产番茄红素红酵母筛选及其培养条件的优化

以实现番茄红素的微生物发酵生产为目标,从土壤中分离筛选出一株产番茄红素的菌株,初步鉴定为红酵母。以该红酵母为出发菌株,对其进行紫外诱变,选育得到优良高产番茄红素突变株Zk1-1。并对培养条件进行优化,试验结果表明,在发酵周期120h、葡萄糖40g/L、酵母膏10g/L、Mg SO4 0.03g/L的条件下,番茄红素产量达20.25mg/L,比未优化前的产量(11.00mg/L)提高了84%,效果显著。     

类胡萝卜素产生菌海洋红酵母培养条件优化研究

本文研究了培养条件对海洋红酵母生长的影响。结果表明：海洋红酵母生长和色素产生不需要光照,能以铵盐为主要氨源。适宜其生长的条件为：温度22－28℃,pH4.0-5.0,糖浓度35g/L,氯化钠浓度20－30g/L,种量≥7．5％。这也为反应器培养打下了基础。     

龙眼果酒酿造酵母的筛选及其发酵条件优化

筛选出了适合龙眼果酒发酵的酵母菌株A1Ya.通过正交实验,优化得到最佳的发酵条件为:温度28℃、糖用量25%、pH 6.0、酵母用量为1.95×107个/mL,发酵时间7d,龙眼果酒中乙醇含量高达15.62%.     

酵母生物转化合成2-苯乙醇的培养条件优化

通过单因素试验和均匀设计试验对酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae CWY132生物转化合成2-苯乙醇的培养基组成及培养条件进行优化研究。优化后培养基组成及培养条件为:葡萄糖30.1g/L,KH2PO45g/L,L-苯丙氨酸5.8g/L,MgSO40.5g/L,酵母氮碱0.17g/L;最佳初始pH5~6,接种密度1.21×107/mL,最适培养温度28~30℃,200r/min振荡培养36h。优化后2-苯乙醇产量达到3.98g/L,比优化前的1.9g/L提高了109%。原料L-苯丙氨酸的摩尔转化率从最初的51.4%提高到了92.7%。     

红酵母发酵生产胡萝卜素培养条件的优化研究

研究了不同的碳源、氮源和添加核黄素在红酵母Yh3发酵生产胡萝卜素过程中,对菌体生长和色素形成的影响,并用正交实验方法对碳源、氮源、pH值和通气量等培养条件进行了优化研究、结果表明,30g／L麦芽糖,10g／L酵母膏作为碳源和氮源,在pH60,摇床转速为150r／min,添加3×10－6mol／L的核黄素对色素形成较为有利,在此条件下发酵红酵母Yh3其生物量及色素产量最大值分别为9．8g／L和10．38mg／L。红酵母Yh3所产胡萝卜素主要成分为β-胡萝卜素。     

高产油脂红酵母的选育及培养条件优化

以本实验室早期从自然界中分离纯化所得18株高产类胡萝卜素红酵母菌株为材料,采用苏丹黑染色法初筛、摇瓶法复筛,得到1株脂含量相对较高(14.63%)的菌株SCAU-13;经鉴定,该菌株为禾本红酵母(Rhodotorula graminis);以SCAU-13为出发菌株,经紫外诱变、硫酸二乙酯诱变和紫外-硫酸二乙酯复合诱变,最终得到突变菌株M124,其脂含量达42.42%,为出发菌株的2.90倍;培养条件优化结果表明其最佳产脂条件为：以葡萄糖为碳源,(NH4)2SO4为氮源,碳氮比为60:1,起始pH6.0,蛋白胨1.8g/L,酵母粉4g/L,MgSO4 ·7H2O 0.5g/L,在此条件下,菌体生物量为(13.55±0.10)g/L,脂含量为(53.67±0.17)%,产脂量为(7.27±0.03)g/L。     

蛹虫草培养条件的优化

以接种量、培养温度、料水比、培养时间为试验因素研究蛹虫草的适宜培养条件,通过正交试验确定其最佳培养条件为:接种量30mL/瓶,培养温度25℃,料水比1∶1,培养时间40d。     

