基因重组人骨形成蛋白-2与珊瑚/聚乳酸复合修复骨质缺损的实验研究

目的　观察生物珊瑚、聚乳酸和rhBMP-2合成人工骨(复合骨)修复兔颅骨缺损后复合骨的变化情况。方法　选择24只新西兰兔,随机分成2组,每组12只,建立兔颅骨缺损标准模型。植入复合骨,用珊瑚/聚乳酸作为对照。术后4、8、12周每组各处死4只动物,取出植入体进行扫描电镜观察和机械强度测定。结果　复合骨在植入缺损后,不仅在植入体周边部有骨组织长入,而且在整个植入体内均有新骨形成,即出现多中心成骨。复合骨在同一时间点的成骨量明显多于对照组,随时间推移,成骨量递增。在植入前,两材料间的抗压强度无明显差异;在植入后,两植入体的抗压强度则差异显著,复合骨明显高于同期的对照组。结论　生物珊瑚、聚乳酸和rhBMP-2合成人工骨在体内以传导成骨和诱导成骨双重机制完成骨修复,且有良好的机械强度,作为植骨材料具有良好的应用前景。     

重组人骨形成蛋白-2-珊瑚复合人工骨修复骨缺损的生物力学研究

将珊瑚与具有骨诱导特性的重组人骨形成蛋白－２（ｒｈＢＭＰ－２）复合，制成ｒｈＢＭＰ－２－ｃｏｒａｌ复合人工骨，将其植入兔颅骨标准大小缺损，并与单纯珊瑚植入作对照。通过Ｘ线片、组织学和生物力学方法来评价此复合人工骨的骨修复能力。结果显示：ｒｈＢＭＰ－２－ｃｏｒａｌ复合人工骨具有较强的骨修复作用，植入骨缺损后，材料被逐渐降解吸收，新骨不断形成，机械强度不断增大；１２周后，植入物完全被成熟的骨组织取代，缺损区抗压强度接近正常的骨组织。该复合人工骨是一种较理想的骨移植替代材料。     

重组人骨形成蛋白-2/珊瑚复合人工骨的动物实验研究

本研究将重组人骨形成蛋白－２（ｒｈＢＭＰ－２）和珊瑚以一定的方式复合后,植入小鼠股部肌袋和兔颅骨标准大小缺损,以单纯珊瑚植入作对照,术后不同时间取材,通过组织学方法检测其骨诱导活性和骨修复能力．结果显示：ｒｈＢＭＰ－２／珊瑚复合人工骨植入小鼠肌袋１周,诱导软骨形成,３周,形成编织骨,６周,形成含骨髓的板层骨,同时,珊瑚被部分降解吸收;复合人工骨植入兔颅骨缺损后,以引导成骨和诱导成骨双重机制完成骨修复过程,术后１２周,植入物完全被成熟的骨组织取代,其骨修复效果明显优于单纯的珊瑚．此复合人工骨具有骨传导和骨诱导活性,骨修复能力较强,是一种较理想的新型生物性植骨材料     

重组人骨形成蛋白—2—珊瑚复合人工骨修复骨缺损的生物力…

将珊瑚与具有骨诱导特性的重组形成蛋白－２（ｒｈＢＭＰ－２）复合，制成ｒｈＢＭＰ－２＝ｃｏｒａｌ复合人工骨，将其植入兔颅骨标准大小缺损，并与单纯珊瑚植入作对照。通过Ｘ线片、组织学和生物力学方法来评价此复合人工骨的骨修复能力。结果显示：ｒｈＢＭＰ－２－ｃｏｒａｌ复合人工骨具有较强的骨修复作用，植入骨缺损后，材料被逐渐降解吸收，新骨不断形成，机械强度不断增大；１２周后，植入物完全被成熟的骨组织取代，缺损     

重组人骨形成蛋白-2/珊瑚复合人工骨的研制及其诱导成骨的实验研究

目的：制备珊瑚（ｃｏｒａｌ）与重组人骨形成蛋白－２（ｒｈＢＭＰ－２）复合人工骨并测试其骨诱导活性。方法：将ｒｈＢＭＰ－２与珊瑚复合后植入鼠肌袋内。６６只小鼠随机分为３组：第１组为复合骨（１∶２０ｗ／ｗ）；第２组为复合骨（１∶４０ｗ／ｗ）；第３组为单独珊瑚。术后１、３、６周处死动物，光镜下观察，并用图象分析法作成骨定量测定，结果：术后１周，可见复合材料表面及孔洞内有软骨形成。３周出现编织骨。６周形成含骨髓的板层骨。珊瑚被部分吸收。诱导成骨的量有时间依赖性和ｒｈＢＭＰ－２剂量依赖性。结论：ｒｈＢＭＰ－２／ｃｏｒａｌ复合人工骨具有良好的诱导成骨能力；珊瑚可能是目前能使用的ｒｈＢＭＰ－２最合适的缓释载体。     

