条斑紫菜多糖对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响

目的:探讨Fas、Bcl-2基因在条斑紫菜多糖诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡中的作用。方法:不同浓度条斑紫菜多糖作用于MCF-7细胞48h后,荧光显微镜观察人乳腺癌细胞MCF-7细胞凋亡情况,RT-PCR法检测Bcl-2、Fas基因表达量的变化。结果条斑紫菜多糖能诱导MCF-7细胞凋亡,并且上调Fas和降低Bcl-2表达。结论:条斑紫菜多糖促进人乳腺癌MCF-7细胞凋亡,其机制可能与激活Fas、抑制Bcl-2表达有关。     

条斑紫菜多糖对人肝癌Bel7402抗肿瘤作用的初步研究

目的：研究条斑紫菜多糖对人肝癌Bel7402体外抗肿瘤作用。方法：采用MTT法观察条斑紫菜多糖体外对肝癌Bel7402的增殖抑制作用;荧光显微镜观察不同浓度条斑紫菜多糖诱导Bel7402细胞凋亡作用情况,RT—PCR检测survivin、Bax基因表达量的变化。结果：条斑紫菜多糖对人肝癌Bel7402细胞有显著地增殖抑制作用,能诱导Bel7402细胞凋亡,并且能上调Bax、降低Survivin表达。结论：条斑紫菜多糖体外有一定的抗肿瘤作用,并能促进BelZ402~wJ＆凋亡．其机制可能与激活Bax、抑制Survivin表达有关。     

姬松茸多糖对糖尿病大鼠脑组织保护作用及其机制

目的:探讨姬松茸多糖对糖尿病大鼠脑组织保护作用及其作用机制。方法:将Wistar大鼠随机分为5组,A:正常对照组;B:模型组;C:2%姬松茸多糖组;D:4%姬松茸多糖组;E:8%姬松茸多糖组。8周后,HE染色观察脑组织病理变化,琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡,RT-PCR观察p53基因的表达。结果:与模型组相比,姬松茸多糖治疗组脑组织形态明显改善,脑组织细胞凋亡量明显减少,p53基因的表达明显减少。结论:姬松茸多糖对糖尿病大鼠脑组织有明显保护作用,其机制可能与抑制细胞凋亡及p53基因的表达有关。     

叶黄素和玉米黄素抑制口腔上皮细胞癌增殖的实验研究

为阐明玉米蛋白粉类胡萝卜素提取物叶黄素和玉米黄素对人口腔上皮癌细胞株KB凋亡的诱导作用,探讨其分子生物学机制。本文采用单细胞凝胶电泳、DNA凝胶电泳、流式细胞术检测叶黄素和玉米黄素诱导口腔癌细胞凋亡的情况。结果发现:单细胞凝胶电泳显示玉米蛋白粉叶黄素和玉米黄素能造成KB细胞DNA损伤、DNA凝胶电泳显示能使KB细胞DNA发生明显的降解,DNA周期分析主要阻断口腔癌细胞由G1向S期转变;流式细胞仪检测明显抑制人口腔癌细胞株KB中bcl-2基因的蛋白表达,明显升高p53、Bax基因的蛋白表达;说明玉米蛋白粉类胡萝卜素提取物叶黄素和玉米黄素具有明显抑制口腔上皮癌细胞增殖、并诱导其凋亡的作用。     

草苁蓉提取物抑制肺癌细胞增殖分子机制的研究

草苁蓉提取物可通过促进肿瘤细胞凋亡抑制A549肺癌细胞增殖。继续探讨草苁蓉提取物(BRE)抑制肺癌细胞增殖的分子机制。采用流式细胞术检测A549细胞周期分布和细胞凋亡,免疫细胞化学法检测凋亡相关蛋白Bax、Bc1-2、P53和Fas蛋白的表达,ELISA法检测sFAS蛋白的表达。结果表明,BRE改变肺癌细胞周期分布,使多数细胞阻滞于G0/G1期。同时,BRE诱导肺癌细胞凋亡,明显增加Fas表达,增加Bax表达和降低Bc1-2表达,但不改变P53表达以及sFas蛋白水平。提示,BRE抗肺癌细胞增殖作用与其改变细胞周期分布、增高Fas表达和降低Bcl-2/Bax比值而诱导肺癌细胞凋亡相关。     

