姜黄素联合乙二胺四乙酸对荧光假单胞菌的光动力灭活作用

为探讨姜黄素对荧光假单胞菌的光动力灭活（photodynamic inactivation,PDI）作用,提高光动力杀菌效果,本研究以乙二胺四乙酸（ethylene diamine tetraacetic acid,EDTA）为协同剂,对PDI的应用条件进行优化,探讨姜黄素联合EDTA对荧光假单胞菌生物膜的PDI作用,并进一步将姜黄素联合EDTA应用于新鲜猪肉的保鲜。结果表明,与空白组相比,0.5%（质量分数,下同）EDTA与75 μmol/L 姜黄素经光照（功率密度200 mW/cm2、波长460 nm、光照时间20 min）,荧光假单胞菌的菌落数对数值减小了6.40（lg（CFU/mL））,玻璃及丙烯腈二乙烯丁二烯树脂（acrylonitrile-butadiene-styrene,ABS）板表面生物膜中荧光假单胞菌菌落数对数值分别减小4.57、6.60（lg（CFU/mL））,均显著高于单独使用姜黄素组的灭活效果（P＜0.05）。新鲜猪肉经75 μmol/L姜黄素和0.5% EDTA处理并光照后（功率密度100 mW/cm2、波长460 nm、光照时间20 min）,与空白组相比,保存到第10天其表面荧光假单胞菌菌落数对数值减小3.05（lg（CFU/mL））,质量损失率为2.14%,色差ΔE随姜黄素浓度增加而增大;且处理后的猪肉随贮藏时间的延长pH值变化缓慢。说明PDI处理对猪肉的感官品质影响较小,能较好地维持猪肉pH值,对猪肉表面荧光假单胞菌有显著抑制作用。结论：姜黄素联合EDTA的PDI处理显著延长了猪肉的保鲜期,本研究可为光动力技术在食品杀菌及贮藏保鲜中的应用提供新的理论参考和技术支持。     

拮抗猕猴桃溃疡病致病菌的海洋细菌的筛选与鉴定

猕猴桃溃疡病是一种严重威胁猕猴桃生产的毁灭性细菌性病害,其致病菌为丁香假单胞菌（Pseudomonas syringae）。本实验旨在利用印度洋海泥中分离出来的115株海洋细菌,从中筛选出对丁香假单胞菌有拮抗作用的海洋细菌。运用滤纸片扩散法对海洋细菌进行初筛,得到33株具有拮抗丁香假单胞菌作用的海洋细菌,利用牛津杯法复筛,筛选出1株海洋细菌NO.357具有最优的抑制效果。对NO.357进行形态学鉴定和生理生化鉴定,通过16S r DNA序列测定和构建系统发育树,鉴定NO.357为低温甲基杆菌（Methylobacterium frigidaeris）。本实验为进一步研究海洋细菌对猕猴桃溃疡病致病菌的拮抗作用以及猕猴桃健康种植奠定基础。     

PCR-DGGE法结合传统技术研究4℃冷链贮运条件下三文鱼菌相变化

为研究三文鱼在冷链贮运4 ℃条件下的细菌腐败机制,运用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳（polymerase chain reaction-denaturing gradient gel electrophoresis,PCR-DGGE）技术、传统鉴定技术以及PCR技术分析了4 ℃冷链贮运条件下的三文鱼中腐败菌菌相变化规律,并通过产量因子测得各优势菌株致腐能力,从而确定特定腐败菌。DGGE指纹图谱显示,贮藏期间微生物多样性降低,假单胞菌属和希瓦氏菌属条带亮度却逐渐提高。这表明这两个属的微生物在三文鱼冷藏期间逐渐成为优势菌。通过分离和鉴定贮藏末期腐败三文鱼的优势腐败菌,本实验得到5 株优势腐败菌,分别为麦芽糖肉食杆菌（Carnobacterium maltaromaticum LMA28）、丁香假单胞菌（Pseudomonas syringae pv. syringae B728a）、荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens SBW25）、肉食杆菌（Carnobacterium sp. WN1359）和波罗的海希瓦氏菌（Shewanella baltica OS678）。将这5 株纯培养的腐败菌分别接种到无菌三文鱼中并冷藏一定时间后,各腐败菌的挥发性盐基氮（total volatile basic nitrogen,TVB-N）产量因子分别为1.26×10－7、1.25×10－7、1.36×10－7、1.08×10－7 mg TVB-N/CFU和1.03×10－7 mg TVB-N/CFU。这5 株腐败菌对三文鱼致腐败能力的顺序依次为荧光假单胞菌SBW25＞麦芽糖肉食杆菌LMA28＞丁香假单胞菌B728a＞肉食杆菌WN1359＞波罗的海希瓦氏菌OS678。     

