以猪小肠黏膜提取物作为α-葡萄糖苷酶和二肽基肽酶IV的酶活力分析体系的建立

α-葡萄糖苷酶和二肽基肽酶IV（dipeptidyl peptidase 4,DPP-4）是II型糖尿病治疗中2 种重要的靶向酶。这两种商品化酶价格昂贵且主要来源于微生物,难以有效用于两种酶抑制剂的筛选,而这两种酶均普遍存在哺乳动物的小肠中。为了获得经济有效、来源于哺乳动物体内的α-葡萄糖苷酶和DPP-4,本研究收集新鲜的猪小肠黏膜分泌物及上皮细胞,对比分析了猪小肠不同部位黏膜提取物的α-葡萄糖苷酶和DPP-4的活力。以猪小肠黏膜提取物作为α-葡萄糖苷酶和DPP-4的酶反应体系,并且利用这两种酶的阳性药（阿卡波糖和抑二肽素A（diprotin A,IPI））分别进行了抑制率验证和评价。阿卡波糖对商品和猪回肠源α-葡萄糖苷酶的半数有效抑制质量浓度（median inhibition concentration,IC50）分别是1.102 4、0.244 7 mg/mL;IPI对商品和猪回肠源DPP-4的IC50分别为19.119 7、41.268 4 μg/mL。通过比较发现,猪回肠黏膜提取物的α-葡萄糖苷酶和DPP-4比活力分别为0.084 1、0.053 4 U/mg,在3 种黏膜提取物中均为最高,因此选择猪回肠黏膜提取物作为商品化α-葡萄糖苷酶和DPP-4的替代物进行抑制剂的筛选。     

乳清蛋白源降糖肽的酶法制备及工艺优化

通过酶法制备乳清蛋白肽,以α-葡萄糖苷酶抑制率和蛋白水解度为评价指标,对酶解温度、pH、酶解时间、液料比(纯水∶乳清蛋白粉)4个因素进行单因素试验和响应面优化分析,确定木瓜蛋白酶水解乳清蛋白制备降血糖粗肽的最佳工艺条件.结果 显示,最佳工艺条件为pH 5.1、酶解温度46C、液料比30∶1mL/g、酶解时间4.1 h....     

具有α-葡萄糖苷酶和二肽基肽酶IV抑制作用降糖益生菌的筛选

以实验室保藏的13 株乳酸杆菌为研究对象,研究其细胞代谢物（cell-free excretory supernatants,CFS）和细胞内容物（cell-free extracts,CFE）对α-葡萄糖苷酶和二肽基肽酶IV（dipeptidyl peptidase IV,DPP-IV）的抑制活性;然后对酶抑制率较高的菌株进行益生特性评价,以期筛选出具有潜在降糖作用的益生菌。结果表明,13 株乳酸杆菌的CFS对α-葡萄糖苷酶具有一定的抑制作用,抑制率为0%～12.13%;CFE对α-葡萄糖苷酶无抑制作用。13 株乳酸杆菌CFS和CFE对DPP-IV均表现出一定的抑制作用,抑制率分别为0%～7.13%和0%～55.42%。选取酶抑制率较高的嗜酸乳杆菌KLDS1.1003、KLDS1.0901和KLDS1.0902进行益生特性的研究。其中嗜酸乳杆菌KLDS1.0901表现出较高的酸耐受性,嗜酸乳杆菌KLDS1.1003表现出较高的胆盐耐受性和疏水性。主成分分析表明嗜酸乳杆菌KLDS1.1003的综合性能最佳：其对α-葡萄糖苷酶的抑制活性可达10.29%;对DPP-IV的抑制率为CFS 7.13%,CFE 50.14%;于pH 2.0的条件下孵育1 h后,存活率达到51.55%;在0.3%的胆盐条件下孵育,滞后时间为2.26 h;在二甲苯、乙酸乙酯和氯仿溶剂中的疏水率分别为134.33%、20.51%和344.08%,总体上嗜酸乳杆菌KLDS1.1003具有较高的酶抑制活性和良好的益生特性。     

