肿瘤DNA含量与p53,p21,p16,Rb基因异常表达的肿瘤生物学特性

背景p53,Rb,p16和p21蛋白是肿瘤相关基因产物,其异常表达在细胞周期的不同阶段直接或间接影响着肿瘤的形成和发展,DNA倍体异常也是肿瘤细胞周期频发事件,而肿瘤细胞DNA倍体与P53,Rb,P16和P21蛋白异常表达关系间的研究鲜见报道.目的研究流式细胞仪(FCM)检测肿瘤组织DNA倍体与多种癌相关基因蛋白p53,Rb,p16和p21异常表达的意义.设计以诊断为依据设立对照的前瞻性研究.地点和对象实验地点江苏省肿瘤防治研究所,实验对象30例女性癌症患者,其中卵巢癌10例,乳腺癌20例,平均年龄55岁.干预对30例卵巢癌和乳腺癌瘤体中心灶进行3点取样,应用FCM检测DNA倍体及p53,Rb,p16和p21异常表达.主要观察指标肿瘤组织DNA倍体及p53,Rb,p16和p21蛋白阳性细胞百分率.结果瘤灶多点取样法可检测出90%(27/30)的异倍体;不同倍性的肿瘤普遍存在程度不同地p53,Rb,p21和p16基因蛋白异常表达.96.7%(29/30)的肿瘤存在至少一种以上癌相关基因(p53,Rb,p16,p21)异常表达.结论DNA异倍体与多种癌相关基因蛋白异常表达均是肿瘤恶性指标,FCM同步检测这些指标,为快速了解肿瘤细胞生物学特性、把握患者l临床治疗及预后提供了良好途径.     

肿瘤抑制基因p53.p16与脑肿瘤

探索肿瘤抑制基因ｐ５３、ｐ１６变异在脑肿瘤发病中的意义。方法２３例脑肿瘤病人原发肿瘤标本用免疫组化ＬＳＡＢ法行肿瘤抑制基因Ｐ５３Ｐ１６蛋白检测。结果：星形细胞瘤Ⅰ级９例，ｐ１６蛋白４例表达３０％以下，５例不表达，ｐ５３蛋白３例表达３０％以下。     

肿瘤抑制基因p53·p16与脑肿瘤

目的：探索肿瘤抑制基因ｐ５３、ｐ１６变异在脑肿瘤发病中的意义。方法：对２３例脑肿瘤病人原发肿瘤标本用免疫组化ＬＳＡＢ法行肿瘤抑制基因ｐ５３、ｐ１６蛋白检测。结果：星形细胞瘤Ⅰ级９例，ｐ１６蛋白４例表达３０％以下，５例不表达，ｐ５３蛋白３例表达３０％以下，６例不表达；Ⅱ～Ⅳ级７例，ｐ１６蛋白１例表达３０％以下，６例不表达，ｐ５３蛋白４例表达３０％～６０％，３例不表达；脑膜瘤、垂体腺瘤７例，ｐ１６蛋白３例表达３０％以下，４例不表达，ｐ５３蛋白２例表达３０％以下，５例不表达；结论：ｐ５３、ｐ１６蛋白缺失、变异是肿瘤发生的重要原因之一，ｐ５３变异主要见于恶性胶质细胞瘤，偏良性的胶质细胞瘤和脑膜瘤、垂体瘤，ｐ５３蛋白轻度阳性表达，提示肿瘤可能处于早期恶性变过程中。ｐ１６蛋白缺失多见于恶性胶质瘤，也见于部分良性肿瘤。     

食管鳞癌中p16、p53及Rb基因蛋白的表达及意义

1　对象和方法1.1　对象　收集我院病理科 1995～ 1998年中段食管癌手术切除蜡块 4 2例 ,男 2 4例 ,女 18例 ,年龄 35～ 73岁 ,平均年龄 5 1岁。全部病例病理证实为食管鳞状上皮细胞癌 ,其中 2 4例伴有淋巴结转移 ,18例不伴淋巴结转移。另取 10例非肿瘤病死亡后食管等组织作为正常组织对照。1.2　方法　鼠抗人 p16及 p5 3蛋白单克隆抗体 (DO- 1)和鼠抗人 Rb单克隆抗体购自 Santa Cruz生物技术公司 ,鼠抗 Ig G购自中山生物技术公司。采用免疫组织化学 S- P方法 ,实验中同时设阳性阴性对照。1.3　结果判定及统计处理　 1细胞阳性是指细胞…     

