全自动酶免分析仪用于ALT微板赖氏法检测

<中国输血技术操作规程>所规定的ALT的检测方法为:初检酮体酚法,复检赖氏法.以往试管赖氏法检测反应体积大,操作繁琐.已有不少血站将反应体积缩小若干倍采用微板法检测.大大减少了工作量,同时适应全自动加样设备的样本处理.全自动酶免分析仪有精确的温度控制系统,各组分试剂的分配精确,结果的判读较少受到外界的影响,笔者所在实验室将ALT的检测与其他检测项目进行组合同时检测,极大的方便了实验工作的安排,而且与传统的试管法及速率法检测结果一致.     

两种方法检测丙氨酸氨基转移酶的比较

丙氨酸氨基转移酶(ALT)检测是筛查献血不可缺少的项目之一，本室采用赖氏法检测ALT。由于试管法检测ALT活力，存在工作量大、比色时间长，初复检使用的标本量多等缺点，所以，笔使用微量法检测，用酶标仪比色，现将两种方法结果比较报告如下。     

丙酮酸在微板赖氏法测定ALT酶活力中的应用

丙酮酸在丙氨酸氨基转氨酶 ( ALT)的测定中 ,主要用于绘制标准曲线 (赖氏法 )。测定 ALT的方法有速率法和赖氏法等。赖氏法又分为试管法和微板法两种 ,试管法费工、费时 ,不利于计算机对原始数据的网络化管理 ,而速率法受温度影响较大 ,为此 ,笔者在微板赖氏法中 ,利用丙酮酸为标准液 ,进行 ALT检测 ,并与试管法与速率法比较 ,现介绍如下。材料与方法1　仪器　 TECAN GENESIS RSP1 5 0全自动加样系统 (奥地利产 ) ,TECAN SPECTRA温控酶标仪 (奥地利产 ) ,Heidolph温控震荡器 (德国产 ) ,96孔微孔平底板 (天津开元公司提供 )…     

应用丙酮酸氧化酶法替代赖氏法筛查血浆ALT活性

目的　用丙酮酸氧化酶法替代赖氏法筛查血浆丙氨酸氨基转移酶 (ALT)活性 ,并对其可行性及适用性进行研究。方法　用赖氏法和丙酮酸氧化酶法 (酶标板法和试管法 )分别测定不同ALT值的血浆标本 ,并对结果进行统计分析。结果　 96孔酶标板法具有较好的精密度 ;线性范围达 135卡门氏单位 ;与赖氏法结果比较 ,可将 5 8份阳性标本全部检出 ,无阳性漏检。但酶标板法结果存在假阳性 (假阳性率为 0 .2 5 %) ,使用试管法进行复检后 ,结果与赖氏法完全一致。结论　使用丙酮酸氧化酶法ALT检测试剂盒可进行大批量ALT筛查 ,该方法具有快速、简便的优点 ,特别适用于标本量大手工操作的实验室。检测结果可用赖氏法的卡门氏单位表示 ,可以代替赖氏法。     

3种方法检测血清ALT的比较

根据献血者健康检查标准,献血者丙氨酸氨基转移酶(ALT)的合格标准,赖氏法ALT≤25U,速率法ALT≤40U/L,现在有赖氏微板孔法更方便,而且可以用酶标仪来打印结果保存,保存时间为10年[1],以便有医疗纠纷时可以查询.由于赖氏法操作简单、方便和价格便宜在基层小血站还是使用,速率法操作简单,结果稳定,只能单个检测,不适合大量标本检测.为此,我们把赖氏试管法、赖氏微板孔法和速率法的检测结果作比较分析.     

应用丙酮酸氧化酶法替代赖氏法筛查血浆ALT活性

目的用丙酮酸氧化酶法替代赖氏法筛查血浆丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性,并对其可行性及适用性进行研究.方法用赖氏法和丙酮酸氧化酶法(酶标板法和试管法)分别测定不同ALT值的血浆标本,并对结果进行统计分析.结果 96孔酶标板法具有较好的精密度;线性范围达135卡门氏单位;与赖氏法结果比较,可将58份阳性标本全部检出,无阳性漏检.但酶标板法结果存在假阳性(假阳性率为0.25%),使用试管法进行复检后,结果与赖氏法完全一致.结论使用丙酮酸氧化酶法ALT检测试剂盒可进行大批量ALT筛查,该方法具有快速、简便的优点,特别适用于标本量大手工操作的实验室.检测结果可用赖氏法的卡门氏单位表示,可以代替赖氏法.     