冷藏鲣鱼优势腐败产胺菌分离鉴定及其致腐产胺能力分析

为探究鲣鱼中优势腐败产胺菌的种类,从冷藏的鲣鱼中筛选出3种优势腐败产胺菌,通过16S rDNA分子鉴定技术对菌株进行鉴定为荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）、弗氏柠檬酸杆菌（Citrobacter freundii）和嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）,将鉴定出的优势腐败产胺菌接种至无菌鱼肉中4 ℃条件下贮藏,通过测定菌落总数和挥发性盐基氮（TVB-N）变化,以腐败代谢产物产量因子（Y_TVB-N/CFU）分析3种优势腐败产胺菌对鲣鱼的致腐能力,并通过样品中生物胺的含量比较3种优势腐败产胺菌的产胺能力。结果表明:在贮藏8 d后接种荧光假单胞菌、弗氏柠檬酸杆菌和嗜水气单胞菌组的菌落总数分别达到8.36、8.27和8.13 lg CFU/g,TVB-N值分别为28.21、30.30和31.29 mg/100 g,3种优势腐败产胺菌对鲣鱼的致腐能力大小为嗜水气单胞菌>弗氏柠檬酸杆菌>荧光假单胞菌。接种荧光假单胞菌组、弗式柠檬酸杆菌组和嗜水气单胞菌组的组胺含量分别为196.23、83.43和261.22 mg/kg,3组样品中总生物胺含量为嗜水气单胞菌>荧光假单胞菌>弗氏柠檬酸杆菌。综合比较得出,嗜水气单胞菌对4 ℃冷藏鲣鱼致腐产胺能力最强,本研究增加对冷藏鲣鱼中优势腐败产胺菌种类的了解并提供了部分理论基础。     

烟草镰刀菌根腐病生防假单胞菌的筛选与鉴定

【背景和目的】镰刀菌引起的根腐病是烟草主要土传病害之一,为筛选对烟草镰刀菌根腐病菌具有较好抑制作用的假单胞菌。【方法】采用稀释涂布平板法从健康烟株根际土壤中分离纯化对烟草镰刀菌根腐病（Fusariumrootrot）主要病原具有一定拮抗作用的假单胞菌;采用形态学、生理生化特征和16S rDNA序列分析鉴定,并测定促生防病效果。【结果】（1）分离纯化的2株假单胞菌分别为铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa YZ66和绿针假单胞菌P. chlororaphis YX33;(2)YZ66和YX33对茄病镰刀菌（F.solani）菌丝的抑制效率分别为79.66%和76.68%,对尖孢镰刀菌（F.oxysporum）的抑制效率分别为79.93%和57.48%,对烟草疫霉菌（Phytophthora nicotianae）、根串珠霉菌（Thielaviopsis basicola）等也有抑制效果;（3）2株菌株具有显著的促生防病作用,YZ66盆栽防病效果在81.21%以上,YX33在67.55%以上;最大叶面积、鲜重等有所增加;（4）2菌株均含吩嗪-1-羧酸（Phenazine...     

