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1.
常用的基因治疗表达载体有病毒表达载体和质粒表达载体,这两类传统基因治疗载体含有大量病毒或细菌DNA序列,会引发人体较严重的免疫反应、细胞炎症、细胞毒性副作用、以及基因表达沉默化,是基因治疗应用于人类疾病治疗的一大障碍。项目构建了一种新型的、基于腺相关病毒(AAV)倒置末端重复序列(ITR)的基因表达单链微载体(AAV-ITR mini vector),并用GFP基因作为报告基因。通过热变性的方法制备单链DNA,然后将带有GFP的质粒、双链DNA载体、AAV-ITR基因表达微载体转入真核表达细胞,采用荧光显微镜观察和流式细胞仪检测等较为简单的方法来检测其表达效率。实验结果显示,AAV-ITR基因表达微载体在293T细胞中具有较高的转染、表达效率,并且具有类似AAV病毒载体的特性。该研究结果将有助于进一步研发类似于AAV病毒载体的安全、无免疫原性的人造基因治疗载体。 相似文献
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李志 《中国医院药学杂志》2001,21(5):302-304
目前的基因载体系统可分为病毒载体和非病毒载体。利用病毒载体介导的基因转移 ,以其高转染率和良好靶向性成为肿瘤基因治疗中应用最广泛的方法。非病毒载体由于其非免疫性和易于生产性而逐渐引起学者瞩目。基因治疗是一种用正常基因取代缺陷基因的治疗 ,目前主要用于肿瘤治疗 ,同时在基因治疗造血细胞疾病、心血管疾病、风湿性关节炎方面 ,已在动物试验中取得一定进展。1 基因载体系统本文介绍几种将外源基因引入宿主细胞的转移方法 ,这些方法可使外源基因短期 (数天 )或长期 (数星期或数年 )稳定的表达[1] 。通常可将这些方法分为病毒载… 相似文献
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阳离子脂质体在基因转染载体中的研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
目前基因治疗面临的首要技术问题是基因药物的载体,用于基因治疗的载体主要分为两大类:病毒载体和非病毒载体.病毒载体可能在体内发生基因的重组或互补,因此具有较大的潜在危险,限制了它在临床基因治疗上的应用[1].非病毒载体中发展最为成熟的是阳离子脂质体(cationic liposomes,CL)载体,它具有可自然降解、无免疫原性、可重复转染等优点,迄今已有数十种阳离子脂质体被用于基因转染[2].该项技术目前已成为基因治疗的研究热点之一,现就其进展综述如下. 相似文献
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肝细胞肝癌(HCC)的基因治疗成为近10年来的研究热点.现就近10年来肝细胞肝癌的基因治疗的研究进展综述如下.
1基因治疗的原理
基因治疗主要是通过将抗肿瘤基因转导人肿瘤细胞,从而产生治疗疾病的有效作用.基因的转导可以通过基因-病毒的形式,也可通过基因-非病毒的形式.逆转录病毒和腺病毒载体是肝癌基因治疗中常用的载体.目前用于肝癌基囚治疗的基囚包括:溶瘤病毒基囚、介导细胞凋广基因、前药激活基囚、抑制血管生成基因、小干扰RNA基囚沉默. 相似文献
5.
基因载体主要有病毒载体和非病毒载体。病毒载体的基因转运能力强,但其携带基因的大小数量有限,而且在临床应用上存在安全性问题(王海等.2006)。非病毒载体具有低毒、低免疫反应,外源基因随机整合率低且携带基因大小类型不受限制等优点,已成为基因治疗中的热点和当前药剂学研 相似文献
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目前基因治疗发展迅速,肿瘤基因治疗方法已经逐步从实验及基础研究过渡到临床试用阶段,理论和技术层次上日趋成熟。然而基因治疗还没达到完全安全、高效、准确的目标,其中基因治疗的载体是最受关注问题之一。合适的载体应具备最大的有效性和最小的毒性,传统生物类载体主要是病毒载体和非病毒载体。目前低毒或无毒的且具有靶向性感染特点的细菌载体在肿瘤基因治疗得到证实,充分说明了细菌载体开辟抗肿瘤治疗的新途径。本文就减毒沙门菌作为载体在肿瘤基因治疗中的应用综述如下。 相似文献
8.
