THE EXPRESSION OF MDR1 GENE IN GASTRIC CARCINOMA AND ITS RELATIONSHIP TO CLINICOPATHOLOGICAL VARIABLES

ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ（ＭＤＲ）ｏｆｃａｎｃｅｒｃｅｌｓｔｏａｎｔｉｃａｎｃｅｒｄｒｕｇｓｉｓａｍａｊｏｒｐｒｏｂｌｅｍｉｎｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ,ａｎｄｔｈｅｃｈｉｅｆｍｅｃｈａｎｉｓｍｒｅｓｐｏｎｓｉｂｌｅｆｏｒＭＤＲｉｓｔｈ...     

耐紫杉醇卵巢癌细胞株中凋亡途径相关基因的差异表达

目的：探讨耐紫杉醇卵巢癌细胞株SKOV3/TAXOL中凋亡途径相关基因的表达差异。方法：运用real-ti me-RT-PCR技术,检测耐紫杉醇卵巢癌细胞株SKOV3/TAXOL和敏感细胞株SKOV3中凋亡途径相关基因TRADD、DFFA、MADD和TGM2的表达量,并对结果进行对比分析。结果：4个基因在SKOV3/TAXOL中的表达量均高于SKOV3,其中TRADD、DF-FA、MADD、TGM2分别高2.25、3 333、3.5×10^5和2 865倍。结论：凋亡相关基因TRADD、DFFA、MADD和TGM2在SK-OV3/TAXOL细胞株中表达都升高,说明卵巢癌细胞对紫杉醇耐药可能在一定程度上与细胞凋亡功能异常相关。     

CyClinD1及MDR1在NSCLC中的表达研究

目的 :探讨非小细胞肺癌 (NSCLC)中细胞周期蛋白D1 (CyclinD1 )及多药耐药基因 (MDR1 )的表达及临床意义。方法 :用鼠抗人CyclinD1 及鼠抗人MDR1 单克隆抗体对 4 0例石蜡包埋的原发性NSCLC组织进行免疫组化染色 ,并与 10例肺良性病变比较。结果 :CyclinD1 及MDR1 在NSCLC中均有较高的表达 ,其阳性率分别为 6 7.5 %和4 7.5 % ;而在肺良性病变中 ,CyclinD1 无 1例表达 ,而MDR1 有 1例表达 ,阳性率为 10 % ;在NSCLC中 ,CyclinD1 表达与肿块大小 ,有无淋巴结转移 ,分化程度及临床分期无关 (P >0 .0 5 ) ;而MDR1 表达则在肿块≥ 3cm高于肿块 <3cm(P<0 .0 5 ) ;有淋巴结转移高于无淋巴结转移 (P <0 .0 5 ) ,低～中度分化高于中～高度分化 (P <0 .0 5 ) ;Ⅲ～Ⅳ期高于Ⅰ～Ⅱ期 (P <0 .0 5 )。结论 :CyclinD1 的过表达与肺癌的发生有关 ,是NSCLC的早期分子蛋白之一 ,而与NSCLC的发展和预后无关 ,可作为NSCLC早期诊断的指标之一。MDR1 的过表达与NSCLC的发展与预后有关 ,可作为NSCLC预后的指标之一 ,同时 ,有利于进行NSCLC耐药的监测与评价。     

p53和c-myc在口腔鳞癌中基因扩增和mRNA表达

目的：探讨p53和c-myc基因扩增和mRNA表达在口腔鳞癌(OSCC)形成和发展中的作用。方法：用原位杂交与图像分析相结合的方法，对30例口腔鳞癌和5例正常口腔粘膜中p53和c-myc的基因扩增和mRNA表达状况进行了定性、定位、定量研究。结果：OSCC中p53和c-myc的扩增阳性率分别为40％和63．3％，其mRNA表达率分别是80％和83．3％。p53和c-myc基因扩增量之间具有显著性相关。结论：这两种基因的扩增和mRNA表达在OSCC发生发展中都具有重要作用；在OSCC中导致p53和c-myc扩增的某些因素可能是相同的。     

