慢病毒介导bcr/abl基因RNAi对白血病K562细胞生物学特性的影响

目的:研究慢病毒介导RNAi致bcr/abl基因长期沉默对K562白血病细胞各种生物学特性的影响. 方法:构建含bcr/abl RNAi序列的pNL-B/A-EGFP慢病毒重组质粒载体并包装病毒,感染K562细胞,挑取稳定转化的克隆(B/A-K562).Real-time PCR及Western blotting验证干扰效应;锥虫蓝染色、集落形成实验检测细胞增殖能力变化;联苯胺染色观察细胞分化;ELISA法检测酪氨酸激酶活性;AO-EB染色观察细胞凋亡;比色法检测Caspase-3、Caspase-9活性;以上检测均以K562细胞和转染空质粒EGFP-K562作对照. 结果:成功构建bcr/abl基因RNAi稳定转染的B/A-K562细胞, Real-time PCR及Western blotting证实B/A-K562细胞中bcr/abl mRNA及P210bcr/abl蛋白含量明显下调.bcr/abl基因稳定下调后,K562细胞倍增时间明显延长(37.1 vs 20.4、23.3 h)、集落形成能力减弱(P<0.01),K562细胞向红系分化,酪氨酸激酶活性下降(P<0.01),自发凋亡率显著提高(P<0.01),细胞中Caspase-3(P<0.05)及Caspase-9(P<0.01)活性明显提高.结论:慢病毒介导的RNAi能实现bcr/abl基因长期沉默,从而抑制K562细胞恶性增殖,诱导其分化及凋亡.     

慢病毒介导bcr/abl基因RNAi对白血病K562细胞生物学特性的影响

目的: 研究慢病毒介导RNAi致bcr/abl基因长期沉默对K562白血病细胞各种生物学特性的影响。方法：构建含bcr/abl RNAi序列的pNLB/AEGFP慢病毒重组质粒载体并包装病毒,感染K562细胞,挑取稳定转化的克隆（B/AK562）。Realtime PCR及Western blotting验证干扰效应;锥虫蓝染色、集落形成实验检测细胞增殖能力变化;联苯胺染色观察细胞分化;ELISA法检测酪氨酸激酶活性;AOEB染色观察细胞凋亡;比色法检测Caspase3、Caspase9活性;以上检测均以K562细胞和转染空质粒EGFPK562作对照。结果：成功构建bcr/abl基因RNAi稳定转染的B/AK562细胞, Realtime PCR及Western blotting证实B/AK562细胞中bcr/abl mRNA及P210bcr/abl蛋白含量明显下调。bcr/abl基因稳定下调后,K562细胞倍增时间明显延长（37.1 vs 20.4、23.3 h）、集落形成能力减弱（P<0.01）,K562细胞向红系分化,酪氨酸激酶活性下降（P<0.01）,自发凋亡率显著提高（P<0.01）,细胞中Caspase3（P<0.05）及Caspase9（P<0.01）活性明显提高。结论：慢病毒介导的RNAi能实现bcr/abl基因长期沉默,从而抑制K562细胞恶性增殖,诱导其分化及凋亡。     

A23187诱导K562细胞分化为树突细胞的实验研究

目的 体外探讨A23187快速将人慢性白血病K562细胞定向诱导分化为树突细胞(DC)的实验方法.方法 K562细胞在含有A23187或细胞因子的条件下诱导分化为DC,倒置显微镜下观察细胞形态的变化,流式细胞术检测DC表面标志的改变,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各表面标志mRNA水平的变化,四甲基偶氮唑蓝(...     

外周血双色荧光原位杂交方法监测慢性粒细胞性白血病患者干扰素治疗前后bcr／abl融合基因的变化

目的：研究外周血双色荧光原住杂交(D-FISH)在慢性粒细胞性白血病(CML)患者干扰素治疗效果监测方面的应用价值。方法：用D-FISH方法对18例CML患者干扰素治疗前后的外周血36份样本进行bcr／abl融合基因检测，并且与骨髓D-FISH方法检测的结果进行比较。结果：治疗后外周血间期核细胞中bcr／abl融合基因的检出率较治疗前有所下降，并且外周血中的检出率比同一患者骨髓中的检出率要低。结论：D-FISH方法可以简便、灵敏、可靠地对CML患者干扰素治疗前后的外周血进行疗效监测，使得从取材上更加方便。     

