STAT3磷酸化介导白血病细胞对多柔比星耐药的机制研究

白血病是常见的造血系统恶性肿瘤之一[1],白血病细胞对化疗药物产生多药耐药(multi-drug resistance,MDR)是临床上导致白血病治疗失败和白血病复发的主要原因[2]。研究表明,STAT3磷酸化能通过多种途径介导肿瘤耐药[3-7]。我们此前的研究结果显示,耐药白血病细细胞(K562/AO2)STAT3磷酸化水平明显升高[8],抑制STAT3磷酸化可以降低耐药白血病细胞P-gp蛋白的表达[9]。本研究中,我们通过转染K562细胞建立耐药白血病细胞株K562/STAT3,阐明STAT3磷酸化介导白血病细胞发生耐药的可能机制。     

浙贝母碱逆转白血病细胞多药耐药的研究

浙贝母因其以化痰散结为主要药用功能,我们常常配合化疗药物治疗复发和难治性白血病（或）肿瘤,往往获得理想疗效。浙贝母中含有多种活性成分,其中浙贝母碱（贝母素甲,Ｐｅｉｍｉｎｅ）是其主要活性成分之一,属异甾类生物碱中的瑟文类（Ｃｅｖｉｎｅｇｒｏｕｐｓ）生物碱［１］。为了探讨浙贝母抗白血病的作用机制,我们研究了浙贝母碱逆转白血病细胞多药耐药作用。材料和方法１　细胞株　Ｋ５６２／Ａ０２：多药耐药细胞株,以Ｐ糖蛋白（Ｐｇｐ）蛋白升高为主要耐药机制。由中国医学科学院血液学研究所药物室提供。对阿霉素耐药４０…     

DNA拓扑异构酶和端粒酶与白血病多药耐药关系

肿瘤细胞产生耐药性成为许多肿瘤治疗成败的关键，也是血液肿瘤化疗失败的重要原因，目前人们从不同的角度和水平对耐药的发生机制、逆转耐药的药物研究及相应的体内外实验等进行研究，指出多药耐药是多种因素共同作用的结果。近年来白血病的不典型耐药机制日益受到人们的重视，因此本文从DNA拓扑异构酶和端粒酶与白血病耐药的关系出发，阐述了白血病细胞多药耐药的抗凋亡机制，旨在为逆转白血病耐药及开发有效的逆转剂奠定理论基础。     

K562/A02耐药细胞NF-κB活性测定及葛根素部分逆转耐药效应的初步研究

白血病细胞的多药耐药（MDR）的产生是导致化疗失败的主要原因。目前发现MDR的产生机制是多因素的，且有不同的耐药表型。核转录因子KappaB（NF—κB）在细胞增殖和凋亡中起关键调控作用。为明确NF—κB是否与细胞MDR产生有关及葛根素是否通过抑制NF—κB活性而逆转耐药，我们观察了慢性粒细胞白血病急变细胞株K562及其耐药细胞株K562／A02的NF—κB活性，P糖蛋白（P—gP）、耐药相关蛋白（MRP）表达情况，以及葛根素干预前后NF—κB活性，P—gP、MRP表达的变化，为揭示白血病细胞耐药机制，寻求有效的逆转耐药药物提供实验依据。     

白血病细胞多药耐药现象研究进展

白血病细胞对化疗药物产生耐药性是化疗失败的主要原因之一。多药耐药现象(MDR)是近年来人们关注的热点。多药耐药性是指肿瘤细胞除对一种药物耐药外,也对其它结构和不同作用机制的药物产生交叉耐药性。主要包括多药耐药基因介导的多药耐药现象、谷胱甘肽转移酶和拓扑异构酶活性改变引起的多药耐药现象。MDR基因表达引起的多药耐药现象和白血病的关系最为密切,研究得最为深入。本文就这方面的进展做一综述。     

白血病细胞多药耐药及其干预对策

多药耐药（ＭＤＲ）是白血经疗失败和复发的主要原因。本简述了白血病细胞ＭＤＲ发生的可能机制以及干预白血病细胞ＭＤＲ的逆转、促凋亡、诱导分化和预防策略。     

Caspase家族与多药耐药发生机理

Caspase蛋白酶在死亡受体介导的细胞凋亡中起着中心的作用,近年来又发现caspase在传递多种化疗药物的敏感性中起重要作用,Caspase活性的组成性下调会增强肿瘤细胞的化疗抗药性。对许多经典的多药耐药机理的研究发现,其中都有caspase的参与。对caspase的深入研究将对我们进一步认识肿瘤细胞多药耐药的机理及提出更新的耐药逆转方法提供思路。     

