实验性精索静脉曲张对大鼠同侧睾丸的影响

目的:利用大鼠动物模型来研究实验性精索静脉曲张(EV)对其同侧睾丸的影响。方法:EV模型的制作是通过在雄性SD大鼠左侧精索内静脉和肾上腺静脉内侧部分结扎左肾静脉。60只雄性青春期SD大鼠随机分为EV持续6、12、18周组(EV6、EV12、EV18组,每组12只)和相应的接受假手术的对照组(每组8只)。于6、12、18周,摘取成功复制成EV模型大鼠(分别为10,8,9只)以及各自接受假手术的对照组大鼠左侧睾丸,检测其Johnsen's评分、生精小管超微结构、睾丸组织睾酮浓度(ITC)和生精细胞的凋亡指数(AI)。结果:EV6、EV12、EV18组Johnsen's评分(6.92±0.52,4.83±0.41,2.95±0.26)和ITC(6.32±0.85,5.17±0.76,4.11±0.69)均显著低于各自对照组[(9.56±0.35,9.63±0.31,9.39±0.46)和(9.64±1.23,9.38±0.69,9.73±0.49)](P<0.05),并且随着精索静脉曲张持续时间的增加而逐渐降低;EV6、EV12、EV18组AI(5.32±1.23,15.21±0.97,21.13±1.12)显著高于各自对照组(3.21±1.15,3.43±1.21,3.61±1.15),并且随着精索静脉曲张持续时间的增加而逐渐升高;各EV组生精小管的超微结构损伤也随着精索静脉曲张持续时间的增加而逐渐严重。结论:EV导致同侧睾丸ITC下降、生精功能的进行性损害、生精细胞AI增加。     

实验性精索静脉曲张大鼠睾丸组织IL-1和NO的变化

目的 :研究精索静脉曲张 (VC)对大鼠睾丸组织中IL 1和NO含量的影响。　方法 :采用部分结扎左肾静脉及左髂总静脉之间的交通支 ,制备Wistar大鼠VC模型。将大鼠随机分为手术结扎组 (VC组 ,n =30 )和假手术组 (n =2 0 ) ,分别测定 2组大鼠睾丸组织中IL 1和NO的含量 ,并加以比较。　结果 :①IL 1、NO含量在左侧睾丸组织中VC组均显著高于假手术组 (P <0 .0 1) ,而在右侧睾丸组织中 2组比较差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;②IL 1与NO呈正相关关系 (r =0 .5 72 ,P <0 .0 1)。　结论 :VC时睾丸组织IL 1和NO的变化 ,可能是造成睾丸损伤、精子发生障碍甚至不育的原因     

实验性精索静脉曲张对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响

目的 :探讨大鼠精索静脉曲张对睾丸生精细胞凋亡的影响 ,阐明精索静脉曲张引起不育的病理机制。　方法 :选用雄性SD大鼠 32只 ,随机分为假手术组、4 5d模型组、6 0d模型组及 90d模型组。采用肾静脉缩窄法建立精索静脉曲张动物模型 ,流式细胞术分别检测各组大鼠睾丸凋亡细胞数及各级生精细胞数。　结果 :假手术组未出现明显的凋亡峰 ,各模型组均出现明显的凋亡峰 ,且随着造模时间的延长凋亡峰增高。　结论 :精索静脉曲张可引起睾丸生精细胞大量凋亡 ,各级生精细胞数减少 ,这可能是精索静脉曲张引起睾丸生精功能障碍从而导致不育的根本机制     

精索静脉曲张大鼠睾丸组织HIF-1α、VEGF、iNOS的表达及意义

目的:检测HIF-1α、VEGF及iNOS在实验性精索静脉曲张(VC)大鼠睾丸组织中的表达,探讨精索静脉曲张导致男性生育力低下的病理生理学机制。方法:用SD雄鼠制造VC模型。36只SD雄性大鼠分为对照组(n=10)、假手术组(n=11)和VC组(n=15),造模后30天行左侧睾丸切除,用免疫组织化学方法检测睾丸组织中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达。结果:HIF-1α、VEGF和iNOS在VC组睾丸组织中的表达均上调,明显高于对照组和假手术组(P<0.05)。结论:青春期实验性VC大鼠的左侧睾丸组织存在低氧。低氧引起HIF表达并激活其下游基因表达,是精索静脉曲张一系列病理生理学改变的可能基础。NO表达上调与间质细胞中iNOS的激活有关。     

