不同酶水解菜籽蛋白的水解物的抗氧化活性研究

使用alcalase、protamex、flavourzyme、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶共6种蛋白酶水解菜籽蛋白,研究水解物清除DPPH自由基能力、还原能力和抑制亚油酸过氧化活性。结果表明,6种蛋白酶水解菜籽蛋白的水解物都具有抗氧化活性,但水解物的抗氧化活性与水解所用酶的种类和水解时间有关,胰蛋白酶和flavourzyme水解物显示了较强的清除DPPH自由基和还原能力,6种蛋白酶水解物抑制亚油酸过氧化活性高于VE,但略低于BHT。alcalase水解菜籽蛋白时,水解10~45 m in的水解物清除DPPH自由基和还原能力较强,延长水解时间并不能提高其抗氧化活性。     

蜂王浆冻干粉体外抗氧化作用

对青海、陕西、安徽和浙江产油菜蜂王浆的冻干粉中水溶性蛋白、总酚和10-羟基-2-葵烯酸(10-HDA)含量进行测定,并通过DPPH法和FRAP法评价蜂王浆冻干粉的抗氧化活性。结果表明：不同产地油菜蜂王浆的冻干粉中总酚含量无显著性差异,但青海产油菜蜂王浆的冻干粉中水溶性蛋白含量最高(190.32mg/g),10-HDA含量最高的为陕西产油菜蜂王浆的冻干粉(4.28%);不同产地油菜蜂王浆的冻干粉均具有良好的DPPH自由基清除能力和总抗氧化能力,且样品的总抗氧化能力与其所含有的水溶性蛋白(r＝0.88)和总酚含量(r＝0.95)间呈显著正相关。     

蜂王浆蛋白肽的制备、鉴定及抗氧化活性研究

以蜂王浆为原料,以DPPH自由基清除率和OH自由基清除率为评价指标,对蜂王浆的酶解工艺进行了系统研究,并对蜂王浆酶解液中的蛋白肽进行了分子量分布分析、凝胶过滤层析纯化、LC-MS/MS分离鉴定、肽的合成及活性验证。结果表明,在酸性蛋白酶、料液比1:4、初始pH 5、酶解温度45℃、加酶量9000 U/g及酶解时间5 h的条件下酶解蜂王浆,所得产物的DPPH自由基清除率和OH自由基清除率最佳。对最优工艺下得到的酶解液层析分离,得到活性最高的组分为F4。对该组分进行质谱鉴定,并筛选出15种肽段进行进一步验证,结果表明,得到序列为FDRIW、YPDWSW、WHDKIF的三条肽DPPH自由基清除效果较好,IC50分别为3.63、3.59、1.00 mg/mL,具有在功能食品开发中的应用潜力。     

蜂王浆水溶性蛋白及其酶解产物的抗氧化活性

本研究分别采用清除二苯基-2- 苦肼自由基(DPPH·),抑制亚油酸氧化和总抗氧化能力测定等方法,探讨蜂王浆水溶性蛋白及其酶解产物的抗氧化特性。结果表明,蜂王浆水溶性蛋白(WSPs)本身的抗氧化活性很弱,但酶解后抗氧化活性增强,其中胃蛋白酶和胰蛋白酶共同酶解产物(PT-WSPs)的抗氧化活性最强。对WSPs 及其酶解产物进行膜分离后发现,分子量小于3kD,尤其是小于1kD 的肽类物质其清除DPPH·、抑制亚油酸氧化及总抗氧化能力最强。     

不同花期蜂王浆主要成分和抗氧化活性分析

为探究不同花期蜂王浆品质和抗氧化活性的差异,以同产地同蜂种同饲养条件下所生产的蜂王浆作为研究对象,分析不同花期蜂王浆的10-羟基-2-癸烯酸（10-HDA）、总蛋白、水分、总酚酸的含量变化,同时采用DPPH法和FRAP法分析比较其体外抗氧化能力。结果表明,不同花期之间蜂王浆的10-HDA含量存在显著差异（P<0.05）,葡萄蜂王浆10-HDA含量最高达到了2.20%。总蛋白含量在13.58%~15.26%之间。蜂王浆的水分含量均≤67.5%,达到国标（GB 9697-2008）关于优等品蜂王浆水分含量的要求。与其他花期蜂王浆相比,荆条花期的总酚酸含量、DPPH自由基清除能力和总抗氧化能力均为最优,且不同花期蜂王浆之间的DPPH自由基清除率存在显著差异（P<0.05）。相关性分析表明,DPPH自由基清除能力和总酚酸以及总抗氧化能力之间均存在极显著正相关性（P<0.01）。     