代代花总黄酮对3T3-L1细胞增殖活性的影响

本文研究了代代花总黄酮抑制3T3-L1细胞增殖及诱导其凋亡的作用。不同浓度的代代花总黄酮作用于3T3-L1细胞24 h之后,采用MTT法检测代代花总黄酮对细胞增殖的抑制作用;使用倒置显微镜观察细胞形态学的变化;Annexin V-EGFP/PI标记检测细胞凋亡率;PI标记法检测了代代花总黄酮对细胞周期的影响;活性氧(ROS)试剂盒检测细胞内ROS水平;荧光定量PCR检测了凋亡相关基因的m RNA水平表达。结果表明,高浓度(300μg/m L和400μg/m L)的代代花总黄酮可显著抑制3T3-L1细胞增殖,细胞的抑制率分别为38%和63%,且细胞形态发生了明显变化,并显著升高了细胞内ROS浓度。细胞凋亡实验结果显示,代代花总黄酮可诱导3T3-L1细胞早期凋亡和晚期凋亡,100μg/m L、200μg/m L和300μg/m L代代花总黄酮处理组的细胞早期凋亡率分别为4.6%、15.7%和22.5%;晚期凋亡率分别为14.4%、8.3%和32.2%。而细胞周期实验则表明,处理后3T3-L1细胞G0/G1期细胞数比例从58.9%下降到51.4%,而相应的S期细胞数比例呈小幅度增加,G2/M期细胞数比例变化不明显。凋亡相关基因p21及p53的m RNA表达明显升高及促凋亡基因bax与抗凋亡基因bcl-2比例的升高使3T3-L1进入细胞凋亡程序。     

沙棘多糖对肝癌细胞Hep-G2生长、凋亡、迁移和侵袭的影响

目的:研究纯化沙棘多糖(SBP-3)通过p38通路对肝癌细胞Hep-G2增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响。方法:将不同浓度SBP-3作用于Hep-G2细胞,采用CCK-8法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡、划痕试验,细胞迁移侵袭试验(Transwell)检测细胞迁移及侵袭情况, 蛋白免疫印迹法(Western blot)检测 p-p38、MMP-2 和 MMP-9 蛋白表达水平。结果:经SBP-3作用48 h,125,250,500,1 000 μg/mL剂量组细胞抑制率均显著升高(P<0.05);125,250,500 μg/mL各剂量组均能诱导Hep-G2细胞产生凋亡作用(P<0.01),且细胞凋亡率随SBP-3浓度的增加而逐渐升高;SBP-3能降低Hep-G2细胞侵袭和迁移能力(P<0.01),抑制p-p38、MMP-2 和 MMP-9 蛋白表达(P<0.01)。结论:沙棘纯化多糖SBP-3能够抑制肝癌细胞Hep-G2的增殖、迁移和侵袭,促进凋亡,这些作用可能是通过调节 p38 信号通路抑制MMP-2和MMP-9蛋白表达来实现。     

乌贼墨多肽诱导人前列腺癌DU-145细胞凋亡的机制研究

本文探讨了乌贼墨多肽(SHP)诱导DU-145细胞凋亡机制。采用CCK-8法检测SHP对DU-145细胞增殖的影响;采用HE染色和AO/EB荧光染色观察DU-145细胞的形态学的变化;采用流式细胞术检测细胞早期凋亡率;并通过Western Blotting检测细胞中p53、Bcl-2、Bax、Caspase-3、VEGF的蛋白表达变化。结果表明,SHP对DU-145细胞的增殖具有明显的抑制作用且呈现剂量和时间依赖性;SHP作用后的DU-145细胞出现凋亡的形态学特征;流式细胞术结果显示,随着SHP浓度和作用时间的增加,DU-145细胞的早期凋亡率从12.25%增加到34.20%;Western Blotting结果显示,当SHP作用24 h后,VEGF、Bcl-2蛋白表达量降低,p53、Bax、Caspase-3蛋白表达量增加。综上可知,SHP能够诱导DU-145细胞凋亡,其机制有可能是通过激活抑癌基因p53,下调Bcl-2/Bax比例;下调VEGF,激活凋亡蛋白酶Caspase-3,诱发凋亡级联反应来实现的。     

P53蛋白参与灵芝酸抑制癌细胞增殖的过程

通过对灵芝三萜类物质(灵芝酸T)抑制肺癌H1299(p53-/-)细胞、肺癌95-D(p53+/+)细胞增殖实验,考察了P53蛋白对灵芝酸抑制增殖作用的影响。结果表明:通过比较IC50,表达野生型P53蛋白的95-D细胞比不表达P53蛋白的H1299细胞对灵芝酸T的敏感性高3.3倍。P53抑制剂Pifithrin-α与灵芝酸T联合处理能显著地降低灵芝酸T对95-D细胞增殖的抑制率(p0.05)。进一步研究表明灵芝酸T可诱导95-D(p53+/+)中P53蛋白表达,并促进细胞凋亡。以上结果提示P53蛋白参与了灵芝酸T抑制肿瘤细胞增殖的过程,可能是灵芝三萜类物质抗肿瘤的作用靶点。本研究可为开发辅助抑制肿瘤类保健食品研究提供理论基础。     