丙铜酸氧化酶法与赖氏法检测血清ALT的比较

《中国输血技术操作规程》1 997年版规定 ,血清丙氨酸氨基转移酶 ( ALT)为血液初复检项目。检测方法有快速测定法 (酮体粉法 )、比色测定法 (赖氏法 )和速率法。酮体粉法假阳性率高 ,结果判断主观 ,误差较大 ;速率法虽准确性高 ,但内源性干扰较大 ,且需要特殊的设备 ,不易普及。本站一直采用赖氏试管法进行 ALT活性检测 ,该法虽相对稳定 ,但操作繁琐费时 ,影响因素多 ,结果记录不规范 ,尤其不适合血站自动化、标准化和规范化检测的要求。为了探讨丙酮酸氧化酶微量法替代赖氏法检测血清 ALT的可行性 ,笔者对 1 1 87份无偿献血者样本用两…     

双波长微孔板赖氏法测ALT含量

献血者丙氨酸氨基转移酶(ALT)的测定,目前多采用赖氏试管法,费工、费时.随着血站自动化加样系统的使用,国内一些血站采用单波长微孔板赖氏法测定ALT含量,但该法检测结果受脂血、板孔差异、板底划痕等因素干扰.     

微板赖氏法酶标仪定量测定ALT酶活力

丙氨酸氨基转移酶（ALT）的测定,是对献血者不可缺少的筛查项目之一。方法上有速率法和赖氏法等。目前全国各采供血机构发展很不平衡,大多没有价格昂贵的大型自动化设备,不能使用FICC推荐方法（速率法）,还是采用赖氏试管法,费工、费时,不但从方法上得不到统一,而且不利于计算机对原始数据的网络化管理。为此笔者建立了微板酶标仪定量（U/L）,利用酶标仪与计算机接口,联接血站局域网络,同其他酶法检测项目一样,实现了实验室原始数据的计算机管理,现介绍如下。     

用MK3酶标仪绘制ALT标准曲线

笔者将MK3酶标仪曲线定量功能,运用到改良赖氏法检测献血者ALT绘制标准曲线工作中,现介绍如下。1材料与方法1.1材料雷勃MK3酶标仪,96孔平底微孔板,赖氏法试剂盒(下面以北化康泰试剂盒为例)。1.2标准管的配制按试剂盒说明书在试管中作出标准曲线管(表1)。将各管置于37℃水浴箱内温育5min,加入2.4-二硝基苯肼100μl,置于37℃水浴箱内温育20min,加NaOH0.4mmol/L2ml室温放置10min后,在酶标仪520nm处比色,以蒸馏水调零,测各管吸光度。将蒸馏水、标准管的液体用微量加样器加200μl到平底微孔板孔中,A1孔中加蒸馏水,“1”管加入A2中,“2”号…     

厦门市无偿献血者ALT检测结果分析

丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)是临床诊断肝功能指标之一,同时也是血站基本标准中献血者健康检查的必检项目之一.目前各地血站ALT检测大多采用赖氏法,在部分引进全自动加样分析仪及恒温酶标仪的实验室,也有采用微板法检测[1],对献血者ALT检测的可行性及意义时有报道[2].本站引进自动生化分析仪用连续监测法作ALT检测,同时用赖氏法复检,笔者对2种方法检测的结果进行了分析比较.     

赖氏法检测ALT从试管到微板加液体积缩小的选择

目的　探讨赖氏法检测ALT从试管到微板加液体积缩小选择的依据。方法　利用赖氏微板法 ,采用正交试验的方法进行优选。结果　液体总量由赖氏试管法的 6 1 0 0 μl缩小为微板法的 2 70 μl,其中样本、基质、2 ,4 二硝苯肼加液量依次为 1 0、5 0、5 0 μl,NaOH(0 .72mol/L)加液量为 1 6 0 μl,结果判断 :Cutoff =[32×Mw(B) +2 5×Mw(Q) ]/5 7。利用微板赖氏法分别检测 2 0 0 3年卫生部临检中心和上海血液中心的ALT质控品 ,准确率均为 1 0 0 %。结论　 0 .1倍试管的加液量 (除NaOH外 )是微板赖氏法的最佳缩小量 ,选择 1 0 μl丙酮酸标准品作为结果判断标准的换算公式     

丙氨酸氨基转移酶3种方法检验结果比较

根据献血者健康检查要求．献血者丙氨酸氨基转移酶（ALT）的合格标准．速率法为ALT≤40iU／L，赖氏法ALT≤25U。但由于传统赖氏法操作烦琐费时，因此很多血站．特别是基层血站用新的ALT检测方法（丙酮酸氧化酶法和赖氏法微板孔测定法）来测定献血者ALT。为此，我们把传统赖氏法的检测结果与丙酮酸氧化酶法和赖氏法微板孔测定法结果作了比较分析。     

酶联免疫吸附试验检测丙型肝炎病毒抗体在酶标仪应用中的探讨

目的探讨酶联免疫吸附试验在检测丙型肝炎病毒抗体中的敏感性和特异性。方法采用TECAN半自动酶标仪及配套的洗板机,以天津市临检中心提供的质控血清为参照,使用上海科华丙型肝炎病毒抗体酶免疫检测试剂盒,对阳性标本采用胶体金快速吸附法同时检测,对同一标本,在同一时间和同一温度下采用半自动酶标仪及肉眼判读。结果酶标仪判读阳性率高于肉眼判读,同时高于胶体金快速吸附法。结论酶标仪检测结果优于肉眼判读结果,洗板机洗板优于手工洗板,但应选择合适的洗板次数。     