基因治疗是随着现代分子生物学技术的发展而诞生的一种生物医学治疗技术,主要涉及载体、目的基因和靶细胞三方面。将目的基因导入靶细胞,得到稳定高效的表达是基因治疗的关键问题,因而选择合适的载体是基因治疗成功的基础。目前应用的载体主要包括病毒载体和非病毒载体两类,此文就近几年来有关基因治疗载体的研究作一简要综述。 相似文献
9.
卵巢癌基因治疗的新进展 总被引:4,自引:0,他引:4
卵巢癌是恶性度最高的妇科肿瘤之一,由于手术和化疗的不尽人意,基因治疗是当今肿瘤研究的热点。卵巢癌的基因治疗载体主要分为病毒载体系统和非病毒载体系统。其中,腺病毒载体转染效率较高,是目前基因治疗的主要手段和最有前途的载体。卵巢癌的基因治疗策略有分子化学治疗,基因替代和免疫系统的基因调控。由于这一领域的迅速发展,卵巢癌的基因治疗有着光明的前景。 相似文献
10.
基因治疗有望成为肿瘤治疗的有效手段,用于携带外源基因的载体在肿瘤基因治疗中发挥了重要作用.其中腺相关病毒(AAV)载体具有安全性高、长效表达、宿主范围广泛等优点,在基因治疗中得到越来越广泛的应用.本文重点综述AAV的生物特点、载体发展及其在肿瘤基因治疗中的应用. 相似文献
11.
本刊编辑部 《中国生化药物杂志》2015,(2):4
基因治疗与表达载体构建是本期文章收录的主题。基因治疗是指向靶细胞引入正常有功能的基因,以纠正或补偿致病基因所产生的缺陷,从而达到治疗疾病的目的。其中将目的基因导入靶细胞并使之表达是其关键环节,因此介导的表达载体的选择便显得格外重要。基因治疗载体可分为病毒性载体和非病毒性载体。病毒性载体中反转录病毒载体对淋巴细胞、神经细胞、肝细胞、心肌细胞、肌细胞和多种肿瘤细胞均具有较高的转导效率;腺相关病毒载体被广泛用于治疗恶性肿瘤、自身免疫性疾病、感染性疾病及器官移植 相似文献
12.
吴祥根 《国外医学(药学分册)》2006,33(4):315-315
一种具有病毒样功能的人工病毒作为基因递送的载体用于基因治疗的研究正在进行中。虽然该技术尚处于实验室研究阶段,但有可能对将来的基因治疗产生巨大影响。全世界已进行过1000多次基因治疗临床试验,但成功率很低,而且,目前尚没有一个基因治疗的产品通过FDA批准。造成这种现象的很重要的一个原因是现有的基因治疗载体很难将目的DNA递送进靶细胞并在胞核内持续表达,即现有的技术如质粒等细胞的转染率很低。 相似文献
13.