子宫内膜癌癌基因ras产物p21,抑癌基因p53蛋白及DNA含量的…

了解子宫内膜癌癌基因表达与其细胞周期动力学的关系，应用流式细胞术和细胞免疫荧光技术对４３例子宫内膜癌标本的癌基因ｒａｓ产物ｐ２１抗癌基因ｐ５３表达及ＤＮＡ含量进行了定量检测。结果表明，异倍体肿瘤的ＤＩ，ＳＰＦ，ＰＩ及ｐ２１表达阳性率显高于二倍体肿瘤（Ｐ〈０．０１～０．０５）；ｐ２１表达阳性肿瘤的ＳＰＦ，ＰＩ明显高于阴性组（Ｐ〈０．０５）；ｐ２１与ｐ５３表达呈直线正相关（ｒ＝０．０３，单侧Ｐ〈０．０     

端粒酶、p21、p53与原发性胆囊癌关系

目的　探讨端粒酶、p2 1和 p53在原发性胆囊癌的发生、转移和浸润中的作用及相互关系。方法　我们应用 TRAP- PCR和免疫组织化学方法对原发性胆囊癌中端粒酶、p2 1和 p53表达进行检测。结果　 1原发性胆囊癌端粒酶、p2 1和 p53阳性表达率为 84.8%、47.8%和 71 .7%。 2端粒酶、p2 1和 p53在胆囊癌旁粘膜阳性表达率为 4.6%、94.5%和 94.5%。 3癌细胞浸润越深 ,端粒酶 p2 1和 p53阳性表达率越高。 4淋巴结转移 ,端粒酶阳性表达率为 1 0 0 % ,而 p2 1和 p53为 2 2 .7%和 63.6%。结论　端粒酶、p2 1和 p53阳性表达与胆囊癌的浸润及在胆囊癌形成和对周围组织浸润 ,淋巴结转移可能起重要作用     

肿瘤抑制基因p16研究进展

p16基因又称多重肿瘤抑制基因(MISI)，是新近发现的重要抑癌基因。本就其研究进展作一综述。     

子宫内膜腺癌的p21ras,p53的表达及意义

应用免疫组化LSAB法对33例原发性子宫内膜腺癌进行p21ras、p53的检测，结果显示子宫内膜腺癌p21ras表达为51．5％，p53表达为78．8％，p21ras和p53在正常子宫内股无表达，说明p21ras和p53在子宫内膜腺癌的表达较特异。本研究显示p53与子宫内膜腺癌的病理分级有关（P＜0．05），p21ras与转移及临床分期有关（P＜0．05）。在子宫内膜腺癌中，p53的表达与p21ras的表达之间呈显著相关（P＜0．01）。另外发现随着肿瘤分化越差p21ras、p53阳性率增加。本研究提示子宫内膜腺癌的发生、发展，与p21ras、p53有关，p21ras、p53可作为诊断子宫内膜腺癌的参考指标。     

抑瘤基因p53、p16在脑肿瘤中的表达及意义

目的探索肿瘤抑制基因p53、p16变异在脑肿瘤发病中的意义。方法对23例脑肿瘤人病原发肿瘤标本用免疫组化LSAB法行肿瘤抑制基因p53、p16蛋白检测。结果星形细胞瘤Ⅰ级9例,p16蛋白4例表达30%以下,5例不表达,p53蛋白3例表达30%以下,6例不表达;Ⅱ~Ⅲ级7例;p16蛋白1例表达30%以下,6例不表达,p53蛋白4例表达30%~60%,3例不表达;脑膜瘤、垂体瘤7例,p16蛋白3例表达30%以下,4例不表达,p53蛋白2例表达30%以下,5例不表达。结论p53、p16蛋白缺失、变异是肿瘤发生的重要的原因之一,p53变异主要见于恶性胶质细胞瘤,偏良性的胶质细胞瘤和脑膜瘤、垂体瘤,p53蛋白轻度阳性表达,提示肿瘤可能处于早期恶性变过程中。p16蛋白缺失多见于恶性胶质瘤,也见于部分良性肿瘤。     

