膀胱尿路上皮癌中Livin和Smac蛋白表达及意义

目的:探讨膀胱尿路上皮癌中Livin和Smac蛋白表达及意义。方法:采用免疫印迹法(Western-Blot)检测Livin和Smac蛋白在73例膀胱尿路上皮癌及21例正常膀胱黏膜中的表达。结果:膀胱尿路上皮癌中Livin蛋白表达率(37.0%)高于正常膀胱黏膜(0%),Smac蛋白表达率(79.5%)低于正常膀胱黏膜(100%)。Livin蛋白表达率复发肿瘤高于初发肿瘤,Smac蛋白表达率低分期高于高分期。Livin和Smac蛋白表达呈负相关(r=-0.604,P<0.05)。结论:膀胱尿路上皮癌中Livin蛋白与复发相关,Smac蛋白与分期相关,可能成为肿瘤治疗的新靶点。     

Livin在膀胱移行细胞癌组织中表达的研究

目的:探讨凋亡抑制基因Livin在膀胱移行细胞癌(TCCB)发生发展中的作用。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测46例TCCB患者癌组织中Livin mRNA的表达,并与13例正常膀胱组织作对照观察。结果:46例TCCB肿瘤组织中35例LivinαmRNA阳性表达,阳性率为76%;对照组13例中无LivinαmRNA阳性表达,二者比较具有显著性差异(P<0.05)。Livin表达在不同临床分期、病理分级、单发与多发等生物学指标上无显著性差异,而复发者组LivinαmRNA表达(91%)要明显高于初发者组(63%),两组有显著性差异(P<0.05)。结论:Livin表达与TCCB的发生、发展有关,可以作为TCCB的分子标志物,可能为TCCB基因治疗提供新的合理靶点。     

转染Livin基因对膀胱癌细胞凋亡的影响

目的 探讨凋亡抑制基因Livin对膀胱癌细胞凋亡的影响.方法 采用脂质体转染法将Livin基因转入膀胱癌T24细胞系,经G418筛选后获得稳定表达Livin的亚克隆细胞系T24/Livin+及仅转染载体的T24/pcDNA3.1(+).用丝裂霉素C(MMC)分别作用于转染前后的膀胱癌细胞系,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测转染前后细胞生长抑制率,应用流式细胞仪(FCM)及吖啶橙(AO)染色检测细胞凋亡.结果 成功建立了稳定表达Livin的亚克隆细胞系T24/Livin+;经MMC作用24 h后,T24/pcDNA3.1(+)细胞与T24的细胞凋亡率分别为(21.4±2.3)%和(19.6±2.3)%,而T24/Livin+的细胞凋亡率则为(8.7±1.5)%,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 Livin基因提高了T24膀胱癌细胞的抗凋亡能力,特别是在膀胱癌化疗中显示出更强的抗凋亡能力.     

Survivin siRNA对肝癌细胞BEL-7402的增殖与对Survivin基因及蛋白表达的作用

目的:探讨小干扰RNA(siRNA)对BEL-7402细胞的生长抑制与生存素(Survivin)基因及蛋白表达的影响。方法:合成Survivin siRNA,以不同浓度转染BEL-7402细胞,MTT法测定细胞生长抑制率,RT-PCR、Western-Blot检测BEL-7402细胞Survivin mRNA及蛋白的表达差异。结果:BEL-7402细胞转染FAM荧光标记的siRNA后,细胞内有绿色荧光表达。分别以10、30、50nmol/LSurvivin siRNA转染细胞后,MTT测得的细胞生长抑制率分别为(38.80±1.71)%,(54.50±1.16)%,(66.79±1.10)%,RT-PCR测得的Survivin mRNA表达分别为0.42±0.02,0.28±0.01,0.12±0.01,Western-Blot测得Survivin蛋白表达分别为0.55±0.04,0.32±0.02,0.21±0.02,三项指标与空白对照组、阴性对照组、脂质体对照组比较有极显著性差异(P<0.01)。随着Survivin siRNA浓度的增加,细胞抑制率呈上升趋势,Survivin mRNA及Survivin蛋白的表达逐渐降低,呈浓度-效应关系。结论:Survivin siRNA能抑制BEL-7402细胞的增殖与Survivin基因和蛋白表达。     