表达绿荧光蛋白的多药耐药微小残留白血病细胞的小鼠模型

为了方便研究多药耐药微小残留白血病的病理生理和治疗,采用携带绿荧光蛋白（EGFP）基因标记的小鼠多药耐药白血病细胞系P388/VCR-G和DBA小鼠建立一个检测多药耐药微小残留白血病的动物模型.结果显示,P388/VCR-G细胞腹腔接种DBA小鼠,白血病的发病率为100%,无自发缓解.P388/VCR-G白血病模型小鼠对环磷酰胺（Cy）敏感,有较好的药物剂量-生存时间关系,接种细胞的对数与Cy剂量间有良好回归相关关系.白血病诱导缓解后残留白血病细胞在肝、脾、胸腺及骨髓等脏器呈不均匀分布.冰冻切片荧光显微镜下观察EGFP＋细胞是检测小鼠体内微小残留白血病细胞最敏感的方法.结论：采用P388/VCR-G细胞和DBA小鼠可建立表达EG-FP的多药耐药小鼠微小残留白血病模型.     

谷胱甘肽转移酶与白血病多药耐药

在白血病的治疗中化疗仍是一种重要手段，然而，尽管化疗可使60％－80％的病人达到完全缓解，但能够治愈的病人只占20％－30％，余下的或复发或难治，对化疗反应差并对多种化疗药耐药。因而，研究耐药原因及解决途径对白血病的治疗至关重要。目前，对耐药机制的解释较多，经典的mdr1、MRP等耐药机制已基本明确，因而进一步了解非经典耐药途径如谷胱苷肽转移酶（GSTs)等的耐药机制对于完善多药耐药机制有重要意义。本文介绍了GSTs的基因家族及其生物学特性、GSTs与白血病MDR的关系、GST与其他耐药途径的相关性和GST耐药的逆转对策。     

肿瘤及白血病细胞肺耐药相关蛋白基因的表达

肺耐药相关蛋白是最新发现的又一种与多药耐药腾的蛋白质，它量种非糖蛋白，与Ｐ糖蛋白及多药耐药相关蛋白的作用机制不同，它在某些肿瘤及急性髓系白血病中过度表达与临床化疗敏感性及预后有关。     

白血病耐药机制的研究概况

耐药是影响白血病患者预后和长期生存的主要因素之一.有效逆转白血病耐药,是提高和改善白血病患者预后和长期生存的重要途径之一.早期对白血病耐药机制的研究,主要集中于白血病细胞本身,如多药耐药基因等.随着对骨髓微环境的深入研究发现,在白血病耐药中,骨髓微环境对白血病细胞的保护作用起着重要作用,其影响机制主要为给白血病细胞提供存活或抗凋亡信号,并使白血病细胞处于相对静止状态.笔者拟就白血病耐药机制的研究概况进行综述,旨在为理解和探索逆转白血病耐药拓宽思路.     

环孢霉素A体外对白血病细胞作用的的研究

为了进一步探讨环胞霉素A（CSA）逆转白血病细胞耐药的机理，采用溴化四氮唑兰法（MTT）测定K562和K562/ADM白血病细胞系对化疗的体外反应性，以脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL）及琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡，台盼蓝拒染法测细胞存活率。结果发现CSA在1.0mg/L水平对两种白血病细胞存活无明显影响，但能够增强其对化疗药物的敏感性，促进化疗药物诱导的白血病细胞凋亡，当浓度大于1.0mg/L时单独CSA也能杀伤白血病细胞并诱导其凋亡。结论提示，CSA可以通过促进细胞凋亡逆转白血病细胞的耐药，其自身也有一定的诱导白血病细胞凋亡及杀伤白血病细胞的作用。     

急性髓性白血病膜糖蛋白介导的多药耐药

急性白血病治疗中存在的主要问题是白血病细胞对化疗药物产生耐药性。这种现象由多种耐药机制所致,包括细胞对化疗药物反应所经历的凋亡失败或药物到达及(或)影响细胞内目标的失败。本综述重点讨论后一种机制，特别是细胞内药物转运耐药机制。有报道ATP结合盒(ABC)转运体P-糖蛋白(P—gp)与急性髓性白血病顸后相关。另外更引人瞩目的是ABC转运体多药耐药蛋白(MRP)和穹隆转运体肺耐药蛋白(LRP)的表达在AML也与预后有关。     

流式细胞术测定白血病细胞MDR功能实验的进展

多药耐药（MDR）功能实验有多种，各采用了不同的荧光染料，多用流式细胞仪测定，有的可特异性反映某一MDR转运蛋白的功能活性，有的可反映多种MDR蛋白的共同作用，可配合其他荧光标记的单抗对细胞进行多参数分析，在白血病化疗预后分析，MDR机制和耐药逆转机制的探讨中起重要作用，但方法学须标准化。     

白血病耐药的表观遗传调控机制

多药耐药是白血病化疗失败的主要原因.在白血病耐药的产生机制中,白血病耐药相关基因表达的DNA甲基化、组蛋白翻译后修饰等表观遗传调控发挥重要作用.从表观遗传调控途径干预耐药相关基因为逆转白血病耐药治疗提供了新的思路.本文就白血病耐药形成中表观遗传调控机制的研究进展作一综述.     

