞 ,前者较后者THir阳性细胞数显著增多 (P <0 .0 5 )。TUNEL法显示移植后 1天VM1移植组和VM2移植组纹状体针道部位有大量TUNEL阳性细胞。前者较后者TUNEL阳性细胞数显著减少     

羊膜细胞移植于帕金森病鼠纹状体的实验研究

目的　探讨非多巴胺能组织 -羊膜细胞移植治疗帕金森病 (PD)的作用机制。方法通过 6 -羟基多巴胺 (6 -OHAD)立体定向注射破坏一侧黑质 ,制成PD大鼠模型 ,然后将鼠成活羊膜细胞悬液植入受损侧纹状体 ,与死羊膜细胞移植及生理盐水假移植对照。结果发现活羊膜细胞移植可抑制大鼠的异常旋转行为 ,酪氨酸羟化酶 (TH)免疫组化结果显示在活羊膜细胞移植靶点周围出现了TH阳性物质。结论活羊膜细胞诱导了宿主纹状体残存多巴胺 (DA)神经纤维的再生 ,提示羊膜细胞能够分泌对在体DA神经元具有营养作用的物质。     

胚胎脊髓组织植入成年鼠损伤脊髓的形态学研究

利用胚胎脑组织移植术,观察胚胎大鼠脊髓组织在同种成年鼠损伤脊髓内存活,生长情况,结果表明,将孕１３～１６ｄ的胚胎大鼠脊髓组织移植入成年鼠脊髓Ｔ１１－Ｌ１背外侧组织创伤后３～５ｄ的腔隙内,胚胎脊髓组织在能在宿主鼠脊髓内存活,并生长发育成为成熟鼠脊髓组织构筑,移植组织存活率５０％,胚胎鼠脊髓移植组织的存活受宿主脊髓损伤程度,供体胚龄,移植时间和部位,移植组织营养及供血等因素的影响。     

一种在体标记成体大鼠室管膜/室下区细胞的方法

目的 研究正常成体大鼠侧脑室注射DiI标记室管膜/室下区(SVZ)细胞的方法.方法 50只雄性SD大鼠随机分为5组,每组10只,均接受2 g/L的 DiI 10 μL右侧脑室注射.采用H33258染色和激光共聚焦显微镜检测DiI注射后6 h、12 h、24 h、36 h和48 h时左侧脑室壁的标记细胞以及标记组织厚度.结论 右侧脑室DiI注射后24 h,DiI标记细胞位于左侧脑室的室管膜层; DiI注射后48 h,DiI标记细胞限定于左侧室的管膜层和室下区.此外,左侧室管膜/中隔室下区(SVZspt)和室管膜/神经节隆起的生后对应物(SVZge)部位荧光标记组织的厚度分别在DiI注射12 h和24 h后维持于稳定水平,而且,在相应各时间点上,室管膜/SVZge部位荧光标记组织的厚度都厚于室管膜/SVZspt部位(P＜0.05).结论 2 g/L 的DiI 10 μL注射于正常大鼠侧脑室后24～48 h,可能仅标记室管膜/室下区细胞.     

Experimental Study on Heterograft of Glomus Ccl ls of Carotid Body for Hemioarkinsonian Rats

Summary: To observe the effects of heterograft of glomus cells of carotid body on hemiparkinsonian rat models, rats with unilateral 6-hydroxydopamine (6-OHDA)-induced lesions of the right dopamin ergic neurons of substantia nigra received intrastriatal glomus cells heterograft. Apomorphine-induced rotation was monitored for 30 rmin at various time points after grafting. The striata were cut and ex-amined for dopamine content by HPLC and for immunohistochemical staining of tyrosine hydroxylase positive neurons (TH ) at the end of the experiments. The results showed that apomorphine-induced rotational behavior was significantly reduced for 12 weeks and the dopamine contents were signifi cantly elevated after grafting (P＜0.01), and TH cells survived better. The present study demon strates that intrastriatal heterograft of glomus cells within carotid body in rats with 6-OHDA-elicited lesions could reduce apomorphine-induced rotational behavior and elevate the dopamine contents and numbers of TH cell surviving within striatum, and can serve as a new and effective alternative for Parkinson disease.     

Experimental Study on Heterograft of Glomus Cells of Carotid Body for Hemiparkinsonian Rats

Parkinson disease(PD) is a neuro- degenerativedisorder commonly found in middle- aged or olderpeople,which ischaracterized by the loss ofmelanin-containing neurons in the substantia nigra pars com-pacta(SNpc) and a reduction in dopamine in stria-tum.After several years of treatment by dopamineprecursor,L- dihydroxyphenylalanine (L - DOPA ) ,and due to the reduced effectof L- DOPA and dyski-nesia,some PD patients need to be switched to othertherapeutic approaches such as neural transplant…     

移植骨髓间充质干细胞对帕金森大鼠旋转行为的影响

目的研究经侧脑室移植骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）对帕金森（Parkinson’s disease,PD）大鼠行为能力及中脑黑质TH表达的影响。方法雄性SD大鼠36只,随机分为假手术组（Sham组）,PD模型组（PD组）,MSCs移植组（MSCs组）。采用6-OHDA制备PD大鼠模型,经侧脑室移植骨髓MSCs,术后2周、4周、8周,腹腔注射阿朴吗啡诱导PD大鼠旋转行为,采用Western blot方法测定中脑黑质TH蛋白的表达。结果移植术后2周、4周、8周,MSCs组与PD组比较,旋转次数明显减少（P〈0.05）,移植细胞干预PD模型8周后中脑黑质TH表达,MSCs组较PD组明显增高（P〈0.05）。结论经侧脑室移植骨髓MSCs通过提高中脑黑质TH的活性,改善PD大鼠的行为能力。     

