时间分辨荧光免疫法测定乙型肝炎病毒标志物

我国是乙型肝炎病毒(HBV)的高感染国家,乙肝病毒感染是常见的感染性疾病之一,而乙肝的预防、诊断和疗效等方面大部分都依赖HBV五项血清学指标的测定[1,2].近年来常用酶联免疫吸附试验( ELISA)测定HBV-M,确定是否感染乙肝,检查急慢性HBV复制状态及评价抗病毒疗效.但传统ELISA只能进行定性检测,未能满足对单纯阳性及阴性的判断.而时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)为一种特异性高、灵敏度强、可定量分析检测技术,对药物疗效及病情检测有重要意义[3].本文同时采用ELISA与TRFIA对120例本院门诊、住院患者HBV血清学指标进行测定及方法学对比,报告如下.     

时间分辨荧光免疫法检测乙肝标志物的临床评价

目的：探讨时间分辨荧光免疫分析技术（TR兀A）检测乙型肝炎血清学标志物（HBV—M）的临床意义。方法：用TRFIA和EUSA法对健康对照组115份血清和感染组210份血清的HBV—M进行测定。结果：用TRnA和ELISA法检测HBsAg对照组和感染组均无差异：TRFIA检测HBsAb比ELISA法灵敏度高．可检出低浓度及过高浓度的HBsAb;TRFIA检HBeAg比EEL／SA特异性强,EUSA法易出现假阳性;TRFIA检测HBeAb和HBcAb与EUSA法相比对感染组差异有显著性。结论：TRFIA法在检测HBV—M是特异性强、敏感性高,其结果间接反映病毒的感染状况,同时也可为接种乙肝疫苗提供依据。HBeAg和HBsAg可作为监测HBV感染和复制的量化指标。动态监测HBV—M的量能够反映机体对病毒感染的免疫反应情况,可作为观察临床疗效的依据。     

时间分辨荧光免疫技术在乙肝两对半测定中的应用

目的比较时间分辨荧光免疫分析技术（TRFIA）和酶联免疫吸附试验（ELISA）对乙肝两对半的测定结果,探讨TRFIA在乙肝两对半测定中的应用价值。方法采用TRFIA对其配套两对半试剂盒进行准确性和重复性测试。对235例临床标本采用TRFIA和ELISA2种方法同时测定乙肝两对半,并对结果进行分析。结果 TRFIA试剂盒测定乙肝五项指标具有良好的准确性和重复性。与ELISA相比,TRFIA在HbsAg与HBeAg的测定上差异无统计学意义（P〉0.05）,而在HbsAb、HbeAb及HBcAb的测定上差异均有统计学意义（P〈0.01）。在两对半模式的测定上,TRFIA与ELISA相比在HbsAb、HbeAb、HbcAb模式的检出率显著增高（P〈0.05）,其他医学模式相比差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论 TRFIA较ELISA特异性强、灵敏度高,是一种比较理想的定量检测方法。TRFIA通过乙肝两对半的定量测定为乙肝诊断、治疗及预后提供全面动态监测,并为疫苗接种提供可靠依据。     

时间分辨荧光免疫技术检测乙肝血清标志物的临床应用评价

目的对时间分辨荧光免疫技术（TRFIA）定量检测乙型肝炎病毒（HBV）五个血清学标志物进行临床评价。方法用TRFIA法和酶免法（EIA）对定值样品和355份临床标本同时测定,对两种方法的结果进行比较分析。结果TRFIA检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb的灵敏度分别为0．2ng／ml、10mIU／ml、0．05Ncu／ml、2Ncu／ml和0．2Ncu／ml;对355份临床血清测定,除HBeAg外,其余4个指标检测阳性率均大于EIA,两个高浓度HBsAg血清EIA法阴性,但TRFIA为阳性。结论TRFIA较EIA更为敏感;TRFIA在一定程度上可克服EIA法中的高剂量钩状效应。     

时间分辨荧光免疫法筛查新生儿先天性甲状腺功能减低的临床研究

目的探讨时间分辨荧光免疫法在新生儿先天性甲状腺功能减低筛查中的临床应用优势。方法分别采用ELISA法和TRFIA法共对40008例新生儿进行新生儿先天性甲状腺功能减低疾病筛查,并比较两种方法筛查的结果。结果 ELISA法和TRFIA法筛查的阳性检出率分别为0.04%和0.10%,差异有统计学意义(x2=12.38,P<0.05);ELISA法和TRFIA法的≥5mIU/L比率分别为16%和25%,差异有统计学意义(x2=22.6,P<0.05)。结论 TRFIA法在筛查新生儿先天性甲状腺功能低下中的阳性检出率较高,应在临床上推广使用。     

