牛磺酸对大鼠脑缺血再灌注损伤时细胞凋亡的影响

目的：研究牛磺酸对脑缺血再灌注损伤中细胞凋亡的影响。方法：建立大鼠全脑缺血再灌注模型，使用ＤＮＡ片段原位末端标记和流式细胞仪观察了Ｔａｕ治疗后细胞凋亡的变化。结论：Ｔａｕ对脑缺血再灌汪损伤中神经细胞的保护作用可能部分由于降低细胞凋亡的发生。     

牛磺酸对家兔缺血/再灌注心肌细胞凋亡的影响

研究表明,牛磺酸（laurine,Tan）对心面缺血再灌注损伤有防护作用,但其确切的机制尚不十分清楚,心肌缺血损伤除引起心肌细胞坏死外,也可诱发心肌细胞的凋亡,近几年的研究表明,细胞凋亡受多种因素调控,其中以细胞凋亡相关基因蛋白（如Bcl-2,Bax和Fas等）的作用较为重要;但牛磺酸对家兔心肌缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡有何影响,以及是否凋控凋亡相关基因的表达,     

内质网应激诱导的细胞凋亡在大鼠肢体缺血再灌注后肺损伤中的作用及牛磺酸的影响

目的: 探讨内质网应激诱导的细胞凋亡在大鼠肢体缺血再灌注(LIR)后肺损伤中的作用及牛磺酸的影响。方法: 成年雄性SD大鼠40只,随机分成4组:(1)对照组(control);(2)LIR组;(3)牛磺酸处理组(LIR+taurine);(4)生理盐水处理组(LIR+saline)。采用生物化学方法检测血气变化及肺组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和丙二醛(MDA)含量;采用原位末端标记(TUNEL)法观察肺组织细胞凋亡情况;采用蛋白质印记方法(Western blotting)及实时定量PCR(real-time PCR)方法观察LIR后肺损伤发生过程中CCAAT增强子结合蛋白(C/EBP)同源蛋白(CHOP)及活化的转录因子4(ATF4)和X-盒结合蛋白-1(XBP1)基因表达的改变;光镜下观察肺脏组织的形态学改变。结果: 与对照组相比,LIR组的动脉血氧分压(PaO₂)和动脉血二氧化碳分压(PaCO₂)明显下降,肺组织中MDA水平明显升高,SOD和CAT活性明显降低,细胞凋亡数增多,CHOP蛋白表达上调,XBP-1、ATF4和CHOP mRNA表达水平明显上调;而牛磺酸能明显减轻LIR后肺损伤;肺呼吸功能明显改善,肺组织MDA的含量减少,SOD和CAT活性增加,细胞凋亡明显减少,CHOP蛋白表达下调,ATF4、XBP1和CHOP基因表达下调。结论: 内质网应激诱导的细胞凋亡参与LIR后肺损伤,牛磺酸对LIR后肺组织的保护作用与其减轻内质网应激诱导的细胞凋亡有关。     

牛磺酸对大鼠肢体缺血再灌注后肺损伤时黏附分子ICAM-1表达的影响

目的：探讨牛磺酸对大鼠肢体缺血再灌注致肺损伤时黏附分子ICAM-1表达的影响。方法：复制大鼠肢体缺血再灌注(LIR)损伤模型,采用流式细胞技术、逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blotting观察LIR后肺损伤发生过程中，血液中CD18阳性的多形核白细胞（PMN）百分率、肺系数（LI）与肺通透指数（LPI）、肺组织形态学的改变、肺组织ICAM-1 在mRNA和蛋白水平的变化及牛磺酸对上述指标的影响。结果：大鼠肢体缺血再灌注后LI、LPI及CD18阳性细胞数均明显增加，肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性增加，ICAM-1表达明显升高，而提前给予牛磺酸可以明显抑制这些变化，从而对肺起一定保护作用。结论： 肺组织细胞ICAM-1表达上调及血液中CD18阳性细胞数的增加可能参与LIR后肺损伤的发生；牛磺酸可减少血液中CD18阳性细胞数，并且下调肺组织ICAM-1的表达，从而减轻肺损伤。     