p16基因与肿瘤研究进展

ｐ１６基因与肿瘤研究进展徐刚综述梁传余审校华西医科大学附属第一医院耳鼻喉科作为一种新的抑癌基因，ｐ１６基因在近年的研究越来越多，成为许多学者关注的焦点。本文对ｐ１６基因与肿瘤有关的几方面研究的最新进展综述如下。１结构与作用机制Ｓｔｅｖｅｎ〔１〕分析发...     

野生型p16和p53抑癌基因共转染对 K562细胞增殖的抑制作用

抑癌基因p16和p53在抑制肿瘤的发生中起重要作用，在髓细胞白血病细胞系K562中检测出这两种基因有纯合缺失。为探讨野生型p16和p53基因的转染与表达对K562细胞的生长影响，采用了脂质体介导外源野生型p16和p53共转染K562细胞，用免疫细胞化学染色检测p16和P53基因的表达，检测细胞生长曲线，采用流式细胞术进行细胞周期分析。结果显示，共转染后p53和p16在K562细胞中表达阳性率分别为23％和28％；细胞生长受到一定程度的抑制，G1期细胞的比例增加，S期细胞减少，与单独转染p53或p16基因的抑制作用有明显差别(P＜0.05)。结论：外源野生型p16和p53基因的共转染比转染单基因对K562细胞生长有更明显的抑制作用，有可能成为白血病基因治疗的一种方法。     

卵巢癌中P21蛋白的表达

P2 1 WAF1/CIP1(简称P2 1 )是细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白家族成员,参与细胞的生长、分化、衰老及死亡[1～3] 。现采用链霉素亲和生物素S P免疫组化法回顾性研究P2 1蛋白在卵巢癌、卵巢良性肿瘤及正常卵巢中的表达,探索其与卵巢癌发生的关系。资料与方法1 .患者来源:1 990年1月～1 999年1 2月因卵巢癌住院行手术切除之标本,石蜡封固后病检证实为卵巢上皮癌5 0例,同期切除卵巢良性肿瘤2 0例,其他疾病切除正常卵巢1 2例。2 .年龄及孕产次:年龄32～78岁,4 0岁以上者占70 % ,3产以上1 4例,1～2产31例,5例未育。3.临床分期:按国际妇产科…     

p16基因异常与胰腺肿瘤

胰腺腺癌 (PC)在西方为常见的消化系统肿瘤之一。由于缺乏特异的早期临床症状与胰腺的较深的解剖位置 ,使得大部分患者就诊时已处于晚期 ,多数病人已出现局部播散或远处转移。在美国 ,胰腺癌位于癌症死亡原因中第五位[1 ] 。过去的十年间 ,胰腺癌发生相关基因的研究取得了较大进展。目前认为 ,胰腺癌是一种基因疾病 ,此病的进展是由于胰管腺上皮细胞分子异常的逐渐积累 ,有多种基因与胰腺癌的发生有关 ,p1 6基因是其中较常见及重要的一个 ,通过多种途径失活从而导致肿瘤发生。本综述旨在从分子生物学的角度认识胰腺癌的发生发展机制 ,寻找…     