外周血双色荧光原位杂交方法监测慢性粒细胞性白血病患者干扰素治疗前后bcr／abl融合基因的变化

目的：研究外周血双色荧光原住杂交(D-FISH)在慢性粒细胞性白血病(CML)患者干扰素治疗效果监测方面的应用价值。方法：用D-FISH方法对18例CML患者干扰素治疗前后的外周血36份样本进行bcr／abl融合基因检测，并且与骨髓D-FISH方法检测的结果进行比较。结果：治疗后外周血间期核细胞中bcr／abl融合基因的检出率较治疗前有所下降，并且外周血中的检出率比同一患者骨髓中的检出率要低。结论：D-FISH方法可以简便、灵敏、可靠地对CML患者干扰素治疗前后的外周血进行疗效监测，使得从取材上更加方便。     

抗原冲击树突状细胞介导细胞毒性T淋巴细胞特异性抗白血病作用的体外研究

 目的　研究白血病来源树突状细胞体外诱导的有效方法;观察不同抗原诱导的特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）的抗白血病效应。方法　分离白血病患者骨髓单个核细胞,经钙离子载体A23187诱导分化,将弱酸洗脱抗原、低渗抗原分别冲击树突状细胞,96 h后树突状细胞与T细胞共同培养,采用MTT法比较CTL细胞对白血病细胞的杀伤活性。结果　骨髓来源的单个核细胞经过100 ng／ml的GM-CSF、500 ng／ml钙离子载体A23187成功诱导为树突状细胞,倒置显微镜下具有树突状细胞的典型形态,流式细胞术测定其CD1a、CD83表达较诱导前明显升高,差异有统计学意义（P＜0.01）。弱酸洗脱法获得抗原冲击树突状细胞致敏T细胞后杀伤白血病的能力最高,未负载抗原的树突状细胞致敏T细胞杀伤白血病细胞的能力最低,两者差异具有统计学意义（P＜0.01）。结论　白血病来源的骨髓单个核细胞经GM-CSF、钙离子载体A23187能够成功诱导为树突状细胞;弱酸洗脱后获得的抗原冲击树突状细胞致敏T细胞能够获得更强的杀伤白血病细胞的能力。     

自体宫颈癌-树突细胞疫苗激活的CTL杀伤效应

背景与目的:树突细胞(dendriticcells,DC)是目前已知的功能最强的抗原递呈细胞(antigen-presentingcell,APC),它可以在体内、外向T淋巴细胞递呈抗原,并诱发细胞毒T淋巴细胞(cytotoxicTlymphocyte,CTL)反应。本研究旨在探讨负载自体宫颈癌抗原的DC体外激发的CTL对自体宫颈癌细胞的杀伤效应。方法:先冻融宫颈癌细胞制备抗原,然后以GM-CSF、IL-4诱导自体外周血单个核细胞(peripheralbloodmononuclearcell,PBMC)获得DC并负载抗原,刺激自体T淋巴细胞制备宫颈癌抗原特异性CTL,观察CTL对宫颈癌细胞的杀伤活性。结果:负载自体宫颈癌抗原DC诱导的特异性CTL对自体宫颈癌细胞的体外杀伤率高达79.32%～89.27%,显著高于淋巴因子激活的杀伤细胞(lymphokine-activatedkillingcells,LAK)的杀伤率(t≥2.89,P<0.05);且对宫颈癌HeLa细胞株具有一定杀伤效应(40.35%～58.09%),但低于自体癌细胞组(t≥2.97,P<0.05);特异性CTL对HepG2、MCF7、A549、MGC803细胞无明显杀伤效应。结论:自体宫颈癌-树突细胞疫苗体外诱导的CTL具有高效而特异的抗自体宫颈癌细胞免疫活性,可望成为宫颈癌生物治疗的一个有力手段。     