豌豆蛋白水解物体外及对HepG2细胞的抗氧化活性

为了全面评价豌豆蛋白水解物(pea protein hydrolysates, PPH)及其超滤分离组分的体外及细胞抗氧化能力,以豌豆蛋白为原料,采用碱性蛋白酶和复合蛋白酶协同水解制备PPH,然后超滤分级得到PPH1(分子质量<3 kDa)、PPH2(分子质量3～5 kDa)、PPH3(分子质量>5 kDa)3个组分,使用不同的化学方法研究PPH和超滤分离组分的抗氧化活性,从中选择抗氧化能力最高的组分进一步考察其细胞内自由基清除能力并用H₂O₂应激的HepG2细胞评估其对氧化应激的保护作用。结果表明,各组分中PPH1具有最高的体外化学抗氧化活性,其氨基酸组成分析表明,抗氧化功能氨基酸占比高;在实验设定浓度下,PPH1能够显著抑制H₂O₂应激损伤HepG2细胞内活性氧的积累,对细胞应激损伤有明显的保护作用。研究认为,PPH及其超滤分离组分具有良好的体外化学及细胞抗氧化活性,对H₂O₂应激的HepG2细胞具有保护作用,能够为其作为一种天然源抗氧化剂...     

蜂王浆蛋白肽的制备及其降血糖和抗氧化活性研究

目的:研究蜂王浆蛋白的最佳酶解工艺条件,并分析所制备酶解肽的氨基酸组成、分子量分布、降血糖及抗氧化活性。方法:以蜂王浆为原料,采用碱提酸沉法提取蜂王浆粗蛋白,以α-葡萄糖苷酶抑制率和ABTS自由基清除率为评价指标,筛选出酶解蜂王浆蛋白制备降血糖及抗氧化活性肽的最佳蛋白酶,并研究蜂王浆酶解肽的体外降血糖和抗氧化活性。结果:蜂王浆降血糖及抗氧化活性肽的最佳制备工艺为:以酸性蛋白酶为酶制剂,酶添加量为6000 U/g,酶解温度为43℃,酶解pH为4.0,酶解时间为4 h,料液比为1:10。在上述条件下,制备的蜂王浆蛋白肽的氨基酸总量为82.19%,相对分子质量集中在1000 Da以下。蜂王浆蛋白肽对α-葡萄糖苷酶的半抑制浓度(IC₅₀)为6.94 mg/mL,清除ABTS自由基、羟自由基、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基及超氧阴离子自由基的半抑制浓度(IC₅₀)分别为14.18、0.45、11.02和18.38 mg/mL。试验结果表明,蜂王浆蛋白肽具有一定的降血糖和抗氧化活性,可为蜂王浆高值化利用及活性肽产品开发提供理论依据。     

新疆黑蜂蜂王浆球蛋白酶解产物的抗氧化活性

为评价新疆黑蜂蜂王浆球蛋白酶解产物的抗氧化活性,以胰蛋白酶为试验用酶,采用清除二苯基-2-苦肼自由基(DPPH·),抑制亚油酸氧化和总抗氧化能力测定方法,探讨新疆黑蜂球蛋白酶解产物的水解条件。结果表明当温度为57℃、pH值为7.5、酶底比为1.5%(质量分数)、酶解时间为4 h时对DPPH·清除率最大,抗氧化活性最强。该结论对研制具有不同抗氧化功能的新疆黑蜂蜂王浆制品,具有一定的理论指导价值。     

玉米胚芽蛋白水解物的抗氧化活性研究

以玉米胚芽蛋白水解物为底物,通过对其羟基自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力、二苯基苦味酸基苯肼(DPPH)自由基清除能力、Cu2+螯合能力、在亚油酸体系中的抗氧化性、油脂过氧化值(POV)等指标的测定,研究玉米胚芽蛋白水解物的抗氧化活性.结果表明,玉米胚芽蛋白水解物对羟基自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基具有一定的清除能力,且浓度为6mg/mL时,清除效果最好;对Cu2+具有螯合能力,并且螯合能力随着玉米胚芽蛋白水解物浓度的增加而呈上升趋势;对亚油酸氧化具有抑制作用,作用效果与剂量成正相关,同时对油脂的POV值具有抑制作用,浓度为0.1％时抑制作用最强.     

