谷氨酸转运体异常与癫痫的关系

在正常情况下,Glu被释放到突触间隙,结合谷氨酸受体并产生动作电位的传播。突触活动受谷氨酸受体和谷氨酸转运体两种因素调节。研究发现突触间隙内Glu水平的升高会导致神经毒性。对于细胞外Glu的调节要依靠分布于突触周围星形胶质细胞和神经元细胞的钠依赖性谷氨酸转运体。本文     

自发性癫痫大鼠海马区谷氨酸转运体GLAST表达下调

[目的]通过对照实验探讨自发性癫痫大鼠（spontaneously epilepsy rats,SER）与正常Wistar大鼠海马区胶质细胞型谷氨酸转运体GLAST蛋白的表达情况,以期发现其与遗传性癫痫发病的关系。[方法]利用聚合酶链反应（PCR）扩增SER的特异性基因片段,筛选出SER;利用免疫荧光定位GLAST蛋白的表达,并应用免疫组织化学技术,检测GLAST蛋白在SER及正常Wistar大鼠海马内的表达情况。[结果]GLAST蛋白在SER海马的齿状回（DG）表达与正常Wistar大鼠相比明显减少（GLAST的表达为Wistar：52.67±11.5,SER：39.39±9.48,P〈0.05）,在海马CA1和CA3区表达差异无显著性意义（CA1区为Wistar：48.56±10.6,SER：45.84±7.20;CA3区为Wistar：43.29±10.6,SER：36.73±6.50,P〉0.05）。[结论]SER自发性癫痫可能与海马DG区GLAST蛋白表达下降有关;GLAST表达下降可能是由SER基因位点的突变引起的。     

各种谷氨酸转运体亚型在颞叶癫痫患者病变部位的表达

目的研究各种谷氨酸转运体亚型(EAAT1、EAAT2、EAAT3)的表达水平在颞叶癫痫患者中的改变情况,及其对发病机制的影响。方法取本院16例颞叶癫痫患者在手术中切除的海马和颞叶标本,通过免疫组化法检测其中各种谷氨酸转运体亚型的表达情况,另取其他非神经性病变的脑部活检组织作为对照组。统计各谷氨酸转运体亚型在癫痫患者和对照组中,阳性表达的差异情况,并对其进行光密度的半定量分析。结果在颞叶癫痫患者中,EAAT1的表达水平与对照组相比,虽有所上升,不过差异未见有显著性(P>0.05)。EAAT2和EAAT3的表达均有不同程度的上升,分别达到对照组的1.5～2.0倍和1.6～2.4倍(P<0.01)。但是,在癫痫伴海马硬化患者的海马组织中,EAAT2和EAAT3的总体表达水平则显示与对照组类似(P>0.05);而在存活的神经元细胞中,EAAT2和EAAT3的表达也达到了对照组的1.5倍和2.0倍(P<0.01)。结论颞叶癫痫患者的EAAT2和EAAT3表达水平,往往有显著的升高,与细胞外的谷氨酸浓度紊乱,诱发癫痫有关。癫痫伴海马硬化患者,由于神经元细胞的缺失,使海马组织中的EAAT2和EAAT3表达未有明显改变,但是在存活的神经元细胞中,EAAT2和EAAT3仍然显示有大幅度的上升。     

大鼠海马谷氨酸转运体在CCK—8调节癫痫发作中的作用

目的探讨谷氨酸转运体在ＣＣＫ－８调节癫痫发作中的作用。方法采用核团微量注射和放射免疫分析的方法，观察谷氨酸转运体功能在大鼠癫痫发作及ＣＣＫ－８调节癫痫中的变化。结果（１）大鼠癫痫发作后，其海马谷氨酸转运体功能明显下降（Ｐ＜０．０５）；癫痫发作次数增加，谷氨酸转运体功能下降愈显著（Ｐ＜０．０１）。（２）海马ＣＡ３区注射ＣＣＫ－８后诱发癫痫，大鼠海马内谷氨酸转运体功能明显增高（Ｐ＜０．０５）。结论癫痫发作可导致脑内谷氨酸转运体功能下降，而ＣＣＫ压抑癫痫发作的作用可能与增强脑内谷氨酸转运体的功能有关     

灵芝多糖对高血脂大鼠血脂水平的影响

目的 探讨灵芝多糖对高血脂大鼠血脂的调节作用.方法 采用高脂饲料喂养建立高血脂大鼠模型,以高、中、低三个剂量灵芝多糖灌胃,分别于第14天和28天检测大鼠血清总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-c）和低密度脂脂蛋白胆固醇（LDL-c）等指标.结果 不同剂量的灵芝多糖均可显著性抑制高血脂大鼠血清TC、TG和LDL-c的升高（P〈0.01）,并能调节HDL-c的升高（P〈0.05）.结论 灵芝多糖有较显著的调节血脂的作用.     