两种方法测定血清ALT的比较

血清丙氨酸氨基转氨酶（ALT）的检测采用赖氏试管法，费时、操作繁琐，不适宜大批量标本的检测。随着全自动加样系统的应用以及新的《血站管理条例》的实施，本站以微孔赖氏法为初检方法，以微板丙酮酸氧化酶速率法为复检方法。笔者对2005年6月份的标本2373份进行检测，结果微孔赖氏法25卡门氏单位以上59例，阳性率为2．49％；微板丙酮酸氧化酶速率法25卡门氏单位以上52例，阳性率为2．19％。现将结果分析如下。     

微板丙酮酸氧化酶动力学法检测献血者血清ALT应用评价

血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotrasferase ALT)检测是采供血机构献血者必查项目之一。目前检测ALT的方法不尽相同[1],笔者应用微板丙酮酸氧化酶动力学法试剂盒检测血清ALT,对其方法的线性、精密度、准确度、干扰实验等方面进行评价。并于2004年7月~2005年3月应用微板丙酮酸氧化酶动力学法检测49764名献血者的血清ALT,介绍如下。1材料与方法1.1试剂与仪器微板丙酮酸氧化酶动力学法检测ALT试剂(江西瑞华倍肯医学制剂有限公司,批号20040320);96孔微量反应板、RSP150全自动加样仪(瑞士Tecan公司);AnthosHT3酶标仪(奥地利);乳酸脱…     

血站丙氨酸氨基转移酶检验中几种诊断方法的比较

目的　探讨献血者血清丙氨酸氨基转移酶最佳筛查试验方法。方法　对几种血清丙氧酸基转移酶定值样本、非定值样本、标准质控血清作速率法与赖氏法检验比较、使用酶标仪与全自动生化分析仪的检测结果比较、诊断试剂的比较。结果　①速率法与赖氏法比较 :在检验准确性方面 ,速率法较赖氏法的符合率要高约 10个百分点 ;在检验精密度方面 ,速率法较赖氏法的变异系数 (CV )要低约 10个百分点。两组符合率t检验和两组精密度t检验显示 ,差异皆有非常显著性意义 ;②使用酶标仪与全自动生化分析仪的检测结果比较 :均值 ( x)t检验和 CVt检验显示 ,差异皆无显著性意义 ;③诊断试剂的比较 :速率法试剂检验结果 x方差分析显示 ,3种试剂 (2种国产、1种进口试剂 )之间 ,差异没有显著性意义 ;CV方差分析显示 ,3种试剂之间 ,差异有非常显著性意义 ,经q检验显示 ,国产试剂与进口试剂之间 ,差异有显著性意义。 3种赖氏法试剂检验结果 x和CV方差分析显示 ,3种国产试剂之间 ,差异皆无显著性意义。微孔板速率法试剂与微孔板丙酮酸氧化酶法试剂在批内精密度方面没有显著差异 ,但在与贝克曼试剂的相关性方面及对定值质控样品检测的准确性方面 ,微孔板速率法试剂优于微孔板丙酮酸氧化酶法试剂。结论　对献血者血液ALT筛查应尽快     

酶标速率法与赖氏法测定ALT的比较

本站1999年引进自动加样系统及温控酶标仪用于ALT的测定，由于酶标仪测定ALT影响因素较多，因此笔对酶标仪初筛ALT升高的标本用赖氏法复查对照，现将检测情况报告如下。     

微板丙酮酸氧化酶及赖氏法与速率法检测ALT的比较

ALT检测方法有酮体粉法、赖氏法、速率法、丙酮酸氧化酶法，干化学试纸条法。酮体粉法只能目测观察结果，干化学试纸条法不适合大批量自动化检测。目前，随着自动化仪器在血站的广泛应用，ALT的检测方法向微板法转变，笔者通过对微板赖氏法、速率法、丙酮酸氧化酶法检测ALT进行对比试验，为血站筛查ALT建立新的试验方法提供科学依据，现报告如下。     

1例ALT酶活性浓度过高致速率法漏检原因分析

随着检测要求的规范和提高，速率法在全国血站ALT检测中得到了较快的开展应用，目前一般血站(尤其是地市级以下血站)使用全自动带恒温孵育的酶标仪以速率法检测ALT，该法使用平底酶标板作为比色反应杯，操作简便，检测量大，结果准确，且利用了血站实验室普遍配置的酶标仪替代生化分析仪，节省了装备费用。但笔者在使用该法对献血者做ALT检测时发现了1例由于酶活力过高引起的漏检，报告如下。