体外树突状细胞诱导细胞毒T淋巴细胞杀伤肺癌细胞A549的研究

 目的　研究负载有肺癌细胞株A549可溶性抗原并携带外源粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）基因的树突状细胞（DC）在体外激活自身T淋巴细胞形成的细胞毒T淋巴细胞（CTL）对A549细胞的杀伤作用。方法　用肺癌细胞株A549可溶性抗原致敏DC,再用含有GM-CSF外源基因的腺病毒感染DC,将所得的DC与T细胞混合培养以形成对A549细胞有特异杀伤作用的CTL。细胞分为未处理（N-DC）组、加抗原未感染病毒（A-DC）组和加抗原感染病毒（G-A-DC）组。通过测定乳酸脱氢酶（LDH）计算CTL对A549细胞的杀伤率。结果　当CTL与A549细胞,即效应细胞与靶细胞比值（E／T）为5∶1时,N-DC组的杀伤率为（1.9±0.7）%,A-DC组为（21.3±2.6）%,G-A-DC组为（34.5±4.9）%;当E／T为10∶1时,N-DC组的杀伤率为（4.8±0.8）%,U-DC组为（35.4±3.6）%,G-A-DC组为（51.3±2.9）%;E／T为20∶1时,N-DC组的杀伤率为（5.3±0.2）%,A-DC组为（40.5±7.7）%,G-A-DC组为（72.5±4.7）%。3组之间的杀伤率差异有统计学意义（n＝2,F＝356,P＜0.05）,通过两两比较,得出G-A-DC组的杀伤率高于其他两组（P＜0.001）,且A-DC组高于对照组（P＜0.001）。结论　以肺癌细胞株A549可溶性抗原致敏的DC可诱导出对A549具有特异杀伤作用的CTL,当所致敏的DC通过腺病毒感染而带有外源基因GM-CSF时,所诱导的细胞毒杀伤反应进一步增强。     

树突细胞／肿瘤细胞融合疫苗对食管癌移植瘤生长的抑制作用

背景与目的：我们前期的研究表明树突细胞／肿瘤细胞融合疫苗能有效诱导体外抗食管癌细胞的特异性免疫应答。在此基础上,本研究进一步探讨树突细胞／肿瘤细胞融合疫苗诱导抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞（cytotoxic T lymphocytes．CTLs）对食管癌细胞株EC-109裸鼠皮下移植瘤的体内抑瘤作用及对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法：①采用聚乙二醇法制备树突细胞／肿瘤细胞融合疫苗并诱导抗原特异性CTLs产生。②建立食管癌EC-109细胞裸鼠皮下移植瘤模型,将成功荷瘤的裸鼠随机分为3组,分别以融合细胞激活的CTLs（A组．n=11）、未激活的T淋巴细胞（B组,n=11）以及RMPI-1640培养液（C组,n=11）作为效应细胞进行瘤内注射,每周一次。③4周后处死动物剥离肿瘤组织．测量并比较各组肿瘤组织的平均体积及平均湿重,计算抑瘤率。④免疫组化SP法检测3组裸鼠移植瘤增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）的表达。⑤流式细胞仪检测3组肿瘤细胞周期及细胞凋亡率,比较各组肿瘤细胞的S期细胞平均百分比（S-phase fraction,SPF）以及细胞平均凋亡率。结果：①A组肿瘤组织的平均体积显著小于B组和C组,差异有统计学意义[（881．45±31．14）mm^3 vs．（1493．37±51．67）mm^3,（2065．77±87．55）mm^3,F=950．67．P=0．00],其平均湿重亦显著小于B组和C组,差异有统计学意义[（0．88±0．04）gvs．（1．38±0．07）g,（2．04±0．11）g,F=1335．90,P=0．00];A组抑瘤率明显高于B组,差异有统计学意义（56．86％ vs．32．35％,F=1218．08,P=0．001）。②A组肿瘤的平均PCNA—LI明显低于B组和C组,差异有统计学意义[（26．83±0．95）％ vs．（51．82±1．51）％,（68．93±2．40）％,F=1528．39,P=0．000]。③A组肿瘤细胞平均SPF值明显低于B、C两组,差异有统计学意义[（12．     

bcr-abl融合基因抑制K562细胞凋亡的研究

目的研究ｂｃｒａｂｌ融合基因在慢性粒细胞白血病细胞（ＣＭＬ）凋亡调控中的作用。方法用人工合成的与ｂｃｒａｂｌｍＲＮＡ（ｂ３ａ２型）融合点碱基序列互补的反义寡聚脱氧核苷酸（ＡＳＯＤＮ）作用于体外培养的ＣＭＬ细胞株Ｋ５６２细胞,观察Ｋ５６２细胞凋亡的情况。结果ｂｃｒａｂｌ融合基因表达受抑后,Ｋ５６２细胞凋亡显著增加。结论ｂｃｒａｂｌ融合基因可抑制ＣＭＬ细胞凋亡,这可能是ＣＭＬ发病的主要机制。     

