秘鲁巨鱿软骨硫酸软骨素理化性质研究

探索一种新的硫酸软骨素来源。以秘鲁巨鱿软骨为原料,经过酶解、超滤浓缩和乙醇沉淀的方法获得硫酸软骨素。秘鲁巨鱿硫酸软骨素得率为3.2%,比旋度为-25.2°,黏均分子量为157 000,硫酸软骨素E型二糖占总二糖比例的17%。秘鲁巨鱿软骨可以作为一种硫酸软骨素新原料。     

利用SNP分子标记对阿根廷滑柔鱼和科氏滑柔鱼的分子鉴定

目的:建立快速、准确的鉴定阿根廷滑柔鱼及其混淆品科氏滑柔鱼的DNA分子标记方法。方法:提取阿根廷滑柔鱼及科氏滑柔鱼的基因组DNA,利用PCR扩增2种鱿鱼品种的细胞色素C氧化酶亚基I(Cytochrome Oxidase Subunit I,COI)的核苷酸序列,利用序列比对发掘2种鱿鱼的品种特异性位点。根据2种鱿鱼品种的SNP位点,通过引入错配碱基设计品种特异性引物,并建立鉴定2种鱿鱼品种的多重PCR体系。结果:建立的多重PCR反应体系使阿根廷滑柔鱼扩增出了516 bp的特异性条带,科氏滑柔鱼产生了419 bp的特异性条带,2种鱿鱼的混合品则同时扩增出了516 bp和419 bp的条带。结论:利用SNP分子标记建立的多重PCR体系,快速、准确、特异性强,可作为阿根廷滑柔鱼及其加工产品原料来源鉴定的分子手段。     

鱿鱼硫酸软骨素糖蛋白的分离纯化和鉴定

目的:研究鱿鱼软骨硫酸软骨素的主要成分.方法:以鱿鱼喉软骨为材料,经提取、分离和纯化等步骤得到一酸性粘多糖组分C-S2:用高效凝胶过滤色谱和比旋光度鉴定其纯度,并用化学和光谱法研究其组成和结构.结果:C-S2为均一性较好的粘多糖,为硫酸软骨素C糖蛋白,其重均相对分子质量(Mw)149 595,比旋光度-25.3.软骨素含量95.31%,蛋白含量2.59%,葡萄糖醛酸(GlcA)含量35.02%,己糖胺含量34.02%,总硫酸基含量9.54%,并存在少量中性单耱,由鼠李糖(Rha)、甘露糖(Man)、葡萄糖(Glu)和半乳糖(Gal)组成;β-消去反应说明C-S2中糖链以O-糖肽键连接到苏氨酸上.结论:鱿鱼软骨硫酸软骨素的主要成分为硫酸软骨素C糖蛋白.     

不同来源和制备工艺硫酸软骨素的二糖分析

从猪、牛、鸡、鸭和鲨鱼软骨中提取分离硫酸软骨素,采用酶解-高效液相色谱法对不同来源和制备工艺获得的硫酸软骨素进行了二糖分析。结果表明,来源于猪、牛、鸡和鸭软骨的硫酸软骨素由非硫酸化二糖、4-硫酸化二糖和6-硫酸化二糖组成,而来源于鲨鱼软骨的硫酸软骨素还含有2, 6-硫酸化二糖、2, 4-硫酸化二糖和4, 6-硫酸化二糖,且各二糖单位的百分含量也不同;高温、强酸、强碱及双氧水的强氧化性均可降低硫酸软骨素中硫酸化二糖的百分含量。说明硫酸软骨素的组成与其来源和制备工艺密切相关,实际生产中可根据不同需求来选择合适的原料和制备工艺。     

酶法制备硫酸软骨素寡糖及其抗氧化活性

采用硫酸软骨素酶对硫酸软骨素进行酶法降解,制备硫酸软骨素寡糖。通过红外分析降解前后的硫酸软骨素以及利用质谱技术对该酶解产物进行分析,并检测酶解前后硫酸软骨素的DPPH自由基的清除能力、羟自由基清除能力和还原能力。结果显示,酶法降解硫酸软骨素对其基本结构影响不大,质谱分析结果表明,该酶解产物是二糖和四糖。抗氧化活性实验表明,硫酸软骨素寡糖对DPPH自由基、羟自由基的清除能力及其还原能力均高于硫酸软骨素。推测其可能是由于硫酸软骨素降解成硫酸软骨素寡糖后,分子量的减小、不饱和双键的形成以及还原糖的含量增加使得其活性增加。     