夏枯草对食管癌细胞Survivin和Caspase-3表达的影响及机制研究

目的:观察夏枯草提取物对人食管癌Eca-109细胞Survivin和Caspase-3基因表达影响,研究夏枯草抗食管癌作用及其机制。方法:IC50浓度夏枯草提取物作用于食管癌Eca-109细胞,CCK-8法检测细胞增殖抑制率,RT-PCR、Western Blotting法检测Survivin和Caspase-3基因及蛋白表达,Annexin-V-FITC/PI法检测细胞凋亡率。结果:食管癌Eca-109细胞出现增殖抑制,Survivin表达减少,Caspase-3表达增加,细胞凋亡率增高。结论:夏枯草可抑制食管癌Eca-109细胞增殖,抑制Survivin表达,促进Caspase-3表达,促进细胞凋亡。     

姬松茸多糖对糖尿病大鼠视网膜细胞凋亡的影响

目的:探讨姬松茸多糖对糖尿病大鼠视网膜病变的保护作用及其作用机制。方法:将Wistar大鼠随机分为5组,A:正常对照组;B:模型组;C:8%姬松茸多糖组;D:4%姬松茸多糖组;E:2%姬松茸多糖组。8周后,琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡,RT-PCR观察Bax基因、Survivin基因的表达。结果:与模型组比较,姬松茸多糖组视网膜细胞凋亡明显减少,Survivin表达上调,Bax表达降低。结论:姬松茸多糖对糖尿病大鼠视网膜组织保护作用的机制可能与抑制视网膜组织细胞凋亡及上调Survivin基因,降低Bax基因表达有关。     

条斑紫菜多糖与薏米仁多糖复配物的制备及其降血脂功效研究

本文通过对粗粮的筛选,选出最佳粗粮与浡海条斑紫菜进行复配,对其进行吸油量及脂肪酶等降血脂功能性指标的测定进行研究,首先响应面法优化条斑紫菜可溶性多糖的最佳超声波法提取工艺,再在9种粗粮中筛选出最适复配的粗粮种类,再以体外油脂吸附能力即吸油量为指标,筛选出条斑紫菜多糖和粗粮多糖的最佳复配比,最后使用复配物对小鼠脂肪酶进行抑制活性实验。结果表明:超声波法最佳提取条斑紫菜多糖的工艺为:料液比1:25,超声功率为150 W,超声温度60 ℃,超声时间30 min,获得水溶性多糖得率为4.24%±0.19%。筛选9种粗粮中得到薏仁米最适合与条斑紫菜多糖复配,且最佳复配比为1:1,吸油量最大为45.87%±5.27%,对小鼠脂肪酶抑制率为34.67%。本实验为研发新型渤海紫菜降血脂功能性食品提供理论依据。     

条斑紫菜蛋白和多糖的逆流脉冲超声辅助提取技术研究

为了缩短生产周期和提高产品产量,本文采用逆流脉冲超声技术对条斑紫菜中蛋白和多糖进行提取。采用Box-Behnken中心组合设计方法结合响应面分析对脉冲超声辅助提取条件进行优化。研究得到了提取的回归方程,通过回归分析与实验验证。在提取液pH9.0、脉冲超声的工作时间4s和间歇时间2s的条件下,获得紫菜蛋白和多糖逆流脉冲超声辅助提取的最佳工艺条件为:提取时间85min、料液温度40℃、料液比19:1(mg/mL),在此最佳条件下,紫菜蛋白和多糖总得率高达37.26%,其中紫菜蛋白和多糖的得率分别为15.68%和21.58%。通过与传统的浸提法对照实验,发现利用逆流脉冲超声辅助提取紫菜中蛋白和多糖的总得率提高了116.38%,提高幅度显著。     

藠头提取物对氟尿嘧啶的增效减毒作用的研究

研究了藠头提取物对人宫颈癌Hela细胞和人胃癌BGC-823细胞体外生长的影响、该提取物与5-FU对抑制这两种癌细胞中的协同作用,探讨了该提取物对5-FU所致小鼠免疫功能抑制的保护作用,并测定了药物对两种癌细胞增殖抑制率的影响和检测药物对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能及淋巴细胞活性的影响。发现药物作用48h后,联合用药对胃癌细胞的抑制率高于单药组,并表现明显的协同作用;联合用药且能明显拮抗5-FU所致体重降低、腹腔巨噬细胞功能降低及淋巴细胞活性降低等毒副作用。表明藠头提取物与5-FU联合使用能有明显提高5-FU抗肿瘤及降低其毒副作用。     

