冬虫夏草对5／6肾切除大鼠肾脏TGF-β1的影响

目的观察冬虫夏草对肾小球硬化大鼠转化生长因子-β1（TGF-β1）表达的影响，并探讨其作用机制。方法将36只正常Wistar大鼠随机分为对照组、模型组和冬虫夏草组。模型组和冬虫夏草组行5／6肾切除术制备进行性肾小球硬化模型。冬虫夏草组每天给予冬虫夏草（2．5g·kg^-1·d^-1）水提液灌胃，模型组和正常对照组每天给予等量的自来水灌胃。末次术后4周各组分别处死大鼠6只，术后9周处死剩余6只。测定血生化指标和尿蛋白排泄量，检测大鼠肾组织中TGF-β1 mRNA、TGF-β1的表达。结果①模型组术后4周24h尿蛋白定量增高，血浆白蛋白降低，胆固醇与低密度脂蛋白增高，TGF-β1及其mRNA的表达均增高。与模型组相比，冬虫夏草组尿蛋白排泄减少，血胆固醇降低，低密度脂蛋白降低，TGF-β1 mRNA的表达明显减少，TGF-β1的表达减弱。②术后9周，模型组肾脏病变进一步加重，血肌酐升高。与之相比，冬虫夏草组尿蛋白排泄减少、血白蛋白增高；血胆固醇降低、低密度脂蛋白降低、血肌酐降低；TGF-β1 mRNA的表达明显减少、TGF-β1的表达减弱。结论随着大鼠肾小球硬化程度的加重，TGF-β1的表达增加；冬虫夏草干预治疗后，TGF-β1的表达明显下调，提示TGF-β1参与了肾小球硬化的进展，冬虫夏草可以延缓肾小球的硬化。     

三芪口服液对5/6肾切除大鼠肾组织细胞凋亡的影响

目的：观察中药三芪口服液对5/6肾切除大鼠肾功能及肾组织形态学、肾脏细胞凋亡的影响,探讨三芪口服液延缓肾脏损害的作用机制。方法：按照随机分配原则将SD大鼠分成6组,分别为空白对照组、模型对照组、三芪口服液治疗高剂量组（TMH组）、三芪口服液中剂量组（TMM组）、三芪口服液低剂量组（TML组）、包醛氧淀粉组（B组）。分别给予相应的干预措施后观察各组大鼠一般状况、肾功能以及光镜下肾脏组织变化和细胞凋亡的情况。结果：三芪口服液各剂量组均可降低造模大鼠的血尿素氮和血肌酐水平,中剂量可以提高造模大鼠的红细胞压积,高、中剂量可以降低造模大鼠的血小板水平,治疗前后比较差异有统计学意义（P〈0.05）。三芪口服液还可以减轻肾脏病理损害程度,以及明显降低慢性肾衰竭大鼠的肾脏细胞凋亡率,与包醛氧淀粉组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：三芪口服液能改善慢性肾衰竭大鼠的肾功能及整体机能状态,其作用机制可能是通过改善肾脏微循环,抑制细胞过度凋亡参与的肾脏病理损害等方面实现的。     

怡肾汤对5/6肾切除大鼠残肾组织形态与Col-Ⅳ及MMP-2的干预作用

目的:研究怡肾汤在改善肾功能和减轻肾小球硬化中的作用。方法:将72只SD大鼠随机取8只为正常对照组,其余分为模型组(n=32)及怡肾汤治疗组(n=32)。模型组和治疗组大鼠行5/6肾切除术。术后,模型组大鼠予以自由饮食、生理盐水灌胃1ml·100g-1·d-1;怡肾汤治疗组大鼠予以怡肾汤灌胃(0.3ml·100g-1·d-1),1次/d。于术后第5、6、7、8周4个时间点分别分批处死大鼠,用PAS染色观察大鼠残肾肾组织形态学改变,计算肾小球硬化指数(GSI);用免疫组织化学方法分别检测肾组织中Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达。结果:(1)细胞形态学观察示:模型组中肾小球内细胞数目增多明显,基质增多,有新月体形成;系膜区增宽染色深,毛细血管开放不良甚至闭塞,肾小囊囊壁增厚。治疗组细胞增生明显轻于模型组,毛细血管开放较好,肾小管结构基本正常。治疗组和模型组大鼠肾小球呈不同程度硬化表现,治疗组GSI显著低于模型组(P<0.05)。(2)免疫组化发现:与正常组和治疗组比较,模型组肾组织中Ⅳ型胶原表达强烈,肾小球硬化严重;怡肾汤治疗组大鼠Ⅳ型胶原表达减少而MMP-2表达强于模型组。结论:Ⅳ型胶原在5/6肾切除大鼠肾组织中有较高的表达。怡肾汤可减轻肾组织中炎性细胞浸润和细胞增生,降低Ⅳ型胶原的表达、增加MMP-2的表达,延缓肾小球硬化进程和肾功能恶化的速度。     

