蒲公英多酚的提取及其活性研究

[目的]研究蒲公英多酚的抗氧化活性和抑菌活性,为蒲公英资源的开发利用提供基础理论研究。[方法]本研究利用热水浸提法提取蒲公英多酚,D101大孔吸附树脂分离纯化,并对其提取物进行抗氧化活性和抑菌活性的测定。[结果]以该法提取的蒲公英多酚,其提取量占蒲公英干草的0.219%且多酚含量为0.124mg·m L~(-1)。蒲公英多酚的总抗氧化活性及其对羟基自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(·O_2)的清除率均随样品浓度的增加而增大,且总抗氧化活性、对·OH和·O_2的清除作用均强于VC。蒲公英多酚对金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌、大肠杆菌和沙门氏菌均有一定的抑菌作用,对金黄色葡萄球和枯草芽胞杆菌的抑菌作用更为明显。[结论]蒲公英多酚具有良好的抗氧化活性和抑菌效果,可为天然食品抗氧化剂和防腐剂的开发利用。     

糙米多酚对淀粉消化酶的抑制作用及机理

本研究将糙米多酚(brown rice polyphenols,BRP)经过提取和C₁₈固相柱纯化后,研究了BRP对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制作用及其机理。液相色谱-质谱联用技术(UPLC-DAD-ESI-Q-TOF-MS)分析结果表明,BRP中大部分多酚以糖苷的形式存在,包括1种酚醛、2种酚酸酰胺、4种酚酸糖苷、6种酚酸、6种酚酸酯和8种黄酮糖苷。BRP对α-葡萄糖苷酶显示出剂量依赖型酶抑制活性,当浓度为2 mg/mL时,抑制率最高可达到39.37%,而BRP对α-淀粉酶无明显抑制作用。此外,荧光光谱和热力学研究结果表明,BRP能与α-葡萄糖苷酶发生疏水相互作用,对α-葡萄糖苷酶的内源荧光具有动态猝灭作用。以上结果表明,BRP主要通过与α-葡萄糖苷酶发生疏水相互作用抑制α-葡萄糖苷酶的活性,从而延缓碳水化合物的水解。本文为改善餐后血糖提供一定的参考。     

蒲公英中菊苣酸的溶出特性及其抗氧化活性

菊苣酸是蒲公英的主要功效成分之一,为充分利用蒲公英资源,该文研究醇提过程中蒲公英菊苣酸随蒲公英粉末粒度、料液比、提取温度的溶出特性和抗氧化活性的变化。结果表明：蒲公英粉末粒度、料液比和提取温度不影响蒲公英菊苣酸的溶出特性,但影响蒲公英菊苣酸的溶出量、平均溶出速率。当提取时间小于60 min时,溶出量快速增加,平均溶出速率快速降低;当提取时间大于60 min时,溶出量缓慢增加,平均溶出速率缓慢降低。蒲公英菊苣酸的溶出量、平均溶出速率随蒲公英粉末粒度减小而增加,随提取温度升高而增加,随溶剂量增加而先增加后降低,蒲公英菊苣酸适宜的提取条件为蒲公英粉末粒度60目、料液比1∶30(g/mL)、提取温度80℃。菊苣酸是蒲公英醇提物中重要的抗氧化活性成分,具有较强的抗氧化能力,抗氧化结果表明,菊苣酸对DPPH·和ABTS⁺·的清除率随菊苣酸浓度增加呈线性增加,清除DPPH·的效果优于清除ABTS⁺·。     