基因治疗是通过一定的载体或手段将功能性外源基因导入受体细胞中,通过外源基因的表达产物或是通过外源基因抑制某些基因的转录或翻译,达到治疗的目的。基因载体有2种:病毒载体传递体系和非病毒载体传递体系。病毒载体传递体系因安全问题使其在临床应用中多有限制。非病毒载体有着诸多优势,但较低的转染效率限制了其在研究及临床上的应用。本文综述近年来一类基于多糖聚合物设计的非病毒载体的研究进展,并阐述其在基因治疗中的优势及应用。 相似文献
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慢病毒———基因转移的潜在新载体 总被引:1,自引:0,他引:1
随着对疾病分子机制认识的加深及生物技术的发展,基因治疗已成为治疗感染性疾病、遗传疾病、神经系统疾病以及肿瘤的新焦点。用于基因治疗的载体系统可分为病毒性载体和非病毒性载体两类。目前常用的病毒载体包括逆转录病毒载体、腺病毒载体、腺相关病毒载体、疱疹病毒载体、痘苗病毒载体等,但是这些载体均存在不足之处,严重影响了基因治疗的有效性及安全性。在基因治疗中广泛应用的逆转录病毒载体存在的主要问题,是无法高效转导非分裂期细胞,而腺病毒载体虽然能转导非分裂期细胞,但在体内不能实现目的基因稳定的长期表达,且反复应用容易引起免疫反应。慢病毒载体不但可以感染非分裂期细胞,还具有容纳外源性目的基因片段大、免疫反应小等优点,在基因治疗中具有广泛的应用前景。现以HIV-1为例,就慢病毒载体的生物学特征、慢病毒载体的构建、在基因治疗中的应用以及生物安全性等方面作一综述。 相似文献
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基因治疗的主要目的是开发和利用高效无毒的基因载体,包裹和传递外源性基因材料到靶细胞。病毒型基因载体包括逆转录病毒、腺病毒、单纯疱疹病毒、腺病毒相关病毒和痘病毒,基因传递效率高,但安全性差和基因载量低。非病毒载体包括阳离子聚合物、阳离子多肽和阳离子脂质体,基因传递效率比病毒载体低,但更安全、制备简单、基因包裹率高。 相似文献
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基因治疗是一种通过改变个体的基因表达来治疗疾病的方法,为肿瘤、罕见病及其他难治性疾病提供了全新的治疗策略。基因治疗通过基因编辑技术实现对个体致病基因的改造,同时也依赖基因递送载体改善其在体内的稳定性和靶向性。本综述简述了基因治疗的方式,结合目前的基因治疗产品,介绍了病毒、非病毒基因递送载体和基因编辑技术在基因治疗中的发展概况,并总结归纳了临床实践中基因治疗的安全性问题。 相似文献
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人白介素24基因重组腺病毒载体的构建与鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
目的构建含有人白介素24(hIL-24)基因的重组腺病毒载体,为下一步病理性瘢痕的基因治疗研究奠定实验基础。方法采用基因工程技术将hIL-24基因的cDNA亚克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV上,鉴定正确后在PAdEasy系统中进行细菌内同源重组,通过脂质体将正确重组体包裹并转染293A细胞以包装并扩增病毒。采用酶切及PCR方法对重组腺病毒进行鉴定。结果酶切和PCR结果证实hIL-24基因重组腺病毒载体构建成功并可在293A细胞中表达,病毒滴度达107pfu/ml。结论成功构建了有较强感染能力的含hIL-24基因的重组腺病毒载体。 相似文献
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乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,难以治愈且对标准治疗产生抗药性的乳腺癌常与基因的改变有关,快速发展的基因治疗为乳腺癌治疗提供了新思路。目前,基因载体分为病毒载体和非病毒载体两大类,相对于病毒载体,非病毒载体中的阳离子聚合物,由于其低免疫原性、安全性高、结构可修饰和制备简单等特点,是一类极具应用前景的基因载体。本文就阳离子聚合物作为基因载体在乳腺癌治疗中的研究进展进行综述。 相似文献
20.
慢病毒——基因转移的潜在新载体 总被引:1,自引:0,他引:1
随着对疾病分子机制认识的加深及生物技术的发展,基因治疗已成为治疗感染性疾病、遗传疾病、神经系统疾病以及肿瘤的新焦点。用于基因治疗的载体系统可分为病毒性载体和非病毒性载体两类。目前常用的病毒载体包括逆转录病毒载体、腺病毒载体、腺相关病毒载体、疱疹病毒载体、痘苗病毒载体等,但是这些载体均存在不足之处,严重影响了基因治疗的有效性及安全性。在基因治疗中广泛应用的逆转录病毒载体存在的主要问题,是无法高效转导非分裂期细胞,而腺病毒载体虽然能转导非分裂期细胞,但在体内不能实现目的基因稳定的长期表达,且反复应用容易引… 相似文献