响应面优化酶解法制备岩豆抗氧化肽工艺

以岩豆为原料,分别以盐提法和水提法提取蛋白,通过比较盐溶蛋白和水溶蛋白的DPPH自由基清除能力,得出盐溶蛋白的DPPH自由基清除能力较高。以岩豆盐溶蛋白为原料,采用响应面优化酶解法制备岩豆抗氧化肽的工艺条件。结果表明,以DPPH自由基清除率为评价指标,筛选出胃蛋白酶为最优酶制剂。酶解法制备岩豆抗氧化肽最优工艺条件为底物质量浓度0. 8 mg/mL、酶解温度34℃、酶添加量1 100 U/g、酶解时间36 min、酶解pH 2. 0,此条件下岩豆抗氧化肽的DPPH自由基清除率为70. 41%,多肽得率为53. 63%。     

不同提取方法对金华火腿粗肽液抗氧化活性的影响

研究两种提取方法(磷酸盐和盐酸)所得金华火腿粗肽液的抗氧化活性,以自由基的清除能力,金属离子螯合能力,还原力以及总抗氧化能力为测定指标,以还原型谷胱甘肽(GSH)作对照。结果表明:磷酸盐法提取的金华火腿粗肽液(P)多肽含量显著(p<0.05)高于盐酸法提取的金华火腿粗肽液(H);质量浓度低于5mg/m L时,P和H清除DPPH自由基与超氧阴离子自由基能力无显著差异;P螯合金属离子的能力显著(p<0.05)高于H和GSH;当质量浓度为4mg/m L时,P还原力显著(p<0.05)高于H;当质量浓度为1mg/m L时,P总抗氧化能力达到GSH的48%,显著高于H(p<0.05)。因此磷酸盐所提取的金华火腿粗肽液抗氧化能力优于盐酸所提取的金华火腿粗肽液。      

苜蓿叶蛋白制备抗氧化肽的条件优化

目的优化苜蓿叶蛋白制备抗氧化肽的条件。方法以现蕾期苜蓿叶为原材料,利用加热法提取苜蓿叶蛋白,再分别用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶等5种蛋白酶分别进行水解。以酶解时间、酶解温度、酶解pH为影响因素,以提取物水解液对DPPH自由基的清除率为指标,采用单因素试验和正交试验对苜蓿叶蛋白制备抗氧化肽的条件进行优化。结果 5种蛋白酶中,碱性蛋白酶酶活力较高、比较稳定、具有较强的DPPH清除能力。各因素对抗氧化值影响的顺序依次为pH、温度、时间,最适水解条件为酶解时间4.0 h,温度55℃,pH 11.50,在此条件下,清除率为(58.10±1.09)%。结论在最优条件下用酶解法可制备具有较高抗氧化活性的植物肽。     

响应面优化藏羊皮胶原蛋白肽超声辅助提取工艺及其体内抗氧化活性分析

为明确超声辅助提取对藏羊皮胶原蛋白肽含量及功能活性的影响。试验采用响应面法研究了料液比、超声功率和超声时间3个因素,确定了胶原蛋白肽最佳超声辅助提取工艺;并对藏羊皮胶原蛋白肽进行了抗氧化能力分析,模拟消化过程中的还原力和·OH清除能力研究。结果表明：超声辅助处理能明显提高胶原蛋白肽含量,最佳超声提取工艺为料液比1:18、超声功率220 W,超声时间27 min,藏羊皮胶原蛋白肽含量为30.21%±1.67%。超声波辅助提取后胶原肽的还原力和·OH清除率为0.49和83.2%,与超声前的胶原肽相比分别提高了4%和38.3%,经胃肠消化后还原力和·OH均有一定程度的下降,但仍然具有较好的抗氧化活性。超声辅助提取藏羊皮胶原蛋白肽具有提高胶原蛋白肽含量和增强体内抗氧化活性的优势,为功能性产品的开发提供了数据参考。     