多宝鱼不同水解物肽段组成及体外抗氧化活性比较

为研究熟化、模拟消化和酶解对多宝鱼肉水解物抗氧化活性的影响,本研究分别采用碱性蛋白酶和胃蛋白酶-胰蛋白酶水解多宝鱼生肉和熟肉,制备生肉碱性蛋白酶水解物、熟肉碱性蛋白酶水解物、生肉体外模拟消化产物和熟肉模拟消化产物,并评价其水解度、相对分子质量分布、氨基酸组成、肽段组成和体外抗氧化活性的差异。结果表明:生肉碱性蛋白酶水解物的水解度最高,为20.18%;4种水解物的分子质量分布差异明显,共有肽段仅有1条,但氨基酸组成没有显著性差异;碱性蛋白酶水解物以肽段小于1000 Da的组分为主,2～4肽的含量达64.57%～51.73%,而模拟消化产物中1000～3000 Da的组分占比超过50%,以多肽(>10)为主,熟化过程会减少小肽(<6)的比例;体外抗氧化活性分析显示,碱性蛋白酶水解物的抗氧化活性均高于模拟消化样品,熟化会降低生肉碱性蛋白酶水解物的抗氧化能力,生肉碱性蛋白酶水解物具有最高的超氧阴离子和羟基自由基清除能力,以及最佳的铁离子还原能力。因此,碱性蛋白酶是优于模拟消化的多宝鱼蛋白水解方式,鱼肉的熟化总体上会降低水解物的抗氧化能力。     

不同冻干辅料对蜂王浆共晶点的影响

采用电阻法测定了水、麦芽糊精、阿拉伯胶、β-环糊精等冻干辅料对蜂王浆共晶点的影响。结果表明,麦芽糊精的添加会提高蜂王浆共晶点,且随添加浓度的增大而提高,阿拉伯胶会降低其共晶点,但随着添加浓度的增大共晶点提高,β-环糊精浓度在0.5%时,会提高其共晶点,但随着β-环糊精浓度的增大,蜂王浆共晶点会降低。本实验为真空冷冻干燥中缩短冻干时间、降低能耗提供一定的研究依据。      

蜂王浆蛋白和脂类降血脂功能的研究

为研究蜂王浆中的蛋白和脂类的降血脂功能,建立高血脂症大鼠模型,以大鼠血清中TC、TG和HDL-C水平,动脉粥样硬化指数（AI）以及体重,肝重、脾重与体重比作为评价指标,考察蜂王浆蛋白和脂类的降血脂作用。结果表明,蜂王浆蛋白能显著降低高血脂症大鼠血清中TC、TG水平,提高血清HDL-C水平,抑制AI值的上升,减少体重、肝脏和脾脏重量的增加,且与鲜蜂王浆效果接近;但是脂类没有降血脂功能。因此,蜂王浆的降血脂功效成分主要是蜂王浆蛋白。      

A rapid method to isolate soluble royal jelly proteins

Soluble royal jelly (RJ) proteins (SRJPs) include the major RJ protein (MRJP) family, which contribute to the physiological actions of RJ. Although SRJPs are prepared using conventional methods involving dialysis and centrifugation, dialysis is a time-consuming process. We have therefore developed a simple method to isolate SRJPs from RJ. This new method produces 20-fold higher levels of SRJPs than that of the conventional procedure; hence, the levels obtained by the new and existing methods were compared. A 1-h ultracentrifugation separated SRJPs in the supernatant into upper, middle and lower layers. Each layer was analyzed by size-exclusion HPLC, SDS–PAGE and 2-DE. The upper and middle layers contained MRJP2 (52 kDa) and MRJP3 (60–70 kDa), while the lower layer contained MRJP1 (290 kDa). In nature, MRJP1 is a monomer and/or oligomer. When the lower layer was analyzed by Superose 12 HPLC, MRJP1 was predominantly an oligomer. Our MRJP isolation method reduces the procedure time by using ultracentrifugation without dialysis to obtain SRJPs and produces layers containing MRJP1 oligomers, MRJP2 and MRJP3.     