实验性精索静脉曲张对大鼠前列腺氧化应激作用的影响

目的探讨实验性精索静脉曲张(VC)对大鼠前列腺氧化应激作用的影响。方法雄性Wistar大鼠24只建立左侧VC模型作为实验组,18只行假手术作为对照组,手术后4、8和16周取前列腺,测定前列腺组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性及丙二醛(MDA)含量,RT-PCR法检测CuZn-SOD及GPx mRNA表达。结果手术后4周,实验组SOD、GPx活性、MDA含量及GPx mRNA水平与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05),而CuZn-SODmR-NA水平实验组(0.366±0.085)显著高于对照组(0.221±0.043)(P<0.05);手术后8周,SOD、GPx活性(25.61±4.06、7.07±1.35)在实验组均显著低于对照组(31.74±3.82、8.74±1.07)(P<0.05),而CuZn-SOD mRNA、GPx mRNA水平及MDA含量均显著高于对照组(P<0.05);手术后16周,SOD、GPx活性实验组(23.88±3.79、6.53±1.12)均显著低于对照组(39.46±4.39、9.05±1.34),MDA含量实验组(4.26±1.61)显著高于对照组(2.35±0.85)(P<0.05),CuZn-SOD mRNA、GPx mRNA水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论实验性VC引起大鼠前列腺活性氧水平升高及抗氧化酶活性降低,可能是VC导致不育的原因之一。     

补肾活血方对实验性精索静脉曲张大鼠睾丸Bcl-2、Fas、FasL表达的影响

目的观察精索静脉曲张模型大鼠睾丸组织凋亡相关基因Bcl-2、Fas与FasL的表达情况，以及补肾活血方对这些基因表达的影响。方法将50只3月龄雄性SD大鼠先随机抽出10只为假手术组，其余40只大鼠采用肾静脉缩窄法建立精索静脉曲张病理模型，造模完成后再随机均分为模型组、补肾活血方低剂量组、中剂量组、高剂量组。造模完成后48d开始给药，连续给药60d，用免疫组织化学法检测各组大鼠睾丸组织凋亡相关基因Bcl-2、Fas、FasL的表达。结果模型组大鼠睾丸组织Bcl-2蛋白表达下降，Fas、FasL蛋白表达上升：补肾活血方低、中、高剂量组睾丸组织Bcl-2蛋白表达显著上升，Fas、FasL蛋白表达显著下降。结论补肾活血方可上调抑凋亡基因Bcl-2的表达，下调促凋亡基因Fas、FasL的表达，这可能是补肾活血方抑制生精细胞凋亡，改善精索静脉曲张性不育患者生精功能的机制。     

实验性精索静脉曲张对大鼠睾丸和附睾中血管内皮生长因子及其受体1表达的影响

目的:研究实验性左侧精索静脉曲张(ELV)对青春期大鼠睾丸、附睾中血管内皮生长因子(VEGF)及其受体fms样酪氨酸激酶(Flt-1)蛋白表达的影响。方法:建立青春期雄性SD大鼠ELV模型,采用免疫组化SP法检测VEGF和Flt-1在ELV组及假手术对照组睾丸、附睾组织中的表达变化。结果:VEGF和Flt-1蛋白在ELV组和对照组大鼠睾丸、附睾中均有表达,其定位和表达量具有细胞特异性和区域特异性。经图像分析和统计检测显示,ELV2周和4周组双侧睾丸和附睾中VEGF蛋白的表达与相应对照组比较均显著增加(P<0.01和P<0.05);ELV2周组双侧睾丸和附睾中Flt-1蛋白的表达与相应对照组比较也显著增加(P<0.01和P<0.01),但4周时在双侧睾丸和左侧附睾中Flt-1蛋白的表达显著下降(P<0.01和P<0.05),而右侧附睾未见明显差异(P>0.05)。结论:实验性精索静脉曲张可造成青春期大鼠睾丸、附睾中VEGF和Flt-1的表达量变化,该变化可能会影响精子的发生和成熟,因而可能是VC引起男性生育力下降甚至不育的原因之一。     