含人AFP基因重组腺病毒载体的构建及其转染树突状细胞瘤苗的制备

目的：构建含人AFP基因的腺病毒载体,体外转染树突状细胞,制备树突状细胞肝癌瘤苗。方法：将AFP基因亚克隆到pIND载体和Shuttle2载体中,构建穿梭载体Shuttle2-AFP。用PI—SceⅠ和I—Ceu Ⅰ双酶切后将所获AFP基因片段再与线性化的腺病毒载体pAdeno—X连接,构成pAdeno—AFP重组腺病毒载体。其后,用重组腺病毒载体转染HEK293细胞,包装腺病毒表达载体。通过酶切、PCR对腺病毒载体进行鉴定。包装好的重组病毒载体pAdeno—AFP体外感染树突状细胞制备树突状细胞肝癌瘤苗后,FACS分析pAd-eno—AFP／DC表面分子的表达,酶联免疫吸附试验法（ELISA）检测AFP水平。结果：酶切、PCR鉴定证实,穿梭质粒插入片段为AFP基因。包装的腺病毒载体具有良好的感染性,可以在293细胞中形成病毒颗粒,腺病毒载体内携带AFP基因感染树突状细胞,pAdeno—AFP／DC能高水平的表达CD1a,CD11c,CD80,CD86以及HIA—DR,并分泌较高水平的AFP。结论：构建成功的含AFP腺病毒载体可以在树突状细胞中表达AFP,为DC瘤苗的进一步研究奠定了基础。     

Apoptotic body-loaded dendritic cells efficiently cross-prime cytotoxic T lymphocytes specific for NA17-A antigen but not for Melan-A/MART-1 antigen

DCs hold promise for cancer immunotherapy due to their functional ambivalence: iDCs internalize antigens, then mDCs trigger naive T-cell activation. However, no consensus has been reached concerning the optimal mode of antigen acquisition for efficient cross-priming of TAA-specific CTLs, and this remains a field of investigation. Here, we used highly purified apobodies derived from an HLA-A*0201-negative melanoma line as a source of tumor antigens for HLA-A*0201 DCs. We compared in vitro mDCs loaded with apobodies to DCs loaded with antigenic peptides, NA17-A(1-9) and Melan-A/MART-1(26-35) A27L analogue, for their capacity to stimulate melanoma antigen-specific T cells from autologous PBLs. Apobody phagocytosis did not induce spontaneous DC maturation, but phagocytic DCs were still responsive to maturation signals, resulting in a functional ability to activate antigen-specific lymphocytes. NA17-A-specific T lymphocytes were activated by both types of stimulation, whereas only peptide-pulsed DCs stimulated the growth of Melan-A/MART-1-specific lymphocytes. We also observed a lack of staining of melanoma-derived apobodies with a Melan-A-specific MAb, suggesting protein alteration during apoptosis induction. After HLA-A*0201/NA17-A multimer sorting, antigen-specific lymphocytes induced by mature DCs loaded with either peptide or apobodies displayed similar functional capacity against peptide-pulsed T2 cells and melanoma cells. Therefore, apobody-loaded DCs can achieve T-cell priming similar to that induced by peptide-pulsed DCs, provided that the apoptotic process allows the preservation of antigen expression.     

双色双融合荧光原位杂交检测bcr/abl融合基因的临床意义

目的 检测bcr/abl融合基因在慢性粒细胞白血病（CML）,急性淋巴细胞白血病（ALL）和真性红细胞增多症（PV）中的表达,以了解其临床意义。方法 采用双标记双融合bcr/abl探针进行荧光原位杂交（D-FISH）。检测了7例患者骨髓中期和（或）间期细胞。结果 38例CML患者中bcl/abl阳性为34例,占89.5%,其中1例患者发病时,细胞遗传学显示典型的t(9;22),应用干扰素治疗38个月后,bcr/abl基因转为阴性;1例异基因外周血造血干细胞移植术后60d的患者,细胞形态学及细胞遗传学均显示完全缓解,但FISH检测仍有3.0%的细胞为bcr/abl基因因阳性,24例ALL患者中,6例bcr/abl阳性,占25.0%,2例PV患者bcr/abl阴性,3例CML待排的患者bcr/abl均阴性,其中1例确诊为原发性血小板增多症;1例进一步检测ETO/AML1基因后诊断为M2a;1例仍未能明显诊断,3例bcr/abl阴性的CML中,难治性白血病2例;6例bcr/abl阳性的ALL中,难治性白血病5例,结论 用双色双融合bcr/abl探针进行FISH杂交,可准确地检测出bcr/abl融合基因,是临床诊断,判定预后及微小残留病的有效监测指标。     