响应面优化蒲公英多酚超声波辅助乙醇提取工艺及其抗氧化性

本实验以蒲公英全草为原料,选取超声波提取时间、超声波功率、料液比、超声提取温度四个因素为自变量,结合单因素实验结果,对蒲公英多酚超声波辅助提取工艺进行优化,最后对蒲公英不同部位多酚抗氧化活性进行评估。结果表明:四因素对提取率的影响大小依次是提取温度>超声波功率>超声提取时间>料液比;超声波辅助乙醇提取蒲公英多酚的最佳工艺条件为提取时间37 min、超声功率380 W、提料液比1∶48、温度42℃,多酚平均提取率为3.68%±0.05%,与理论预测值3.72%误差值仅为0.94%。在优化条件下依次对蒲公英全草、叶片和根中的多酚进行提取并比较其抗氧化活性,三者均具有较强的抗氧化能力,蒲公英不同部位的抗氧化活性大小依次为蒲公英叶片>蒲公英全草>蒲公英根。      

分子模拟结合荧光光谱法探究BSA-多酚复合物形成机理及对多酚的保护作用

采用蛋白质内源荧光猝灭分析槲皮素(QUE)、白藜芦醇(RES)和咖啡酸β-苯乙醇酯(CAPE)同时与牛血清白蛋白(BSA)结合的可能性;通过位点Marker和分子对接技术确定结合位点;通过光稳定性试验研究BSA-多酚复合物对多酚的保护作用.结果表明:BSA可以同时结合2个或3个配体形成蛋白-多酚复合物,且多酚添加顺序影...     

曲酸对菠萝蜜多酚氧化酶的抑制作用和抑菌实验

采用酶动力学和Lineweaver-Burk双倒数法作图研究了曲酸对菠萝蜜多酚氧化酶PPO的抑制作用和机理,并通过平板菌落实验研究了曲酸对果肉的抑菌效果。结果表明,曲酸对PPO酶活有很强的抑制作用,其IC50为0.297mmol/L,表现为可逆非竞争性抑制,解离常数Ki为0.296mmol/L;果肉经0.10%曲酸浸泡后6d内具有较好的抑菌效果。      

红菜苔废弃物中多酚的超声波水提工艺优化

在优化Folin-Ciocalteau法测定多酚比色条件及单因素实验的基础上,采用Design-Expert软件中的中心复合设计（Central Composite Design,CCD）模块,设计一组3因素实验来确定超声波功率、料液比和提取时间这3个因素对从红菜苔茎皮等废弃物中提取多酚的影响。构建了具有良好预测能力的数学模型并通过响应曲面分析得到了红菜苔多酚最佳提取参数:超声波功率249W,料液比52∶1（mL∶g）,提取时间34min,在此条件下进行验证实验,测得红菜苔多酚提取量为5.84mg/g,达到理论预测值的97.34%。采用该工艺条件提取红菜苔多酚,稳定可靠,得率较高,无污染,可用于指导红菜苔废弃物中多酚的提取生产。      

莲藕多酚对微生物抑制作用的研究

时所提莲藕多酚各组分的生物活性进行了分析，结果表明，莲藕多酚组分Ⅰ、组分Ⅱ时金黄色葡萄球菌均有较好的抑制作用，对其他细菌及真菌的抑制作用效果不明显。     

蒲公英提取物中总酚酸含量测定方法的优化

以咖啡酸为对照品,采用普鲁士蓝比色法测定蒲公英提取物中总酚酸的含量并对方法学进行考察和优化。并通过单因素考察方法,确定最佳测定方法:显色剂、缓冲剂十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)用量为2.0 mL,盐酸浓度为0.1 mol/L,显色20 min。在最佳测定条件下,测得蒲公英提取物中总酚酸含量为120.5 mg/g。该方法稳定性好,精密度高,咖啡酸在2.0μg/mL~20.0μg/mL呈现良好的线性关系(r=0.999 2),平均回收率为98.86%,RSD为0.84%;结果表明该方法简单易行,稳定可靠,可作为蒲公英提取物中总酚酸含量的测定方法。     