基于Caco-2细胞模型对DPP-IV抑制肽IPQVS的活性评价研究

基于Caco-2细胞模型研究了二肽基肽酶-4（DPP-IV）抑制肽（IPQVS）的活性,评价了小肠吸收与降解作用对DPP-IV抑制活性的影响。测定了IPQVS和其降解肽片段PQVS、QVS、VS的表观渗透系数（Papp）,分别为（1.35±0.09）×10^-6、（1.46±0.18）×10^-6、（0.95±0.08）×10^-6、（3.01±0.15）×10^-6 cm/s。其中,IPQVS主要是通过胞吞的形式跨Caco-2细胞单层转运,IPQVS以剂量依赖型方式抑制Caco-2细胞单层中的DPP-IV活性,不会影响DPP-IV中mRNA的表达（P>0.05）,其IC₅₀为（101.66±6.02） μmol/L,数值高于体外化学底物法测量值。分子对接结果表明DPP-IV和IPQVS降解产物（PQVS和QVS）的结合弱于IPQVS,结合的位点也发生了明显减少,这极大限制了IPQVS的DPP-IV抑制活性。     

马氏珍珠贝软体酶法制备降糖肽的工艺优化及肽段分析

目的:以二肽基肽酶-IV（dipeptidyl peptidase,DPP-IV）抑制率和葡萄糖消耗量为指标优化马氏珍珠贝软体的酶解工艺,并对酶法制备的降糖肽进行分析。方法:以人肝癌细胞（HepG-2）胰岛素抵抗模型的葡萄糖消耗量、体外二肽基肽酶-IV（dipeptidyl peptidase,DPP-IV）抑制率为评价指标,比较筛选了酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、复合蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶对马氏珍珠贝软体的酶解效果,通过单因素及正交试验分析酶解温度、料液比、加酶量、酶解时间等因素对酶解物降糖活性的影响,确定最佳酶解工艺,以液相串联质谱（Nano LC-MS/MS）分析酶解物中肽类物质组成。结果:酸性蛋白酶酶解的产物葡萄糖消耗量和DPP-IV抑制率优于其他种类蛋白酶,马氏珍珠贝软体制备降糖肽的最佳酶解条件为:45 ℃、3 h、料液比1:3.5（w:w）、加酶量1000 U/g,在此条件下的葡萄糖消耗量为37.53%、DPP-IV抑制率为74.21%。最佳工艺制备的马氏珍珠贝软体酶解物中93.88%的肽段分子量低于2000 Da,22.63%的肽段为疏水性肽段,74.92%的肽段N端至少有含有一个疏水性氨基酸。结论:本研究酶法制备的马氏珍珠贝软体降糖肽可通过抑制DPP-IV的活性及减少胰岛素抵抗发挥降糖作用,对功能食品的研发具有一定的指导意义。     

仿刺参胶原蛋白源二肽基肽酶抑制肽虚拟筛选及分子对接研究

目的 采用生物信息学和分子对接方法筛选仿刺参胶原蛋白来源的二肽基肽酶(dipeptidyl peptidase-Ⅳ,DPP-Ⅳ)抑制肽。方法 以仿刺参胶原蛋白序列为对象,进行生物信息学分析和计算机辅助虚拟酶解,基于生物毒性、致敏性、水溶性及吸收、分配、代谢、排泄及毒性(absorption,distribution,metabolism,excretion,toxicity,ADMET)预测,筛选得到6条具有潜在生物活性的寡肽,氨基酸序列分别为CD、CQ、CS、GR、SM、MDG,进一步通过分子对接分析肽段与DPP-Ⅳ的结合活性,并分析其结合位点及方式。结果 生物信息学分析表明仿刺参胶原蛋白是生物活性肽的潜在优良来源,经木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶及模拟胃肠道虚拟水解后能够释放出DPP-Ⅳ抑制肽;分子对接表明俩条新肽段CS、SM通过氢键、疏水相互作用分别与DPP-Ⅳ的S1、S2活性口袋结合。结论 本研究提供了一种快速筛选刺参胶原蛋白中DPP-Ⅳ抑制肽的方法。     

动物源性食品安全检测技术研究进展

随着人民生活水平的提高和健康意识的增强,动物源性食品的质量安全问题受到广泛关注。化学污染（三聚氰胺添加、兽药残留、食品添加剂残留等）及致病微生物是导致动物源性食品安全问题的主要原因,不仅威胁人类健康,而且影响社会经济及产业发展。因此,建立动物源性食品安全的快速检测方法非常必要。表面增强拉曼光谱法（surface-enhanced Raman spectroscopy,SERS）具有检测速度快、选择性好、灵敏度高等优点,在食品安全检测领域展现出巨大的应用潜力而成为研究热点之一。本文综述了表面增强拉曼光谱技术在动物源性食品安全检测中的应用,详细介绍了SERS对三聚氰胺、食源性致病菌、农兽药残留和食品添加剂的检测应用及发展现状,并对SERS技术在食品中快速残留检测方面的应用进行了总结和展望,旨在为SERS技术在食品安全检测领域的进一步发展提供参考。     