HPLC分析来自糖胺聚糖的不饱和二糖

介绍一种快速、简单的HPLC分析透明质酸、硫酸软骨素、硫酸皮肤素、硫酸乙酰肝素以及肝素的酶解产物—不饱和二糖的方法,采用氨基键合硅胶柱,并用磷酸二氢钠线性梯度洗脱。对于硫酸软骨素类化合物和硫酸乙酰肝素类化合物,二糖随着盐浓度的增加以非硫酸化二糖、单硫酸化二糖、二硫酸化二糖、三硫酸化二糖的顺序依次洗脱。这种分析方法能够定量分离硫酸化糖胺聚糖中的大部分组成二糖,而有利于化合物在色谱柱上直接酶解,无需任何预处理,且经由单次色谱法即可得到多种二糖的良好分离。     

《硫酸软骨素》序言

作为软骨重要组分的硫酸软骨素(chondroitin sulfate)是一种糖胺聚糖,由葡糖醛酸和N-乙酰氨基半乳糖二糖单位重复组成。硫酸软骨素商品的形式大多为钠盐,主要应用于心血管疾病和骨关节炎等。硫酸软骨素的生理功能主要以其蛋白质复合物的形式体现,它是细胞外基质的主要组分,对维持组织的完整性具有重要     

鮟鱇鱼皮硫酸皮肤素的二糖组成及结构研究

目的:获取鮟鱇鱼皮中硫酸皮肤素的二糖结构信息。方法:以硫酸软骨素ABC酶酶解硫酸皮肤素样品,得到二糖;对酶解时间进行优化,进而以毛细管液相色谱法和毛细管液相-质谱联用法分析二糖结构及含量。结果:鮟鱇鱼皮硫酸皮肤素在硫酸软骨素ABC酶作用下,37℃反应4h,可酶解完全。其糖链是以艾杜糖醛酸-[1→3]-N-乙酰氨基半乳糖-4硫酸(△Di-4S(Ido))为主要二糖重复单位,此外,还含有少量的艾杜糖醛酸-[1→3]-N-乙酰氨基半乳糖-6硫酸(△Di-6S(Ido))和葡萄糖醛酸-[1→3]-N-乙酰氨基半乳糖(△Di-0S)二糖单位。△Di-4S(Ido)、△Di-0S与△Di-6S(Ido)3种不饱和二糖的摩尔比为171∶1∶1。     

新西兰柔鱼与北太平洋柔鱼的品种特异性聚合酶链式反应鉴定

利用聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）技术扩增新西兰柔鱼和北太平洋柔鱼的线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ（cytochrome C oxidase subunit Ⅰ,COⅠ）基因,通过多重序列比对检测2 种鱿鱼之间的多态性位点。根据2 种鱿鱼的特异性位点分别设计2 种鱿鱼的品种特异性引物,并利用多重PCR实现2 种鱿鱼品种的特异性鉴定和区分。结果表明：建立的品种特异性PCR鉴别体系对新西兰柔鱼和北太平洋柔鱼分别扩增出214 bp和339 bp的品种特异性条带,该方法的检测限低至0.1 ng,且能检测出新西兰柔鱼中1%的北太平洋柔鱼掺入,并能有效检测市场上2 种鱿鱼及其复配鱼糜制品的原料来源。     

太平洋褶柔鱼及南海鸢乌贼双位点特异性PCR鉴定方法的建立

目的:市场上利用南海鸢乌贼冒充太平洋褶柔鱼作为鱿鱼加工原料的现象时有发生,拟为2种鱿鱼建立一种简单高效的DNA分子鉴定方法。方法:利用从线粒体细胞色素氧化酶亚基I(COI)发掘的太平洋褶柔鱼和南海鸢乌贼的SNP位点,分别设计2种鱿鱼的双位点特异性引物,利用多重PCR对太平洋褶柔鱼和南海鸢乌贼进行鉴定和区分。结果:双位点特异性引物在相对温和的退火温度下对2种鱿鱼品种显示了绝对的特异性,太平洋褶柔鱼和南海鸢乌贼分别扩增出了193bp和530 bp的品种特异性条带。建立的多重PCR体系可以有效地对太平洋褶柔鱼和南海鸢乌贼及两者的混合品进行鉴定。结论:多重PCR方法为市场上太平洋褶柔鱼和南海鸢乌贼的鉴定提供了有效的DNA分子手段,并可为太平洋褶柔鱼及其加工产品的原料来源检测提供客观依据。     

鱿鱼的营养及食用价值

鱿鱼,也称柔鱼、枪乌贼,营养价值很高,是名贵的海产品。它是海洋赐于人类的天然无污染水产蛋白质,为大众所喜食。全世界有日本、韩国、波兰、中国台湾、泰国、西班牙、意大利、俄罗斯、加拿大、新西兰和阿根廷等55个国家和地区从事鱿鱼生产,鱿鱼的消费和利用也以上述国家和地区     