重组人骨形成蛋白─2和珊瑚复合移植的超微结构观察

为了弥补单纯珊瑚无骨诱导活性、骨修复能力较差的缺陷，本研究将具有骨诱导特性的重组人骨形成蛋白-2（rhBMP－2）和珊瑚复合，制备出rhBMP-2／珊瑚复合人工骨。将其植入免颅骨标准大小缺损，以单纯珊瑚植入作对照；术后2、6、12周取材，通过X残片和扫描电镜观察，评价其骨修复能力。结果显示；rhBMP－2／珊瑚复合人工骨的骨修复能力和骨修复效果明显优于单纯的珊湖，是一种较为理想的骨移植替代材料。     

复合人工骨双重机制修复骨质缺损的实验研究

目的　研究生物珊瑚 /聚乳酸和rhBMP 2合成人工骨 (复合骨 )修复兔颅骨缺损的骨修复能力。方法　选择 2 4只新西兰兔 ,随机分成 2组 ,每组 1 2只 ,建立兔颅骨缺损标准模型。植入复合骨 ,用珊瑚 /聚乳酸作为对照。术后 4、8、1 2周每组各处死 4只动物。进行X线片、组织学观察。结果　复合骨在植入缺损后 ,不仅在其周边部有骨组织长入 ,而且在整个植入物内均有新骨形成 ,即出现多中心成骨。复合骨在同一时间点的成骨量明显多于对照组 ,随时间推移 ,成骨量递增。结论　生物珊瑚 /聚乳酸和rhBMP 2合成人工骨在体内以传导成骨和诱导成骨双重机制完成骨修复 ,作为植骨材料具有良好的应用前景     

重组人骨形成蛋白—2／珊瑚复合人工骨的研制及其诱导成骨的？…

目的：制备珊瑚（ｃｏｒａｌ）与重组人骨形成蛋白－２（ｒｈＢＭＰ－２）复合人工骨并测试其骨诱导活性，方法：将ｒｈＢＭＰ－２与珊瑚复合后植入鼠肌袋内，６６只小鼠随机分为３组，第１组为复合骨（１：２０ｗ／ｗ）；第２组为复合骨（１：４０ｗ／ｗ）；第３组为单独珊瑚，术后１，３，６周处死动物。光镜下观察，并用图象分析法作成骨定量测定。结果：术后１周，可见复合材料表面及孔洞内有软骨形成。３周出现编织骨。６周形成     

应用珊瑚作为重组人骨形成蛋白-2缓释载体的动物实验研究

将大肠杆菌表达的重组人骨形成蛋白-2（rhBMP－2）和珊瑚（coral）复合，制成rhBMP－2／coral复合人工骨，将其植入小鼠股部肌肉内，并以单纯珊瑚植入作对照，术后1、3、6周取材，组织学观察。结果显示：rhBMP－2／coral复合人工骨在植入局部诱导形成骨和软骨，表现出良好的异位诱导成骨能力；珊瑚对rhBMP－2的活性未产生不利影响，是rhBMP－2的良好缓释载体。此复合人工骨可望作为一种新型生物性植骨材料而应用于骨科和颌面外科。     

个体化钛支架复合珊瑚羟基磷灰石和重组人骨形成蛋白2修复兔下颌骨缺损

目的通过观察个体化钛支架复合珊瑚羟基磷灰石(CHA)和重组人骨形成蛋白2(rhBMP-2)修复兔下颌骨缺损的实验效果,探讨下颌骨个体化修复再生的途径。方法以9只新西兰大白兔为实验对象,采用磨骨术建立兔下颌骨单侧缺损模型,利用计算机辅助设计/制作、快速成型技术等设计制作兔下颌骨个体化钛修复体,再将其与CHA和rhBMP-2复合应用于兔下颌骨标准化缺损修复,通过大体标本观察、骨密度检测、生物力学测试和组织学染色对下颌骨缺损的个体化再生修复效果进行研究。结果兔下颌骨解剖形态恢复理想,生物力学测试、骨密度检测及组织学观察均显示随时间点延长成骨效果呈明显上升趋势(P<0.05),钛支架内具有大量新骨形成,新生骨组织在24周时已明显成熟。结论采用快速成型技术制作的个体化钛支架复合CHA和rhBMP-2,可望通过骨再生途径实现下颌骨缺损的个体化修复重建。     