大鼠精索静脉曲张睾丸组织的蛋白质组学研究

目的精索静脉曲张是男性不育的首要病因,本课题利用蛋白组学技术筛选精索静脉曲张大鼠睾丸中表达变化显著蛋白,探索精索静脉曲张引起不育的可能分子机制。方法雄性Wistar大鼠16只,随机分为对照组和精索静脉曲张实验组。实验组大鼠施行左肾静脉部分结扎术来诱导产生精索静脉曲张,对照组行假手术作为阴性对照。30d后,收集全部大鼠的左侧睾丸。采用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记（Tunel）法检测两组大鼠生精细胞凋亡情况,进而比较两组生精细胞的凋亡指数。利用双向凝胶电泳技术（2-DE）寻找两组大鼠睾丸中表达有显著性差异的蛋白质点,然后进行基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱鉴定（MALDI-TOFMS）。结果双向凝胶电泳结果显示21个蛋白质点在两组间存在显著性差异。在精索静脉曲张大鼠睾丸中有8个蛋白质点表达上升、13个下降,这些蛋白功能涉及蛋白质合成、加工、降解,基因表达调控,信号转导,能量代谢,凋亡,自由基代谢等。Tunel证实实验组大鼠睾丸中生精细胞凋亡指数显著高于对照组,且本实验筛选出14—3—3e、hnRNPF以及LZTFL1三种蛋白与凋亡相关。结论蛋白组学筛选出精索静脉曲张大鼠睾丸差异表达蛋白,并进一步证实精索静脉曲张促进睾丸生精细胞凋亡,其中相关凋亡蛋白对揭示精索静脉曲张引起男性不育的分子机制提供了可能。     

Experimental production of varicocele and its effect on testes

Parital obstruction of left renal vein leads to production of varicocele in a fairly short period, i.e.; even within a month. Collateral venous channels play an important role in the formation and degree of varicocele. Varicocele has got a depressive effect on the spermatogenesis on the side of varicocele as well as on opposite testes. Leydig cells and interstitial tissue flourish at the expense of gonadal elements. The factors affecting the spermatogenesis are different from those of other tissues of the testes.     

生精冲剂对精索静脉曲张大鼠睾丸生精功能保护作用的研究

目的探讨生精冲剂对精索静脉曲张睾丸损伤的保护作用。方法观察生精冲剂对实验性精索静脉曲张大鼠睾丸组织结构、超微结构的影响。测定各组实验大鼠睾丸超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、乙酰胆碱脂酶(ACE)活性和脂质过氧化物(LPO)、一氧化氮(NO)含量。结果治疗组鼠睾丸组织结构与超微结构的损害程度明显低于模型组,SOD、CAT、ACE活性测定值明显高于模型组,LPO、NO含量明显低于模型组(P<0.01)。结论生精冲剂对精索静脉曲张造成的睾丸损害有保护作用,其提高精子质量和生育率的机制可能与抗脂质过氧化和增强抗氧化酶活性有关。     

Apoptosis-related proteins in the testes of infertile men with varicocele

OBJECTIVES: To assess immunohistochemically the expression of apoptosis-related proteins in the testes of infertile men, to determine which of these proteins were related to hypospermatogenesis, as a previous report suggested that apoptosis was suppressed in infertile men with varicocele. MATERIALS AND METHODS: The expression of Bcl-2, Bax, caspase-1 (ICE) and caspase-3 (CPP32) were examined in bilateral testicular specimens from 26 infertile men with varicocele and six normal testicular specimens, using the avidin-biotin-peroxidase complex method. Clinical variables were also assessed. RESULTS: Bax, ICE, and CPP32 were expressed in germ cells, while Bcl-2 was not. Differences in staining in left or right testes were not significant. In both testes of infertile patients with varicocele, significantly fewer germ cells stained for CPP32 than in controls (P < 0.001). For Bax and ICE, total germ cell staining was similar between these groups. Staining was less frequent in infertile patients for both CPP32 and ICE when the analysis was restricted to spermatogonia. Serum luteinizing hormone levels correlated positively with CPP32 staining (P = 0.0457). CONCLUSIONS: The reduced expression of CPP32 participates in regulating apoptosis in the testes of infertile men with varicocele.     