HACCP在蜂王浆生产中的应用

推行危害分析和关键点控制环节管理是对食品生产、经营企业强化自身管理 ,确保食品卫生质量及食用安全的一种先进的管理方法。本文应用HACCP管理于蜂王浆生产过程中 ,以确保产品的卫生与安全 ,为在蜂产品企业推行HACCP管理建立了一套模型。     

蜂王浆对免疫功能低下小鼠免疫功能的影响

研究蜂王浆对免疫低下小鼠免疫系统的调节作用。48只雄性昆明小鼠随机分为空白组、环磷酰胺模型组、酪蛋白组以及蜂王浆低、中、高剂量组,每组8只。除空白组外,其余5组每天腹腔注射80 mg/(kg bw)环磷酰胺,建立免疫低下小鼠模型。各组小鼠经不同样品连续灌胃30 d后测量小鼠体重、脾脏和胸腺质量及HE染色观察脾脏与肝脏的形态、白细胞计数、免疫球蛋白含量、细胞因子水平、脾淋巴细胞增殖能力、睾酮含量。造模后,脾脏和胸腺指数降低,小鼠脾脏和肝脏镜下形态学结构紊乱,白细胞计数、免疫球蛋白、IL-6水平显著降低,T/B淋巴细胞增殖能力显著下降;经蜂王浆干预后,相比于模型组,蜂王浆干预组小鼠上述指标有不同程度的改善,其中以高剂量组效果最为显著。蜂王浆可以增强环磷酰胺造成的免疫功能低下小鼠的免疫功能。     

Fast determination of royal jelly freshness by a chromogenic reaction

Royal jelly is one of the most important products of honeybees. Given its role in development of bee brood into fertile individuals of the royal caste it is also used in health products for human consumption. Royal jelly spoils and loses its health-promoting properties depending on storage duration and conditions. To ensure product quality before selling, it is therefore necessary to assess royal jelly freshness. Many indexes of freshness have been suggested, but they all lack reliability or require complex and time-consuming analyses. Here we describe a method to detect royal jelly freshness based on a chromogenic reaction between royal jelly and HCl. We demonstrate that analyses based on color parameters allow for the discrimination of royal jelly samples based on the duration of their storage. Color parameters of royal jelly stored at -18 and 4 °C for 28 d remained comparable to that of fresh samples, which supports the reliability of the method. The method of freshness determination described is practical, cheap, and fast and can thus be used in real-time when trading royal jelly. PRACTICAL APPLICATION: The method developed can be used to assess royal jelly freshness. It is practical, cheap, and fast and can thus be used in real-time when trading royal jelly.     

高效液相色谱法测定蜂王浆中6种糠醛类物质含量

目的建立同时测定蜂王浆中5-羟甲基-2-糠醛(5-HMF)、5-甲基糠醛(5-MF)、2-糠醛(F)、2-糠酸(2-OIC)、3-糠酸(3-OIC)、5-羟甲基-2-糠酸(5-HMFacid)等6种糠醛类物质含量的高效液相色谱分析方法。方法样品经去离子水提取,亚铁氰化钾和乙酸锌溶液沉淀蛋白后,用C18色谱柱分离,0.5%甲酸水溶液和甲醇梯度洗脱,在各化合物的最佳吸收波长处进行检测。结果在测试范围内,6种糠醛类物质的浓度与相应的峰面积呈线性关系,相关系数(R2)不小于0.9993。方法定量和定性检出限分别在0.07~0.26μg/m L和0.02~0.08μg/m L之间,加标回收率为86.2%~99.7%,相对标准偏差小于2.40%。结论 该方法操作简单,灵敏度高,适合蜂王浆中6种糠醛类化合物的测定。     

蜜蜂蜂王不同于工蜂的关键因素-蜂王浆主蛋白1

蜂王浆是决定蜜蜂幼虫发育中级型分化,即成为蜂王还是工蜂的关键环境因素,而蜂王浆主蛋白(main royal jelly proteins,MRJPs)是反映蜂王浆新鲜度的重要指标。日本镰仓昌树以蜜蜂和果蝇为模型的最新研究表明,MRJP1是蜂王浆中决定蜜蜂级型分化的关键因子,该蛋白可通过激活虫体脂肪体中的表皮生长因子信号通路,引发个体增大、发育时间缩短和卵巢发育等蜂王特征的出现。因此,今后很有必要进一步开展MRJP1对人体的营养功能和作用机理研究,为MRJP1应用于功能食品提供科学依据。      

高效液相色谱法测定蜂王浆中6种糖的含量

目的 建立高效液相色谱法测定蜂王浆中6种糖含量的分析方法.方法 样品经适量水溶解后,加入乙酸锌、亚铁氰化钾溶液各2.5 mL,涡旋混匀,用水定容至50 mL,8000 r/min,4℃离心3 min.滤液过0.45μm液水相膜,采用ZORBAX Carbohydrate Anlys.Col(4.6 mm×150 mm,...