粘红酵母苯丙氨酸解氨酶合成条件优化

首先利用Plackett-Burman设计及最陡爬坡试验对在摇瓶中对粘红酵母合成苯丙氨酸解氨酶的培养基和培养条件进行优化筛选,然后通过单因子试验确定最适诱导物。在此基础上,进行发酵罐葡萄糖浓度、产酶pH值以及诱导物添加时间的优化。结果显示优化的发酵培养条件为葡萄糖1g/L,蛋白胨35g/L,NaCl 5g/L,KH2PO4 0.25g/L,（NH4）2HPO4 1.5g/L;接种量4%;初始pH值为5;控制产酶pH值为7;诱导物为L-苯丙氨酸,分别在发酵8h和26h时添加;在上述优化条件下,最高比酶活为40.85U/g,比未优化前提高了7.3倍。     

耐热赖氨酸氨肽酶毕赤酵母表达及培养条件优化

为实现耐热耐氨酸氨肽酶的异源表达,通过PCR扩增技术从Pseudomonas aeruginosa NJ-814基因组中克隆获得耐热的赖氨肽酶基因(PLAP),构建重组载体p PIC9K-PLAP,并最终实现在毕赤酵母GS115中的分泌表达。对重组毕赤酵母进行初步筛选,单因素实验优化获得重组毕赤酵母最佳诱导条件如下:诱导培养基初始pH为5.0、甲醇质量浓度1.5 g/dL、诱导温度28℃、装液量25 mL/250 mL、Co~(2+)浓度50μmol/mL、山梨醇添加量9 g/L。在最优条件下,氨肽酶酶活提高了5.2倍,比酶活2.74 U/mg。实验结果表明:PLAP基因已成功转入毕赤酵母GS115并获得表达。     

响应面法优化窖泥中一株产酯酵母的扩培条件

从优质浓香型窖泥中筛选出1株产酯能力相对较高的酵母菌,对其进行分子生物学鉴定,并采用单因素结合Design-Expert设计响应面试验优化该菌株的培养条件。结果表明,该菌株为异常毕赤酵母,优化后的培养条件为:装液量为11%,培养温度31℃,培养时间5 d,接种量5%,培养转速为150 r/min,pH 8.0,接种种龄60.72 h。在该培养条件下,细胞干重达6.37 g/L,是初始培养条件222.7%,其培养条件的优化使酵母菌数量达到了显著的增殖效果,为通过使用产酯酵母增加浓香型白酒中风味物质提供了一定的技术参考。     

南极假丝酵母Pseudozyma sp.JCC207的培养及其海藻糖提取工艺优化

本文研究了南极假丝酵母Pseudozyma sp.JCC207的培养条件,对其海藻糖的提取工艺进行优化。利用单因素实验研究了培养温度和初始p H对南极假丝酵母生长的影响,采用RSM分析法确定了三氯乙酸(TCA)法提取南极假丝酵母海藻糖的最优工艺。结果表明其最适培养温度为25℃,起始p H为5~9范围内酵母生长情况差别不大;最优提取条件为:三氯乙酸浓度0.6 mol/L、体积15.20 m L、提取时间29 min;每克南极假丝酵母湿菌体中海藻糖的提取量为17.72 mg;功能实验表明,与甘油(20%)和二甲基亚砜(10%)等传统保种试剂相比,0.5%海藻糖溶液在短期内(5 d)对酵母具有更好的保种能力。      

高产DHA裂壶藻突变株发酵条件的优化

为了进一步提高裂壶藻突变株的DHA产量,以经过⁶⁰Co-γ射线辐照诱变后所得高产DHA裂壶藻突变株1.6-7-1为研究对象,通过Plackett-Burman实验、最陡爬坡实验和响应面实验对其发酵培养基进行优化,同时通过发酵罐发酵培养研究不同溶氧水平对突变株代谢的影响。结果表明：葡萄糖、C₅H₈NNaO₄和NaCl添加量对该突变株产DHA具有显著影响,其最佳添加量分别为葡萄糖125.46 g/L、C₅H₈NNaO₄ 12.44 g/L、NaCl 4 g/L,在此条件下该突变株DHA产量达6.01 g/L,相较于原始菌株提升了49.88%;在高溶氧水平下,突变株生物量高但油脂产量和DHA产量较低,可能是因为细胞优先用营养物质进行自身的生长繁殖,而过低的溶氧水平会抑制能量代谢,减慢细胞繁殖速度。综上,优化发酵条件可以提高突变株DHA产量。     