黑果腺肋花楸多酚的抑菌效果及对α-淀粉酶活性的抑制作用

为探究黑果腺肋花楸多酚的抑菌效果及对α-淀粉酶活性的抑制作用,采用滤纸片法测定黑果腺肋花楸多酚对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、黄曲霉、烟曲霉、米根霉、岛青霉、康宁木霉的抑制效果,并考察温度和pH值对黑果腺肋花楸多酚抑制金黄色葡萄球菌和烟曲霉活性的影响。通过建立动力学模型研究黑果腺肋花楸多酚对α-淀粉酶活性的抑制作用。结果表明：黑果腺肋花楸多酚对7 种供试菌均有一定的抑制作用,对烟曲霉的抑制效果最强,最低抑菌浓度为0.171 9 mg/mL;黑果腺肋花楸多酚对金黄色葡萄球菌的抑菌效果在pH 5.0条件下最强;而对于烟曲霉,pH值的变化对抑菌效果有破坏作用。黑果腺肋花楸多酚对α-淀粉酶活性具有显著的抑制作用,并在0.10～0.70 mg/mL质量浓度范围内,对α-淀粉酶的抑制活性强于阳性对照阿卡波糖,该抑制作用属于可逆非竞争性抑制,抑制常数为0.193 2 mg/mL。在202 nm波长处,黑果腺肋花楸多酚能够引起α-淀粉酶紫外吸收的增强和吸收峰的红移。通过深入开发研究,黑果腺肋花楸多酚可作为具有辅助防腐抑菌功能的α-淀粉酶抑制剂。     

黄嘌呤氧化酶多酚抑制剂的筛选及其作用机制

黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XOD)是人体内次黄嘌呤和黄嘌呤代谢产生尿酸的关键酶,而多酚单体可抑制黄嘌呤氧化酶从而减少尿酸合成进而缓解痛风症状。为探究来源于天然产物的多酚单体对XOD的抑制作用机制,首先研究几种常见活性较好的多酚单体对黄嘌呤氧化酶的抑制率,及其对XOD的抑制动力学,并且通过荧光猝灭实验与分子对接模拟多酚单体与XOD之间的相互作用形式。在6种多酚单体中,白藜芦醇、表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)和橙皮苷对黄嘌呤氧化酶活性的抑制效果较好,室温下IC50分别为261.22、150.51、97.08μmol/L,是黄嘌呤氧化酶的竞争性抑制剂。荧光猝灭实验表明,单体与XOD结合使酶的内源荧光发生了猝灭现象,猝灭机制为静态猝灭。分子对接模拟表明,多酚单体能与XOD的氨基酸残基结合,结合位点位于钼蝶呤(molybdopterin,Mo-Pt)辅因子或黄素腺嘌呤二核苷酸(flavine-adenine dinucleotide,FAD)结构域的异恶嗪环附近。多酚单体是有效的XOD竞争性抑制剂,可以通过抑制黄嘌呤氧化酶的活性有效降低尿酸水平,在天然产物的开发和功能性食品的应用中具有很好的前景。     

脲酶抑制剂对脲酶活性的抑制试验

试验研究了乙酰氧肟酸对牛瘤胃液脲酶及大豆脲酶的抑制作用。研究结果表明，乙酰氧肟酸对脲酶活性有明显抑制作用。当乙酰氧肟酸在牛精料中的添加水平为150mg/kg时，对牛瘤胃液脲酶活性的平均抑制率为42．6％；当乙酰氧肟酸含量为125mg/L时，大豆脲酶活性降低80％以上。     

Inhibitory Mechanism and Kinetics Study of Apple Polyphenols on the Activity of Tyrosinase

Tyrosinase is the key enzyme in the biosynthesis of melanin. In order to investigate the effect of apple polyphenols on tyrosinase activity, the enzyme kinetic method was used. The concentration of apple polyphenols, which caused the tyrosinase activity to be lost by 50%, was 1.0 mg ml^?1 for monophenolase and 0.9 mg ml^?1 for disphenolase. When the concentration of apple polyphenols was 2.0 mg ml^?1, the lag time before reaction of monophenolase was extended from 1.2 to 4.5 min. Inhibition kinetics analysis suggested that apple polyphenols were reversible and mixed inhibitors for tyrosinase with an inhibition equilibrium constant 2.3 mmol l^?1. The results indicated that apple polyphenols were ideal tyrosinase inhibitors and could be used in food and cosmetics.     