人重组骨形成蛋白2与异种骨复合移植的实验研究

为检验新型复合异种骨的骨修复能力，作者将人重组骨形成蛋白２与经综合化学处理的小羊骨松质结合，制备成复合异种骨。小鼠肌袋生物活性分析表明：复合异种骨具有活跃诱导成骨活性。将其植入兔下颌骨缺损内，复合异种骨术后４周显示明显骨诱导现象，１２周时大部分移植骨已被新骨代替；单纯异种松质骨组骨缺损仅有部分修复。结论为复合异种骨是一种较理想的植骨材料。     

rhBMP-2对人牙周膜细胞骨桥蛋白表达的影响

目的　深入了解牙周膜细胞 (periodontalligamentcells,PDLC)的成骨样细胞特性 ,以及非胶原蛋白在牙周组织矿化中的作用。方法　在体外培养条件下 ,观察重组人骨形成蛋白 2(recombinanthumanbonemorphogeneticprotein 2 ,rhBMP 2 )作用前后是否对矿化相关蛋白之一的骨桥蛋白 (osteopontin ,OPN)在人PDLC中的存在及表达情况产生影响。在小玻片上培养第 5代PDLC ,分为加rhBMP 2 (5 0 μg/L)刺激的实验组和不加任何因子的空白对照组 ,以地高辛标记的OPNcDNA探针 ,采用原位杂交技术对PDLC中OPN的表达情况进行检测 ;同时做PBS替代探针和RNA酶预处理的方法学对照。结果　对照组、替代对照和RNA酶预处理的PDLC均显示为阴性反应 ,没有显示出OPN的阳性表达信号 ;实验组PDLC的胞浆中可见明显的OPN阳性反应 ,表达信号较强。结论　rhBMP 2的刺激作用可使PDLC表达出较强的OPN阳性信号 ;表明在一定条件和外界因子的诱导下 ,PDLC具有向成骨特性方向转变的潜能 ,对牙周组织再生有促进效应。     

二氧化钛纳米管阵列加载重组人骨形成蛋白2的体外生物活性研究

目的 探讨二氧化钛纳米管阵列加载重组人骨形成蛋白2 (recombinant human bone morphogenetic protein-2,rhBMP-2)对小鼠骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cell,BMSC)早期活性的影响,为钛种植体表面生物化学改性提供实验依据.方法 利用阳极氧化技术在纯钛片表面制备双层二氧化钛纳米管阵列,化学接枝rhBMP-2(实验组),以机械抛光的纯钛为空白对照组,阴性对照A组为二氧化钛纳米管组、阴性对照B组为二氧化钛纳米管+羰基二咪唑组.用场发射扫描电镜观察各组形貌并用X射线光电子能谱仪检测各组元素.各组试件与BMSC共培养,检测第1天各组细胞黏附铺展情况(每组样本量为3),第1、3、5天各组细胞增殖A值及第5、7、11天各组碱性磷酸酶活性(每组每个时间点样本量为3).结果 场发射扫描电镜示实验组表面可见粟粒状颗粒物,X射线光电子能谱仪示实验组氮峰明显增高.场发射扫描电镜示第1天实验组细胞黏附铺展良好,细胞间连接广泛而紧密,均优于其他3组.第1天各组细胞增殖效果不明显;第3、5天实验组A值(3.295±0.153、3.823±0.059)均显著高于空白对照组(2.479±0.064、3.131±0.096)、阴性对照A组(2.715±0.075、3.371±0.047)及阴性对照B组(2.756±0.132、3.637±0.047) (P＜0.05);第5、7、11天实验组碱性磷酸酶活性(0.0477±0.0287、0.0615±0.0016、0.0667±0.0018)均显著高于其他3组(P＜0.05).结论 二氧化钛纳米管阵列可通过生物化学法加载rhBMP-2并具备良好的生物相容性.     

骨形成蛋白2基因转染的人牙周膜成纤维细胞超微结构观察

目的 观察稳定表达骨形成蛋白2（bone morphogenetin protein-2,BMP-2j)的人牙周膜成纤维细胞（human periodontal ligament fibroblasts,HPDLFs）的超微结构。方法 用脂质体转染法将BMP－2表达载体转染至HPDLFs,以原位杂交和免疫组化法检测BMP－2的稳定表达,透射电镜观察细胞的超微结构。结果 转染BMP－2基因的HPDLFs内质网池普遍扩张,细胞内基质膜泡和髓鞘样结构明显增加,细胞间广泛分布胶原原纤维。结论 转染BMP－2基因能促进HPDLFs向成骨样细胞方向发展。     

The effect of nicotine on osteoinduction by recombinant human bone morphogenetic protein 2