谷氨酸转运体mRNA在糖尿病大鼠脑损伤中的表达

目的 探讨谷氨酸转运体(EAAT)在糖尿病脑损伤时表达情况及作用机制.方法 Wistar大鼠28只,随机分成2组(每组14只):对照组(常规饲料喂养)、模型组(高糖高脂饲料喂养+STZ注射诱导胰岛素抵抗),均自由进食进水,12h光照周期.饲养1个月后,测定血糖.6个月后以RT-PCR检测大鼠脑皮质EAAT-1、EAAT-2、EAAT-3的mRNA表达情况.结果 糖尿病模型组血糖[(20.016±1.984) mmol/L]明显高于正常值(P＜0.01)及对照组[(3.82±0.123)mmol/L,P＜0.01].对照组胰腺组织中可见大量胰岛细胞,而糖尿病模型组胰腺组织中胰岛细胞显著减少.模型组EAAT-3 mRNA表达与对照组相比明显增加(P＜0.01).结论 EAAT-3高表达可能是糖尿病脑细胞损伤的主要机制.     

高亲和力谷氨酸转运体与慢性疼痛

谷氨酸是哺乳动物中枢神经系统中最主要的兴奋性神经递质,位于突触间隙中的谷氨酸有赖于位于胶质 细胞和神经元细胞膜上的高亲和力谷氨酸转运体给予及时清除,维持其正常的生理功能。谷氨酸转运体的量或功能 异常,会引起多种生理功能紊乱。研究表明高亲和力谷氨酸转运体在慢性疼痛产生过程中发挥重要作用,可能成为 疼痛治疗的新靶点。     

灵芝多糖的研究

灵芝多糖的研究孙树英１王洪存１王磊２（１化学教研室２山东泰山制药厂）灵芝［ｇａｎｏｄｅｒｍａｌｕｃｉｄｕｍ（ｌｅｙｓ．ｅｘ．ｆｒ．）ｋａｒｓｔ］作为一种名贵中药用于临床已有悠久的历史，是传统的扶正固本、滋补强壮中药。临床和药理研究表明，灵芝具有多种生...     

灵芝多糖的研究进展

灵芝多糖是灵芝的主要活性成分之一,具有抗肿瘤、抗氧化、抗衰老和降血糖等生物活性,对近年来研究灵芝多糖的超声法、微波法、复合酶法等提取方法和径向流色谱、柱色谱联用等分离纯化方法,含量测定及其在抗肿瘤和抗氧化等方面的药理活性进行综述,为灵芝多糖的进一步开发利用提供依据。     

灵芝多糖乙酰化及其抗氧化活性研究

目的 通过化学修饰改变灵芝多糖分子结构,并研究其体内抗氧化活性。方法 乙酰化修饰灵芝多糖（Ganoderma lucidum polysaccharide,GLP）,得到GLP乙酰化衍生物（GLP acetyl derivatives,GLPa）;将昆明种小鼠随机分成空白对照组,阳性对照组,GLP高、低剂量组及GLPa高、低剂量组,测定小鼠血清和肝脏丙二醛（malondialdehyde,MDA）、总抗氧化能力（total antioxidant capacity,T-AOC）和过氧化氢酶（catalase,CAT）;建立高脂血症大鼠抗氧化损伤模型,考察GLP及GLPa的抗氧化能力。结果 GLPa及GLP均可以显著提高正常小鼠肝组织CAT活力及T-AOC,降低小鼠血清及肝脏MDA含量,GLPa抗氧化活性明显优于GLP,且与给药剂量相关。此外,GLPa及GLP还可以显著降低四氧嘧啶致高脂大鼠的氧化损伤程度,提高其血清超氧化物歧化酶活力及肝脏T-AOC,并降低其血清MDA含量。结论 乙酰化修饰可显著提高灵芝多糖的抗氧化活性。     