凋亡抑制基因Livin在肺癌化疗前后的表达及临床意义

目的:探讨凋亡抑制蛋白Livin在非小细胞肺癌中的表达及临床意义。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)对50例非小细胞肺癌患者化疗前、后血清中Livin的表达水平及20例正常健康人血清Livin水平进行检测。结果:1非小细胞肺癌患者血清Livin水平明显高于健康对照组(P<0.05),且化疗后Livin平均水平明显高于化疗前(P<0.05);2非小细胞肺癌患者血清Livin平均水平与临床分期呈正相关关系,~期患者Livin平均水平明显高于~期患者(P<0.05);3非小细胞肺癌患者血清Livin水平与有无淋巴结转移明显相关,有淋巴结转移组明显高于无淋巴结转移组(P<0.05);4Livin水平在性别、年龄、病理类型及分化程度方面无显著性差异(P>0.05)。结论:Livin在正常健康人血清中不表达,而在非小细胞肺癌患者血清中高表达,化疗后血清Livin水平增高,对判断其预后有一定临床意义。     

Survivin、VEGF在前列腺癌中的表达及与微血管密度的相关性

目的:探讨Survivin、VEGF在前列腺癌(Pca)中的表达及与微血管密度(MDV)的关系。方法:采用免疫组化SP法分别测定42例PCa组织及10例正常前列腺(NP)组织中Survivin和VEGF的表达和MDV记数。结果:Survivin、VEGF在PCa中的阳性表达率分别为80.59%和69.05%,与病理分级、临床分期和淋巴结转移密切相关(P<0.05)。Pca中MVD计数显著高于正常前列腺组织,两者之间有显著性差异(P<0.01)。PCa组织中Survivin、VEGF和MVD计数的表达之间均呈正相关。结论:Survivin和VEGF在Pca中的表达呈正相关,其作用具有协同性,可促进肿瘤血管增生,在PCa的发生、发展中起一定的作用。     

Survivin在前列腺癌细胞LNCaP和PC-3中的表达及意义

目的:探讨Survivin在前列腺癌激素非依赖进展中的可能作用。方法:采用流式细胞术测定前列腺癌雄激素依赖型细胞LNCaP和雄激素非依赖型细胞PC-3在雄激素剥夺时的凋亡情况,进而用Western-Blot鉴定这两株细胞中的Survivin表达情况,初步分析其在前列腺癌的激素非依赖存活中的作用。结果:在去雄激素情况下LNCaP凋亡细胞数显著高于PC-3;同时,Western-Blot证实Survivin在PC-3细胞中的表达显著高于LNCaP细胞。结论:Survivin在雄激素依赖型和雄激素非依赖型的前列腺癌细胞中的表达存在差异,而这种差异可能在前列腺癌细胞雄激素缺失时的生存发挥重要作用。     

膀胱移行细胞癌中Survivin表达的意义

目的探讨膀胱移行细胞癌（TBCC）中Survivin表达的意义。方法应用免疫组织化学一步法、RT PCR法检测40例BTCC和12例正常膀胱粘膜中Survivin和Survivin mRNA的表达,Western blot方法检测40例BTCC与32例非BTCC患者尿液细胞中Survivin的表达。结果免疫组织化学方法显示,Survivin在BTCC中阳性表达率为95.0%,在正常膀胱粘膜中无表达（P<0.01）。RT PCR显示,Survivin mRNA在BTCC中阳性表达率为100.0%,在正常粘膜中无表达（P<0.01）。Western blot显示,Survivin在BTCC患者尿液细胞中阳性表达率为95.0%,在非BTCC患者中无表达(P<0.01)。3组中Survivin的表达与BTCC的分级、分期密切相关（P<0.01）。结论Survivin在BTCC中高表达,因而可作为BTCC的一个良好的诊断和预后指标。     