酶联免疫吸附法和时间分辨荧光免疫法在检测乙型病毒性肝炎中的效果比较

目的分析比较ELISA法和TRFIA法在检测乙型肝炎患者血清学标志物的灵敏性。方法以2011年5月至2012年1月期间来我院就诊的74例乙肝患者为研究对象。分别采用两种检测方法对患者血清学标志物进行检测,并对检出结果进行统计分析。结果 TRFIA法对乙肝患者血清标志物检测的阳性率明显高于ELISA法(P<0.05)。结论与ELISA相比,TRFIA法对乙肝血清学标志物的检测更为灵敏,临床上值得推广。     

时间分辨荧光免疫法检测梅毒螺旋体抗体的临床应用研究

目的通过比较时间分辨荧光免疫法(TRFIA)与梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)、梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)在检测不同时期的梅毒的准确率,阐明时间分辨荧光免疫法在检测梅毒及不同时期与类型梅毒中的优势。方法通过对100例梅毒疑似及后续的确诊病例患者的血清样本进行梅毒TRFIA、TPPA、TP-ELISA三种不同方法的检测分析比对,评价时间分辨荧光免疫法(TRFIA)与梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)、梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)准确率的差异。结果 (1)与健康对照组相比:TRFIA、TPPA、TP-ELISA三种方法检测各周期梅毒患者的阳性百分率明显升高;但与TRFIA相比:TPPA、TP-ELISA法对一、二、三周期梅毒的阳性检出率有所下降,差异有统计学意义(P 0.01);对隐性梅毒的阳性检出率显著下降,经χ~2分析,TRFIA与TPPA的差异无统计学意义(P 0.05),TRFIA与TPELISA的差异有统计学意义(P 0.01)。(2)与TRFIA法相比,TPPA、TP-ELISA法灵敏度下降明显,差异有统计学意义(P 0.01);但特异性差异无统计学意义(P 0.05)。(3)与TRFIA法相比,TPPA法的阳性预测值有所增加,差异无统计学意义(P 0.05),但阴性预测值却显著下降,差异具有统计学意义(P 0.05);与TRFIA法相比,TP-ELISA法的阳性预测值有所下降,差异无统计学意义(P 0.05),但其阴性预测值显著下降,差异有统计学意义(P 0.01);与TRFIA法相比,TP-ELISA的阳性似然比值显著下降,差异有统计学意义(P 0.01),TPPA、TP-ELISA法的阴性似然比显著增加,差异无统计学意义(P 0.05)。(4)与TRFIA检测法相比,TPPA法和TP-ELISA法的复检率均明显增加,差异有统计学意义(P 0.01)。结论 TRFIA、TPPA、TP-ELISA三种方法均能较好的识别梅毒患者血清中相应抗体,但TRFIA的灵敏度和特异性更好,其阳性检出率高且假阳性的干扰较低。     

时间分辨荧光免疫法检测甲胎蛋白的应用及其临床意义

以往测定甲胎蛋白（AFP）用ELISA法，但是这种方法只能达到半定量，而且还有钩状效应。第二种方法是酶联荧光（ELFA）法，虽然能定量检测AFP，但以常用荧光素作为标记物，往往受血清成分、试管、仪器组件等的本底荧光干扰，以及激发光源的杂色光的影响，使灵敏度受到很大限制。时间分辨荧光免疫测定（TRFIA）是针对这些缺点加以改进的一种新型检测技术。其基本原理是以镧系元素铕（Eu）螯合物作为荧光标记物，利用这类荧光物质寿命长的特点，延长荧光测量时间，待短寿命的自然本底荧光完全衰退后再行测定，所得信号完全为长寿命镧系螯合物的荧光，从而有效排除非特异性本底荧光的干扰。本研究应用TR-FIA法测定AFP，并与ELFA法作比较，另外还对其临床意义作初步探讨，现报告如下。     