酶解豆类蛋白制备活性肽研究进展

豆类蛋白源活性肽具有抗氧化、血管紧张素转化酶（angiotensin I-converting enzyme,ACE）抑制、二肽基肽酶-IV（dipeptidyl peptidase-IV,DPP-IV）抑制和抗炎等活性,在防治高血压和糖尿病等慢性疾病中起积极作用,对维护人体健康具有重要意义。该文就目前国内外豆类蛋白源活性肽的酶法制备及其活性予以综述,并对其发展趋势进行展望,旨在为健康功能性食品的研究与开发提供参考。     

响应面法优化辣木籽降糖肽的酶法制备工艺及其体外活性评价

为提升辣木籽资源利用度,采用酶法制备辣木籽降糖肽。以蛋白水解度和α-葡萄糖苷酶抑制率为指标,通过单因素实验筛选和响应面法优化最佳的酶解时间、液料比、酶解pH、酶添加量和酶解温度,通过超滤粗分离酶解液制备分子量＜3 kDa的降糖肽,并通过MTT法分析其对人肝癌细胞（HepG2细胞）的抑制作用。结果表明,酶法制备辣木籽降糖肽的最佳酶解时间为4.6 h、液料比40.5:1、pH为8.3、酶添加量5.5%、温度55 ℃,该条件下酶解产物的α-葡萄糖苷酶抑制率为23.62%±0.14%。超滤组分中分子量<3 kDa组分的α-葡萄糖苷酶抑制率为IC₅₀值为5.56 mg/mL,当其质量浓度为300 μg/mL时,作用于HepG2细胞48 h后能显著抑制HepG2细胞的增殖（P<0.05）。研究可为辣木籽降糖肽的进一步分离纯化奠定基础。     

乳清蛋白及其生物活性肽调节血糖功能研究进展

乳清蛋白及其生物活性肽具备多种保健功能,其调节血糖的功效受到关注,且乳清蛋白已被证实具有延缓2型糖尿病的功效。糖尿病是当今全球十大致死疾病之一,而90%的糖尿病患者所患为2型糖尿病。生活方式干预和药物营养治疗是当下治疗糖尿病的重要手段。前人的研究表明乳清蛋白及其生物活性肽调节血糖机理包括改善胰岛素抵抗、抑制α-葡萄糖苷酶活性、促进肠促胰素分泌等。本文综述了乳清蛋白及其生物活性肽调节血糖的作用及其调节血糖可能机制的研究进展,归纳了乳清蛋白源二肽基肽酶-IV抑制肽的相关研究,以期为乳品行业革新提供参考。     

生物活性肽降血糖功能的研究进展

糖尿病严重危害着人类的健康,全球患病人数已超过2亿。近年来,人们从动植物、昆虫以及人体中提取得到具有降血糖活性的多肽类物质,与传统治疗糖尿病的药物相比,其生物活性高,副作用小,有望开发成为预防或治疗糖尿病的功能食品或药物。本文分类介绍一些具有降血糖功能的生物活性肽,以及国内外的研究进展和应用。     

食源性DPP-IV抑制肽降血糖作用机制研究进展

随着全球糖尿病患者人数的逐年增加,传统的药物治疗方法面临严峻挑战。研究发现,饮食干预是辅助治疗糖尿病的一种有效手段。食物中的蛋白质经酶解后可产生多种生物活性肽。其中,与糖尿病防治密切相关的二肽基肽酶-IV（Dipeptidyl peptidase-IV, DPP-IV）抑制肽已从鱼类等多种食物的酶解液中被发现。海洋生物种类丰富,是制备功能性食品的重要原料来源。本文综述了食源性DPP-IV抑制肽降糖的作用机制,特别是海洋生物来源的DPP-IV抑制肽的研究进展,旨在为开发基于DPP-IV抑制肽的功能性食品提供参考。     