含人AFP基因重组腺病毒载体的构建及其转染树突状细胞瘤苗的制备

目的:构建含人AFP基因的腺病毒载体,体外转染树突状细胞,制备树突状细胞肝癌瘤苗.方法: 将AFP基因亚克隆到pIND 载体和Shuttle2载体中,构建穿梭载体Shuttle2-AFP.用PI-Sce Ⅰ和I-CeuⅠ双酶切后将所获AFP基因片段再与线性化的腺病毒载体pAdeno-X连接,构成pAdeno-AFP重组腺病毒载体.其后,用重组腺病毒载体转染HEK293细胞,包装腺病毒表达载体.通过酶切、PCR对腺病毒载体进行鉴定.包装好的重组病毒载体pAdeno-AFP体外感染树突状细胞制备树突状细胞肝癌瘤苗后,FACS分析pAdeno-AFP/DC表面分子的表达,酶联免疫吸附试验法( ELISA) 检测AFP水平.结果: 酶切、PCR鉴定证实,穿梭质粒插入片段为AFP基因.包装的腺病毒载体具有良好的感染性,可以在293细胞中形成病毒颗粒,腺病毒载体内携带AFP基因感染树突状细胞,pAdeno-AFP/DC能高水平的表达CD1a,CD11c,CD80,CD86以及HLA-DR,并分泌较高水平的AFP.结论: 构建成功的含AFP腺病毒载体可以在树突状细胞中表达AFP,为DC瘤苗的进一步研究奠定了基础.     

MGBA负载脐带血DC诱导特异性CTL对乳腺癌细胞的杀伤作用

目的：观察乳腺珠蛋白（mammaglobin A, MGBA）负载脐带血来源树突状细胞（dendritic cell, DC）诱导产生的细胞毒性T细胞（cytotoxic T lymphocyte, CTL）对乳腺癌细胞的体外杀伤效果。方法：采集健康剖宫产女性志愿者的脐带血,分离脐带血单个核细胞并诱导DC生成,用MGBA致敏DC与自体淋巴细胞共培养诱导CTL。采用流式细胞术测定DC的表型(CD83、CD86、HLADR)变化,ELISA法测定IL-10、IL-12分泌水平,CCK-8法测定CTL对乳腺癌细胞的杀伤活性。结果：成功培养出形态典型、功能成熟的DC,MGBA负载DC诱导的MGBA特异性CTL对乳腺癌细胞MDA-MB-415 产生显著的杀伤效果（P<0.05）;加入HLA-I 抗体可显著减弱杀伤效果,加入HLA-II 抗体细胞毒活性无显著变化,加入HLA-I 抗体或HLA-II 抗体对正常乳腺细胞的杀伤性均无影响。结论：MGBA 能明显加强脐带血DC 诱导的CTL 对乳腺癌细胞的杀伤活性,该杀伤活性具有MHC限制性。     

A small molecule significantly inhibits the bcr/abl fusion gene at the mRNA level in human chronic myelogenous leukemia

Bcr/abl fusion gene is the marker gene in chronic myelogenous leukemia (CML) and becomes the target for CML therapy. Although Imatinib opened a new way to treat CML, the resistance to the drug caused by bcr/abl fusion protein mutation stimulated search for new molecules to inhibit bcr/abl expression. In our research, it was found that a novel 2-aminosteroid (H89465) possessed special mechanism in treating CML. H89465 inhibits the proliferation of both non-resistant and resistant CML cells such as K562, Meg-01 and clinical primary CML cells. It prolongs the survival time of NOD/SCID mice inoculated with K562 leukemia cells. The mechanism underlying the effects is concerned with down-regulation of bcr/abl mRNA expression followed by decreasing the BCR/ABL protein expression and tyrosine kinase activity in CML cells. Our results demonstrate that H89465 possesses the therapeutic potential in treating human CML.     