大分子灵芝多糖对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的抑制作用

目的:探讨超滤管截留得到的大分子量灵芝多糖(ultrafiltered macromolecular Ganoderma lucidum polysaccharide,UM-GLP)对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的抑制作用。方法:以非小细胞肺癌细胞A549和NCI-H1299作为研究对象,并以空白培养基和紫杉醇(PTX)处理分别作为空白对照和阳性对照。采用MTT法检测UM-GLP对A549和NCI-H1299细胞增殖的抑制作用,划痕实验检测UM-GLP对A549和NCIH1299细胞迁移能力的抑制作用,Transwell实验检测UM-GLP对A549和NCI-H1299细胞侵袭能力的抑制作用。结果:MTT实验结果显示,随着UM-GLP和PTX药物浓度的增加,细胞增殖抑制率明显增加,UM-GLP浓度在0.5~2.0 mg/ml时,与PTX浓度在25~100 nmol/L的抑制效果相仿。A549和NCI-H1299细胞划痕实验结果显示,与空白对照组比较,UM-GLP组和PTX组的迁移距离均明显缩短(P0.05)。Transwell实验结果显示,UM-GLP(2 mg/ml)处理后,非小细胞肺癌细胞侵袭数量显著低于空白对照组(P0.05);并且UM-GLP对A549细胞侵袭能力的抑制作用与紫杉醇组(0.1μmol/L)相当,对NCI-H1299细胞侵袭能力的抑制作用小于紫杉醇组(0.1μmol/L)(P0.05)。结论:大分子量灵芝多糖可有效抑制非小细胞肺癌细胞A549和NCI-H1299的增殖、迁移和侵袭能力。     

不同LED光质对莞香灵芝子实体生长发育的影响

目的 研究5种LED光质对莞香灵芝子实体生长发育及其主要活性成分的影响。方法 将不同光质的LED光源设为光照条件（红、蓝、黄、绿、白光为处理组,黑暗为黑暗组）,对灵芝子实体进行培养,观察其生长速率、形态、多糖含量及三萜含量。结果 红、绿、黄、白、蓝5种光质处理组的灵芝子实体菌盖直径和干重均大于黑暗组（P<0.01或0.05）,黄光组的子实体干重最大（P<0.01或0.05）,灵芝子实体出芝数和菌盖厚度与黑暗组比较差异无统计学意义（P>0.05）。在灵芝的5个生长时期,蓝光组的多糖含量均明显高于其他各组（P<0.01）;现蕾期、开伞期、弹孢前期,黄光组多糖含量高于除蓝光组外的其他各组（P<0.01）;弹孢后期,白光组的多糖含量显著高于除蓝光组外的其他各组（P<0.01）。芝盖形成期,红光组的灵芝三萜含量低于其他各组（P<0.01）;弹孢前期,绿、白、红和蓝光组的灵芝三萜含量高于黑暗组（P<0.01或0.05）。现蕾期、开伞期和弹孢后期,各组灵芝三萜含量比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论5种LED光质均影响莞香灵芝子实体的生长发育及其主要活性成分的生成,应根据各光质对灵芝子实体影响效果不同的特点合理安排光照。     

灵芝多糖对小鼠腹腔巨噬细胞蛋白激酶A活性的影响

为观察灵芝多糖（ＧＬＢ７）体外对小鼠腹腔巨噬细胞（ＭΦ）蛋白激酶Ａ（ＰＫＡ）活性的影响,采用反相离子对高效液相色谱法测定ＭΦ中ＲＫＡ活力。结果表明ＧＬＢ７（４０ｍｇ／Ｌ）能引起小鼠腹腔ＭΦ中ＰＫＡ活性明显升高,１０ｍｉｎ达峰值,３０ｍｉｎ恢复到基础水平。提示灵芝多糖的免疫增强作用与其增强ＭΦ中ＰＫＡ活性有关。     