凋亡抑制基因Livin在膀胱癌中的表达及临床意义

目的检测凋亡抑制基因Livin在膀胱移行细胞癌组织中的表达,以探讨其在膀胱癌发生、发展中的作用。方法应用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法,检测了60例膀胱移行细胞癌中Livin基因的表达情况。结果60例膀胱癌组织中Livin基因阳性表达率为28．3％,10例非肿瘤膀胱组织无一例Livin表达阳性;Livin的表达与膀胱癌的病理分级、临床分期无关（均P〉0．05）;21例复发性膀胱癌组织中Livin阳性表达率为38．1％（8／21）,高于原发性膀胱癌（23．1％,9／39）。结论Livin在膀胱癌的发生发展中具有一定意义,Livin高表达提示患者可能有早期复发的倾向。     

HSP_(27)与Survivin在胃癌中的表达及意义

目的:探讨热休克蛋白27(HSP27)和Survivin在胃癌组织中的表达及二者的相关性。方法:用免疫组织化学法检测45例胃癌及30例癌旁组织、20例正常胃黏膜中HSP27与Survivin的表达,比较其阳性表达率及HSP27表达与Survivin表达的关系。结果:HSP27在胃癌中的表达率明显高于癌旁组织和正常胃黏膜(P<0.01),并且与胃癌的分化程度相关,但与性别、年龄和胃癌的浸润深度及淋巴结转移无关;Survivin在胃癌中阳性表达率明显高于癌旁组织和正常胃黏膜(P<0.01),并且与胃癌的分化程度相关,但与性别、年龄和胃癌的浸润深度及淋巴结转移无关;胃癌组织中HSP27与Survivin的表达有相关性。结论:HSP27和Survivin在胃癌中过度表达,提示二者在胃癌的发生发展中起重要作用;HSP27和Survivin通过抗凋亡机制协同参与胃癌的发生。     

凋亡抑制基因Livin与Survivin在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的探讨Livin与Survivin基因在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达情况及其与临床和病理参数的关系。方法采用RT-PCR法检测44例NSCLC患者手术切除后的标本（其中腺癌30例,鳞癌14例）和44例癌旁正常肺组织中Livin与Survivin基因的表达情况,并分析其与NSCLC临床和病理参数的关系。结果NSCLC肺组织中的Livin与Survivin基因阳性表达率（分别为68.2％和88.6％）均显著高于癌旁正常组织（分别为22.7％和27.2％）,差异均有统计学意义（均P〈0.01）;Livin与Survivin基因在NSCLC中的表达和患者性别、年龄及肿瘤大小、分化程度、组织学类型、淋巴结是否转移、病理TNM分期的差异均无统计学意义（均P〉0.05）,且Livin与Survivin基因在NSCLC组织中的分布也无相关性（r=0.157,P〉0.05）。结论Livin和Survivin基因在NSCLC组织中呈高度表达,但其表达与NSCLC的性别、年龄及肿瘤大小、分化程度、组织学类型、淋巴结是否转移、病理TNM分期无关。     

Livin mRNA和Livin蛋白在食管癌组织中的表达

目的探讨凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis protein,IAP）家族中的新成员Livin在食管癌组织中的表达及其与食管癌临床病理的关系。方法采用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）结合银染技术检测食管癌组织中Livinα mRNA和LivinβmRNA的表达,并用western blot分析Livin蛋白的表达。结果36例食管癌组织中Livin表达阳性率为50.0％,其表达与癌组织浸润深度和淋巴结转移呈正相关（P〈0.05）,而与癌组织分化程度无关（P〉0.05）。而18例癌旁正常食管组织中Livin低表达,阳性率为5．6％（P〈0.01）。结论Livin在食管癌组织中异常表达,有望成为食管癌诊断和基因治疗的新靶点。     

Livin反义寡核苷酸对肺腺癌A549细胞增殖的影响

目的：探讨Livin基因反义寡核苷酸（antisense oligodeoxynucleotides,ASODN）对肺腺癌A549细胞增殖的影响。方法：用阳离子脂质体介导Livin ASODN转染至A549细胞,反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测Livin基因mRNA的表达;MTT法检测转染细胞的生长抑制情况。结果：转染ASODN后A549细胞的Livin基因mRNA的表达明显减少,Livin基因ASODN显著抑制A549细胞增殖,并呈剂量依赖性,与对照的错义寡核苷酸（missense oligodeoxynucleotides,MSODN）比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：Livin反义寡核苷酸能明显抑制A549细胞Livin基因mRNA的表达,抑制细胞增殖,Livin基因有望成为肺癌基因治疗的新靶点。     