动物源性食品中氨苄青霉素残留检测研究进展

近年来,食品安全事件频繁发生,严重威胁着社会公共健康。中国养殖业中普遍使用抗生素来降低畜禽致死率,促进畜禽生长,造成动物源性食品中的抗生素残留问题。因此检测动物源性食品中的抗生素残留是控制食品安全的关键环节。常用的抗生素残留检测方法主要有微生物法、仪器分析法、免疫分析法、生物传感检测等检测技术。对氨苄青霉素残留的检测方法进行综述,分析各种方法的利弊,为进一步开发动物源性食品中氨苄青霉素残留检测技术提供依据。     

胶原蛋白生物活性肽的研究进展

本文介绍了胶原蛋白的结构，综述了胶原蛋白生物活性肽的多种生物活性，包括抑制血管紧张素转换酶、抗氧化、抑制血小板凝结和抗肿瘤活性等，并对胶原蛋白生物活性肽的开发应用前景作了展望.     

基于文献计量分析的动物源活性肽领域的态势分析

为深入了解国内外动物源活性肽的研究现状和热点,基于中国知网(CNKI)和Web of Science核心合集(SCI-E)数据库,采用文献计量学理论和可视化分析技术,对2016～2020年期间发表的研究文献进行分析.通过收集的1005篇中文文献和2063篇英文文献,从文献时序性、发文国家及合作关系、研究机构、期刊分布和...     

抗氧化肽的研究进展

来源于食物蛋白的抗氧化肽,因其天然、无毒而越来越受到人们的重视。对目前国内外抗氧化肽的原料来源、制备方法和抗氧化作用机理的有关文献进行综述,并简要介绍其未来的发展方向,以期为抗氧化肽的进一步研究提供参考。     

木姜叶柯降血糖作用研究进展

木姜叶柯俗称甜茶,具有降血糖、降血脂、抗氧化、抗炎及抗肿瘤等作用,2017年被审批为新资源食品。研究表明,根皮苷、根皮素、三叶苷等二氢查尔酮是木姜叶柯主要的活性成分,被证实具有降血糖作用。糖尿病是一种常见的,以持续性高血糖为主要特征的慢性代谢性疾病,现有降血糖药物应用有一定的限制条件,且伴有各种副作用。木姜叶柯作为一种天然资源且具有长期饮用的降血糖应用基础,极具研究和开发价值。该研究探讨了木姜叶柯甜味的主要来源与其能量低的显著特点,并综述了降血糖作用。进一步从胰岛素抵抗、葡萄糖转运、调控酶类活性、抗氧化防御和糖尿病并发症等方面总结了木姜叶柯的降血糖作用及其作用机制,并分析了目前木姜叶柯研究存在分子靶点不明确、研究内容单一等问题。最后,对木姜叶柯相关潜在分子机理进行了展望,为木姜叶柯降血糖作用及高值化应用研究提供了理论依据。     

褐藻降血糖活性物质的研究进展

糖尿病,一种不再与富裕有关的疾病,在全球范围内呈上升趋势,其分布范围广和伴随的高危并发症,严重影响着人类健康与发展.目前,从海洋中寻找其有效药物是一种趋势,尤其是海洋藻类,具有较高的降血糖活性.综述降血糖海藻的物质多样性和鉴定方式,以期为海洋降血糖药物和保健品的开发提供依据.     

食品和饲料中动物源性成分检测技术研究进展

近年来,肉、奶等食品中“掺杂使假”的投诉事件不断上升,疯牛病的传播风险也在不断加大,作为保障食品安全、维护缴费者利益的重要技术手段,食品和饲料中动物源性成分的定性或定量检测技术已成为国内外的研究热点,适用于各种样品、基于各种原理的方法和技术被开发出来。本文综述基于蛋白质和DNA特异性建立的动物源性成分检测技术类型和研究现状,并对其发展趋势进行讨论。     

植物多酚降血糖机制的研究进展

多酚类化合物是植物的次生代谢产物,广泛存在于自然界中,包括黄酮类化合物、单宁、绿原酸等。研究表明,经常摄入富含多酚类化合物的蔬菜、水果和饮料可以减缓心脑血管疾病、糖尿病、肥胖等慢性代谢疾病甚至癌症的发生和发展。本文从植物多酚可以通过促进胰岛素合成与分泌、抑制葡萄糖转运、调节肠道菌群等方面对血糖起调节作用进行论述,以期为植物多酚降血糖功能提供理论依据。