应用人类全基因组芯片检测多药耐药白血病细胞株HL-60/VCR与敏感细胞株HL-60基因的表达差异

本研究利用基因芯片技术检测白血病多药耐药细胞株HL-60/VCR及其亲本细胞株差异基因表达谱,探讨急性白血病多药耐药机制.本试验提取白血病细胞株HL-60及其多药耐药细胞株HL-60/VCR的mRNA,在反转录及体外转录过程中分别用生物素进行标记,与Affymetrix公司人类全基因组芯片U133A杂交,用Affymetrix专用芯片扫描仪G2500A GeneArray Scanner及Microarray Suite、Micro DB^TM GeneChip LIMS、GeneChip DMT分析软件系统处理杂交信号获取结果.结果表明：白血病细胞株HL-60及其耐药株HL-60/VCR差异显示基因5 507条,其中耐药细胞株中上调表达基因3 100条,下调表达基因2 407条;差异极显著性基因1 040条,表达上调435条,下调605条,涉及与细胞生长活动及信号转导相关的基因.结论：多基因参与白血病细胞株的多药耐药机制,基因芯片技术是并行分析多个基因、探讨白血病多药耐药机制的有效方法.     

肺耐药蛋白基因和多药耐药相关蛋白基因在急性白血病骨髓细胞中的表达及临床意义

为了研究肺耐药蛋白基因和多药耐药相关蛋白基因在急性白血病骨髓细胞中的表达及其临床意义，采用半定量逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测初治急性白血病、复发难治白血病及正常对照骨髓细胞肺耐药蛋白基因(lung resistance protein，LRP)及多药耐药相关蛋白基因(multidrug resistance protein，MRP)的表达。结果显示，正常对照骨髓细胞LRP表达阴性，初治急性髓细胞白血病(AML)组及复发难治组LRP表达水平与正常对照组相比明显升高，增高的LRP mRNA水平与对初次化疗不敏感及预后差有关，LRP表达阳性患的完全缓解率明显低于表达阴性。经直线相关分析发现，LRP表达与MRP表达水平成正相关。结论：LRP可能是一项新的耐药指标，其高表达与急性髓细胞白血病的疗效及预后密切相关，同时检测LRP和MRP的表达可以指导治疗，估计预后。     

DNA拓扑异构酶Ⅱ与白血病细胞的不典型耐药

白血病细胞耐药是引起化疗失败的主要原因，机制复杂。DNA拓扑异构酶Ⅱ（TopoⅡ）表达异常是引起多药耐药（MDR）的主要机制之一，不同于P－170介导的经典耐药，被冠以下典型耐药（at-MDR)。本文就TOPOⅡ的生物学特性、介导at-MDR的机制、临床意义和逆转at-MDR的策略等方面进行综述。     

急性白血病患者谷胱甘肽硫转移酶-π、多药耐药相关蛋白1表达与临床相关因素的分析

白血病细胞多药耐药（multi-drug resistance，MDR）性的产生是急性白血病（acute leukemia，AL）临床化疗失败的主要原因。MDR是指肿瘤细胞一旦对某种药物产生耐受，对其它结构、作用机制不同的化疗药物也交叉耐受。目前认为MDR发生机制主要有以下几个方面：     

三氧化二砷对K562/ADM耐药细胞凋亡抑制的逆转作用

目的:研究三氧化二砷(As2O3)诱导白血病K562/ADM耐药细胞凋亡的分子机制。方法:采用MTT比色法检测K562/ADM耐药细胞增殖活性,细胞形态学和annexinV /PI双染色检测细胞凋亡,RT-PCR检测mdr1、bcl-2和caspase-3基因mRNA的表达水平,流式细胞法(FCM)测定P-糖蛋白(P -glycoprotein,P-gp)和bcl-2蛋白表达及caspase-3活性。结果:As2O3显著抑制K562/ADM耐药细胞的增殖;经 As2O3处理后细胞形态上出现典型的凋亡改变,annexinV /PI双染显示凋亡细胞明显增加;mdr1mRNA表达和P-gp合成明显降低,凋亡抑制基因bcl-2mRNA及其蛋白bcl-2表达下调, caspase-3mRNA表达和caspase-3活性显著增强。结论:As2O3诱导K562/ADM耐药细胞凋亡,其主要机制可能为As2O3抑制 mdr1和bcl-2基因表达,逆转耐药白血病细胞因bcl-2和P-gp高表达所介导的凋亡抑制。