根皮苷及苹果幼果多酚对酪氨酸酶活性的抑制作用

为比较苹果幼果多酚及其主要组分根皮苷作为酪氨酸酶抑制剂的潜质,本文以曲酸为阳性对照,分析并比较了三者对酪氨酸酶的抑制效果及抑制动力学。结果表明,根皮苷、苹果幼果多酚和曲酸均能有效抑制酪氨酸酶单酚酶及二酚酶活性,三者抑酶效果的强弱顺序为曲酸苹果幼果多酚根皮苷,对单酚酶活性的IC50分别为55.80、54.30和23.81μg/m L,对二酚酶活性的IC50分别为75.30、56.15和23.45μg/m L;根皮苷浓度为200μg/m L时为竞争型抑制,低于200μg/m L时为混合型抑制,苹果幼果多酚为非竞争型抑制,曲酸为混合型抑制。因此,抑制剂的组成成分和浓度均能影响其抑酶效果和抑酶机理,三种抑制剂均可通过抑制酪氨酸羟化生成多巴及抑制多巴氧化成多巴醌来减少黑色素的合成,苹果幼果多酚对酪氨酸酶活性的抑制效果优于根皮苷,且含量丰富,价格便宜,更适合作为酪氨酸酶抑制剂,有望开发应用于美白产品中。     

茶多酚对嗜水气单胞菌致病力的抑制作用

针对嗜水气单胞菌污染水产品所致动物感染和消费者食源性疾病等问题,筛选能够抑制嗜水气单胞菌致病力的天然产物茶多酚。溶血试验表明茶多酚对气溶素溶血活性具有直接抑制作用,通过荧光热漂移和七聚体形成试验分析其作用机制。结果表明,茶多酚虽在128μg/mL以下不抑制嗜水气单胞菌的生长,但能在1～8μg/mL直接抑制其主要毒力蛋白气溶素的溶血活性。荧光热漂移和七聚体试验发现,茶多酚通过与气溶素直接结合,降低了气溶素七聚体的形成并抑制其活性。细胞试验结果表明,4～8μg/mL茶多酚能对气溶素导致的人肺癌上皮细胞死亡具有显著的保护作用。此外,50 mg/kg茶多酚治疗可使斑点叉尾鮰嗜水气单胞菌感染模型的存活率提高至60%。综上,茶多酚通过直接与气溶素结合,抑制气溶素形成功能性七聚体而降低其活性,从而显著降低嗜水气单胞菌的体内、外致病力。研究结果提示茶多酚可作为抗生素替代或辅助药物用于治疗嗜水气单胞菌相关感染。     

茶多酚的降脂作用及其机制研究进展

茶多酚是茶叶中多酚类物质的总称,具有多种生物活性和保健功能。流行病学研究和体外试验研究表明,多酚类物质可以有效调节脂代谢,具有降低血脂的重要作用。就近年来对茶多酚类物质调节脂代谢及其作用机制的研究作综述,在对现有研究成果分析的基础上对茶多酚类物质降脂作用及其机制的研究前景进行展望。     