Transduction of dendritic cells with recombinant adenovirus encoding HCA661 activates autologous cytotoxic T lymphocytes to target hepatoma cells

Transduction of recombinant adenovirus into dendritic cells (DCs) is a promising new tool for cancer vaccine development. Here, we report that an adenovirus vector carrying hepatocellular carcinoma (HCC) antigen HCA661 and infected into DCs generates T-cell immunity against hepatoma cells. HCA661 is a novel cancer/testis (CT) antigen screened by SEREX from sera of an HCC patient. We constructed a recombinant adenovirus expressing the full-length cDNA of HCA661 gene and then transduced immature DCs, which had been generated with GM-CSF and IL-4 from peripheral blood mononuclear cell of HLA-A2(+) healthy donors. The resulting adenovirus-transduced DCs differentiated in the presence of monocyte-conditioned medium and poly [I] : poly [C], expressing the surface markers of mature DCs, including CD83, CD80, CD86 and HLA-DR. After maturation, the transduced DCs transcribed HCA661 mRNA and were able to prime the na?ve T cells to become cytotoxic T lymphocytes (CTLs). Intracellular flow cytometry and enzyme-linked immunospot assay showed that these CTLs were able to target a hepatoma cell line, HepG2, which is HLA-A2 and HCA661 positive. In summary, we found that this recombinant adenovirus can help to induce DC maturation and these mature DCs can activate T cells to target hepatoma cells. Therefore, this recombinant adenovirus may have potential for use in liver cancer immunotherapy.     

WT1致敏树突状细胞激活CTLs对HL60细胞作用的研究

目的研究分别负载WT1多肽抗原及HL60细胞冻融抗原的树突状细胞(DCs)产生的特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)对HL60细胞的杀伤效应。方法联合应用rhGM-CSF、rhIL-4、rhTNF-α及rh-sCD40L等细胞因子,诱导扩增自健康人外周血获取的单核细胞,培养出DCs,分别用WT1多肽抗原及冻融抗原冲击致敏,激活淋巴细胞。实验分4组WT1多肽致敏DCs为实验组A,HL60细胞冻融抗原致敏DCs为实验组B,未致敏DCs组为对照组A,单核细胞组为对照组B,LDH释放法检测CTLs对HL60细胞的杀伤作用。结果培养出具有典型特征的DCs,表达CD40达96%,CD80达77%,CD1α达69%,CD86达97%,体外能诱导强烈的同种异体混合淋巴结胞增殖反应。在效靶比为20∶1时,WT1多肽致敏DCs组时HL60细胞杀伤率为89.1%,冻融抗原负载DCs组为90.6%,未致敏DCs组为32.8%,单核细胞组为26.1%。以下多肽或冻融抗原负载DCs与对照组相比显示更强的杀伤效应,P<0.01。结论WT1多肽抗原及HL60细胞冻融抗原冲击致敏DCs均能有效诱导T细胞抗白血病作用,为临床研制DCs疫苗提供实验依据。     

化疗联合DC-CTL治疗不同分期非小细胞肺癌的疗效分析

目的:分析化疗联合树突状细胞诱导的细胞毒性T淋巴细胞(dendritic cells and cytotoxic lymphocytes,DC-CTL)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者的疗效及安全性.方法:收集我院2013年5月至2015年12月期间住院病理确诊为Ⅰb(具有高危因素)、Ⅱa、Ⅱb、Ⅲa、Ⅲb、Ⅳ期的NSCLC患者114例,其中接受肺癌根治术的患者分为术后化疗联合DC-CTL组20例和术后化疗组32例,未行手术患者分为化疗联合DC-CTL组23例和化疗组39例.回顾分析了114例患者的临床特点、疾病控制率(disease control rate, DCR)、中位无疾病生存期(median-disease free survival,M-DFS)、中位无进展生存期(median-progression free survival,M-PFS)、副作用等资料.随访截止至2016年11月.结果:1年DCR:术后化疗联合DC-CTL组(75.0%)vs术后化疗组(43.8%)(P=0.044).M-DFS:术后化疗联合DC-CTL组(19.5个月)与术后化疗组(11.5个月)相比,差异具有明显统计学意义(P=0.025 5).化疗联合DC-CTL治疗与化疗组相比,DCR及M-PFS不具有统计学差异.DC-CTL治疗的副作用显著低于化疗.结论:术后化疗联合DC-CTL治疗可显著提高DCR及延缓NSCLC患者的疾病进展,且安全性高.