核桃蛋白肽的抗氧化活性研究

以VC为对照,研究了分子质量小于3000u的核桃蛋白肽混合物的还原能力、羟自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力以及二苯代苦味酰基自由基清除能力。结果显示,随着核桃蛋白肽浓度的增加,其还原能力、羟自由基的清除能力和超氧阴离子清除能力增大,在浓度为30mg/mL时,核桃蛋白肽还原能力达到VC的57.1%;在浓度为50mg/mL时,核桃蛋白肽对羟自由基(OH.)的清除率分别69.1%,对超氧阴离子自由基的清除率达到了85%。而对二苯代苦味酰基自由基清除能力则是先增大后变小,在20mg/mL时达到最大值66%。核桃蛋白肽的分子质量分布主要有2大区域,蛋白肽氨基酸含量达到89.74%。     

混菌发酵紫苏粕小肽提取工艺优化及体外抗氧化活性研究

以混菌发酵的紫苏粕为原料,通过控制提取的料水比、温度、时间、pH,以小肽的得率为指标,优化提取工艺,并考察了发酵前后小肽的DPPH自由基清除能力、羟自由基(·OH)清除能力和还原力的变化。试验结果表明,当碱性蛋白酶添加量为5%(质量分数)时的最佳提取工艺条件为:pH 8.5,酶解温度45℃,酶解时间210 min,底物质量分数5%,此条件下小肽得率(32.56±1.25)%;此时发酵紫苏粕小肽的DPPH自由基清除率、·OH清除率和还原力最高分别为(90.00±4.58)%、(100.00±0)%和2.49±0.09,未发酵紫苏粕小肽的DPPH自由基清除率、·OH清除率和还原力最高分别为(84.00±2.65)%、(96.00±2.00)%和1.87±0.10。发酵后紫苏粕中小肽比未发酵紫苏粕小肽DPPH自由基清除率、·OH清除率和还原力分别提高了6%、4%、33%。     

皱纹盘鲍腹足抗氧化肽的制备及其工艺优化

以皱纹盘鲍腹足为原料制备抗氧化肽。采用酶解技术,以皱纹盘鲍腹足为原材料,多肽得率、水解度、还原力、二苯代苦味脐基自由基(DPPH·)清除率为主要影响指标,筛选出最优蛋白酶;在单因素实验的基础上,应用响应面分析法,对pH值、酶解温度、酶解时间进行优化,确定制备工艺。结果表明,中性蛋白酶酶解皱纹盘鲍腹足制备抗氧化肽酶解液的最佳工艺条件为:pH 7. 10,酶解温度50. 25℃,酶解时间4. 65 h,此时皱纹盘鲍腹足抗氧化肽酶解液的DPPH·清除率可达到96. 12%,与预测理论值相比,其相对误差为0. 12%,且平均多肽含量可达到80. 56%。说明该工艺条件适于制备皱纹盘鲍腹足抗氧化肽,可达到促进皱纹盘鲍的产业化。     

鸭肉蛋白源抗氧化肽的酶法制备工艺

以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除率为指标,采用响应曲面法（response surface methodology,RSM）优化胃蛋白酶制备鸭肉抗氧化肽的最佳酶解工艺条件。结果表明：以底物质量浓度、酶与底物质量比和酶解时间为自变量,以DPPH自由基清除率为响应值,得到的回归方程拟合度高（R2=0.995 7,R2Adj=0.992 7）。其中酶与底物质量比对DPPH自由基清除率的影响最大,其次是酶解时间,底物质量浓度的影响最小。胃蛋白酶的最优酶解工艺条件为底物质量浓度10.89 g/100 mL、酶与底物质量比0.013%、酶解时间3.54 h,此时DPPH自由基清除率的理论值可达84.23%,通过优化验证实验测得,在最优酶解条件下,DPPH自由基清除率的实际值为（83.57±0.20）%。     