大豆蛋白饮食对5/6肾切除大鼠血管早期病变的影响

目的观察大豆蛋白饮食对5／6肾切除大鼠血管早期病变的影响并探讨其可能的机制。方法把40只大鼠随机分为手术组和假手术组，手术组大鼠行5／6肾切除术后又随机分为对照组（20％酪蛋白），低蛋白组（6％酪蛋白），大豆蛋白组（6％大豆蛋白）。假手术组予以普通酪蛋白饲料饮食。于术前、术后4周、8周及12周观察大鼠的营养状况，并检测其血清尿素氮（BUN）、肌酐（Scr）、胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、白蛋白（Alb）以及尿蛋白量（24h）等指标。12周后处死所有大鼠，并留取其主动脉弓组织，行HE染色观察主动脉弓病理变化，并行免疫组化染色检测其单核细胞趋化蛋白（MCP）1和植物血凝素样氧化低密度脂蛋白受体（LOX）1的表达水平。结果5／6肾切除大鼠各组BUN、Scr从第4周起均开始升高，但低蛋白组及大豆蛋白组BUN、Scr上升的程度较对照组缓慢，且以大豆蛋白组最为显著[12周Scr，（111．44±5．50）比（172．00±9．54）μmol／L，P〈0．01]。与假手术组相比，5／6肾切除大鼠各组血白蛋白水平均显著降低（P〈0．01），但各手术组间差异无统计学意义。5／6肾切除大鼠各组尿蛋白量（24h）随时间的延长持续增加，但低蛋白组、大豆蛋白组的增加幅度较小（P〈0．01）。各组大鼠主动脉弓组织未见明显病理改变。免疫组化检查发现，大豆蛋白组大鼠主动脉弓内膜MCP-1（155．68±4．84比132．80±5．67）和LOX-1（195．48±4．95比167．46±7．62）染色灰度值明显高于对照组（P〈0．01）。结论大豆蛋白饮食能有效抑制5／6肾切除大鼠的大动脉内膜的MCP-1和LOX-1的表达，提示大豆蛋白饮食有助于减轻慢性肾衰大鼠的早期血管病变。     

辛伐他汀未能改善5/6肾切除大鼠自体动静脉内瘘血管内膜增生

目的:观察辛伐他汀对5/6肾切除大鼠自体移植静脉内膜增生的影响,探讨其防治透析内瘘内膜增生是否有潜在的价值。方法:36只大鼠随机分为3组:假手术组、CRF对照组和CRF他汀组各12只。各组在成模后分别于第7天、28天各处死6只,抽血行肾功能、血脂检测,并取其内瘘内膜组织行组织病理学检查。比较相同时间点各组肾功能,血脂及内膜增生程度。结果:(1)肾功能和血脂:与同一时点假手术组相比,CRF对照组、CRF他汀组造模后第7、28天后的肌酐和尿素氮均显著增高(P<0.05),各组血脂无显著差异。(2)新生内膜面积、厚度测定:术后第7天,已见各组内瘘血管内膜受损、薄层新生内膜形成;第28天病理改变更明显。与假手术组相比,CRF对照组、CRF他汀组两组内膜增生更为明显(P<0.05);CRF对照和CRF他汀两组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。(3)免疫组化α-SMA、PCNA:假手术组与CRF对照组、假手术组与CRF他汀组比较差异均有统计学意义(P<0.05);CRF对照组与CRF他汀组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:辛伐他汀未能改善慢性肾功能不全自体动静脉内瘘大鼠的血管内膜增生。     