大鼠肢体缺血再灌注可致脑组织细胞凋亡

目的：探讨肢体缺血再灌注（limbs ischemia-reperfusion,LIR）对脑组织的影响。方法：复制大鼠LIR模型,采用尼氏染色观察脑组织病理学改变,TUNEL法检测细胞凋亡情况,免疫组化和Western印迹法检测凋亡相关因子Bcl-2、细胞色素C（cytoC）、Caspase-3的表达变化。结果：大鼠LIR后,脑组织海马区、中脑红核区神经元细胞受损,脑组织出现水肿裂隙,cytoC、Caspase-3凋亡相关蛋白表达明显上调,24h达高峰,与细胞凋亡数量的增加相一致,Bcl-2表达与再灌时程呈负相关。结论：LIR后可导致脑组织损伤,并出现细胞凋亡,其发生机制与Caspase-3、cytoC、Bcl-2凋亡相关蛋白的表达变化有关。     

缺血预适应减少大鼠肢体缺血再灌注后的肝细胞凋亡

目的观察缺血预适应（IPC）对大鼠肢体缺血再灌注（I／R）后肝脏自由基和钙含量的改变与细胞凋亡情况以及对其变化的影响。方法实验用雄性Wistar大鼠18只,随机分为对照（Control）、缺血再灌注（IR）组和缺血预适应（IPC＋IR）组,每组6只。分别测定血浆谷丙转氨酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）、血浆和肝组织超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）的含量,肝组织钙及线粒体钙含量;免疫组化法检测肝组织的BCL-2和BAX蛋白的表达水平;采用末端标记技术（TUNEL）检测肝细胞凋亡。结果肢体IR后血浆AST、LDH显著增多,血浆和肝SOD减少而MDA显著增加;肝组织钙及线粒体钙含量显著增多;BCL-2与BAX蛋白表达增多,而BCL-2／BAX比值显著降低;凋亡细胞显著增多。IPC显著减轻了IR后引起的MDA含量的升高,并且显著增加了SOD的含量;减轻了组织和线粒体钙超载;BCL-2的表达则明显升高而BAX表达较IR组减少,BCL-2／BAX比值升高;凋亡细胞显著减少。结论肢体IR引起肝脂质过氧化产物增多,钙超载,凋亡细胞增多。IPC可能通过减少自由基的产生及钙超载抑制细胞凋亡而减轻肢体IR后继发的肝损伤。     

肢体缺血再灌注后的肺损伤和细胞凋亡及NO的效应

目的：探讨肢体缺血再灌注（LIR）后肺的损伤性变化以及细胞凋亡在肺损伤发生中的作用；探讨一氧化氮（NO）对LIR后肺组织细胞凋亡的影响。 方法：采用本室常规方法复制大鼠LIR模型，给予外源性一氧化氮合酶底物（L-Arg）和一氧化氮合酶抑制剂(L-NAME)处理，采用原位末端标记法（TUNEL）检测缺血4 h再灌注4 h时各组动物肺组织细胞凋亡情况；采用放免法检测凋亡相关细胞因子TNF-α在肺组织的表达，结合计算机分析系统对结果进行定量分析；采用免疫组织化学方法检测Bcl-2、Bax、caspase-3、TNF-α蛋白表达情况，结合自动图像分析系统对其结果进行定量分析；在光镜下观察肺组织的形态学改变。结果：大鼠LIR后4 h，肺泡Ⅱ型上皮细胞、肺血管内皮细胞呈凋亡改变,肺组织TNF-α、caspase-3、Bax明显上调,Bcl-2表达下调。L-Arg处理组，凋亡细胞数明显减少，肺组织TNF-α、caspase-3、Bax的表达情况与IR组相比明显减弱，Bcl-2表达明显增强；L-NAME处理组动物肺组织TNF-α、caspase-3、Bax的表达情况与IR组相比明显增强，Bcl-2表达明显减弱。结论：细胞凋亡参与了大鼠LIR后急性肺损伤的发生，且与TNF-α有关；NO可通过减弱细胞凋亡相关因子TNF-α的表达，减轻LIR后肺组织的细胞凋亡。     