破壁与不破壁灵芝孢子粉多糖的分析

目的研究灵芝孢子粉多糖的组成、相对分子质量及相对分子质量分布,比较破壁与不破壁灵芝孢子粉多糖的异同。方法用不同提取方法提取灵芝孢子粉多糖,采用气相色谱-质谱(GC-MS)、高效液相色谱(HPLC)分析灵芝孢子粉多糖的单糖组成,用凝胶渗透色谱(GPC)分析灵芝孢子粉多糖的相对分子质量及其分布。结果不同提取方法所得灵芝孢子粉多糖的得率不同,破壁后灵芝孢子粉含的多糖是不破壁的1.7倍;灵芝孢子粉多糖是由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成的杂多糖,破壁与不破壁的多糖组成完全相同,其相对质量分数略有区别;破壁灵芝孢子粉多糖的GPC有两个多糖峰,相对分子质量分别为7.80×104和1.17×104,而不破壁灵芝孢子粉多糖只有相对分子质量为7.80×104的一个峰。结论破壁与不破壁孢子粉多糖的单糖组成相同,但破壁灵芝孢子粉多糖较不破壁孢子粉的多糖高出70%,增加部分为相对分子质量较小的多糖。这可以解释破壁灵芝孢子粉的功效好于不破壁灵芝孢子粉的原因。     

灵芪菌质发酵工艺初报

目的:探讨灵芪菌质发酵的工艺,验证药用真菌新型固体发酵的优越性.方法:将灵芝分别在普通基质、药性基质(含黄芪)、富硒药性基质中发酵,对三种基质中菌质的有效部位多糖的含量进行测定及动态研究,比较其变化.结果:三种基质中菌质有效部位多糖含量及其相对标准差分别为4.65%、1.61%,3.76%、1.99%,4.50%、1.86%;对灵芝和黄芪发酵组合的有效成分多糖、蛋白质及总皂苷进行动态变化研究,发现第28天是发生次生代谢最旺盛的时候,确定为发酵终点.结论:灵芝和黄芪发酵组合是可行的.     

HP LC-ELSD法测定灵芝中灵芝酸A的含量

目的 建立测定灵芝药材中灵芝酸A质量分数的HPLC-ELSD法.方法 采用Welch XtimateTM-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-体积分数0.01%醋酸(体积比37:63),流速为1 mL/min,柱温为30℃,进样量为10μL;蒸发光散射器漂移管温度为105℃,空气流速为2.8 L/min.结果 灵芝酸A的进样量在0.8928~5.3568μg范围内,峰面积的对数值与进样量的对数值具有良好的线性关系;平均加样回收率为95.81%;不同批次的灵芝样品中灵芝酸A的质量分数范围为0.2143~2.8942 mg/g,结果差异较大.结论 本法操作简单、结果准确、重复性好,为灵芝的质量控制提供参考方法.     

灵芝真菌发酵胞外多糖反馈抑制的初步研究

探讨了灵芝胞外多糖自身反馈抑制作用。在摇瓶中考察了灵芝真菌发酵菌丝体生长、胞外多糖(EPS)和胞内多糖(IPS)合成的动态过程。在培养168h时，生物量达到最大值3．18g／L(干重)，培养216h时，胞外多糖达到最高浓度1．24g／L，EPS和生物量的变化趋势大致呈正相关。在摇瓶培养基中添加同源胞外多糖，以浓度梯度实验法考察培养基中的同源胞外多糖浓度对灵芝真菌发酵胞外多糖产量的影响，结果表明：培养基中添加的同源胞外多糖浓度高于0．59g/L时，EPS的产生受到明显抑制，其趋势是随着培养基中同源灵芝胞外多糖浓度的增加，反馈抑制作用逐渐增强，当培养基中添加的同源胞外多糖浓度高于2．34g/L时，菌丝的生长和胞外多糖的产生完全受到抑制。     

灵芝真菌发酵生产灵芝多糖和灵芝酸

提出了灵芝真菌同时高效生产灵芝多糖和灵芝酸的发酵过程。在摇瓶中考察了氮源、接种量、起始葡萄糖浓度和装液量对灵芝细胞生长及灵芝多糖和灵芝酸生产的影响。结果表明 ,酵母膏和蛋白胨复配作为氮源有利于细胞生长。接种量对细胞量有一定影响 ,但是对产物积累量影响更大。在 50 g/ L起始糖浓度下 ,细胞干重达到 1 6.7g/ L,胞内多糖、胞外多糖和灵芝酸分别达 1 .1 9g/ L,0 .854g/ L和 2 1 2 .3mg/ L。考察装液量发现 ,小装液量有利于提高细胞生长速率和产物的生产速率