羟苯磺酸钙对5／6肾切除大鼠肾脏微血管的保护机制

目的探讨羟苯磺酸钙对5／6肾切除大鼠肾脏微血管的保护作用及其机制。方法复制5／6肾切除大鼠模型，设5／6肾切除模型组和羟苯磺酸钙干预组，在二次手术后第1、2、4、8、12周观察各组大鼠肾功能及残肾组织病理改变。采用免疫组化观察肾脏Ang-1和CD31表达的变化，RT-PCR观察肾脏Ang-1 mRNA的表达并行相关性分析。结果与同时点模型组比较，羟苯磺酸钙干预组大鼠尿蛋白减少、肾功能改善、残肾组织病理改变明显减轻。自第2周开始Ang-1 mRNA及蛋白表达水平升高，其后期的下调趋势变缓、CD31表达增强、肾脏微血管病变显著改善。结论羟苯磺酸钙可能通过增强Ang-1早期的上调幅度并延缓后期的下调来改善5／6。肾切除大鼠肾脏的微血管病变，从而保护肾脏。     

冬虫夏草对5／6肾切除大鼠肾脏病理改变的影响

冬虫夏草对５／６肾切除大鼠肾脏病理改变的影响程庆，于力方，师锁柱，陈香美ＥＦＦＥＣＴＯＦＣＯＲＤＹＣＥＰＳＳＩＮＥＮＳＩＳＯＮＲＥＮＡＬＨＩＳＴＯＬＯＧＩＣＡＬＣＨＡＮＧＦＳＩＮ５／６ＮＥＰＨＲＥＣＴＯＭＩＺＥＤＲＡＴ￥ＣｈｅｎｇＱｉｎｇｌｉ；ＹｕＬ...     

氯吡格雷联合伊贝沙坦对5/6肾切除大鼠肾脏的保护作用

目的:观察氯吡格雷联合伊贝沙坦对5/6肾切除大鼠肾脏的保护作用,并比较联合用药是否比单独用药效果更好.方法:雄性Wistar大鼠随机分为5组:假手术组(SHM)、模型对照组(NX)、氯吡格雷治疗组(CLO)、伊贝沙坦治疗组(IRB)和氯吡格雷联合伊贝沙坦治疗组(CLO/IRB),每组12只.氯吡格雷按20mg·kg-1·d-1给药,伊贝沙坦按20mg·kg-1·d-1给药,氯吡格雷联合伊贝沙坦给药(氯吡格雷按20 mg·kg-1·d-1加伊贝沙坦按20 mg·kg-1·d-1),每天8:30开始灌胃给药;假手术组和模型对照组给予相应量的蒸馏水.分别观察治疗4周末和8周末大鼠的血压、尿蛋白、血生化以及肾脏病理改变.结果:治疗8周末,与模型对照组比较,氯吡格雷/伊贝沙坦可以显著改善大鼠的一般情况,降低24 h尿蛋白排泄量和血肌酐水平(P＜0.05),减轻肾小球硬化及肾小管间质病变,降低平均肾小球截面积.伊贝沙坦降尿蛋白作用比氯吡格雷强.氯吡格雷联合伊贝沙坦降尿蛋白、血清肌酐、减轻肾脏病理损害作用比单独用药效果好.结论:氯吡格雷/伊贝沙坦可以减轻肾小球硬化和肾小管间质病变,减少尿蛋白排泄,延缓大鼠慢性肾衰竭的进程;联合用药比单独用药效果更为有效.     