肢体缺血/再灌注后氧自由基与Bax蛋白、细胞凋亡的关系

目的　阐明氧自由基与Bax蛋白、细胞凋亡在大鼠肢体缺血 /再灌注不同时相中的变化规律及相互关系。方法　采用大鼠股动脉夹闭模型 ,阻断股动脉血流 5h后再灌注 ,设立缺血组、再灌注组 ,再灌注组设立 1,6 ,12 ,2 4h 4个检测时相 ,应用硫代巴比妥酸法测定肌肉组织中脂质过氧化产物丙二醛 (MDA)水平 ,应用免疫组化方法测定Bax蛋白表达的变化 ,应用原位末端标记法及电镜方法观察细胞凋亡现象。结果　随着再灌注时间的延长 ,MDA水平、Bax蛋白表达强度、细胞凋亡指数 (AI)进行性升高 ,且三者呈显著正相关。结论　氧自由基与细胞凋亡同时参与肢体再灌注损伤 ,氧自由基可能通过调节Bax蛋白表达促进细胞凋亡的发生。     

肝脏缺血再灌注损伤与细胞凋亡

Hepatic ischemia/reperfusion injury (HIRI) exists in lots of process of clinical pathology and operation. Apoptosis is an active process controlled by some gene and factors such as Fas/FasL, Caspases and Bcl -2 families. More and more studies suggest that HIRI is associated with apoptosis. This article summarized the mechanisms and gene modulation of apoptosis during HIRI and the significance of suppressing auoutosis in preventing HIRI.     

牛磺酸对大鼠心脏模拟缺血再灌注损伤的保护作用

在离体大鼠心脏模拟缺血再灌注(I/R)损伤的模型上观察了牛磺酸的心肌保护作用。实验结果发现预先给大鼠牛磺酸灌胃(300mg/kg)三日或再灌注同时给药(20mmol/L),对心肌均有保护作用,明显减少心肌细胞内的Mb、LDH的漏出,降低心肌MDA的生成,减轻细胞内钙的聚集,促进心肌ATP含量的恢复。在本实验条件下预防应用牛磺酸较再灌注的同时应用更为有效,表现为更大程度地减少LDH漏出,抑制心肌MDA生成和钙聚集。结果证明牛磺酸具有心肌保护作用,对于防治心肌I/R损伤可能具有临床应用价值。     

二氧化硫对大鼠肢体缺血再灌注所致肺损伤的影响及其作用机制

 目的：探讨内、 外源性二氧化硫(SO2)对肢体缺血再灌注(IR)所致大鼠急性肺损伤(ALI)的作用及其机制。方法：应用双大腿根部止血带复制大鼠双后肢IR后肺损伤模型。96只SD大鼠随机分为6组：假手术(sham)组、肢体缺血4 h再灌注4 h(IR) 组、sham+SO2组、sham+异羟肟酸(hydroxamate, HDX)组、IR+SO2组和IR+HDX组。光镜下观察肺组织形态学改变并计数肺泡间隔中中性粒细胞（polymorphonuclear neutrophil, PMN）数目;测定肺系数和肺组织丙二醛（malondialdehyde,MDA)含量;测定肺内细胞间粘附分子(intercellular adhesion molecule,ICAM)-1以及血清肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）-α和白细胞介素（interleukin,IL)-1表达的变化;测定肺组织中SO2含量和天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase, AST)活性;观察动物24 h存活率。结果：大鼠肢体 IR可引起肺组织出现损伤性变化,同时肺泡间隔中PMN数目、肺系数、肺组织 MDA 含量和ICAM-1水平以及血清TNF-α和IL-1含量增加,而肺组织SO2含量和AST活性下降、动物存活率降低;预先给予SO2供体Na2SO3/NaHSO3可明显减轻上述指标的变化;而预先给予体内SO2生成酶抑制剂HDX减少SO2的生成可加重IR所致的上述变化。结论：肺内AST/SO2体系下调参与介导了大鼠肢体IR致ALI的发生;外源性 SO2通过抗炎、抗氧化发挥其改善肢体IR所致的肺损伤的作用。     

大鼠肢体缺血再灌注致肺损伤时肺组织中血红素氧合酶的表达

目的:观察大鼠肢体缺血再灌注致肺损伤时肺组织中HO-1表达的变化。方法:采用夹闭大鼠腹主动脉下段造成双下肢缺血和再灌注性肺损伤模型,分别采集假手术组,缺血4h组及缺血4h再灌注4、8、16、24、48h组肺组织标本,以Northern印迹、Western印迹及免疫组化分析,观察HO-1表达的变化。结果:假手术组和单纯缺血组未见HO-1mRNA表达;再灌注4h可见其表达信号,且随着再灌注时间延长表达信号逐渐增强,到16h时达到高峰,之后渐减弱,48h时已消失。蛋白表达水平与mRNA表达一致。免疫组化研究显示,HO-1阳性信号主要出现在气道上皮细胞、血管平滑肌细胞和肺泡巨噬细胞,而假手术组和单纯缺血组均未见阳性信号。结论:假手术及肢体的单纯缺血未诱发肺组织HO-1的表达,而肢体缺血再灌注可诱发其表达,并具有时相变化。     