评《硫酸软骨素》一书

正硫酸软骨素是一种由葡糖醛酸和N-乙酰半乳糖胺二糖重复单位组成的糖胺聚糖。其分子一般含20～60个二糖单位,在体内以蛋白聚糖形式存在于软骨、腱、韧带和主动脉等组织的基质。硫酸软骨素主链内存在多种特殊的寡糖结构域,编码着与许多生物活性蛋白质相互作用的大量生物信息。迄今已报道的与硫酸软骨素链相互作用的生物活性蛋白达几十种之多,包括细胞外基质组分、凝血因子、生长因子、病毒蛋白、细胞黏附分子、趋化因子、蛋白酶等。鉴于这些生物活性蛋白的多样性和生物重要性,硫酸软骨素分子拥有多种生物功能和药理活性。     

评《硫酸软骨素》一书

硫酸软骨素是一种由葡糖醛酸和N-乙酰半乳糖胺二糖重复单位组成的糖胺聚糖。其分子一般含20～60个二糖单位,在体内以蛋白聚糖形式存在于软骨、腱、韧带和主动脉等组织的基质。硫酸软骨素主链内存在多种特殊的寡糖结构域,编码着与许多生物活性蛋白质相互作用的大量生物信息。迄今已报道的与硫酸软骨素链相互作用的生物活性蛋白达几十种之多,包括细胞外基质组分、凝血因子、生长因子、病毒蛋白、细胞黏附分子、趋化因子、蛋白酶等。鉴于这些生物活性蛋白的多样性和生物重要性,硫酸软骨素分子拥有多种生物功能和药理活性。     

肝素和硫酸乙酰肝素的生物合成与结构

1概述肝素和HS是一类由糖醛酸和D-葡糖胺二糖重复单位以1-4键连接形成的线性多糖。二糖单位的N-硫酸基、O-硫酸基、N-乙酰基等多种可变取代形成了多种复杂的序列。肝素和HS是糖胺聚糖(GAG)家族(包括硫酸软骨素、硫酸皮肤素和硫酸角质素)中结构最复杂的一类成员。肝素由结缔组织型肥大细胞表达,以肝素蛋白聚糖的     

鳐鱼硫酸软骨素提取工艺优化及其性质表征

以孔鳐加工的副产物软骨为原料,利用响应面方法优化鳐鱼硫酸软骨素提纯工艺,并对获得的鳐鱼硫酸软骨素进行质量及结构的表征。结果表明,最优提取工艺为碱液浓度2.3%、提取温度43℃、酶添加量0.7%时,硫酸软骨素提取率为43.32%。提取的鳐鱼硫酸软骨素符合国药标准,其重均分子量、数均分子量和多分散系数分别为40 752、38 257和1.065 2,经红外光谱分析,鳐鱼硫酸软骨素与鲨鱼硫酸软骨素具有相同结构组织,均由β-1,3糖苷键连接的β-D-葡萄糖醛酸和N-乙酰基-β-D-氨基半乳糖组成,该研究结果不仅可大幅度增加鳐鱼加工产业的附加值,也可为硫酸软骨素的工业生产提供一定的技术支持。     

鸡胸软骨硫酸软骨素的制备及其稳定性研究

采用木瓜蛋白酶水解法从鸡胸软骨中提取硫酸软骨素粗多糖,并用三氯乙酸除蛋白、乙醇沉淀和柱色谱分离纯化得到高纯度产品。以硫酸软骨素主要成分(总糖、还原糖、葡萄糖醛酸、游离硫酸根)及相对黏度为指标,研究热、酸碱、氧化剂处理对硫酸软骨素稳定性的影响及紫外光照射对其结构的影响。研究结果表明,经紫外光照射后,硫酸软骨素结构基本无变化;在温度低于80℃,pH=7时,硫酸软骨素稳定性较好。温度大于100℃、强酸、强碱或含有氧化剂时,硫酸软骨素极不稳定,各成分变化程度较大,游离硫酸根增加,分子量降低。但对于其降解机理,需做进一步研究。     

安康鱼鱼骨糖胺聚糖的提取及组成分析

目的提取安康鱼鱼骨中的糖胺聚糖并分析其二糖组成。方法以碱解-酶解法提取安康鱼头骨中的糖胺聚糖,检测提取物中总糖醛酸、总氮、总硫含量,并进行红外检测及高效液相色谱(HPLC)分析。结果提取物总硫含量与硫酸软骨素差别较大,红外图谱中指纹区域与硫酸软骨素标准图谱不符,酶解液相图谱与硫酸软骨素不同。结论该提取物并非硫酸软骨素,而是一种非硫酸化的糖胺聚糖。     