金雀异黄素对5／6肾切除大鼠残余肾组织细胞外基质沉积的影响

目的探讨金雀异黄素对5／6肾切除大鼠的。肾脏保护作用。方法将5／6肾切除大鼠分为金雀异黄素组（Gen）和模型对照组（Con），同时设假手术组（So）为正常对照组。检测各组术后第4、8周尿蛋白、血肌酐、尿素氮、血白蛋白、总蛋白等水平，观察第8周肾组织的病理改变情况。应用免疫组化方法检测肾组织中纤维连接蛋白（FN）和Ⅳ型胶原（ColⅣ）沉积的情况。采用Western Blot法检测肾组织中TGF-β，蛋白质表达的情况。结果与模型对照组相比，金雀异黄素组尿蛋白排泄量明显减少，血肌酐、尿素氮水平明显下降，肾小球硬化程度明显减轻，肾小球内FN和COlⅣ沉积显著减少，TGF-β1，蛋白质表达明显减弱。结论金雀异黄素对5／6肾切除大鼠肾脏病变有部分保护作用。     

高蛋白饮食对5／6肾切除大鼠肾组织一氧化氮合酶的影响

目的探讨高蛋白饮食对慢性肾衰竭大鼠肾组织一氧化氮合酶(NOs)表达的影响。方法用肾切除法制作慢性肾衰竭的大鼠模型，再分别给予大鼠不同含量的蛋白饮食喂养2个月，观察不同大鼠血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、24h尿蛋白水平的变化；用免疫组化法半定量检测肾组织内皮型一氧化氮酶(eNOS)、神经型一氧化氮酶(nNOS)、诱生型一氧化氮酶(iNOS)的表达。结果给予肾衰竭模型大鼠高蛋白饮食，可导致大鼠大量蛋白尿的产生，同时降低肾组织eNOS、nNOS的表达，增强肾组织iNOS的表达。结论高蛋白饮食可导致肾衰竭模型大鼠大量蛋白尿，降低eNOS、nNOS对大鼠肾的保护作用，增加iINOS对大鼠肾的损害作用，加速慢性肾衰竭的进展。     

5/6肾切除大鼠肾脏病理图像分析与中医证型的研究

目的 :探讨 5 / 6肾切除 (5 / 6nephrectomy ,5 / 6NT)大鼠肾脏病理动态变化与图像分析、中医证型的关系。方法 :5 / 6NT大鼠肾组织标本的PAS、PAM染色片 ,用图像分析仪分别对PAM染色片的肾小球直径、肾小球截面积、系膜基质及血管壁面积进行定量分析 ,观察肾脏病理动态变化情况。结果 :5 / 6NT大鼠肾脏病理变化的基本特征为肾小球系膜细胞 (glomenrulusmesangialcells,GMC)增生 ,肾小管扩张 ,肾间质炎症反应 ,肾小管蛋白管型形成 ,并逐渐形成肾小球纤维化、硬化。这些病理变化与中医“瘀血”、“瘀浊”的概念相符合。病理变化轻重与肾小球直径、系膜基质面积、肾小球截面积、肾小球体积及血管壁面积肾小球基底膜、肾小球及肾血管壁面积呈正比例关系。结论 :肾小球直径、系膜基质面积、肾小球截面积、肾小球体积及血管壁面积肾小球基底膜、肾小球及肾血管壁面积可以作为肾纤维化、硬化的评价指标 ;5 / 6NT大鼠肾脏病理相当于中医的“瘀血”、“瘀浊”证     

omapatrilat对5/6肾切除大鼠肾小管间质病变的影响

目的 观察血管肽酶抑制剂omapatrilat对5／6肾切除大鼠肾衰模型肾小管间质 病变的影响,探索防治肾小管间质纤维化的新途径。方法建立5／6肾切除肾衰大鼠模型,随 机分成手术对照组、Omap 10 mg组(omapatrilat 10 mg·kg-1·d-1)和Omap 40 mg组(omapatrilat 40 mg·kg-1·d-1),另设假手术组和正常对照组。12周后观察比较各组间大鼠尾部动脉收缩压、 肾功能、肾小管间质纤维化水平(HE、Masson、PAS和PASM染色,半定量分析)。结果(1)omapatrilat 能明显降低5／6肾切除肾衰竭大鼠血压水平[(153.67±9.69)mmHg比(192.00±10.45)mmHg, P<0.01],且Omap 40 mg组降压效果明显优于Omap 10 mg组[(142.50±11.14)mmHg比 (153.67+9.69)mmHg,P<0.05];(2)omapatrilat能改善5／6肾切除肾衰竭大鼠肾功能[Scr(61.00±15.50) μmol／L比(97.00±34.10)μmol／L,P<0.01:BUN(19.38±3.65)mmol／L比(30.23±9.31)mmol／L, P<0.01 1:(3)omapatrilat可减轻肾小管间质纤维化程度(2.0±0.63比2.83±0.55,P<0.05),但 40 mg和10 mg两剂量组差异无统计学意义。结论 omapatrilat能明显降低5／6肾切除大鼠血 压水平.显著改善其肾功能及延缓肾小管间质纤维化进展。     

