胃癌组织中增殖诱导配体及其受体蛋白的表达

目的:观察人胃癌组织中增殖诱导配体(APRIL)及其受体B细胞成熟抗原(BCMA)和穿膜蛋白活化物(TACI)蛋白的表达,探讨其临床意义.方法:采用H-E染色及间接免疫荧光法检测30例人胃癌组织及相应10例癌旁正常组织APRIL及其受体蛋白的表达,分析不同临床病理特征下相关蛋白的表达水平.结果:胃癌组织中APRIL阳性率为86.7%,癌旁正常组织未见表达(P<0.05);而其受体BCMA和TACI蛋白表达水平在两者间无统计学差异.胃癌组织不同临床病理指标下(肿瘤大小、分化程度、浸润深度、有无淋巴结转移和TNM临床分期),APRIL及其受体蛋白表达无统计学差异.结论:胃癌组织中APRIL蛋白高表达,检测其表达水平可能有助于胃癌的早期诊断.     

靶向胰腺癌细胞株增殖诱导配体基因小干扰RNA的制备及纯化

目的:制备及纯化针对增殖诱导配体基因(APRIL)的小干扰RNA(APRIL siRNA),为进一步研究APRIL基因在人胰腺癌中的作用奠定基础.方法:构建靶向胰腺癌CFPAC-1细胞株APRIL基因双链RNA(APRIL dsRNA)的表达质粒pET-22b-APRIL, 在大肠杆菌中发酵表达APRIL dsRNA,并利用CF-11树脂亲和层析纯化;用大肠杆菌Ⅲ型RNA水解酶(RNase Ⅲ)水解dsRNA,制备APRIL siRNA,应用DEAE树脂离子交换层析使RNaseⅢ与核苷酸分离,分子筛层析进一步分离纯化APRIL siRNA.将纯化后的APRIL siRNA转染CHO细胞,荧光显微镜下观察转染后CHO细胞APRIL蛋白的表达情况.结果:pET-22b-APRIL转染大肠杆菌后,经IPTG诱导能大量表达APRIL dsRNA,表达产物经CF-11树脂纯化能得到纯化的APRIL dsRNA;dsRNA经RNase Ⅲ水解后,过DEAE树脂离子交换层析柱,经5%PAGE、12%SDS-PAGE电泳证实RNase Ⅲ与核苷酸分离,进一步经分子筛层析分离纯化,得到纯化APRIL siRNA.荧光显微镜下观察结果表明,APRIL siRNA转染CHO细胞能明显抑制APRIL蛋白的表达.结论:成功制备了靶向CFPAC-1细胞株的APRIL siRNA,为下一步敲减CFPAC-1细胞APRIL基因的研究奠定了基础.     

胃癌组织中增殖诱导配体及受体mRNAs表达的病理意义

目的:研究增殖诱导配体(APRIL)及其受体B细胞成熟抗原(BCMA)和穿膜蛋白活化物(TACI)mRNA在胃癌组织中的表达,探讨其临床病理意义。方法:收集30例胃癌及相应癌旁正常胃组织,应用RT-PCR检测APRIL及其受体mRNA在胃癌及癌旁胃组织中的表达。结果:胃癌组织APRILmRNA阳性率(26/30,86.7%)明显高于癌旁胃正常组织(12/30,40.0%)(P<0.01),在肠型胃癌中的表达高于弥漫型(P<0.05),与年龄、性别、病灶大小、临床病理分期、分化程度、浸润深度、淋巴结转移等因素无关。而APRIL受体mRNA在胃癌和癌旁胃组织中表达无差异,且与年龄、性别、病灶大小、临床病理分型和分期、分化程度、浸润深度、淋巴结转移等因素无关。结论:APRILmRNA异常表达与肠型胃癌的发生有关,检测其表达水平有助于胃癌的早期诊断。     