RRM1基因的表达对晚期非小细胞肺癌化疗效果及预后的影响

目的：探索核糖核苷还原酶调节因子1（RRM1）在晚期非小细胞肺癌中的表达及其与药物化疗敏感性及效果的关系。方法：采用免疫组化S-P法检测60例Ⅲb、Ⅳ期非小细胞肺癌患者RRM1的表达情况并分析其与化疗效果的关系。结果：RRM1表达与性别、年龄、肿瘤大小、病理类型、组织学分级以及TNM分期差异均无统计学意义（P〉0.05）。GP化疗组RRM1阳性者化疗有效率（12.5%）、1年生存率（6.3%）均低于RRM1阴性组（78.6%、64.3%）,差异有统计学意义（P〈0.05）,而NP化疗组差异均无统计学差异（P〉0.05）。结论：RRM1的表达水平与吉西他滨化疗效果有关,可作为个体化疗在选择化疗方案时的参考依据。     

E2F-1过表达对胃癌细胞中癌基因和抑癌基因表达的影响

目的：了解E2F-1过表达对胃癌细胞中癌基因和抑癌基因表达的影响,探讨E2F—1影响胃癌细胞侵袭能力的作用机制。方法：从胃癌细胞MGC-803和MGC803／E2F-1中提取总RNA,纯化mRNA,逆转录将Cy3和Cy5两种荧光素标记到两组逆转录合成的第一链cDNA。与22K人类基因组寡核苷酸芯片进行杂交,采用LuxScan 10K／A双通道激光扫描仪扫描芯片上两种荧光信号,应用LuxScan3．0图像分析软件对图像处理分析,筛选出差异基因。结果：在21522条基因中,MGC-803／E2F-1和MGC-803细胞差异表达的癌基因和抑癌基因有39条,其中上调基因19条（49%）,下调基因20条（51%）。结论：过表达E2F-1在胃癌细胞MGC803中影响了众多癌基因和抑癌基因的表达变化,表明胃癌侵袭能力的变化是多基因相互作用,多种信号传导途径相互影响的结果。     

非小细胞肺癌组织Survivin和Caspase基因表达及其关系

目的 探讨Survivin和Caspase-3基因在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其相互关系.方法 应用免疫组织化学等技术与方法检测74例NSCLC组织细胞中Survivin和Caspase-3基因的表达.结果 在NSCLC组织细胞中,Survivin基因表达率为64.9%(48/74),其表达与NSCLC TNM分期、淋巴结转移和细胞分化程度密切相关(X2=5.00～5.20,P<0.05);Caspase-3基因表达率为55.4%(41/74), 其表达与淋巴结转移密切相关(X2=5.98,P<0.05);在NSCLC组织细胞中,Survivin基因表达与Caspase-3基因表达呈高度负相关(r=-0.404,P<0.01).结论 在NSCLC组织细胞中,Survivin基因表达上调,Caspase-3基因失活或低表达;Survivin结合激活的Caspase-3,抑制其活性,阻止细胞凋亡;Survivin基因表达预示肺癌组织有较高的侵袭性和预后不良.     

非小细胞肺癌Bax基因表达及临床病理意义

目的探讨细胞Bax基因表达与非小细胞肺癌的临床病理因素相关性及其与临床预后的关系。方法采用SABC免疫组化法检测43例非小细胞肺癌及20例癌旁正常肺组织石蜡包埋标本的Bax蛋白表达。结果肺癌Bax基因表达阳性率为60.47%,癌旁肺组织阳性率为90%,两者比较差异有显著性(P<0.05)。BAX蛋白的表达与肺癌组织的细胞分化程度以及预后密切相关(P<0.05),与肺癌患者的年龄、性别、肿瘤大小、组织类型、淋巴结转移状态及临床分期无关。结论肺癌存在Bax蛋白低表达;Bax蛋白的表达与肺癌组织分化程度以及患者预后密切相关,Bax蛋白的表达异常可能在肺癌的发生、发展和预后中起重要作用。     