血管生成素-1在5/6肾切除大鼠微血管病变中的表达变化及意义

目的：探讨促血管生成素-1（angiopoietin-1,Ang-1）在5/6肾切除大鼠肾脏中的表达变化及其与肾脏微血管病变的关系。方法：复制5/6肾切除大鼠模型,设假手术组和5/6肾切除模型组,在1、2、4、8和12周,采用免疫组化观察肾脏Ang-1和CD31表达变化以及RT-PCR观察肾脏Ang-1 mRNA表达。结果：模型组2、4和8周时肾脏Ang-1 mRNA表达显著上调,12周时低于假手术组;模型组2周~8周免疫组化显示肾小球Ang-1阳性着染均显著高于假手术组,峰值在4周~8周,12周后逐渐下调;模型组2周~12周肾小球CD31表达逐渐减少。结论：5/6肾切除大鼠肾脏存在Ang-1和CD31表达的改变,此改变参与了残肾微血管结构的变化。     

梓醇对5/6肾切除大鼠肾组织TGF-β1、CTGF表达的影响

目的:观察梓醇(catalpol)对肾衰大鼠肾组织TGF-β1、CTGF表达的影响。方法:将Wistar大鼠50只随机分为正常组,模型组,梓醇高、中、低剂量(100、50、10 mg/kg)组。除正常组外,其余各组大鼠均行5/6(ablation/infarction,A/I)肾切除法建立肾衰竭大鼠模型,从手术当日开始,梓醇各剂量组连续灌胃给药60 d。检测血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、超敏反应蛋白(hs-CRP)、血红蛋白(Hb)水平变化,ELISA法检测肾纤维化指标肾皮质转化生长因子(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)的水平变化,HE染色观察大鼠肾脏病理变化,免疫组化法检测肾组织TGF-β1、CTGF的表达。结果:模型组大鼠血清Cr、BUN、hs-CRP水平显著升高(P<0.01)、Hb水平明显降低(P<0.01);血TGF-β1、CTGF含量显著上升(P<0.01);肾组织TGF-β1、CTGF的表达量增多。比较模型组,梓醇高(P<0.01)、中(P<0.05)、低(P<0.05)剂量组大鼠血清Cr、BUN、hs-CRP、TGF-β1、CTGF水平降低,Hb水平升高,肾组织TGF-β1、CTGF的表达量减少,其中尤以梓醇高剂量组疗效最佳。结论:梓醇可有效阻断大鼠肾纤维化进程、改善微炎症反应,保护大鼠肾功能,其作用机制可能与通过下调TGF-β1、CTGF表达,抑制纤维细胞增殖,减少纤维组织增生、炎性浸润相关,且具剂量依赖性。     

左归丸对5/6肾大部切除模型并肾性骨病大鼠骨代谢指标的影响

目的:探讨左归丸对5/6肾大部切除模型并肾性骨病大鼠骨代谢的影响。方法:SPF级Wistar大鼠进行5/6肾大部切除并给予高磷饮食诱导肾性骨病模型。造模大鼠分为模型组、左归丸组、骨化三醇组,并设假手术组。左归丸与骨化三醇治疗4周、12周时,检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、血清碱性磷酸酶(ALP)、血清全段甲状旁腺激素(iPTH)、血钙(Ca2+)、血磷(P3-);药物干预12周麻醉处死大鼠,双能X线测量大鼠股骨骨密度(BMD)。结果:12周时,模型组大鼠出现了Scr、BUN、ALP、iPTH、磷升高,血Ca2+下降。左归丸能明显降低Scr、BUN水平,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05);与骨化三醇组比较差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。左归丸组大鼠ALP、iPTH、血磷水平与模型组比较明显下降(P<0.05),血钙水平明显升高(P<0.01),左归丸组大鼠骨密度与模型组比较明显改善(P<0.01)。结论:左归丸通过调节钙磷代谢及参与成骨细胞代谢,对iPTH有直接的抑制作用,能改善肾性骨病的骨营养不良。     