时间分辨荧光免疫分析技术检测梅毒抗体中的应用

目的:探究梅毒螺旋体感染者在血清中的免疫学标志物,实验室应用时间分辨荧光免疫法测定梅毒螺旋体特异性抗体S/CO值与TPPA颗粒凝集法,及梅毒非特异性抗体RPR法结果的灵敏度、吻合程度、特异性。以掌握梅毒检测方法适用性和临床诊断意义。方法:门诊及住院26例就诊患者分别用TRFIA、TPPA、RPR法同时测定含量及滴度,比对检测结果的不同。结果:TRFIA测定大于参考值11例,阳性率12.7%;TPPA阳性11例,阳性率12.5%;RPR阳性9例,阳性率9.5%。结论:时间分辨荧光法与TPPA法联合应用对输血筛查;临床诊断及预后疗效利于血液质量的保证,质量成本也更为经济。     

时间分辨荧光免疫定量分析与肿瘤临床应用进展

时间分辨荧光免疫分析（Timeresolved Fluoroimmunoassay，TRFIA）是一种以镧系元素螫合物为标记物，测量其发射荧光的超灵敏的无放射性污染的标记分析技术。是近年来发展起来的一种新的非同位素标记免疫分析技术，作为一种新型的非放射性免疫标记技术，其应用已不再局限于临床诊断，已渗透入生物学研究的各个领域。TRFIA技术为免疫学诊断开辟了一条崭新的途径。本文就TR—FRA技术及其在肿瘤学应用进展做一简要综述。     

时间分辨荧光免疫分析技术的临床应用

20世纪80年代以来，随着基础医学的迅速发展，我国的标记免疫学的实验医学技术取得了前所未有的发展。体现在理论水平逐渐提高，技术方法日臻完善，临床应用更加广泛，实践经验不断丰富。任何一门自然学科的发展，都依赖于方法学的创新，临床医学作为实践性学科更是如此。标记免疫分析方法的创立和发展，特别是与分子生物学、细胞生物学这些医学     

时间分辨荧光免疫分析测定血清甲胎蛋白

目的 探讨时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）双抗体夹心法在血清甲胎蛋白（AFP）定量检测中的临床应用。方法 参照NCCLS的评价方案,测试了102例患者血清标本,对TRFIA法和放射免疫分析（RIA）法进行了精密度评价、线性评价、相关性分析和回收试验的比较．结果 两种方法均有较好的重复性,但TRFIA法精密度明显优于RIA法;TRFIA法线性范围（〉1000U／ml）比RIA法（〈500U／ml）要宽;TRFIA法和RIA法具有良好的相关性（r=0.987,P〈0.05）;回收率均在95％以上,TRFIA法明显高于RIA法（t=4．58,P〈0．05）。结论 TRFIA法各项统计分析指标明显优于RIA法,是一种更灵敏、更稳定、更准确的免疫分析方法,更能满足临床需要。     

体检人员乙肝病毒标志物的定性定量对比分析

目的:研究时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)在体检人员乙型肝炎病毒(HBV)血清免疫学表面标志物(HbsAg、HB-sAb)检测中的应用及其与ELISA法的比较.方法:用TRFIA和ELISA法对168例体检人员血清学标本进行检测,并对结果进行分析.结果:TRFIA和ELISA法比较,HBsAg结果符合率为92.9%,经配对X2检验,P<0.05,差异有统计学意义.HBsAb结果符合率为82.7%,P<0.05,差异有统计学意义.结论:TRFIA与ELISA法检测乙肝病毒标志物相比,其特异性和敏感性高.TRFIA法作为一种高灵敏度的方法,其定量检测结果对体检人员HBV感染的诊断、治疗,特别是疫苗接种方案的提示都将起着十分积极的作用及更可靠的依据.     

探讨时间分辨免疫技术在乙型肝炎五项测定中的应用效果

目的探讨时间分辨免疫技术在乙型肝炎五项测定中的应用效果。方法选取我院2012年8月至2014年8月432例乙型肝炎患者的血清标本进行TRFIA法检测,并与ELISA法检测的结果对比分析。结果 TRFIA法检测乙型肝炎五项指标,质控血清五项指标的变异系数(CV%)均在20%范围内,标准品C和E的五项指标均值与靶值的比值均在0.90~1.10。ELISA法和TRFIA法分别检测血清样品的乙型肝炎五项指标经统计学分析,差异不显著(P>0.05),除HBs Ab外其他四项指标阳性符合率均较高。结论 TRFIA法在能保证高重复性和准确性的同时,其灵敏度明显高于ELISA法。     