DADLE对大鼠急性全脑缺血再灌注继发肺损伤的作用

 目的：通过建立大鼠急性全脑缺血再灌注模型,观察肺组织超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量及肺组织光镜、电镜病理变化,探讨δ阿片受体激动剂DADLE对急性肺损伤的保护作用。方法：SD大鼠30只随机分为假手术（sham）组、模型（I/R）组和DADLE处理组。采用改良的二血管阻断加低血压法建立全脑缺血再灌注模型。DADLE处理组（n=10）于再灌注前经左侧颈静脉注射DADLE 5 mg/kg,再灌注120 min后,取肺组织,光镜、电镜观察其病理学改变及检测肺组织SOD活性、MDA含量。右侧股动脉取血测定氧分压,计算氧合指数。结果：I/R组与 sham组比较,肺脏表现为肺泡间隔增宽,毛细血管扩张充血,肺胞腔内及血管周围中性粒细胞浸润,Ⅱ型上皮细胞表面微绒毛明显减少,肺胞腔及气管腔均有浆液渗出,大鼠肺组织SOD活性降低和MDA含量升高。DADLE处理组与I/R组比较肺脏充血减轻,肺组织损伤程度明显减轻,中性粒细胞浸润有所减少,SOD活性升高和MDA含量降低。DADLE处理组动脉血氧分压和氧合指数有升高趋势,与I/R组比较差异有统计学意义。结论：大鼠急性全脑缺血再灌注模型对肺有不同程度的损伤,DADLE可减轻急性肺损伤,对肺组织提供一定的保护作用。     

血小板活化因子在急性胰腺炎大鼠肺损伤发病中作用

以牛磺胆酸钠诱发大鼠急性胰腺炎并发肺损伤模型，观察血小板活化因子拮抗剂ＢＮ５２０２１对肺病理形态、肺系数、血小板聚集率及肺血流量的影响，记录其大鼠存活率。结果表明，ＢＮ５２０２１治疗后，胰腺出血坏死程度减轻同时肺损伤显著改善，肺系数值、血小板聚集率显著低于急性胰腺炎非治疗组，肺相对血流量及组织灌注量显著高于急性胰腺炎非治疗组，大鼠存活率提高。提示内源性血小板活化因子通过增加肺血管通透性、影响肺血循环而介导急性胰腺炎大鼠肺损伤。     

一氧化氮和过氧亚硝基阴离子在肢体缺血再灌注致肺损伤中的作用

目的:观察肢体缺血再灌注致肺损伤时肺组织中一氧化氮(NO)及过氧亚硝基阴离子(ONOO^-)的变化,以探讨二者在此种损伤中的作用。方法:采用夹闭大鼠腹主动脉下段造成双下肢缺血和再灌注后肺损伤模型,分别测定假手术组、缺血4h组、缺血4h再灌注1h组及再灌注4h组肺组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)、NO₂^-/NO₃^-含量变化;应用免疫组化方法测定上述各组肺组织中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及ONOO^-体内生成标志物硝基酪氨酸(NT)的变化。结果:肢体缺血再灌注后1h和4h肺组织中MDA和NO₂^-/NO₃^-的含量显著高于对照组和单纯缺血组(P＜0.05),而SOD活性则显著低于此两组(P＜0.05),并出现大量iNOS及NT阳性信号。结论:肢体缺血再灌注致肺损伤时肺组织中有大量NO和ONOO^-产生,脂质过氧化增强,提示ONOO^-参与介导此种肺损伤。     

干细胞旁分泌效应在ALI/ARDS治疗中的研究进展

急性肺损伤(acute lung injury,ALI)以及它的严重形式——急性呼吸窘迫综合征(acute respiratorydistress syndrome,ARDS)是危重病人发病和死亡的重要原因之一,最近2个世纪以来,死亡率仍在36%～44%左右。ALI/ARDS的病因众多,发病机制十分复杂,涉及的环节多,受损的靶细胞多,主要涉及的环节有:炎症反应失控、细胞损伤与修复、细胞凋