Effects of graft placement site on the survival of adrenal medulla transplants into the brain and its relation with the recovery of motor function

BACKGROUND: Because of their lack of long-term viability, adrenal tissue transplants have shown limited success in alleviating the motor disturbances associated with experimental and pathologic striatal dopamine denervation. In this study, we examined how the graft placement site influences adrenal medulla transplant survival and its relation with the reduction of motor deficits in rats bearing unilateral 6-OHDA lesion. METHODS: One or 5 microL of fetal adrenal medullar tissue was grafted either inside the striatal parenchyma or into the lateral ventricle in contact with the dopamine-denervated striatum. Motor disturbances, as assessed by apomorphine-induced rotation, were correlated to the graft morphologic survival features. RESULTS: Apomorphine-induced rotation showed a marginal reduction of 11% in all groups independently of graft survival features or placement site. Intrastriatal transplants showed limited viability characterized by a substantial loss of graft initial volume as well as fewer and smaller chromaffin cells compared to ventricular grafts, which had a reduced loss of graft initial volume and more and larger chromaffin cells. CONCLUSIONS: Although the lateral ventricle may favor adrenal medulla transplant viability, their induced motor outcome is comparable to that induced by less viable intrastriatal grafts, suggesting that the implanted dopamine-producing cells may interact and influence striatal neurons better when placed in close proximity.     

心房肽mRNA在大鼠脑室脉络丛的表达

目的 :研究大鼠脑室脉络丛细胞内是否存在ANPmRNA的基因表达。方法 :原位杂交技术。结果 :脉络丛细胞及侧脑室和第三脑室室管膜上皮细胞内呈现ANP阳性反应产物。结论 :证明在脑室脉络丛细胞及室管膜上皮细胞内存在ANPmRNA的表达。本实验结果为脉络丛产生分泌ANP提供了形态学依据 ;为脉络丛产生的ANP可能发挥的生理作用提供了理论基础     

局灶性脑缺血后室管膜/室下区细胞迁移到梗塞区周围并分化为神经元和星形胶质细胞

目的研究局灶性脑缺血后室管膜/室下区细胞的迁移分化,揭示梗塞区周围新生细胞的来源.方法大脑中动脉阻塞前,将10μl 0.2%的荧光染料DiI注射于体质量250～350 g的雄性SD大鼠侧脑室以预标记室管膜/室下区细胞.脑缺血后,采用累积式的BrdU标记方法标记新生细胞并通过双重免疫荧光染色确定细胞分化.标记的细胞通过激光共聚焦显微镜观察.结果在非缺血对照大鼠,DiI标记细胞定居于室管膜/室下区.局灶性脑缺血后,DiI标记细胞出现于胼胝体,邻近的纹状体和皮质.此外,缺血14 d后,梗塞区周围纹状体和皮质内可见一些DiI/BrdU/GFAP或DiI/BrdU/NeuN三重标记阳性细胞.结论局灶性脑缺血后,室管膜/室下区细胞迁移到梗塞区周围并分化成神经元和星形胶质细胞,这一发现对于理解成体神经干细胞的起源和开发促进脑损伤后内源性神经发生的新措施具有重要意义.     

局灶性脑缺血后室管膜 /室下区细胞迁移到梗塞区周围并分化为神经元和星形胶质细胞

目的 研究局灶性脑缺血后室管膜/室下区细胞的迁移分化,揭示梗塞区周围新生细胞的来源。方法 大脑中动脉阻塞前,将10μl0.2%的荧光染料DiI注射于体质量250~350g的雄性SD大鼠侧脑室以预标记室管膜/室下区细胞。脑缺血后,采用累积式的BrdU标记方法标记新生细胞并通过双重免疫荧光染色确定细胞分化。标记的细胞通过激光共聚焦显微镜观察。结果 在非缺血对照大鼠,DiI标记细胞定居于室管膜/室下区。局灶性脑缺血后,DiI标记细胞出现于胼胝体,邻近的纹状体和皮质。此外,缺血14d后,梗塞区周围纹状体和皮质内可见一些DiI/BrdU/GFAP或DiI/BrdU/NeuN三重标记阳性细胞。结论 局灶性脑缺血后,室管膜/室下区细胞迁移到梗塞区周围并分化成神经元和星形胶质细胞,这一发现对于理解成体神经干细胞的起源和开发促进脑损伤后内源性神经发生的新措施具有重要意义。     

下丘脑室旁核接触脑脊液的胆囊收缩素神经元的分布及特征

本文用免疫组化技术研究室旁核接触脑脊液的胆囊收缩素(CCK)神经元的分布和形态特征。结果显示:CCK神经元主要分布于大细胞内、外侧亚核的尾侧,小细胞内侧亚核和室周区。有些与第三脑室关系密切,根据其位置和形态特征,可分为3类;①室管膜内神经元。通过其胞体或脑室树突直接接触脑脊液。②室管膜下神经元。由平行室面突起发出一短侧支进入脑室。③室壁远位神经元。发一长树突穿室管膜进入第三脑室。