食品中铜绿假单胞菌实时荧光PCR检测的研究

根据铜绿假单胞菌外毒素A基因片段序列,用Primer express 3.0设计一对特异性引物和一个Taq Man探针,建立铜绿假单胞菌实时荧光PCR检测方法。通过对梯度含量的铜绿假单胞菌标准菌液样品DNA和多种细菌的DNA进行实时荧光PCR检测,来检测其灵敏度和验证引物和探针的特异性。试验结果表明,只有铜绿假单胞菌产生扩增曲线,其他细菌无扩增,说明引物及Taq Man探针特异性较好,检测灵敏度为1×10~3 CFU/m L。该方法具有很好的研究价值和应用前景。     

棘孢木霉与30%霜霉·嘧菌酯协同防治烟草镰刀菌根腐病

为筛选防治烟草镰刀菌根腐病高效、安全的复配剂,采用菌丝生长速率法测定生防棘孢木霉Tr-0111、化学杀菌剂30%霜霉·嘧菌酯对尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)的毒力及两者的相容性,同时测定两者混配对尖孢镰刀菌的毒力系数,并通过盆栽试验评价其对烟草镰刀菌根腐病的防治效果。结果表明,30%霜霉·嘧菌酯和棘孢木霉Tr-0111对尖孢镰刀菌均具有较强的毒力,其EC₅₀值分别为0.064 3 mL/L、2.36×10² cfu/mL,且两者相容性好。除V_{30%霜霉·嘧菌酯}∶V_Tr-0111=4∶6时无增效作用,其他8个混配比例均具有增效作用,其中V_{30%霜霉·嘧菌酯}∶V_Tr-0111=7∶3时增效比率最高,为1.16,抑菌率为68.37%。盆栽试验结果表明,V_{30%霜霉·嘧菌酯}∶V_Tr-0111=5∶5时,对烟草镰刀菌根腐病的防效最好,为78.18%,其次为7∶3和1∶9,防效分别为77.27%和72.7...     

重组酶介导等温扩增法检测食品中铜绿假单胞菌

目的 建立重组酶介导等温扩增（Recombinase-aided amplification,RAA）法,快速、灵敏、特异检测食品中铜绿假单胞菌的分析方法。方法 针对铜绿假单胞菌lasB基因的特异性保守区域,设计RAA特异性引物和exo探针,筛选出最优组合;对提取的目标基因组DNA进行检测,确定方法的特异性和灵敏度,并通过人工污染实验,比对不同检测方法对食品样品的检出限。结果 建立的铜绿假单胞菌lasB基因RAA检测方法特异性良好,仅对铜绿假单胞菌有扩增曲线,对其他致病菌无交叉反应;方法对纯菌液的灵敏度为1.7 pg/μL。人工污染实验表明,方法对肉类样品中铜绿假单胞菌的检出限与传统方法一致,达1.0×103 CFU/mL;RAA方法检测时间仅需20min。结论 本研究建立的铜绿假单胞菌实时荧光RAA检测方法特异性强、灵敏度高、反应时间短,可用于食品中铜绿假单胞菌的快速检测。     

食品中椰毒假单胞菌酵米亚种实时荧光PCR检测的研究

目的建立食品中椰毒假单胞菌酵米面亚种实时荧光PCR检测方法。方法根据椰毒假单胞菌酵米面亚种16S～23S rRNA基因片段序列,用Oligo7设计一对特异性引物和一个TaqMan探针,摸索最佳退火温度,最佳引物和探针浓度,建立椰毒假单胞菌酵米面亚种实时荧光PCR检测方法。通过对唐菖蒲伯克霍尔德氏菌以及22种其他标准菌株进行实时荧光PCR检测,验证本法的特异性和抗干扰性。同时从菌液浓度和DNA浓度水平上进行研究,确定该检测方法的灵敏度。结果用该方法检测23种菌,除唐菖蒲伯克霍尔德氏菌外,其他22种细菌均为阴性。抗干扰性试验显示杂菌对检测结果不影响,本法抗干扰能力强。通过灵敏度试验的研究,确定本法检测椰毒假单胞菌酵米面亚种的菌液灵敏度为1×10~2 CFU/mL,DNA灵敏度为250 fg/μL。结论本试验设计的引物和探针具有较强特异性、抗干扰性以及灵敏度,该方法具有很好的研究价值和应用前景。     