TOLL样受体4在糖尿病肾病大鼠肾小球中的表达变化及其意义

目的初步探讨TOLL样受体4（TLR4）在糖尿病肾病肾小球硬化发生发展中的作用及其机制。方法试验分对照组和模型组。通过链脲佐菌素（STZ）腹腔注射建立糖尿病大鼠模型。模型成功后2、4、6、8、12周分别测定两组24h尿蛋白排泄量、血肌酐、尿素氮、肾重／体重;观察肾脏病理形态学变化,测定细胞外基质增生程度;应用免疫组化法检测肾小球TLR4、转化生长因子-β1（TGF-β1）、核因子KB（NF-κB）、纤维连接蛋白（FN）的表达。结果模型组大鼠24h尿蛋A、血肌酐、尿素氮、肾重／体重明显升高,肾小球肥大,细胞外基质增生,PAS阳性物质沉积增多。肾小球TLR4、TGFβ1、NF-κB、FN表达亦明显增加,分析提示TLR4的蛋白表达与多项肾小球硬化相关因素呈正相关关系。结论TLR4可能通过调节炎症反应参与了糖尿病肾病肾小球硬化的发生和发展。     

微纤维蛋白1在病理性瘢痕中的表达及意义

目的 检测微纤维蛋白1(FBN1)在瘢痕疙瘩和增生性瘢痕的表达情况,研究其与TGF-β1的相关性,探讨病理性瘢痕发生的分子机理.方法 用RT-PCR法检测瘢痕疙瘩、增生性瘢痕和正常皮肤三种组织中FBNI和TGF-β1mRNA的表达量并进行相关性分析;用免疫组化的方法对FBN1蛋白在人类皮肤组织的表达进行定位及半定量研究.结果 FBN1 mRNA在瘢痕疙瘩(0.802±0.116)高于正常皮肤(0.252±0.067)218.25%(P<0.01),增生性瘢痕(0.628±0.144)较正常皮肤增高149.21%(P>0.05).TGF-β1在瘢痕疙瘩较正常皮肤和增生性瘢痕分别增高200.27%和92.81%(均为P<0.01);FBNI和TGF-β1 mRNA在上述标本中的表达量呈正性相关(r=0.820,P<0.01).FBN1蛋白主要在人类皮肤组织的表皮、毛囊和汗腺的基底膜以及真皮层的血管内皮细胞、部分成纤维细胞和细胞外基质中表达阳性.在真皮层,FBN1蛋白在瘢痕疙瘩(0.117±0.042)表达量较正常皮肤(0.185±0.043)和增生性瘢痕(0.181±0.048)分别减少36.76%和35.36%(均为P<0.01).结论 FBN1在瘢痕疙瘩表达异常,它是瘢痕疙瘩相关基因(瘢痕相关基因),可能通过参与TGF-β1信号通路的调节影响病理性瘢痕的发生.     

Effects of polychlorinated biphenyl on bcl-2 and TGFbeta1 expression in rat testes]

OBJECTIVE: To study the effects of polychlorinated biphenyl (PCB) on bcl-2 and TGFbeta1 expression in rat testes. METHODS: Forty male Wistar rats were divided into 4 groups at random: Group A (normal control), Group B (fed on 10(-8) mol/L PBC), Group C (feb on 10(-7) mol/L) and Group D (feb on 10(-6) mol/L). After three months, all the rats were killed, the animal model established, and observations made on the expression of bcl2 and TGFbeta1 in the rat testis using the optical microscope and immunohistochemical techniques. RESULTS: The damage to the structure of the testis was related to the dosage of PCB: the higher the dodage, the more serious the damage. PCB induced the expression of bcl-2 and TGFbeta1. The TGFbeta1 expression was significantly higher in the highest dosage group than in others (P < 0.01 ), and the bcl-2 expression was dramatically higher in Group C than in other groups (P < 0.01). CONCLUSION: PCB can cause injury in rat testes.