Nicotine, one of the constituents of tobacco, is known to have an adverse effect on human health. We sought to clarify the interaction between nicotine and recombinant human bone morphogenetic protein 2 (rhBMP-2) in terms of osteogenesis in vitro and osteoinduction in vivo. Nicotine did not inhibit or stimulate alkaline phosphatase (ALP) activity or the amount of osteocalcin in C2C12 cells in the presence of rhBMP-2 in vitro. Ectopic bone formation using a collagen sponge containing rhBMP-2 was evaluated with and without nicotine after 21 days using radiographic, histological, biochemical, and immunohistochemical analyses. ALP activity in the medium-dose group (2.2 ± 0.9 IU/mg protein; P = 0.047) and the high-dose group (2.0 ± 0.1 IU/mg protein; P = 0.03) was significantly lower than in the control group. The calcium content in the medium-dose group (35.4 ± 12.9 μg/mg tissue; P = 0.0099) and high-dose group (34.8 ± 10.5 μg/mg tissue; P = 0.006) was significantly lower than in the control group. The number of vascular endothelial growth factor-positive cells in the high-dose group (671.9 ± 57.3 cells/mm²; P = 0.03) was significantly lower than in the control group. Results showed that nicotine did not inhibit the stimulatory effect of rhBMP-2 in vitro, but a high dose of nicotine inhibited bone formation in vivo by adversely affecting vascularization.     

致密型珊瑚骨修复皮质骨缺损的实验研究

为了寻找新的骨代用品，作者采用产自海南岛的角蜂巢珊瑚（ｆａｖｉｔｅｓ）作原料，制成珊瑚人工骨。理化测定显示Ｆａｖｉｔｅｓ的化学成分与滨珊瑚（ｐｏｒｉｔｅｓ）相同，但孔隙结构不同，孔率较少，质地较致密，强度较高。植入狗下颌骨和股骨皮质缺损内，具有良好的生物相容性和骨亲和性，６～８个月后植入物逐渐降解而被新骨完全替代，皮质骨缺损得到完全修复并保持其强度。结果表明该人工骨可能成为颌骨节段性缺损的修复材料之一。     

The role of bone morphogenetic proteins 2 and 4 in mouse dentinogenesis

ObjectiveThe bone morphogenetic proteins (BMPs) play crucial roles in tooth development. However, several BMPs retain expression in the dentin of the fully patterned and differentiated tooth. We hypothesized that BMP signaling therefore plays a role in the function of the differentiated odontoblast, the job of which is to lay down and mineralize the dentin matrix.DesignWe generated mice deficient in Bmp2 and 4 using a dentin matrix protein 1 (Dmp1) promoter-driven cre recombinase that was expressed in differentiated odontoblasts.ResultsThe first and second molars of these Bmp2 and Bmp4 double conditional knockout (DcKO) mice displayed reduced dentin and enlarged pulp chambers compared to cre-negative littermate controls. DcKO mouse dentin in first molars was characterized by small, disorganized dentinal fibers, a wider predentin layer, and reduced expression of dentin sialophosphoprotein (DSPP), dentin matrix protein 1 (DMP1), and bone sialoprotein (BSP). DcKO mouse odontoblasts demonstrated increased type I collagen mRNA production, indicating that the loss of BMP signaling altered the rate of collagen gene expression in these cells. Bmp2 and Bmp4 single Dmp1-cre knockout mice displayed no discernable dentin phenotype.ConclusionsThese data demonstrate that BMP signaling in differentiated odontoblasts is necessary for proper dentin production in mature teeth.     

缓释骨形态发生蛋白-2的壳聚糖温敏凝胶促进牙周组织再生的实验研究

目的观察自制的加载重组人骨形态发生蛋白- 2（rhBMP- 2）的壳聚糖温敏凝胶修复牙周组织缺损的效果。方法选取3只健康雄性杂种犬制备前磨牙区人工Ⅱ度根分叉区组织缺损模型,随机分为空白对照组、空白凝胶组及载药凝胶组,术中先严密缝合组织瓣,然后对空白凝胶组及载药凝胶组区域分别注射先期配制并消毒好的空白凝胶和载药凝胶,术后8周取材行大体及组织学观察。结果载药凝胶组出现明显的牙周组织再生,而空白对照组和空白凝胶组仅有少量的牙周组织再生。载药凝胶组与空白对照组及空白凝胶组均有统计学差异（P<0.05）,空白对照组和空白凝胶组相比,没有统计学差异。结论载rhBMP- 2的壳聚糖温敏凝胶可有效促进牙周组织再生,同时简化手术操作,是一项有潜力的牙周组织再生手段。