杏鲍菇污染菌的分离、鉴定及其特性

从夏季被细菌污染的杏鲍菇上分离纯化得到2 株病害菌（CTE722-B、CTE722-C）,结合显微结构和生理生化实验结果,以及对它们16S rDNA序列的分析确定这两株菌的系统发育地位;通过抑菌圈实验考察几种工厂常用消毒剂对病害菌的抑菌影响。结果表明：菌株CTE722-B鉴定为恶臭假单胞菌属（Pseudomonas putida）,CTE722-C为边缘假单胞菌属（Pseudomonas marginalis）。消毒剂菇保、甲酚皂、苯扎溴铵消毒液在短时间内对这两种细菌都有较好的抑菌效果;但因其具有挥发性,故防治效果不理想。从污染菇体分离得到的2 株病害菌CTE722-B和CTE722-C被鉴定为假单胞菌属,因常用消毒剂只在短时间内对其有抑菌性,防治效果较差。     

基于近红外光谱的酸枣仁不同伪品掺假检测

本文采用近红外光谱技术对酸枣仁及其三种常见伪品理枣仁、枳椇子和兵豆进行定性定量检测研究。分别制备不同伪品掺杂质量分数为1%~90%的单种掺杂物实验样品,以及多种伪品同时掺杂的样品,采集800~2500 nm范围的近红外光谱数据。首先利用主成分分析（principal component analysis,PCA）对酸枣仁及三种伪品进行初步定性鉴别。对于单一掺假物样品,采用五种不同预处理方法对光谱数据进行去噪。利用偏最小二乘回归（partial least squares regression,PLS）方法,建立PLS1模型定量预测掺假物含量,并采用连续投影算法（successive projection algorithm,SPA）挑选最优波长,优化定量模型。结果表明,理枣仁掺假建立的3波长检测模型的预测集决定系数R2_p为0.9659,均方根误差（root mean square error,RMSEP）为6.1910%。枳椇子掺假建立的8波长检测模型的预测集决定系数R2_p为0.9491,均方根误差（RMSEP）为7.6232%。兵豆掺假建立的5波长检测模型的预测集决定系数R2_p为0.9666,均方根误差（RMSEP）为6.1437%。对于多掺杂物样品,建立了PLS2模型同时对不同成分进行定量预测,酸枣仁效果最好,R2_p≥0.7115,枳椇子预测效果最差,R2_p≥0.2007。研究表明,利用近红外光谱技术可以实现酸枣仁不同伪品掺假的快速无损检测。所建方法为后续酸枣仁及其他种子类中药材便携式无损检测仪器的开发提供了理论基础与参考依据,对保证中药材质量安全具有重要社会意义。     

基于不同预处理高光谱信息的鸡肉滴水损失率快速预测研究

本文旨在通过挖掘不同预处理高光谱(900~1700 nm)信息构建鸡肉滴水损失率的快速预测模型。首先采集每个鸡肉样本高光谱图像并提取图像感兴趣区域内的平均光谱信息,经基线校正(BC)、标准正态变量校正(SNV)、多元散射校正(MSC)、高斯滤波平滑(GFS)、归一化校正(NC)等五种光谱不同预处理,利用偏最小二乘回归(Partial Least Squares Regression,PLSR)算法构建光谱信息与鸡肉滴水损失率之间的定量关系。然后分别基于回归系数法(Regression Coefficient,RC)、连续投影算法(Successive Projections Algorithm,SPA)和逐步回归算法(Stepwise)筛选出对模型精度影响较大的最优波长优化全波段PLS模型。结果显示,基于BC光谱的全波段PLSR模型(BC-PLSR)预测鸡肉滴水损失率效果更好(r_P=0.95,RMSEP=0.29%,RPD=3.07,ΔE=0.0024%)。利用Stepwise法从BC光谱中选取的14个最优波长(900.6、903.8、905.5、907.1、917.0、997.7、1162.2、1272.4、1354.8、1369.6、1410.8、1425.6、1584.1和1695.1 nm)建立的SW-BC-PLSR模型(r_P=0.97,RMSEP=0.24%,RPD=3.82,ΔE=0.0012%)和多元线性回归(Multiple Linear Regression,MLR)模型SW-BC-MLR(r_P=0.97、RMSEP=0.22%、RPD=4.19,ΔE=0.0036%)预测鸡肉滴水损失率效果均良好。本试验表明,基于近红外高光谱信息可潜在实现鸡肉滴水损失率的快速预测。     