Six1、E-cad在结肠癌中的表达及意义

目的:探讨结肠癌组织同源盒蛋白1(Six1)和E-钙黏蛋白(E-cad)的表达和临床意义.方法:采用SP免疫组化法检测70例结肠癌组织和30例癌旁正常组织Six1、E-cad的表达情况,并分析二者与结肠癌临床病理特征的关系及结肠癌组织Six1、E-cad表达的相关性.结果:结肠癌组织Six1的阳性表达率明显高于癌旁正常组织(P<0.01),E-cad的阳性表达率明显低于癌旁正常组织(P<0.01).结肠癌组织Six1、E-cad表达与性别、年龄、肿瘤大小、分化程度无关(P>0.05);与TNM分期和浸润深度有关(P<0.05).结肠癌组织Six1、E-cad表达呈负相关关系(r=-0.480,P<0.01).结论:Six1、E-cad可能共同参与了结肠癌的发生发展过程,且二者的表达情况与结肠癌患者的不良预后密切相关.     

Kai1基因在口腔鳞癌中的表达及意义

目的 :研究肿瘤转移抑制基因Kai1在口腔鳞癌中的表达及意义。方法 :运用免疫组化法检测 6 7例口腔鳞癌 (包括 39例不伴有、2 8例伴有淋巴结转移的原发灶 )、2 8例淋巴结转移灶及 2 3例口腔粘膜白斑、12例癌旁正常口腔粘膜组织中Kai1 CD82的表达情况。结果 :正常组、口腔粘膜白斑组、不伴淋巴结转移、伴淋巴结转移的口腔鳞癌原发灶组及淋巴结转移灶组Kai1 CD82的阳性表达率分别为 10 0 % (12 12 )、86 .9% (2 0 2 3)、6 9.6 % (2 3 39)、2 8.6 % (8 2 8)和 7.14 % (2 2 8)。Kai1 CD82的表达在口腔粘膜白斑组与正常组中无明显差异 (P >0 .0 5 ) ,但其在其余三组中的表达较正常组均明显减低 ,它们之间的差别均有统计学意义 (P <0 .0 5 )。有转移的原发灶组较无转移组中Kai1 CD82的表达明显减低 (P <0 .0 5 ) ,而在淋巴结转移灶中的表达又较相对应的原发灶组进一步减低 (P <0 .0 5 )。Kai1 CD82的表达与患者的年龄、性别、肿瘤的pTNM分期及组织分化程度无关 (P >0 .0 5 )。结论 :Kai1基因的表达下调与口腔鳞癌的转移密切相关 ,检测Kai1基因的表达可作为临床预测口腔鳞癌转移潜能的良好指标。     

MDR_1基因表达与原发上皮性卵巢癌原代细胞体外抗药性关系的研究

目的　探讨 Ｍ Ｄ Ｒ１ 基因表达与原代细胞体外抗药性的关系,为原发上皮性卵巢癌合理化疗提供理论依据。方法　应用半定量逆转录———聚合酶链反应技术和 Ｍ Ｔ Ｔ 法体外药敏试验,检测了３７ 例原发上皮性卵巢癌原代细胞对临床常用抗癌药物的抗药性及其 Ｍ Ｄ Ｒ１基因表达情况。结果　原发上皮性卵巢癌 Ｍ Ｄ Ｒ１ 基因阳性表达率为３０ ％ 。 Ｍ Ｄ Ｒ１ 基因表达与 Ｍ Ｄ Ｒ 相关药物耐药有关,与非 Ｍ Ｄ Ｒ 相关药物耐药无关。结论　 Ｍ Ｄ Ｒ１ 基因表达是原发上皮性卵巢癌抗 Ｍ Ｄ Ｒ 相关药物的主要原因。     