酶解核桃蛋白制备抗氧化肽的研究

利用木瓜蛋白酶酶解核桃分离蛋白制备小分子活性肽,并研究了不同分子量段核桃小分子肽的抗氧化性能。通过单因素实验和正交实验,确定了木瓜蛋白酶制备抗氧化肽的最佳酶解条件为:pH8.5,温度50℃,酶与底物浓度之比[E]/[S]=3:100,底物浓度[S]=3.5g/100mL,酶解时间5h。用截留分子量分别为3kDa和10kDa的超滤膜将核桃粗肽液分离成<3kDa、3～10kDa及>10kDa3个分子量段,并对不同分子量段核桃多肽的抗氧化性进行了研究,结果表明,分子量<3kDa的核桃多肽的抗氧化性大于其他两个分子量段。     

酶解发酵酸肉制备抗氧化肽的工艺优化

以侗族酸肉、苗族酸肉两种酸肉为原料,采用木瓜、碱性、风味及中性蛋白酶四种蛋白酶进行酶解,测定酶解液短肽得率、羟自由基及DPPH自由基清除率,结果表明碱性蛋白酶酶解液的短肽得率(侗族86.01%,苗族82.52%)、羟自由基(侗族87.48%,苗族79.88%)及DPPH自由基(侗族74.63%,苗族87.87%)清除率最高。通过比较分析苗族酸肉较侗族酸肉短肽得率更高,因此选择以蛋白酶种类、加酶量、酶解时间及料液比为自变量的单因素试验基础上,以苗族酸肉短肽得率及DPPH自由基清除率为评价指标,采用响应面优化最佳酶解条件。结果表明,酸肉抗氧化肽最佳酶解工艺为:碱性蛋白酶添加量12600 U/g、酶解时间1 h、料液比1:1.09(m:V)。在此最优条件下酶解获得的抗氧化肽得率为83.35%,是预测值的98.99%,DPPH自由基清除率力为84.01%,是预测值的97.33%,与预测值基本一致,表明以碱性蛋白酶酶解的酸肉肽具有较高的抗氧化活性及营养价值,同时为酸肉抗氧化肽的开发及利用提供理论依据。     

扇贝贝肉抗氧化肽制备及体外抗氧化实验研究

以海湾扇贝和虾夷扇贝的贝肉为原料,研究扇贝品种、蛋白酶种类、加酶量、固液比、酶解温度对水解度及体外自由基清除率的影响。在单因素实验的基础上采用L9(34)正交实验,对酶解条件进行优化研究。结果表明,最佳酶解条件为:以海湾扇贝为原料,选用中性蛋白酶,加酶量3.25%([E]/[S]),酶解温度40℃,固液比1∶2.5(W/V),此时水解度可达45.91%,DPPH自由基和超氧阴离子自由基的清除率分别为91.90%和79.72%。      

超声辅助核桃饼脱脂和多肽制备工艺的优化

采用超声辅助核桃饼脱脂,并以脱脂核桃粉为原料制备核桃蛋白,采用碱性蛋白酶酶解核桃蛋白制备多肽。通过单因素实验和正交实验对超声辅助核桃饼脱脂和核桃多肽制备工艺条件进行优化,并对最优条件下制备的核桃多肽的特性进行分析。结果表明:超声辅助核桃饼脱脂最优条件为料液比1∶20、超声功率500 W、超声时间140 min,在最优条件下脱脂率为91.23%,蛋白损失率为11.32%;酶解制备核桃多肽的最优工艺条件为酶解温度50℃、酶解pH 9、加酶量3.0%、酶解时间5.0 h,在最优条件下水解度达到22.63%,多肽得率为88.24%。核桃多肽粗蛋白质含量约为95%,相对分子质量小于1 000 Da的多肽占比达91.61%。     

采用不同蛋白酶制备羊胎盘抗氧化肽的研究

选取羊胎盘为实验材料,以水解度、多肽含量和DPPH自由基清除率为考察指标,采用生物酶法对羊胎盘酶解制备抗氧化肽进行了研究。采用8种蛋白酶,在最优的酶解条件下对羊胎盘进行酶解制备抗氧化活性肽。结果表明,风味蛋白酶、碱性蛋白酶和中性蛋白酶酶解产物对DPPH清除的IC50分别为0.6420、0.7120和0.6781mg/m L。说明该三种酶对羊胎盘酶解制备抗氧化肽的效果比较好。      