大豆异黄酮对HepG2细胞胆固醇代谢的作用及其机制

目的:对大豆异黄酮降低胆固醇作用及其机制进行探讨,并比较金雀异黄素(Gen),大豆素(Dai)和雌马酚(Eq)的作用强弱。方法:采用MTT检测细胞增殖状况,采用试剂盒检测LDL-C、TC和apoA-I的表达,采用实时定量PCR检测mRNA的表达。结果:大豆异黄酮可以增加细胞内胆固醇含量,增加LDL-C的摄取量和apoA-I的分泌量,其中Gen的作用最为明显,Eq的作用较弱。PPARγ和LXRα的mRNA表达量增多。结论:大豆异黄酮能够调节细胞胆固醇代谢,其作用可能是通过调节PPARγ/LXRα通路实现的。     

南瓜多糖对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗及脂联素基因表达的影响

目的:探讨南瓜多糖对2型糖尿病(2-diabetes mellitus,2-DM)大鼠糖脂代谢和脂联素(adiponectin)基因表达的影响。方法:将Wistar大鼠随机分为5组,A:正常对照组;B:模型组;C、D、E:南瓜多糖高、中、低剂量治疗组。8周后,测定空腹血糖(fasting bloodglucose,FBG)、空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)、血脂和胰岛素抵抗指数(insulin resistance index,IRI);半定量RT-PCR检测adiponectin基因mRNA的表达水平。结果:南瓜多糖治疗组FBG、FINS、TG、LDL、VLDL、CH、IRI均低于模型组,而HDL的含量则高于模型组(P<0.05);adiponectinmRNA的表达高于模型组(P<0.05)。结论:南瓜多糖可上调adiponectin基因表达,降低胰岛素抵抗;降低2-DM大鼠血糖和改善其脂代谢紊乱。     

藻蓝蛋白对非小细胞肺癌H1299生长、迁移和凋亡的功能影响

藻蓝蛋白(C-phycocyanin,C-PC)是一种从顿顶螺旋藻中提取的天然水溶性无毒的活性蛋白。采用MTT法、克隆形成实验、流式细胞术、划痕实验等探究不同浓度的藻蓝蛋白对人类非小细胞肺癌H1299细胞活力、凋亡、迁移等的影响。结果表明:藻蓝蛋白能显著(p<0.05)降低H1299细胞存活率,通过下调周期蛋白cyclinA、CDK2,上调周期抑制因子P21使细胞周期阻滞在S期;藻蓝蛋白处理使细胞形态发生改变,同时通过调控bad、bax、bcl-xL、bcl-2等凋亡相关基因的表达促进细胞凋亡;体外划痕实验表明藻蓝蛋白通过调控基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)和基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)抑制细胞迁移。研究结果表明藻蓝蛋白能够通过细胞周期S期阻滞,调控细胞周期、凋亡和迁移相关基因的表达而抑制非小细胞肺癌H1299细胞的生长和迁移,进而诱导细胞凋亡,为进一步开发功能食品奠定坚实的理论基础。     

银杏叶提取物对甲状腺癌细胞增殖和凋亡的影响

本文探究了银杏叶提取物对甲状腺癌细胞增殖、凋亡作用的影响。将培养后的细胞分为空白组、低浓度银杏叶组、中浓度银杏叶组、高浓度银杏叶组,观察四组细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移和粘附能力,并对凋亡相关蛋白p53、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bax表达进行检测。研究结果显示,72 h时高浓度银杏叶组细胞增殖率为14.25%,低于其他三组;凋亡率为81.64%,高于其他三组。高浓度银杏叶组甲状腺癌细胞迁移数、侵袭数、粘附数分别为25.66、24.19、13.02,均低于其他三组(p0.05)。高浓度银杏叶组甲状腺癌细胞p53、Bcl-2相对表达量分别为0.36、0.26,均低于其他三组,Bax相对表达量为1.79,高于其他三组(p0.05)。结果表明银杏叶提取物能够抑制甲状腺癌细胞增殖、侵袭、迁移、粘附能力,还能够通过调控凋亡相关蛋白p53、Bcl-2、Bax表达而促进细胞凋亡,且其能力呈现浓度依赖性。