硫酸软骨素二糖对疲劳致小鼠肾脏炎症的改善作用

目的:研究硫酸软骨素二糖对疲劳诱发的肾脏炎症的改善作用。方法:24只Balb/c小鼠随机分成四组:正常组(N组)、疲劳应激组(M组)、正常小鼠干预硫酸软骨素二糖组(150 mg/kg·bw)(CS组)和疲劳应激小鼠干预硫酸软骨素二糖的(150 mg/kg·bw)组(S组)。将M组和S组小鼠置于电动轮跑步机上,速度为20r/min,跑步时间为3 h,持续运动2 d后休息5 d。实验周期为16 d,共运动6 d。随后测定各组小鼠肾脏中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量以及转化生长因子(TGF-β1)、核转录因子(NF-κB)、白介-6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的mRNA表达量和NF-κB、IL-6、MCP-1的蛋白质表达量。结果:与N组相比,M组小鼠肾脏中SOD活性降低,MDA含量、TGF-β1的mRNA表达量以及NF-κB、IL-6、MCP-1的mRNA和蛋白质的表达量均极显著升高(p<0.01)。与N组相比,CS组小鼠肾脏SOD活性极显著提高(p<0.01)。与M组相比,S组小鼠肾脏SOD活性显著升高(p<0.05),MDA含量、IL-6以及MCP-1的mRNA表达量均极显著降低(p<0.01),IL-6以及MCP-1的蛋白质表达量均显著降低(p<0.05)。结论:硫酸软骨素二糖对疲劳引发的小鼠肾脏炎症具有显著的改善作用,且其机理可能与其改善肾脏氧化应激状态有关。     

鸡胸软骨糖/肽水解物的结构表征及其抗炎活性

本研究从鸡胸软骨水解物中分离得到胶原蛋白肽和硫酸软骨素并对其进行了结构表征和抗炎活性研究。胶原蛋白肽和硫酸软骨素得率分别为68.32%和18.82%(以干重计)。氨基酸分析表明胶原蛋白肽中甘氨酸含量最高,达14.05 mg/g,其次为谷氨酸(9.09mg/g)和脯氨酸(7.44 mg/g);紫外光谱分析与圆二色性结果显示所提取样品符合胶原蛋白肽的典型特征;通过高效液相色谱分析发现92.38%的胶原蛋白肽分子量小于1000u。傅里叶红外光谱、琼脂糖凝胶电泳、二糖组成分析结果表明提取的硫酸软骨素主要由硫酸软骨素A组成,相对纯度为91.87%。通过建立关节炎大鼠模型并检测糖/肽水解物对炎症因子TNF-α、IL-1β、PGE-2水平影响,与模型组相比(TNF-α39.90 pg/mL、IL-1β22.38 pg/mL、PGE-2 89.41 pg/mL),灌胃软骨水解物、胶原蛋白肽和硫酸软骨素能显著降低关节炎大鼠TNF-α、IL-1β、PGE-2水平(p0.05)。本实验结果表明,使用软骨水解物、胶原蛋白肽和硫酸软骨素能够抑制炎症因子TNF-α、IL-1β、PGE-2水平,减轻关节炎大鼠炎症反应。     

罗非鱼加工副产物不同部位硫酸软骨素的制备、理化性质及结构表征

采用双酶酶解、氯化十六烷基吡啶法从罗非鱼副产物不同部位（鱼头、鱼脊骨、鱼鳍、鱼尾）制备硫酸软骨素,利用紫外光谱、醋酸纤维电泳、红外光谱和高效液相色谱对其理化性质和结构特征进行分析。结果表明,鱼头、鱼尾所含硫酸软骨素主要为C型（Δdi6S）,含量分别为46.10%和41.01%;鱼脊骨、鱼鳍所含硫酸软骨素主要为A型（Δdi4S）,含量分别为71.86%和69.59%。纯度从高到低依次为鱼头90.37%、鱼尾83.33%、鱼脊骨59.76%、鱼鳍52.01%。鱼头、鱼脊骨、鱼鳍、鱼尾硫酸软骨素的单糖组成主要由不同比例的葡萄糖醛酸、葡萄糖和氨基半乳糖构成,mn依次为51 422、18 402、19 481、76 371。不同部位提取的硫酸软骨素的种类和组成有明显差异,其中罗非鱼头、鱼尾提取的硫酸软骨素与鲨鱼软骨来源硫酸软骨素结构相似,有望作为代替鲨鱼硫酸软骨素的潜在来源。