NIR高光谱成像技术联用SPA算法 快速检测五花肉的过氧化值

利用近红外(NIR)高光谱成像技术结合连续投影算法(SPA)快速、无损检测五花肉的过氧化值。通过高光谱成像系统采集样品的光谱图像,提取其反射光谱信息,经过基线校正(BC)、高斯滤波平滑(GFS)、中值滤波平滑(MFS)、卷积平滑(SGS)、移动平均值平滑(MAS)、标准正态变量变换(SNV)、多元散射校正(MSC)七种预处理后,利用偏最小二乘(PLS)建立预测模型。使用SPA筛选最优波长,重新预算,构建优化的PLS模型和多元线性回归(MLR)模型。结果显示,经过BC预处理(R_P=0.960,RMSEP=5.15×10-4g/100 g)和原始数据RAW(R_P=0.960,RMSEP=4.89×10-4g/100 g)的全波段PLS模型(F-PLS)预测过氧化值效果较好。优化结果显示,RAW的MLR模型(R_P=0.968,RMSEP=4.12×10-4 g/100 g)预测效果更好。研究表明,NIR高光谱成像技术联用SPA算法可潜在实现对五花肉过氧化值的快速无损检测。     

MALDI-TOF-MS鉴定3种水稻细菌的方法

用哥伦比亚培养基培养了水稻细菌性谷枯病菌(NCPPB 2391,NCPPB 3591)、水稻细菌性条斑病菌(NCPPB 1585)、水稻细菌性褐斑病菌(NCPPB 2844),菌落采用乙醇/甲酸处理法处理后用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析其蛋白质指纹图谱。除水稻细菌性条斑病菌无匹配结果外,其它2种细菌均有正确的鉴定结果。用Bruker公司标准方法建立了水稻细菌性条斑病菌蛋白质指纹图谱库。采用水稻叶片作为空白样品添加了上述3种植物病菌,回收实验结果表明3种植物病菌均可以用本方法检测。该研究为应用MALDI-TOF-MS方法检测水稻细菌奠定了基础。     

近红外结合线性回归算法快速预测小麦籽粒干物质和重量

为了实现小麦品质(干物质、重量)的快速无损检测,对35个小麦品种样品进行了近红外系统扫描,获取光谱信息,并进行高斯滤波平滑(GFS)、归一化(N)和基线校正(BC)预处理.采用偏最小二乘(PLS)算法分别建立光谱信息与干物质和重量参考值之间的定量关系.采用回归系数法(RC)和连续投影算法(SPA)两种方法在900～17...     

磨盘柿褐变指标的可见/近红外漫反射无损预测研究

为了建立可见/近红外漫反射光谱与磨盘柿果皮和果肉褐变之间的关系,作者在全光谱区域(570～1 848 nm)对比分析了不同处理方法对磨盘柿果皮颜色b*和果肉浊度定标模型的影响。结果表明,应用MPLS、原始光谱和无散射处理建立果皮颜色b*的定标模型预测性能较好,Rp2为0.968,RMSEP为1.417 7,RPD为7.92。应用PLS、一阶导处理和无散射处理建立磨盘柿果肉浊度的定标模型预测性能较好,Rp2为0.757,RMSEP为0.107 9,RPD为2.22。因此,可见/近红外漫反射技术对磨盘柿果皮颜色b*和果肉浊度的快速无损检测具有可行性。     

Simultaneous measurement of total acid content and soluble salt-free solids content in Chinese vinegar using near-infrared spectroscopy