慢性脑低灌注状态缺血再灌注后大鼠海马P21和P53蛋白的表达

目的：通过建立大鼠慢性脑低灌注模型。观察慢性脑低灌注状态下正常脑灌注压恢复过程中P21和P53蛋白的表达情况。方法：实验于2003-12／2004-12在锦州医学院动物实验中心进行。取Ⅱ级Wistar雄性大鼠60只，随机分为对照组、模型不灌注组和模型再灌注组：每组动物按正常灌注压恢复后不同时间点分组(12，24，48，72h组)，每个时间点各5只。采用右侧颈外静脉-颈总动脉端侧吻合和对侧横窦引流静脉结扎的方法，建立慢性脑低灌注动物模型，术后90d阻断颈部动静脉分流造成模型组大鼠脑组织再灌注。各组在恢复正常灌注后12，24，48，72h取材，应用免疫组化和显微图像分析方法检测慢性脑低灌注状态下正常脑灌注压恢复过程中大鼠海马P21和P53蛋白的表达。结果：P21和P53蛋白在对照组大鼠脑组织中无表达．48h灰度值分别为155．34&;#177;1．18和172．91&;#177;1．37；在模型不灌注组中弱表达，48hP21和P53蛋白分别为125.12&;#177;3．56和112.10&;#177;4．46；在模型再灌注组大鼠脑组织中P21和P53蛋白于术后12h开始有表达，48h达高峰，分别为53．32&;#177;2．84和54．12&;#177;0．34，随后逐渐降低。结论：慢性脑低灌注状态下，正常脑灌注压恢复过程中可诱导P21和州P53蛋白的表达。     

抑癌基因p16在喉癌中的表达及临床意义

目的 探讨抑癌基因ｐ１６与喉癌的生物学行为的关系。方法 采用免疫组织化学法检测３９例喉癌中ｐ１６基因表达情况。结果 喉癌组织ｐ１６阳必表达率６６．７％,ｐ１６蛋白的阳性率在鳞癌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级中分别为１００％、６４．７％、５０％,显示ｐ１６蛋白表达阳性率随喉癌的病理分级的上升而降低,ｐ１６阳性与阴性组之间的１～５年的生存率则无明显差异．结论 抑癌基因ｐ１６的表达与肿瘤的类型有关,百喉癌预后好于其它肿瘤     

食管癌p53、p21和nm23基因表达的免疫组化研究

癌抑制基因p53是细胞生长控制的主要生化调节因子[1],它的异常或突变可能与肝癌、食管癌等发生和发展密切相关[2,3].p21癌基因能诱导肿瘤的形成,已发现在肺癌、结肠癌和食管癌中均有表达[3,5,6].     

白血病的p53基因研究

对４０例不同类型的白血病和骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）患者进行ｐ５３基因的ＤＮＡ印迹杂交分析和ｐ５３蛋白的免疫组化染色，发现４例有ｐ５３基因结构异常，主要聚集在ＡＭＬ－Ｍ５亚型；１３例有ｐ５３蛋白高表达，与白血病类型，患者预后无直接关系。     

p53基因与骨肉瘤治疗及其预后的相关性

骨肉瘤的发生是多基因、多步骤、多阶段、多重损伤并存的过程，众多情况下认为是由于细胞核DNA分子受破坏，细胞不能修复受损的DNA分子，其继续存在并复制可激活癌基因和(或)抑癌基因异常，发展成为骨肉瘤。在细胞抑癌基因中p53基因研究最广泛，50％人类肿瘤与p53基因突变有关。动物试验证实：存在p53基因突变的转基因鼠中除了淋巴瘤和肺腺癌外，骨肉瘤的发生率最高。p53基因的突变和失活影响着骨肉瘤的发生、发展、预后。随着少数p53基因治疗进入临床实验阶段，目前p53的基因治疗研究也出现了一些新的策略。随着分子生物学手段的不断发展和完善，基因治疗的安全性和有效性的提高，p53基因治疗将在骨肉瘤的治疗中体现出不可估量的作用。     