凋亡相关蛋白及粘附分子在大鼠心脏急性排斥反应中的作用

目的 探讨凋亡及凋亡相关因子Fas／FasL、Bcl-2/Bax，粘附分子ICAM-1、P-selectin、E-selectin、L-Selectin、PECAM-1和VCAM-1在心脏移植中的表达及意义。方法 用免疫组织化学方法和原位杂交法，检测大鼠心脏移植后不同时间(1、3、5、7d)、Fas／FasL、ICAM-1、P-selectin、L-selectin、E-selectin蛋白、Bcl-2/Bax、VCAM-1、PECAM-1 mRNA的表达情况。结果 随着移植后天数的增加，细胞凋亡增多，Fas／FasL、Bax表达增加，粘附分子ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1表达也增加，Selectin表达较少。正常大鼠肝脏未见细胞凋亡及粘附分子的表达。结论 细胞凋亡和粘附分子ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1表达增加可能与心脏移植后急性排斥反应有关，而Fas／FasL、Bax可能促进了凋亡的发生。     

一步法5/6肾切除大鼠加高磷饮食快速建立肾衰竭致血管钙化动物模型法

目的：建立一种慢性肾衰竭快速诱导动脉血管钙化大鼠模型的实验方法,为进一步阐明肾衰竭所致血管钙化发病机制及其防治和新药的研究提供可靠的实验平台。方法：一步法5/6肾切除大鼠同时予以高磷饮食,28d后检测大鼠血清尿素氮、血肌酐、血钙、血磷和血甲状旁腺激素浓度;盐酸萃取法测定胸主动脉血管壁组织钙含量;von Kossa染色光镜下观察胸主动脉血管病理;pQCT仪测试胫骨近端骨密度。结果：大鼠血清尿素氮、血肌酐、血钙、血磷,血甲状旁腺激素和胫骨近端骨密度值,假手术组与正常组之间各项指标差异无统计学意义（P〉0.05）,手术组与假手术组之间各项指标差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：本方法较传统方法相比,具有省时、省力、经济等特点,为慢性肾衰竭引起的心血管钙化研究提供了一个快速可靠的动物模型,为有效新药筛选提供可靠的动物模型。     

温阳活血方对5/6肾切除大鼠肾组织TGF-β1表达的影响

目的:探讨温阳活血方对慢性肾衰竭(chronic renal failure,CRF)大鼠肾脏中转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)表达的影响。方法:选用120只SD雄性大鼠,通过5/6肾切除建立慢性肾衰竭大鼠模型。随机分为5组:(1)假手术组:予生理盐水10ml·kg-1·d-1灌胃;(2)模型组:予生理盐水10ml·kg-1·d-1灌胃;(3)中药组:予温阳活血方30g·kg-1·d-1灌胃;(4)西药组:科素亚33.3ml·kg-1·d-1灌胃;(5)中西药联合组:予温阳活血方+科素亚灌胃。分别在给药后4、8、12周,每组随机选取8只大鼠处死,检测肾功能指标和24h尿蛋白,用免疫组化法检测肾脏TGF-β1表达水平。Western印迹检测给药12周后TGF-β1蛋白在肾组织中的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠血BUN、Scr、24h尿蛋白定量明显均明显升高(P<0.01,P<0.05);三个治疗组血BUN、Scr、24h尿蛋白定量明显低于模型组(P<0.01)。免疫组化显示,治疗组均能显著减少TGF-β1在肾脏中的表达(P<0.01)。结论:温阳活血方可能是通过降低慢性肾衰竭大鼠的Scr、BUN和尿蛋白水平,抑制肾脏TGF-β1表达,从而延缓肾衰竭进展。