Total acid content (TAC) and soluble salt-free solids content (SSFSC) in Chinese vinegar are 2 important indicators in the assessment of its quality. This paper shows the feasibility to determine TAC and SSFSC in Chinese vinegar by near-infrared (NIR) spectroscopy. Synergy interval partial least square (Si-PLS) algorithm was performed to calibrate the regression model. The number of PLS factors and the number of intervals were optimized simultaneously by cross-validation. The performance of the model was evaluated according to root mean square error of prediction (RMSEP) and correlation coefficient (R) in the prediction set. The optimum Si-PLS model for TAC was achieved with RMSEP = 0.264 g/100 mL and R(p) = 0.9655; the optimum Si-PLS model for SSFSC was achieved with RMSEP = 1.93 g/100 mL and R(p) = 0.9302. The overall results demonstrated that NIR spectroscopy combined with Si-PLS could be utilized to determinate TAC and SSFSC in Chinese vinegar, and NIR spectroscopy has a potential to be used in vinegar industry.     

紫外/可见光谱技术无损检测李子可溶性固形物含量

利用光谱技术结合化学计量学对李子可溶性固形物含量检测进行研究,为李子品质无损检测提供科学方法。通过反射式光谱采集系统获取了"红"李子和"青"李子的平均光谱,并对原始光谱数据进行预处理;应用连续投影算法(SPA)和竞争性自适应重加权算法(CARS)对预处理后的光谱数据提取特征波长;分别建立基于全光谱和特征波长的预测李子可溶性固形物含量的误差反向传播(BP)网络模型。结果表明:利用SPA和CARS算法分别从全光谱的1024个波长中选取出31和104个特征波长;而基于特征波长建立的CARS-BP网络模型效果最优,其相关系数r_c为0.998,r_p为0.887,均方根误差RMSEC为0.026,RMSEP为1.767。这表明光谱技术结合化学计量学进行李子可溶性固形物含量的无损检测具有可行性。     

基于第三代测序与理化指标评价不同压曲工艺酱大曲品质

基于第三代测序解析不同压曲工艺酱香大曲中微生物群落结构,并结合理化指标评价机械仿生压曲（AQ）与传统人工踩曲（MQ）成品曲的品质。结果表明,机械仿生压曲AQ的糖化与投粮作用优于传统人工踩曲MQ。从酱香大曲样品中共检测出63个真菌和272个细菌菌种,其中相对丰度较高的真菌种均为烟曲霉（Aspergillus fumigatus）、微皱篮状菌（Talaromyces rugulosus）、米曲霉（Aspergillus oryzae）,相对丰度较高的细菌种均为丁香假单胞菌（Pseudomonas syringae）、绿针假单胞菌（Pseudomonas chlororaphis）、恶臭假单胞菌（Pseudomonas putida）、假单胞杆菌（Pseudomonas sp.）CC6-YY-74、防御假单胞菌（Pseudomonas protegens）、沼泽红假单胞菌（Rhodopseudomonas palustris）、荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）、铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）、Pseudomonas silesiensis、贪噬菌属（Variovorax sp.）PMC12。机械仿生压曲AQ中物种总数和多样性均高于传统人工踩曲MQ。综合来看,机械仿生压曲AQ的品质高于传统人工踩曲MQ。     

基于高光谱成像的贵长猕猴桃硬度快速预测

为了提高猕猴桃硬度预测的效率。应用可见/近红外(390～1030 nm)高光谱成像系统获取贵长猕猴桃的高光谱图像信息,并提取每个样品感兴趣区域的反射光谱,采用标准正态变换消除原始反射光谱中的噪声干扰;基于竞争性自适应重加权(competitive adaptive reweighted sampling,CARS)与连续投影算法筛选特征变量,建立误差反向传播神经网络和多元线性回归(multi linear regression,MLR)模型检测贵长猕猴桃硬度。结果表明：应用CARS从256个变量中筛选了35个特征变量,运算效率提升了近11倍(即运算时间从5.84 s降到了0.54 s);构建的CARS-MLR检测模型具有较大的r_c=0.95和r_p=0.92,较小的RMSEC=1.65 kg/cm²和RMSEP=1.99 kg/cm²,且RPD值(2.47)大于2,表明CARS-MLR模型具有非常好的检测性能,利用高光谱成像技术以及化学计量学可以实现贵长猕猴桃硬度的快速无损检测。