结肠癌组织P52的表达和临床意义

目的:探讨核转录因子-κ B2(P52)在结肠癌中的表达及临床意义.方法:应用SP免疫组化法检测70例结肠癌组织和35例癌旁组织P52的表达情况,并分析P52表达与结肠癌临床病理特征的关系.结果:结肠癌组织P52的阳性表达率为70.0％(49/70),明显高于癌旁正常组织(P＜0.05).结肠癌组织P52表达与年龄、性别、分化级别无关(P＞0.05);与侵及深度、TNM分期和淋巴结转移有关(P＜0.05):侵及浆膜明显高于未侵及浆膜,TNM分期Ⅲ+Ⅵ期明显高于Ⅰ+Ⅱ期,有淋巴结转移明显高于无淋巴结转移.结论:P52高表达可能与结肠癌的浸润、转移和预后有关.     

CD34在大肠癌中的表达及其意义

目的:检测大肠癌中CD34的表达,探讨其在大肠癌发生、发展及转移中的作用.方法:应用流式细胞术检测80例大肠癌标本中CD34的表达.结果:CD34在大肠癌组织中的表达量明显高于正常大肠粘膜(P＜0.01);不同Dukes分期之间、不同分化程度大肠癌组织之间CD34的表达差异有统计学意义(P＜0.05-0.01).结论:大肠癌中有血管形成,CD34可能是判断病人预后的指标.     

大肠癌不同部位粘膜细胞中增殖细胞核抗原表达的研究

探讨增殖细胞核抗原在大肠癌及癌周不同部位粘膜细胞中的表达及意义。方法采取正常大肠１０例,大肠癌远旁、近旁和癌粘膜各３０例。用免疫组化染色（ＳＰ法）检测增殖细胞核抗原（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇｃｅｌｌｎｕｃｌｅａｒａｎｔｉｇｅｎ,ＰＣＮＡ）的表达。结果ＰＣＮＡ染色阳性物质主要定位于细胞核。ＰＣＮＡ阳性细胞在大肠癌组织中的分布呈不同程度的异质性。正常大肠和大肠癌粘膜细胞中ＰＣＮＡ阳性细胞数分别为２．     

非小细胞肺癌中Bax和CyclinD1的表达及意义

目的:探讨促凋亡基因Bax和促增殖基因CyclinD1在非小细胞肺癌中的表达及意义.方法:用鼠抗人Bax及鼠抗人CyclinD1单克隆抗体对40例石蜡包埋的原发性NSCLC组织进行免疫组化染色,并与10例肺良性病变作对照,对它们的表达情况进行检测分析.结果:Bax蛋白在良性病变和恶性病变中表达无明显差异性,但当恶性肿块≥3cm时其表达高于肿块<3cm,有淋巴结转移者高于无淋巴结转移者,Ⅲ～Ⅳ期高于Ⅰ～Ⅱ期,中～高分化高于低～中分化(P<0.05).而CyclinD1表达为恶性病变高于良性病变(P<0.05),与P-TNM分期及分化程度无关.结论:Bax在非小细胞肺癌发生的早期低表达,而在中晚期高表达,说明Bax在早期的抑制有诱癌形成的可能,晚期则加速癌细胞凋亡,参与机体的抗癌机制.CyclinD1的过表达与肺癌的发生有关,是NSCLC的早期分子事件之一,而与NSCLC的发展和预后可能无关.     

恶性血液病患者MDR_1和MRP表达水平及其意义

用ＲＴ－ＰＣＲ检测１９例急性白血病和６例多发性骨髓瘤患者ＭＤＲ１和ＭＲＰ表达水平。结果显示：临床耐药患者ＭＤＲ１表达水平明显增高；与临床耐药之间呈显著正相关（ｒ＝０．６１２，Ｐ＜０．０１）；与ＭＲＰ之间无明显相关性（ｒ＝０．０３５，Ｐ＞０．０５）。表明ＭＤＲ１是临床耐药的主要机制。     