人乳腺癌组织中增殖诱导配体及受体mRNA水平定量测定

目的:分析乳腺癌组织中增殖诱导配体(APR IL)及其受体mRNA的表达水平。方法:采用实时荧光定量PCR(RFQ-PCR)技术检测临床样本中靶基因mRNA准确含量,并以靶基因和内参β2M mRNA含量的比值作为评价靶基因表达水平的指标。结果:RFQ-PCR检测靶基因mRNA含量的线性范围为109~101pg/m l,批内和批间重复性测定的变异系数v分别为3.87%~10.12%和6.86%~12.29%。乳腺癌25例组织样本的检测结果显示乳腺癌及癌旁组织中APR IL的水平均显著高于远端正常组织(P<0.05),而β细胞成熟抗原和穿膜蛋白活化物的表达水平在3组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:成功建立RFQ-PCR检测APR IL及其受体mRNA含量的方法,具有较好的检测灵敏度和重复性;发现APR IL在乳腺癌组织中高表达,提示APR IL在乳腺癌发生、发展过程中可能起了重要作用。     

增殖诱导配体在喉鳞状细胞癌中的表达

目的观察增殖诱导配体（APRIL）在喉鳞癌（LSCC）中的表达。方法采用免疫组织化学SABC法检测150例喉鳞癌患者中癌旁喉黏膜组织、癌组织中是否有APRIL的表达及APRIL的表达量与临床指标之间的关系。结果APRIL在癌旁喉黏膜组织及癌组织中的阳性表达率分别为6．7％（10／150）、89．3％（134／150）,在喉鳞癌不同的TNM分期中随着分期的增进APRIL的表达量逐渐增加且差异有统计学意义（P〈0．05）,APRIL的表达量与TNM分期相关（P〈0．05）。结论APRIL蛋白在喉鳞癌中高表达,且在不同TNM分期之间差异有统计学意义。     

人胃腺癌细胞株AGS、SGC-7901增殖诱导配体mRNA的表达

目的:比较人AGS、SGC-7901两种胃癌细胞株中增殖诱导配体(APRIL)mRNA的表达水平。方法:通过半定量RT-PCR检测APRIL mRNA,筛选出APRIL mRNA高表达细胞株。结果:以GAPDH为内参,通过计算机图像扫描系统分析各株细胞APRIL mRNA的表达量,获得人胃腺癌细胞株APRIL mRNA表达量的相对值,AGS0.09,SGC-79010.61。结论:SGC-7901为APRIL mRNA高表达细胞株。     

人可溶性增殖诱导配体促HeLa细胞增殖作用的研究

目的 观察人可溶性增殖诱导配体(soluble a proliferation-induced ligand, sAPRIL)是否具有促进宫颈癌细胞株HeLa增殖的作用及其机制.方法 用Brdu法检测sAPRIL蛋白对人宫颈癌HeLa细胞增殖的作用,进而用RT-PCR法检测HeLa细胞APRIL受体的表达情况.结果 原核表达的sAPRIL蛋白能促进HeLa细胞增殖.HeLa细胞表达APRIL的受体HSPG1、HSPG2,而不表达BCMA 、TACI及HSPG4.结论 sAPRIL有明确的促HeLa细胞增殖作用.由于HeLa细胞有APRIL受体HSPG1、HSPG2的表达,我们初步推测该作用可能是通过HSPG1及HSPG2起作用的.     

增殖诱导配体在非小细胞肺癌组织中的表达与临床意义

目的:探讨增殖诱导配体(APR IL)mRNA在非小细胞肺癌的表达及临床意义。方法:采用荧光定量聚合酶链反应技术检测肺癌组织、癌旁组织及正常肺组织标本中APR IL mRNA的表达情况,其结果与临床病理指标进行分析。结果:APR IL mRNA在肺癌组织中表达最高,癌旁组织次之,正常肺组织最低(P<0.05)。且APR IL mRNA表达水平与肿瘤细胞分化程度、淋巴结远处转移及TNM分期相关(P<0.05),但与患者的性别、年龄、肺癌肿块大小和病理细胞类型无关(P>0.05)。结论:APR IL在肺癌发生和促进其淋巴结远处转移的过程中具有重要功能。     

增殖诱导配体在多发性骨髓瘤中的表达及临床意义

目的定量分析多发性骨髓瘤患者化疗前后外周血单个核细胞和血浆中增殖诱导配体(APRIL)mRNA及蛋白的表达水平。方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)及实时荧光定量聚合酶链反应(RFQ-PCR)技术测定靶基因及靶蛋白的准确含量。结果 MM患者化疗前APRIL mRNA及蛋白表达水平均显著高于正常对照(P<0.05);化疗前Ⅲ期APRIL mRNA及蛋白表达水平显著高于Ⅰ期及Ⅱ期(P<0.05);化疗后PD组显著高于CR及PR组(P<0.05)。结论 APRIL可能参与MM的发生与发展并与肿瘤负荷量及疗效密切相关,其mRNA与蛋白表达水平相一致,且可能成为有效治疗MM的新靶点。     