抑癌基因p53与p16及PCNA蛋白在皮肤增生期血管瘤中的表达及其对血管内皮细胞的干预

目的：应用免疫组化法检测抑癌基因p16，p53及DNA聚合酶8的辅助蛋白PCNA在增生期血管瘤中的表达，及其对血管内皮细胞的影响。方法：实验选取2001-01／2005-04北京世纪坛医院病理科收集的手术切除皮肤增生期血管瘤组织标本36例作为增生期血管瘤组（患者术前均未经任何辅助性治疗），以痔静脉标本30例作为痔静脉对照组。患者均知情同意。①两组标本切片均采用DAKO Envisions二步法进行免疫组化处理。切片以体积分数为0．03的过氧化氢消除内源性过氧化物酶，微波法抗原修复，92-95℃于pH6．0枸盐酸缓冲液浸泡10min；室温冷却10min，双蒸水洗涤，pH7．2磷酸盐缓冲液浸泡5min；体积分数为0．1的山羊血清（磷酸盐缓冲液稀释）封闭，去血清。加入Ⅰ抗，37℃浸泡30min；pH7．2磷酸盐缓冲液冲洗；Envision孵育，37℃下放置30min；二氨基联苯胺显色，苏木精复染后，脱水、透明、封固。免疫组化阴性对照以磷酸盐缓冲液代替Ⅰ抗，其他步骤维持不变，以确认试剂质量及控制染色效果。②p16，p53阳性信号为棕黄色，以内皮细胞浆和／或核染成棕黄色为阳性细胞。阴性对照除细胞核染成蓝色外，无棕黄色反应物。血管内皮细胞核内见棕黄色颗粒者为PCNA蛋白染色阳性。采用CMIAS高清晰彩色病理图像分析系统分别对两组切片p53，P16及PCNA蛋白的表达进行图像检测，测定每个视野下p16和p53阳性细胞的平均吸光度以及PCNA蛋白阳性表达指数。结果：实验选取手术切除皮肤增生期血管瘤组织标本36例，痔静脉标本30例，全部进入结果分析。①两组p53阳性表达检测及平均吸光度的比较：增生期血管瘤组内皮细胞核内有较多棕黄色颗粒，p53表达强；痔静脉对照组血管内皮细胞核内无棕黄色颗粒沉积，p53表达极弱。增生期血管瘤组p53阳性表达的平均吸光度明显强于痔静脉对照组（6．423&;#177;1.415，1．036&;#177;0．131，P〈0．05）。②两组p16阳性表达检测及平均吸光度的比较：两组切片组织中除细胞核着色外，部分细胞浆有着色。p16的阳性表达在增生期血管瘤组和痔静脉对照组中基本相同，平均吸光度分别为1．241&;#177;0．373和1．206&;#177;0．267。③两组PCNA蛋白阳性表达指数的比较：PCNA蛋白阳性表达的细胞光镜下可见核内弥漫分布细小的棕黄色颗粒，这些内皮细胞围成血管腔及团块状，核椭圆，体积较大。增生期血管瘤组PCNA蛋白阳性表达指数明显高于痔静脉对照组（67．40&;#177;8．79，38．41&;#177;9．89，P〈0．01）。结论：抑癌基因p53在增生期血管瘤组织中呈高表达，能够促进血管内皮细胞的增殖，但p16的表达与血管内皮细胞增殖的关系不明显。此外PCNA蛋白可作为增生期血管瘤的可靠标志物。     

鼻咽癌颅底侵犯的MRI表现及与p53、p16蛋白表达的关系

目的 观察鼻咽癌(NPC)颅底骨侵犯的MRI特征及其与p53、p16蛋白表达的关系.方法 对150例NPC患者和20例鼻咽炎症患者行鼻咽部MR平扫和增强扫描,并采用免疫组化SABC法检测蛋白质p53和p16的表达.结果 MRI发现颅底骨侵犯63例,其中溶骨性破坏29例,成骨改变13例,混合性破坏9例,骨髓浸润10例.沿神经侵犯2例.破坏部位最多见于斜坡(42例).NPC及鼻咽炎症中p53、p16蛋白表达率差异有统计学意义(P<0.001).p53蛋白表达与分化程度、颅底骨质侵犯相关(P<0.001),形成溶骨性颅底破坏的NPC组织与仅有颅底骨成骨改变者中p53蛋白表达率分别为93.10%(27/29)、61.54%(8/13),差异有统计学意义(P<0.05).p16蛋白表达与颅底骨质侵犯无关.结论 p53蛋白表达与NPC颅底侵犯有一定相关性.成骨改变可能是反应性骨改变,颅底骨质破坏形式可以反映p53蛋白的表达情况.