乳腺癌neu癌基因扩增及蛋白表达研究

目的 观察乳腺癌中neu癌基因扩增和蛋白表达及与临床病理特征的关系。方法 应用免疫组化及点杂交技术对90例乳腺肿瘤neu癌基因扩增及蛋白表达进行研究,结果 乳腺癌中neu蛋白表达率为３８％,导管内乳头状瘤及正常乳腺组织均为阴性;neu表达与乳腺癌组织学分级（P＜0．01）及淋巴结转移呈正相关（P＜0．01）,与雌激素受体状态呈负相关（P＜0．01）;neu癌基因扩增率为36％,与乳腺癌组织学分级呈正相关（P＜0．01）,与雌激素受体状态呈负相关;结论：该基因的扩增及表达与乳腺上皮细胞的恶性转化及淋巴结转移密切相关,因此,该基因的改变可作为判断乳腺癌生物学行为和预后的重要指标。     

突变二氢叶酸还原酶基因转导及乳癌耐药细胞株的建立

为了研究耐药肿瘤细胞的酶学动力学变化及寻找和筛选逆转耐药性的药用，用含有突变的二氢叶酸还原酶（ＤＨＦＲ）基因的高效反转录病毒上清感染上乳癌细胞ＭＤＡ２３１，经药物筛选ＤＮＡ印迹法、ＲＮＡ印迹法及细胞对药物耐受性实验检测，确定ＤＨＦＲ基因已整合入细胞基因组ＤＮＡ中并表达，转染细胞对Ｇ４１８，ＭＴＸ有不同程度的耐受，成功地建立了一个耐受ＭＴＸ的乳癌细胞株，为进一步研究提供了实验材料。     

非小细胞肺癌中p14ARF基因的表达及意义

①目的 检测p14^ARF基因在非小细胞肺癌（NSCLC）中表达情况,并探讨其在NSCLC发生、发展过程中的作用。②方法应用蛋白印迹方法检测了28例NSCLC组织标本p14^ARF蛋白的表达水平。③结果肺鳞癌和肺腺癌中p14^ARF蛋白阳性率分别为61．5％和80．0％,与癌旁正常组织（100％）比较差异有显著性（X^2=12．27、6．02,P〈0．05）;p14^ARF表达异常与肿瘤分期、组织类型、分化程度、淋巴结转移情况无显著相关性;p14^ARF蛋白Ⅰ在期病例中强阳性占阳性比例为62．5％,在Ⅲ期病例中强阳性占阳性比例为16．0％。④结论p14^ARF基因在NSCLC发生、发展过程中起重要作用,特别在肿瘤早期可能起更为重要的作用。     

多药耐药相关蛋白在人肝细胞癌亚群细胞中的表达及意义

目的检测肝细胞癌异质性亚群细胞对化疗药物的耐药差异,探讨耐药蛋白在肝癌组织中不同亚群细胞的表达意义。方法①通过MTT法分别测定人肝细胞癌异质性亚群细胞在不同浓度、不同化疗药物（ADM、VP-16、DDP）作用下的抑制率,计算每种药物IC50值。②应用流式细胞仪分别检测耐药相关蛋白MDR1、MRP、LRP、GST在两亚群细胞中的表达率。结果①LCSC-1和LCSC-2亚群细胞对阿霉素（ADM）、顺铂（DDP）、鬼臼乙叉苷（VP-16）等药物都产生了耐药性（F=249.651）。三种药物对LCSC-2亚群细胞和LCSC-1亚群细胞抑制率有显著差异（P〈0.01）。②LCSC-1和LCSC-1亚群细胞MDR1、MRP、LRP、GST的表达量分别是：（23.97±0.34）%、（17.03±0.59）%、（24.02±0.63）%、（23.93±0.59）%;（26.59±0.78）%、（19.43±0.60）%、（26.43±1.06）%、（26.24±1.06）%;两亚群比较,t=5.32,P=0.006;t=4.94,P=0.008;t=3.85,P=0.028;t=3.30,P=0.030。两亚群细胞MDR1、MRP、LRP、GST的表达有显著性差异。结论MRP、LRP、GST、MDR1的高表达,可能是人肝癌细胞异质性亚群多耐药产生的部分分子基础,耐药是肝细胞癌干细胞的特征之一。