发酵马铃薯蛋白制备抗氧化肽

从腐乳、泡菜等传统发酵食品中分离筛选得到七株产蛋白酶能力较强的菌株,分别为菌A、B、C、D、E、F和G。以马铃薯蛋白为原料,利用产蛋白酶菌株对其进行发酵,研究马铃薯蛋白发酵产物的抗氧化能力。以样品发酵液对DPPH自由基的清除率为指标,测得七种菌株发酵产物DPPH自由基的清除率分别为:88.32%、92.00%、24.49%、76.90%、53.02%、18.11%、55.69%,菌B的发酵液具有较强的抗氧化能力。      

三种蛋白酶酶解核桃饼粕的抗氧化活性研究

该研究以核桃饼粕（WC）、石油醚脱脂核桃饼粕（PEWC）、石油醚及丙酮脱脂核桃饼粕（PEAWC）、核桃饼粕分离蛋白（WCP）、石油醚脱脂核桃饼粕分离蛋白（PEWCP）、石油醚及丙酮脱脂核桃饼粕分离蛋白（PEAWCP）为研究对象,分别采用碱性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶超声水解,以抗氧化活性为评价指标,筛选最佳的蛋白酶及原料处理方法。结果表明,碱性蛋白酶水解PEWC对OH·、O2-·和DPPH·清除率最高,分别为18.74%、28.44%和79.96%;胰蛋白酶酶解PEWC的总还原力最大;胰蛋白酶水解PEWCP的OH·和DPPH·清除率最高,分别为21.44%和80.22%,但O2-·清除率较低;胃蛋白酶水解PEWCP的O2-·清除率最高,达30.23%;碱性蛋白酶酶解PEWCP的总还原力最大;核桃饼粕经石油醚脱脂后的酶解产物抗氧化活性最高,且以碱性蛋白酶为最佳水解酶。     

糯米糠抗氧化肽的制备工艺及自由基清除能力研究

为开发利用糯米糠资源,研究了糯米糠抗氧化肽的制备工艺及自由基清除能力。选取中性蛋白酶为水解酶,以抗氧化肽还原力为指标,采用单因素实验和正交实验方法优化糯米糠抗氧化肽的制备工艺。结果表明,制备糯米糠抗氧化肽的最佳工艺条件为糯米蛋白底物浓度4%、[E]/[S]2%、pH7、酶解温度40℃、酶解时间6h,在该条件下制备的糯米糠抗氧化肽对羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除能力明显优于米糠抗氧化肽,且存在一定的量效关系,提示糯米糠抗氧化肽可用作功能性食品或天然抗氧化剂被深入研究和开发利用。      

响应面法优化酶解制备核桃多肽工艺

以高蛋白核桃粉为原料,采用酶解法制备核桃多肽。在单因素实验基础上,根据Box-Behnken中心组合实验设计原理,以多肽质量浓度和水解度为响应值,研究p H、温度、加酶量和时间对其影响,在此基础上将酶解液通过超滤系统分离得到不同分子量多肽,并测定不同分子量多肽的抗氧化活性。结果表明:料液比1∶20 g/m L磨浆时蛋白质溶出较充分,碱性和木瓜蛋白酶按1∶1复配,风味蛋白酶添加量2000 U/g辅助酶解时水解效果较好,酶解法提取核桃多肽最优工艺:p H 7.10,温度50℃,加酶量8000 U/g,时间3.0 h,该条件下多肽质量浓度为10.01 mg/m L,水解度为11.45%,接近理论值。经超滤分离后得到≤5、5¹0、10³0和≥30 k Da四种分子量多肽,不同分子量多肽都具有一定的抗氧化活性,并且≤5 k Da多肽的还原力(IC₅₀=5.47 mg/m L)、DPPH·清除能力(IC₅₀=1.03 mg/m L)、·OH清除能力(IC₅₀=5.02 mg/m L)、O-2·清除能力(IC₅₀=0.68 mg/m L)和总抗氧化能力（14.18 U/m L）均高于其它三种多肽。本研究为核桃产品的深加工和开发提供了一定的理论指导。