时间分辨荧光免疫技术检测HBV的临床应用评价

目的对时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)检测乙型肝炎病毒(HBV)进行临床应用分析。方法用时间分辨荧光免疫分析技术TRFIA和放射免疫分析(RIA)同时检测261例乙型肝炎病毒感染者和150例正常人血清的HBV标志物,并对两种方法的检测结果HBsAg、HBsAb、HbeAg、HbeAb、HBcAb进行比较分析。同时对TRFIA法HBsg阳性而RIA阴性及TRFIA法HBcAb阴性而RIA阳性用化学发光免疫分析法(ECLIA)进行确诊检验。结果TRFIA法同RIA法比较,检测结果示二者之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论TRFIA技术检测HBV标志物较RIA法的敏感度高,特异性强,可作为HBV感染的常规检测方法。     

JWA蛋白时间分辨荧光免疫层析检测方法的建立

目的：建立时间分辨荧光免疫层析法检测JWA蛋白的体系,并对该法进行评价。方法：运用EDC（1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐）-NHS（N-羟基琥珀酰亚胺）活化时间分辨荧光微球,活化的时间分辨荧光微球按 100 μg Ab∶1 mg 微球标记JWA单克隆抗体7C3;将荧光标记的抗体运用于免疫层析检测。结果：时间分辨荧光微球成功标记JWA单克隆抗体,荧光标记的7C3可以准确识别JWA多肽;测量范围可从20 ng·mL-1至1500 ng·mL-1,线性范围可达100 ng·mL-1~1000 ng·mL-1,回收率在95%以上,高、中、低浓度的重复性检测离散度（CV）均小于10%,加速稳定性亦较好,同时可以检测出胃癌细胞中的JWA蛋白。结论：本研究建立的时间分辨免疫荧光层析法测定JWA蛋白,各项分析性能良好,且便捷准确、快速经济,为检测JWA蛋白提供了一种高效的新途径。     

酶联免疫1步法检测HBsAg出现假阴性的观察

用酶联免疫法检测血清中乙肝病毒5项指标HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc),已成为各临床实验室的常规工作。近年来,由于生产厂家的努力,实验方法进一步简化、快速,颇受检验工作者的欢迎。我科近几年来采用上海科华公司生产的快速1步法酶免试剂,进行乙肝5项指标的检测,大大     

乙型肝炎病毒DNA的含量与乙型肝炎病毒表面抗原的关系

目前 ,临床上常用酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测乙型肝炎病毒 (HBV)血清标志物 ,一些实验室利用乙型肝炎病毒表面抗原 (HBsAg)ELISA法检测吸光度或S CO值 (S为样品的吸光度值 ,CO为CutOff值 )高低来观察药物的治疗效果 ,我们采用荧光定量聚合酶链反应 (FQ PCR)的方法检测HBVDNA的含量[1] ,并与血清标志物HBsAg的S CO值高低进行比较 ,以探讨二者之间的关系。1　材料与方法1 1　材料　无偿献血者血清样品 2 0份 ,由本中心提供。PE 5 70 0荧光PCR仪 ,美国PE公司产。AT 2自动化加样系统 ,FAME自动化酶免分析系统 ,均为瑞…     

胶体金免疫层析法和ELISA在HBsAg检测中的方法学评价

目的：对胶体金免疫层析法（GICA）和ELISA两种检测HBsAg方法进行方法学比较。方法：用国产HBsAg胶体金纸条和ELISA试剂同时检测血清标本，结果：与ELISA相比，胶体金免疫层析法检测HBsAg的灵敏度为96%，特异性为100%，符合率为97%，以上结果可以看出，胶体金免疫层析法与ELISA相比特异性基本一致，但胶体金免疫层析法灵敏度稍差，结论：国产HBsAg胶体金纸条与ELISA试剂相比有较高的符合率，但灵敏度有待于进一步提高。     

时间分辨在检测抗-HBs的优势应用

目的定量检测人体抗-HBs对乙肝免疫的重要性。方法用时间分辨的方法（TRFIA）、酶联免疫吸附实验（ELISA）的方法以及胶体金免疫层析（GICA）的方法比对三者结果的符合率。结果时间分辨的方法和ELISA与胶体金免疫层析的方法阳性吻合率分别为98．6％和97．7％。结论ELISA和胶体金方法只能测量乙肝抗-HBs阴性阳性结果,但对设备要求简单,回报结果迅捷,适用于大量标本的初筛;而时问分辨给出了抗-HBs的量化结果,更容易动态观察乙肝的病情发展以及疫苗注射情况。