应用组织芯片研究乳腺癌组织中CK5／6蛋白的表达及其临床意义

摘要:目的探讨乳腺癌组织中CK5／6蛋白的表达与临床及预后的关系。方法制作240例乳腺癌组织芯片,采用免疫组织化学法检测乳腺癌组织中CK5／6蛋白的表达,分析其与乳腺癌临床病理特征及预后的关系。结果CK5／6阳性表达占乳腺癌总数的14.72％(29／197)。CK5／6表达与患者年龄、月经、肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移情况、肿瘤病理类型等无关,而与ER阴性表达具有相关性(P＜0.01)。CK5／6表达阳性与阴性的乳腺癌比较,生存期短且预后差。结论CK5／6阳性表达的乳腺癌患者预后较差,CK5／6可成为乳腺癌预后的指标之一。     

胰腺癌组织中ABCG2、MRP-1的表达及临床意义

目的探讨胰腺癌组织中ABCG2和MRP-1的表达及其临床意义,为肿瘤筛查、抗癌药物选择及MDR抑制剂因子药物研究提供依据。方法用免疫组化方法研究98例胰腺组织中ABCG2、MRP-1的表达,应用SPSS软件分析二者表达与胰腺肿瘤患者的临床病理特征的关系。结果 ABCG2在胰腺癌、胰腺良性肿瘤及正常胰腺组织中的阳性率分别为53.62%、18.18%、16.67%,其在胰腺癌中表达较两对照组差异具统计学意义(P<0.05);而MRP-1在胰腺癌、胰腺良性肿瘤及正常胰腺组织中的阳性率分别为62.32%,18.18%,27.78%,其在胰腺癌中表达较两对照组差异同样存在计学意义(P<0.05);二者表达均与肿瘤大小相关,而MRP-1表达尚与肿瘤分化相关;在胰腺癌组织中ABCG2与MRP-1表达呈正相关(rs=0.489,P=0.044)。结论 ABCG2与MRP-1在胰腺癌组织中表达与肿瘤生长与分期相关,其表达对预后具有意义。     

宫颈癌组织CD44v6表达的意义

目的　探讨 CD4 4 v6在宫颈癌前病变及宫颈癌中的表达及其临床意义 .方法　应用 S- P免疫组化法观察宫颈癌6 0例、正常宫颈上皮组织 10例和宫颈上皮内瘤样病变 (CIN)12例中 CD4 4 v6的表达 .结果　正常宫颈上皮组织中CD4 4 V6阳性率为 2 0 % ,CIN中 CD4 4 v6阳性率为 4 2 % ,而宫颈癌组织中 CD4 4 v6阳性率为 6 8% .在宫颈癌中 ,随病理分级的升高 ,CD4 4 v6表达增加 ,其 , 及 级 CD4 4 v6阳性率分别为 4 3% ,6 9%和 85 % (P<0 .0 5 ) .CD4 4 v6表达在有淋巴结转移组中 (91% )明显高于无淋巴结转移组 (5 2 % ,P<0 .0 5 ) .临床分期晚 CD4 4 v6表达高 , , 期和 , 期CD4 4 v6阳性率分别为 6 3%和 80 % ,但无统计学意义 (P>0 .0 5 ) .结论　随着宫颈癌的发生、发展 ,CD4 4 v6表达率逐渐增加 ,CD4 4 v6可作为判断宫颈癌恶性程度、转移及预后的重要指标     