产2-酮基-D-葡萄糖酸菌Serratiasp．BK-98的分离及其培养条件优化

从土壤中分离得到一株2-酮基-D-葡萄糖酸（2-KDG）产生菌,综合16SrDNA序列和系统进化分析确定该菌属于沙雷氏菌属（Serratia）,命名为Serratiasp．BK-98。采用PIackett—Burman（PB）实验设计,从影响2-酮基-D-葡萄糖酸生物合成条件的14个因素中筛选出具有显著效应的3个因子：装液量、发酵时间和初始pH。在此基础上通过中心组合设计实验（central composite design,CCD）和响应面分析（response surface methodology,RSM）确定了装液量、发酵时间和初始DH的最适值分别为6．6mL、57．9h和5．0。在优化条件下．2-KDG的100mL摇瓶发酵产量达到了187．8g／L,100L发酵罐产量达到了192．2g／L．分别较优化前提高了142．6％和148．3％．这两个实验结果均与模型的预测值191．4g／L非常接近。     

链霉菌Streptomyces sp.FJS31-2产卤化二型聚酮类化合物的发酵条件优化

以产zunyimycin A及BE-24566B类卤化天然化合物的Streptomyces sp. FJS31-2为研究对象,分别利用高分辨质谱（HRMS）和高效液相色谱（HPLC）为检测手段,对不同的碳源、氮源组合的培养基在不同的培养时间和萃取条件下获得的目标化合物进行定性和产量的分析。在基础培养基内添加10 g/L无水乙醇浸泡24 h后的腐殖酸,培养17 d,采取乙酸乙酯萃取可以使目标化合物产量提高。     

产磷脂酶D链霉菌发酵条件优化

以链霉菌为发酵菌株,研究了10 L发酵罐中不同培养条件对链霉菌发酵产生磷脂酶D和链霉菌生长的影响。结果表明,10 L发酵罐中最佳发酵条件为:接种量12%,种龄17 h,温度28℃,通气量0.8 L/h,转速600 r/min。在最佳发酵条件下,酶活可达到3.48 U/m L。     

异养培养小球藻chlorella sp.生产叶黄素条件的优化

研究了异养条件下不同碳源、氮源、pH和温度等因素对一株自分离小球藻的生长及叶黄素产量的影响。结果表明,葡萄糖和硝酸钾分别是支持这株小球藻持续快速生长生产叶黄素的最佳碳源和氮源。异养培养小球藻生产叶黄素的最佳条件为:葡萄糖浓度20g·L-1、硝酸钾浓度1.25g·L-1,初始pH6.0,温度30℃,叶黄素产量为12.27mg·L-1。      

正交实验优化新型血液抗凝剂的使用条件

紫外分光光度计可以测定血浆液中血红蛋白的OD值,通过OD值可以反映复合抗凝剂的使用效果。通过单因素实验和正交实验,优化出复合抗凝剂的最佳使用条件。结果显示：复合抗凝剂最优使用条件为保存温度5℃,保存时间不超过60h,溶液浓度为12％,添加比例0．5％。     

1株产类胡萝卜素盐盒菌的分离鉴定及培养条件优化

对分离自运城盐湖黑泥中的一株产类胡萝卜素嗜盐菌G14进行分离鉴定,经菌落形态观察、生理生化特性及16S rRNA基因 序列分析,确定该菌株隶属于盐盒菌属（Haloarcula sp.）。 通过单因素与正交试验对菌株G14的培养条件进行优化。 结果表明,菌株G14 最佳培养条件为NaCl质量浓度0.23 g/mL,初始pH值为7.0,43 ℃光照培养。 在此优化条件下,培养的菌液OD600 nm值达2.24,类胡萝卜素 产量为0.65 mg/L。     

高产洛伐他汀红曲霉（Monascus sp.UV-D-9）的发酵条件优化

为了进一步提高洛伐他汀产量,对实验组前期获得的洛伐他汀高突变株Monascus sp.UV-D-9的发酵条件进行了响应曲面优化。获得最佳发酵条件为:发酵温度30.4℃,装液量134 m L,转速187 r·min-1,其他条件为发酵时间10 d,接种量8%。在此条件下,洛伐他汀的产量为（0.32±0.014）mg·m L-1（n=3）,比原始条件的产量提高了10.1%。