凋亡抑制因子Survivin和Livin在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的探讨抑癌基因Survivin、Livin在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及临床意义。方法采用免疫组化S-P法检测52例NSCLC癌组织、20例癌旁5cm以上正常肺组织中Survivin、Livin蛋白表达情况。结果Sur—vivin、Livin蛋白在NSCLC组织中的表达水平明显高于癌旁肺组织（61．54％vs5．00％,48．08％vs0．00％,P〈0．05）;Survivin蛋白的表达与腺癌密切相关（P〈0．05）;Livin蛋白的表达与患者淋巴结转移密切相关（P〈0．05）;Survivin与Livin间（rs=0．193,P〉0．05）无明显相关性。结论Survivin和Livin蛋白在非小细胞肺癌组织中表达上调;Survivin蛋白的表达与NSCLC患者组织类型密切相关;Livin蛋白的高表达可能与NSCLC癌细胞的转移有密切关;Survivin和Livin蛋白之间无明显相关性。     

Survivin和Livin在人骨肉瘤组织中的表达及临床意义

目的 研究Survivin和Livin在骨肉瘤中的表达及其临床意义.方法 对38例骨肉瘤及20例骨软骨瘤患者的临床病理资料进行同顾性分析,应用免疫组织化学染色结果进行统计学分析.结果 survin和Livin在38例标本中阳性率分别为44.7%(17/38)和55.3%(21/38),Survivin和Livin的表达与患者年龄、性别、骨肉瘤亚型尤明显关系,但与Enneking外科分期有关,Ⅰ～ⅡA期与ⅡB～Ⅲ期之间肿瘤表达率差异明显(P＜0.05).结论 surivin和Livin在骨肉瘤组织中有较高比例的表达,可作为预测骨肉瘤预后的重要指标.     

Livin和Survivin在结肠癌及不同类型结肠腺瘤中的表达

目的 探讨Livin和Survivin在结肠正常黏膜、不同类型结肠腺瘤及结肠癌中表达水平的变化规律及临床意义.方法 针对30例结肠癌、30例结肠绒毛状腺瘤、30例结肠管状腺瘤及30例结肠正常黏膜采用免疫组化染色方法对其Livin和Survivin的表达水平进行测定.结果 结肠癌标本Livin和Survivin阳性表达率...     

Livin、Survivin和Caspase-3在星形细胞瘤中的表达

目的探讨Livin、Survivin和Caspase-3在星形细胞瘤中的表达。方法采用免疫组织化学法检测50例星形细胞瘤标本及10例正常脑组织中Livin、Survivin和Caspase-3的表达,分析Livin、Survivin的表达与Caspase-3表达的关系。结果 Caspase-3在正常脑组织中的阳性表达率显著高于在星形细胞瘤(P<0.05),且在Ⅰ～Ⅱ级星形细胞瘤中的阳性表达率高于Ⅲ～Ⅳ级(P<0.05)。Livin和Survivin在星形细胞瘤中的阳性表达率显著高于正常脑组织(P<0.05),且在Ⅲ～Ⅳ级星形细胞瘤中的阳性表达率明显高于Ⅰ～Ⅱ级(P<0.05)。星形细胞瘤中Livin和Survivin的表达与Caspase-3蛋白的表达均呈负相关(r分别为-0.520和-0.360,P<0.05)。结论 Livin、Survivin和Caspase-3的表达可能与星形细胞瘤的发生及发展有关。     

Livin和Survivin基因联合靶向siRNA重组表达载体的构建和鉴定

目的 构建Livin和Survivin联合靶向的siRNA重组表达载体,探讨用RNA干扰方法同时下调Livin和Survivin基因表达的增效作用.方法 通过前期的实验,分别从靶向Livin基因和Survivin基因的siRNA序列中各挑选出1对最有效的siRNA序列,然后采用1个载体编码2个shRNA技术,将其构建到同一个真核表达载体上,转化DH5a菌株,提取质粒进行酶切鉴定和测序分析.结果 经酶切鉴定和测序分析证实Livin和Survivin联合靶向的siRNA重组表达载体构建成功.结论 Livin和Survivin联合靶向的siRNA重组表达载体构建成功.