AAX14401蛋白在人膀胱癌组织中的表达及其意义

目的：研究AAX14401蛋白在正常膀胱组织和膀胱移行细胞癌组织中的表达情况,分析其在膀胱癌发生发展过程中的作用。方法：收集膀胱癌组织标本75例作为实验组,以正常膀胱黏膜组织12例作为对照组,应用免疫组织化学法检测谷胱甘肽S转移酶P1（GSTP1）和AAX14401的阳性表达率,分析GSTP1和AAX14401蛋白阳性表达率在膀胱癌组织和正常膀胱组织中的差异。结果：正常膀胱组织中GSTP1蛋白阳性表达率为58.3%,膀胱癌组织中GSTP1蛋白阳性表达率为90.7%,二者比较差异有统计学意义（P<0.01）;在正常膀胱组织中AAX14401蛋白表达均为阴性,在膀胱癌组织中AAX14401蛋白阳性表达率为2.7%,二者比较差异无统计学意义（P=0.596）;膀胱癌组织中AAX14401蛋白和GSTP1蛋白无同为阳性表达者,GSTP1阴性表达的膀胱癌组织中有2例Anti-AY阳性表达,GSTP1蛋白与AAX14401蛋白在膀胱癌组织中阳性表达呈负相关关系（r=-0.274,P=0.018）。结论：AAX14401蛋白在膀胱癌中的表达可能促进了膀胱癌的发生发展。     

组蛋白精氨酸甲基转移酶5在胃癌组织中的表达及其意义

目的：探讨组蛋白精氨酸甲基转移酶5（PRMT5）在胃癌组织中的表达,阐明PRMT5与胃癌发生及临床病理学特征之间的关系,为胃癌的防治提供新的靶点。方法：43例人胃癌组织及15例癌旁正常胃组织样本分别作为胃癌组和对照组,采用免疫组织化学方法检测2组样本中PRMT5的高表达率。结果：与对照组（13.3%）比较,胃癌组胃癌组织中PRMT5高表达率（72.1%）明显升高（P < 0.05）。对照组弱阳性表达标本中,棕黄色颗粒主要位于细胞浆中,表现为弱到中等强度表达,细胞核染色较少;高分化胃癌标本中,棕黄色颗粒主要位于细胞浆中,表现为中等和强表达,细胞核染色较多;中、低分化和未分化胃癌标本中棕黄色颗粒主要位于细胞浆和细胞核中,细胞核表现为强表达。PRMT5高表达率与肿瘤大小、分化程度、浸润深度、淋巴结转移情况及TNM分期有关联（P < 0.05或P < 0.01）,与患者的性别和年龄无关联（P < 0.05）。结论：PRMT5高表达可能对胃癌的发生发展起促进作用。     

人胰腺癌组织K-ras,p53基因表达及其意义

目的：探讨Ｋ－ｒａｓ，ｐ５３基因表达与人胰腺癌临床生物学行为之间的关系。     

子宫内膜癌组织中钙磷脂结合蛋白Ⅱ的表达及其意义

目的研究子宫内膜癌组织中钙磷脂结合蛋白Ⅱ(AnnexinⅡ)的表达及其意义。方法用免疫组化检测86例子宫内膜癌组织中AnnexinⅡ的表达,分析AnnexinⅡ与临床病理特征的关系。结果子宫内膜癌组织中AnnexinⅡ表达阳性率高于正常子宫内膜组织,AnnexinⅡ表达与淋巴结转移、病理分级及临床分期有相关性,与肿瘤病理组织类型无相关性。结论AnnexinⅡ表达可能与子宫内膜癌生长和淋巴结转移有关。     

程序性细胞死亡因子4在胰腺癌组织中的表达及临床病理学意义

目的探讨胰腺癌组织中程序性细胞死亡因子4(PDCD4)的表达及临床病理学意义.方法采用免疫组织化学方法检测69例胰腺癌石蜡标本中PDCD4表达,同时采用Western印迹杂交方法检测其中8例冷冻保存的新鲜胰腺癌及癌旁正常胰腺组织中PDCD4蛋白的表达情况,观察其与胰腺癌患者临床病理学参数之间的关系.结果Western印迹分析结果显示,同癌旁正常胰腺组织相比,8例胰腺癌组织中PDCD4蛋白表达均明显减弱或缺失.69例胰腺癌中,PDCD4低表达(阳性细胞数＜30%)者占52.2%.其中,在中、低分化腺癌中,PDCD4低表达者分别为67.4%(15/23)和70%(14/20),而高分化腺癌仅有26.9%(7/26)为低表达.相关分析显示,PDCD4表达减弱或缺失与胰腺癌的不良分化相关(P＜0.01),而与患者的性别、年龄、肿瘤部位和TNM分期无关.结论PDCD4蛋白在胰腺癌中多呈低表达,并与胰腺癌的分化程度相关,其在胰腺癌的发生、发展过程中可能起重要作用.