石榴皮多酚分离纯化及对脂肪酸合成酶抑制作用的研究

以总多酚质量分数、吸附率、解吸率为指标,进行石榴皮总多酚的分离纯化研究,并通过反相高效液相色谱（reverse phase high performance liquid chromatography,RP-HPLC）法测定石榴皮多酚中的鞣花酸、安石榴苷、绿原酸、槲皮素和表儿茶素质量分数。同时研究石榴皮多酚纯化物对脂肪酸合成酶的抑制作用。结果表明：石榴皮多酚纯化的最佳条件为采用D101大孔树脂,石榴皮溶液进柱质量浓度为10 mg/mL,流速为2 BV/h,清洗用水5 BV,乙醇洗脱剂的体积分数为70%,用量为5.5 BV;纯化后石榴皮多酚质量分数为71.64%,较纯化前多酚质量分数49.31%有明显提高;纯化后石榴皮多酚中安石榴苷、鞣花酸、绿原酸、槲皮素和表儿茶素质量分数分别为46.91%、9.44%、0.53%、0.75%、0.32%。石榴皮多酚提取物对脂肪酸合成酶的半最大效应浓度（concentration for50% of maximal effect,EC50）为0.72 mg/mL,说明石榴皮多酚对脂肪酸合成酶具有较好的抑制作用。     

葡萄籽多酚对糖尿病大鼠的降血糖作用及其机制

目的：研究葡萄籽多酚对糖尿病大鼠的降血糖作用,并从胰岛细胞损伤及胰岛素表达的角度探讨其作用机 制。方法：以链脲佐菌素腹腔注射至雄性SD大鼠,建立Ⅱ型糖尿病大鼠模型,成模后随机分为模型组、阿卡波糖 阳性对照组和葡萄籽多酚组。通过为期8 周的葡萄籽多酚（50 mg/（kg·d）,以体质量计）干预,观察大鼠空腹血 糖水平、胰岛素水平、葡萄糖耐受性变化,并采用免疫组化法检测胰岛病变及胰岛素表达。结果：葡萄籽多酚可明 显降低糖尿病大鼠的空腹血糖水平（P＜0.05）,提高对葡萄糖的耐受性,促进胰岛素分泌,改善胰岛细胞损伤, 增加胰腺中胰岛素的表达（P＜0.05）,增加血清中超氧化物歧化酶的活力及降低丙二醛的含量（P＜0.05）。结 论：长期低剂量的葡萄籽多酚干预可以有效调节糖尿病大鼠的血糖水平。葡萄籽多酚通过修复胰岛损伤促进胰岛素 分泌降低空腹血糖水平,改善葡萄糖耐受程度,这一作用可能与其显著的体内抗氧化功效相关。     

茶多酚降血脂作用及其机制研究进展

茶多酚是存在于天然植物茶叶中的一类多酚类物质，具有多种生物活性和保健功能。近几年的流行病学研究和试验研究显示，多酚类物质可以调节脂类代谢，具有降血脂的重要作用，从而抑制动脉粥样硬化的发生和发展，降低冠心病等各种心脑血管疾病的发生率和死亡率。本文就近年来对茶多酚物质的降血脂作用及作用机制研究作了综述。     

脂肽和茶多酚对副溶血弧菌的协同抑菌效应和机理

研究脂肽和茶多酚对副溶血弧菌的协同抑菌效应和机理,为脂肽协同茶多酚应用于副溶血弧菌的控制提供理论依据。利用"棋盘法"研究脂肽和茶多酚对副溶血弧菌的协同抑菌效应;通过研究脂肽和茶多酚独立作用及协同作用对细胞膜完整性、细胞蛋白质合成及磷代谢方面影响来研究二者的协同抑菌机理。结果表明:脂肽和茶多酚对副溶血弧菌存在强烈的协同抑菌效应,部分抑菌浓度指数达到0.19;与1/16最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)脂肽或1/8 MIC茶多酚各自独立作用相比,在1/16 MIC脂肽和1/8 MIC茶多酚协同作用下,副溶血弧菌的细胞膜通透性显著增强,细胞部分蛋白质合成的抑制作用得到进一步加强,并且细胞的磷代谢完全受到抑制。结果表明,脂肽和茶多酚对副溶血弧菌具有强烈的协同抑菌效应,其协同抑菌作用主要通过二者协同破坏细胞膜的完整性,从而影响细胞部分蛋白质的合成与正常代谢实现的。